目的:利用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)和巨噬细胞炎症反应模型,基于通路水平阐释补肺健脾方干预慢性阻塞性肺疾病的配伍机制。方法:利用LPS诱导巨噬细胞建立炎症反应模型,分别给予补肺健脾方的12味中药干预,利用...目的:利用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)和巨噬细胞炎症反应模型,基于通路水平阐释补肺健脾方干预慢性阻塞性肺疾病的配伍机制。方法:利用LPS诱导巨噬细胞建立炎症反应模型,分别给予补肺健脾方的12味中药干预,利用Illumina高通量测序平台得到基因表达谱数据。采用GSEA方法鉴定巨噬细胞炎症反应相关通路,通过富集评分(normalized enrichment score,NES)筛选中药干预后显著回调的通路,揭示补肺健脾方及其配伍的干预机制。结果:与对照组比较,模型组筛选到244条显著扰动通路(GSEA,FDR<0.05)。以得到的显著扰动通路为对象,补肺健脾方所含中药显著回调通路的NES为-1041.56,其中补肺配伍的为-71.25,健脾配伍的为-17.45,温肾配伍的为-211.42,止咳化痰配伍的为-363.94,活血通络配伍的为-377.5;补肺健脾方可显著回调214条通路(逆转率为87.70%),其中补肺配伍的为43条,健脾配伍的为19条,温肾配伍的为133条,止咳化痰配伍的为142条,活血通络配伍的为187条,逆转率分别为17.62%、7.79%、54.51%、58.20%、76.64%。Positive regulation of interleukin 1 production等7条通路在5个配伍中均被显著回调。Mitotic cell cycle arrest等通路在补肺配伍中特异回调。Response to acetylcholine通路在健脾配伍中特异回调。Negative regulation of viral entry into host cell等通路在温肾配伍中特异回调。Negative regulation of leukocyte chemotaxis等通路在止咳化痰配伍中特异回调。Negative regulation of extrinsic apoptotic signaling pathway via death domain receptors等通路在活血通络配伍中特异回调。结论:补肺健脾方各配伍回调炎症反应相关通路的强度及数量均依次为活血通络、止咳化痰、温肾、补肺、健脾配伍。补肺健脾方可通过各配伍回调positive regulation of interleukin 1 production等共性通路及negative regulation of leukocyte chemotaxis等特异性通路干预炎症反应。展开更多
目的:观察补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠骨骼肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Caspase-8及Caspase-3的影响。方法:48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、补肺健脾组和氨茶碱组,采用香烟烟雾暴露联合肺炎克雷伯杆菌感染的方法建...目的:观察补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠骨骼肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Caspase-8及Caspase-3的影响。方法:48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、补肺健脾组和氨茶碱组,采用香烟烟雾暴露联合肺炎克雷伯杆菌感染的方法建立COPD稳定期大鼠模型,从第9周起,对照组和模型组分别给予0.9%氯化钠溶液(2m L/只)灌胃,补肺健脾组和氨茶碱组分别给予补肺健脾方(5g·kg-1·d-1)、氨茶碱(2.3mg·kg-1·d-1)灌胃,至第20周结束后取材。光镜下观察大鼠股四头肌、肋间肌、肱二头肌及比目鱼肌组织病理变化,采用荧光定量PCR和Western Blot技术检测4种骨骼肌组织TNF-α、Caspase-8和Caspase-3 m RNA和蛋白表达。结果:模型组4种骨骼肌TNF-α、Caspase-8和Caspase-3基因和蛋白表达均较对照组显著升高(P<0.01)。补肺健脾组、氨茶碱组上述基因和蛋白表达较模型组显著降低(P<0.01),且补肺健脾组疗效优于氨茶碱组。结论:补肺健脾方能够降低骨骼肌组织中TNF-α、Caspase-8和Caspase-3基因和蛋白表达,这可能是其调控炎性反应和细胞凋亡改善COPD骨骼肌功能的重要机制。展开更多
文摘目的:利用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)和巨噬细胞炎症反应模型,基于通路水平阐释补肺健脾方干预慢性阻塞性肺疾病的配伍机制。方法:利用LPS诱导巨噬细胞建立炎症反应模型,分别给予补肺健脾方的12味中药干预,利用Illumina高通量测序平台得到基因表达谱数据。采用GSEA方法鉴定巨噬细胞炎症反应相关通路,通过富集评分(normalized enrichment score,NES)筛选中药干预后显著回调的通路,揭示补肺健脾方及其配伍的干预机制。结果:与对照组比较,模型组筛选到244条显著扰动通路(GSEA,FDR<0.05)。以得到的显著扰动通路为对象,补肺健脾方所含中药显著回调通路的NES为-1041.56,其中补肺配伍的为-71.25,健脾配伍的为-17.45,温肾配伍的为-211.42,止咳化痰配伍的为-363.94,活血通络配伍的为-377.5;补肺健脾方可显著回调214条通路(逆转率为87.70%),其中补肺配伍的为43条,健脾配伍的为19条,温肾配伍的为133条,止咳化痰配伍的为142条,活血通络配伍的为187条,逆转率分别为17.62%、7.79%、54.51%、58.20%、76.64%。Positive regulation of interleukin 1 production等7条通路在5个配伍中均被显著回调。Mitotic cell cycle arrest等通路在补肺配伍中特异回调。Response to acetylcholine通路在健脾配伍中特异回调。Negative regulation of viral entry into host cell等通路在温肾配伍中特异回调。Negative regulation of leukocyte chemotaxis等通路在止咳化痰配伍中特异回调。Negative regulation of extrinsic apoptotic signaling pathway via death domain receptors等通路在活血通络配伍中特异回调。结论:补肺健脾方各配伍回调炎症反应相关通路的强度及数量均依次为活血通络、止咳化痰、温肾、补肺、健脾配伍。补肺健脾方可通过各配伍回调positive regulation of interleukin 1 production等共性通路及negative regulation of leukocyte chemotaxis等特异性通路干预炎症反应。
文摘目的:观察补肺健脾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠骨骼肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Caspase-8及Caspase-3的影响。方法:48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、补肺健脾组和氨茶碱组,采用香烟烟雾暴露联合肺炎克雷伯杆菌感染的方法建立COPD稳定期大鼠模型,从第9周起,对照组和模型组分别给予0.9%氯化钠溶液(2m L/只)灌胃,补肺健脾组和氨茶碱组分别给予补肺健脾方(5g·kg-1·d-1)、氨茶碱(2.3mg·kg-1·d-1)灌胃,至第20周结束后取材。光镜下观察大鼠股四头肌、肋间肌、肱二头肌及比目鱼肌组织病理变化,采用荧光定量PCR和Western Blot技术检测4种骨骼肌组织TNF-α、Caspase-8和Caspase-3 m RNA和蛋白表达。结果:模型组4种骨骼肌TNF-α、Caspase-8和Caspase-3基因和蛋白表达均较对照组显著升高(P<0.01)。补肺健脾组、氨茶碱组上述基因和蛋白表达较模型组显著降低(P<0.01),且补肺健脾组疗效优于氨茶碱组。结论:补肺健脾方能够降低骨骼肌组织中TNF-α、Caspase-8和Caspase-3基因和蛋白表达,这可能是其调控炎性反应和细胞凋亡改善COPD骨骼肌功能的重要机制。
