补脾强力复方对自身免疫性重症肌无力大鼠胸腺组织GR mRNA表达的影响

目的:观察补脾强力复方对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型大鼠胸腺组织中糖皮质激素受体(GR)mRNA表达的影响。方法:将Lewis大鼠按体重随机分为6组,即:正常组、模型组、强的松组(5.4 mg/kg)、补脾强力复方不同剂量组(剂量分别为4.75 g/kg,7.12 g/kg,9.49 g/kg),除正常组外,均采用鼠源性AchR-α亚基97-116肽段序列(R97-116)免疫接种复制EAMG模型。药物治疗后,ELISA法检测各组大鼠的AchR-Ab、皮质醇水平,RT-Q-PCR技术检测大鼠胸腺组织GR mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组GR mRNA相对表达量降低(P<0.01),与模型组比较,西药组、中药大、中、小剂量组大鼠AchR-Ab含量下降(P<0.05),强的松组、中药大剂量组和中剂量组GR mRNA相对表达量增加(P<0.05)。结论:补脾强力复方可提高胸腺组织GR mRNA的表达,这可能是其治疗MG的作用机制之一。

HPA轴损伤对EAMG大鼠胸腺组织GR mRNA表达影响及补脾强力复方干预作用

目的:观察HPA轴损伤对实验性自身免疫性重症肌无力模型(EAMG)大鼠胸腺组织GR mRNA表达影响及补脾强力复方干预作用。方法:将Lewis大鼠随机分为假手术组、模型组、强的松组及补脾强力复方大、中、小剂量组(以下称大、中、小剂量组),除假手术组外,余经双肾上腺摘除致HPA轴损伤,采用免疫诱导注射鼠源性AchR-α亚基97-116肽段复制EAMG模型,造模成功进行灌胃治疗4周后,ELISA法检测各组大鼠血清AchR-Ab、皮质醇水平,RT-q-PCR技术检测各组大鼠胸腺GR mRNA基因表达水平。结果:与假手术组比较,模型组AchR-Ab显著升高,皮质醇水平显著下降,均具有极显著统计学差异(P<0.01);与假手术组比较,模型组胸腺内GRmRNA相对表达量显著降低(P<0.05),与模型组比较,补脾强力复方大剂量组、中剂量组、强的松组胸腺GRmRNA相对表达量升高,具有显著性差异(P<0.05)。结论:HPA轴损伤EAMG大鼠胸腺GR mRNA相对表达量显著降低,而补脾强力复方可提高胸腺组织GR mRNA的表达,有效调节HPA轴功能,这可能是其治疗MG的作用机制之一。

补脾强力复方对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠下丘脑CRHmRNA及蛋白表达的影响

目的：观察补脾强力复方对实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）大鼠下丘脑CRHmRNA及蛋白表达的变化,探讨补脾强力复方治疗EAMG的作用机制。方法：将Lewis大鼠作为正常对照组,采用免疫诱导注射鼠源性AchR-α亚基97-116肽段免疫Lewis大鼠复制EAMG模型,将造模成功的EAMG大鼠随机分为模型组、强的松组（5.4 mg/kg）、补脾强力复方大、中、小剂量组（分别为9.49 g/kg,7.12 g/kg,4.75 g/kg）,每日灌胃治疗1次,连续给药4周后分别采用RT-Q-PCR技术、免疫组化法观察各组大鼠下丘脑CRHmRNA及蛋白表达变化。结果：EAMG模型组大鼠下丘脑CRHmRNA及蛋白表达较正常组均明显降低（P〈0.01）;补脾强力复方大、中、小剂量组下丘脑CRHmRNA及蛋白较EAMG模型组及强的松组相对表达量增加（P〈0.05）。结论：补脾强力复方能上调EAMG大鼠下丘脑CRHmRNA及蛋白表达,这可能是补脾强力复方治疗EAMG大鼠机制之一。

基于HPTT轴探讨补脾强力复方调节EAMG大鼠免疫系统平衡的机制

目的基于下丘脑-垂体-甲状腺-胸腺(HPTT)轴探讨补脾强力复方调节实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠免疫系统平衡的机制。方法将120只Lewis大鼠随机分为对照组,模型组,补脾强力复方低、中、高剂量组(4.75、7.12、9.49 g/kg)和西药组(泼尼松,5.4 mg/kg),每组20只。实验期间观察大鼠行为学改变(体质量、Lennon评分)。实验结束后HE染色评估胸腺组织病理变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab)、肿瘤坏死因子(TNF)-β、白细胞介素(IL)-4和IL-10含量;流式细胞术检测大鼠胸腺中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞比例,同时检测HPTT轴功能损伤指标[(三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激素(TSH)、促甲状腺激素释放激素(TRH)、下丘脑T3受体(T3R)、去甲肾上腺素(NE)]水平。结果建模后,与对照组相比,各建模组体质量下降,Lennon评分升高;给药后,补脾强力复方中、高剂量组和西药组体质量较模型组升高,Lennon评分下降(P<0.05)。HE染色可见模型组皮质区淋巴细胞变性坏死,髓质区胸腺小体消失,细胞数量减少;补脾强力复方低、中、高剂量组及西药组大鼠胸腺皮质区和髓质区细胞数量明显增多。与对照组相比,模型组胸腺CD4^(+)CD25^(+)Treg、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞比例下降,CD4+CD25-Foxp3+Treg和CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(-)Treg细胞比例升高(P<0.05),血清AchR-Ab、TNF-β、IL-4、IL-10、TSH和TRH水平明显升高,T3R和NE水平明显下降(P<0.05)。与模型组相比,补脾强力复方中、高剂量组及西药组胸腺CD4^(+)CD25^(+)Treg、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞比例升高,CD4+CD25-Foxp3+Treg和CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(-)Treg细胞比例下降,血清AchR-Ab、TNF-β、IL-4、IL-10、TSH和TRH水平下降(P<0.05);T3R和NE水平升高。结论补脾强力复方可以通过调控HPTT轴及其相关因子,改善EAMG大鼠自身免疫平衡。