麻蜥和蟾蜍肺微血管铸型的比较观察

为了搞清蜥蜴和蟾蜍肺微血管构筑的特征与差异,利用扫描电镜对密点麻蜥(Eremiasmultiocellata)和花背蟾蜍(BuforaddeiStrauch)的肺微血管做了铸型观察.结果表明,密点麻蜥肺内壁上有许多网状隔膜、次级隔膜和三级隔膜,将其肺壁内表面分隔成许多囊状室、小室、亚小室.花背蟾蜍肺内壁上仅有网状隔膜和次级隔膜而没有三级隔膜,将其肺壁内表面分隔成许多小室和亚小室,花背蟾蜍肺内壁上的网状隔膜比密点麻蜥明显稀少.在肺泡壁和各级隔膜上均有丰富的毛细血管相互吻合成单层密集网.密点麻蜥和花背蟾蜍肺泡毛细血管直径分别为7 0～12 5μm和11 5～15 5μm,毛细血管间的网眼孔径分别是5～17μm和9～21μm.

红毛五加皮对豚鼠离体心脏冠脉流量及某些心律失常的影响

红毛五加皮经乙醇处理后剩余物的水煎液可使豚鼠离体心脏冠脉流量增加,可延长乌头碱所致大白鼠心律失常的潜伏期,能使氯化钡所致的大白鼠心律失常立即转为窦性心律,但维持时间甚短,仅使心律失常得到部分改善。对花背蟾蜍中毒所致豚鼠离体心脏及麻醉猫心律失常可转为正常节律。

花背蟾蜍肺微血管的扫描电镜观察

用扫描电镜观察了ＡＢＳ丁酮溶液灌注的花背蟾蜍肺微血管构筑情况．花背蟾蜍肺壁内有许多网状隔膜及次级隔膜（肺泡隔）将其分隔成许多肺泡囊及肺泡，在网状隔膜、肺泡隔及肺泡壁上均有丰富的毛细血管，且相互吻合成单层密集网；肺泡毛细血管网眼多由五边和六边的毛细血管环组成，毛细血管直径１１～１６μｍ，网眼孔径９～２１μｍ；在微动脉和终末微动脉血管铸型上，显示出少量明显的平滑肌细胞和内皮细胞核压迹，在毛细血管铸型上。

花背蟾蜍蝌蚪视神经再生与角膜诱导间关系的研究

以花背蟾蜍 (Buf o raddei Strauch)后肢芽期蝌蚪为材料 ,切断其左眼视神经并进行角膜移植 ,在角膜诱导的不同时期取眼球固定 ,用环氧树脂 Epon 812包埋 ,制成半薄切片 ,用次甲蓝、天青 、硼砂染色后 ,在光学显微镜下观察切断视神经后视网膜的退化过程及在视神经再生的情况下视网膜诱导皮肤移植片转化为角膜的作用 .结果表明 ,切断视神经 ,引起视网膜逐渐退化 ,移植的皮肤片与正常的皮肤基本相似 ;在分断的视神经发生再生并恢复其正常的生理功能的情况下 ,退化的视网膜逐渐恢复 ,同时被移植的皮肤片也出现表皮的去分化及表皮变薄等被诱导为角膜的过程 .

花背蟾蜍角膜的发育和诱导

以花背蟾蜍的胚胎和变态期蝌蚪为材料， 采用光镜、电镜、免疫荧光组织化学、放射自显影、电镜细胞化学、皮肤片移植及类坏死处理等技术，研究：（１）在胚胎发育及变态期间角膜的发育过程； （２）细胞外基质的合成变化及其对角膜发育和诱导的作用； （３）角膜诱导期间的超微结构变化及类坏死对角膜诱导的影响； （４）在角膜正常发育和诱导过程中的组织化学和视网膜感光细胞特异视蛋白的出现及二者间的可能关系．还提出角膜诱导的可能机理，认为表皮细胞的去分化是使表皮被诱导为角膜的主要因素，而视网膜的感光细胞及其所含的视蛋白可促进角膜的发育和诱导。

兰州产6种洗发精诱发花背蟾蜍蝌蚪红细胞微核的研究

花背蟾蜍蝌蚪经3种不同剂量的6种洗发精染毒7天后,对红细胞内出现的微核进行计数,计算其微核率及出现微核的细胞率.结果表明:两项指标都随染毒剂量的增加而升高,有较明显的剂量效应关系;和对照组相比,除调理、蛋白的1.6 ppm 剂量组差异不显著(X^2<3.84,p>0.05)当归和蛋白秀发的1.6 ppm 剂量组有显著差异(X^2>3.84,p<0.05)外,其余各组均有极其显著的增加(X^2≥10.83.p≤0.001).对6种洗发精诱变活性进行比较,从总微核率来看,从大列小依次是:康妮>蛋白秀发>洗发>调理>当归>蛋白>对照组.经 X^2检验.除康妮和其它洗发精间有较明显的差异(X^2>3.84,p<0.05)外,其余各种洗发精间均无明显差异(X^2<3.84,p>0.05).

花背蟾蜍耳后腺分泌物中化学成分的研究

作者对花背蟾蜍耳后腺分泌物的药效研究结果表明,其强心、升压等作用主要来自其氯仿提取物,作者应用中、低压液相色谱法,首次对花背蟾蜍分泌物的化学成分行进了分离,经UV,IR,~1H-NMR,MS鉴定确定了其中5种成分。分别为胆甾醇(Cholesterol),南美蟾毒精(Marinobufagin),日蟾毒它灵(Gamabufotalin),远华蟾毒精(Telocinobufagin),阿根廷蟾毒精(Arenobufagin). 另外,花背蟾蜍耳后腺分泌物有特臭,作者用水蒸汽蒸馏法提取,GC-MS鉴定,对其挥发性成分进行了研究。

Pax6 variant新基因的原核表达 蛋白纯化和多克隆抗体制备

目的构建花背蟾蜍(Bufo raddei Strauch)转录因子Pax6variant的原核表达载体,纯化融合蛋白His-Pax6variant并以其为抗原免疫家兔,制备花背蟾蜍转录因子Pax6variant多克隆抗体。方法 RT-PCR扩增得到花背蟾蜍胚胎组织的Pax6variant基因,并将此片段与原核表达载体pET-28a-c连接,构建重组表达质粒pET-Pax6variant并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株,诱导融合蛋白His-Pax6variant表达;所获得的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE电泳鉴定后,免疫家兔制备抗血清,分别采用ELISA、Western blot检测抗体效价和特异性。结果从花背蟾蜍胚胎组织中克隆了Pax6variant基因,并成功构建了其原核表达质粒;SDS-PAGE结果证实获得Mr为43 300的His-Pax6融合蛋白且为可溶性蛋白;经过His亲和层析有效纯化;以该融合蛋白免疫家兔制备得到的抗血清经Westernblot检测证实能与目的蛋白发生特异性结合,ELISA检测为阳性。结论获得了花背蟾蜍转录因子Pax6variant蛋白及特异性多克隆抗体,对进一步研究花背蟾蜍Pax6variant在发育过程中功能奠定基础。

γ-氨基丁酸、牛磺酸对蟾蜍密闭缺氧存活时间的影响

本试验采用密闭缺氧方法，研究不同质量浓度的γ-氨基丁酸（γ-Aminobutyricacid，GARA）、牛磺酸（Taurine，Tau）对蟾蜍抗缺氧能力的影响．试验显示，在25-26．5℃水温下，γ-氨基丁酸的质量浓度为0．3mg／L的溶液，牛磺酸的质量浓度为0．3mg／L的溶液，牛磺酸的质量浓度为0．5mg／L的溶液可以使蟾蜍的密闭缺氧存活时间极显著提高（P〈0．01）．γ-氨基丁酸的质量浓度为0．5mg／L，牛磺酸的质量浓度为0．7mg／L的溶液可使蟾蜍的密闭缺氧存活时间显著提高（P〈O．05），而β-丙氨酸的质量浓度为0．5mg／L时可以使蟾蜍的密闭缺氧存活时间明显减少（P〈O．05）．结果表明，在溶液一定质量浓度的范围内，γ-氨基丁酸、牛磺酸均可提高蟾蜍的抗缺氧能力．β-丙氨酸作为牛磺酸转运体的抑制剂，可以使蟾蜍的密闭缺氧存活时间明显减少，进一步证明了牛磺酸具有抗缺氧作用．

花背蟾蜍蝌蚪红血细胞微核测定(1)七种洗衣粉诱发蝌蚪红血细胞微核的比较研究

用7种洗衣粉对花背蟾蜍蝌蚪进行染毒七天后,检测其诱发红血细胞中的微核,结果表明,7种洗衣粉都能使红血细胞的微核率和出现微核的细胞率有极其显著意义的增加,并随着洗衣粉剂量的增加而升高.对各种洗衣粉诱发红血细胞微核率敏感性的排列顺序是:敦煌高级加酶加香>兰鲸加酶>燕牌加酶>长颈鹿增白加香>飞天机用>百合花加香>飞天加香.

花背蟾蜍的实验室养殖技术

两栖类胚胎发育在胚胎学、发育生物学及细胞生物学的研究中占有重要位置,而温度对两栖类胚胎发育有着十分重要的作用。花背蟾蜍(BuforaddeiStrauch)是兰州地区一种常见的、数量较多的无尾两栖类。本文就20℃条件下,从人工授精开始到蝌蚪的鳃盖封闭直至变态为幼蟾的整个实验室养殖技术作一报道。

花背蟾蜍角膜早期发育期间胎球蛋白结合位点的分布

本文用酶标胎球蛋白作为探针，在光镜水平对花背蟾蜍角膜早期发育中胎球蛋白结合位点（ＦＢＳ）进行组化定位．结果表明ＦＢＳ主要分布在角膜上皮层：胚胎发育至２０期，ＦＢＳ开始出现；在２２期和２３期，基底细胞中ＦＢＳ减少，在基膜附近大量密集；２４期，ＦＢＳ在基底细胞中再度增加而均一分布在上皮层；表层细胞游离面在２５期出现无ＦＢＳ的区带；纤毛细胞中始终无ＦＢＳ分布，而只在２５期时其游离面出现ＦＢＳ．认为ＦＢＳ参予角膜中Ｂｏｗｍａｎ＇ｓ膜的形成和间充质细胞的附着，是导致角膜上皮层变薄透明的因素之一。

花背蟾蜍耳后腺分泌物化学成分的研究[Ⅰ 脂溶性部分]

花背蟾蜍的耳后腺分泌物为黄色浆液,它的脂溶性部分通过薄层层析发现有四种蟾蜍配基,较蟾酥为少,对蟾酥的脂溶性部分用硅胶 G 以干法柱层析洗脱,获得两种结晶,经薄层层析,紫外和核磁共振光谱法鉴定分别确定为残余蟾蜍配基和华蟾蜍它灵。它们也含于花背蟾蜍的耳后腺分泌物中。

花背蟾蜍内胚层细胞核在核移植胚胎LDH表达上的等能性

研究了花背蟾蜍发育不同阶段内胚层细胞核为供体的核移植胚胎的LDH同工酶。发育20期之前的核移植胚胎整体的LDH同工酶谱均与发育同期正常受精的胚胎结果一致。发育20期之后,分别取肝、鳃、脑及肠进行分析,核移植胚胎的LDH同工酶表现也与对照组基本一致,表明花背蟾蜍早期发育不同阶段的内胚层细胞核在核移植胚胎LDH同工酶表达上具有全能性。

鸟类动物家鸡和哺乳类动物家兔之间及两栖纲动物蟾蜍和硬骨鱼类鲤鱼之间血红蛋白互作的研究

目的:研究鸟类动物家鸡和哺乳类动物家兔之间、两栖纲动物蟾蜍和硬骨鱼类鲤鱼之间血红蛋白(hemoglobin,Hb)的相互作用。方法:淀粉-琼脂糖混合凝胶薄层电泳。结果:家鸡和家兔Hb之间在“穿过”、“兜过”实验电泳过程中出现扭曲现象;蟾蜍和鲤鱼Hb之间在“穿过”、“兜过”实验电泳过程中未出现扭曲现象。结论:家鸡和家兔Hb之间可发生相互作用,而蟾蜍和鲤鱼Hb之间未发生相互作用。

花背蟾蜍耳后腺分泌物化学成分的研究(Ⅱ 水溶性部分)

经用薄层层析法测定花背蟾酥的水溶性部分,证实它和蟾酥一样都含有吲哚类衍生物,但花背蟾酥中含有五种而蟾酥中含有四种吲哚类衍生物,并均含有蟾酥碱。根据蟾酥碱与重氮化对硝基苯胺稀溶液在中性条件下生成红色偶氮化合物的性质,用纸层析法测得花背蟾酥和蟾酥中蟾酥碱的含量分别为1.3%和0.8%。

花背蟾蜍眼早期形态发生过程中ConA受体的定位及变化研究

本文用FITC－ConA作为探针，通过组织化学方法，较细致地研究了花背蟾蜍早期形态发生中ConA受体的定位和变化。结果表明：1、眼各部分组织在即将分化时出现较多的ConA受体，分化开始后逐渐下降到原基形成时的水平；2、在晶状体被诱导时，视泡、晶状体原基以及两者间的基质中，有较多的ConA受体分布，这表明ConA受体与晶状体诱导密切相关。

河南产花背蟾蜍的核型研究

采用骨髓细胞蒸汽固定的方法,对河南产花背蟾蜍(Buforaddeistrauch)的染色体组型分析表明,河南产花背蟾蜍的二倍体染色体数目为2n=22,20m+2sm,可分为五组,除第4染色体为亚中部着丝点染色体外,其余均为中部着丝点染色体.包括6对大型染色体和5对小型染色体,各对染色体之间在形态上可以区分,雌雄个体之间没有可察觉的差异.与北京产花背蟾蜍作比较,发现二者在核型上有微小而又重要的差别,主要涉及随体的位置,前者随体在第4染色体长臂末端,后者的随体在第4染色体短臂末端.本文还探讨了提高蟾蜍分裂指数的几种方法,结果表明注射葡萄糖酵母汁能明显提高有丝分裂指数.

环境雌激素双酚A对花背蟾蜍血清蛋白的影响

目的研究花背蟾蜍腹腔注射不同剂量BPA对血清蛋白的影响。方法实验分组饲养,对照组注射花生油,实验组每天注射不同浓度BPA溶液,分低剂量组(50μmol/l),中剂量组(100μmol/l),高剂量组(150μmol/l),第7 d进行解剖,心脏取血,离心取上清液,醋酸纤维薄膜电泳,测定泳动度,紫外可见分光光度计752N 620 nm处测OD值,计算其相对含量。结果表明不同剂量的BPA对蟾蜍血清蛋白有影响,各实验组电泳图谱中不同蛋白的含量差异显著。实验组中随BPA剂量的增大,中、高剂量组减少γ-球蛋白条带,各蛋白条带之间的分界不明显。结论 BPA对蟾蜍血清中的γ-球蛋白有明显影响。

花背蟾蜍角膜和皮肤蛋白质的SDS-PAGE分析

本文用梯度SDS-PAGE方法,分析和比较了花背蟾蜍蝌蚪和成体皮肤及成体角膜中蛋白质组分的异同,结果表明成体角膜约有33种蛋白质组分;成体皮肤约有27种;蝌蚪皮肤约24种.蝌蚪皮肤与成体皮肤蛋白质组分数量和分布趋势相似,但成体皮肤的组分比蝌蚪的多,一些蛋白质组分的相对含量与蝌蚪的有差别.角膜与前两者相比差别明显,一是蛋白质组分数较多,其次分布趋势差异较大.