补肾化痰方含药血清对HepG2肝癌细胞增殖、迁移的实验研究

目的:研究补肾化痰方(BHF)对小鼠脏器指数及BHF含药血清对HepG2肝癌细胞增殖、迁移的影响。方法:将小鼠随机分为对照组、BHF高剂量组、BHF中剂量组、BHF低剂量组,灌胃7 d后,采血制备含药血清,处死后取材测定各组小鼠脏器指数。体外培养HepG2肝癌细胞,设置空白组、对照组、BHF高剂量组、BHF中剂量组、BHF低剂量组,每组设3个浓度(20%、10%、5%),3个复孔。各组加入相应的含药血清,培养24、48、72 h后,采用CCK8法测算细胞增殖抑制率。采用Transwell细胞培养24 h后镜下观察各组细胞的形态学改变。进行细胞划痕实验,检测各组HepG2细胞迁移的水平。结果:在20%血清浓度下,与对照组比较,24 h时BHF高、低剂量组细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05)。72 h时BHF各剂量组细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05),且高、低剂量组均高于中剂量组(P<0.05)。在10%血清浓度下,与对照组比较,24 h时BHF低剂量组细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05),72 h时BHF各剂量组细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05),且高剂量组显著高于低剂量组(P<0.05)。在5%血清浓度下,与对照组比较,48 h时BHF高剂量组显著增加(P<0.05)。72 h时BHF各剂量组细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05),且高剂量组显著高于中、低剂量组(P<0.05)。与空白组比较,72 h时BHF高剂量组划痕迁移率显著降低(P<0.05)。结论:BHF含药血清对HepG2肝癌细胞增殖、迁移具有抑制作用,且高剂量组表现最优。

补肾化痰方对肥胖型多囊卵巢综合征不孕患者子宫内膜容受性的影响

目的观察补肾化痰方对肥胖型多囊卵巢综合征不孕患者子宫内膜容受性的影响。方法将64例肥胖型多囊卵巢综合征不孕患者,随机分为治疗组和对照组各32例。两组患者均以炔雌醇环丙孕酮预处理3个周期,第4个周期开始,对照组予来曲唑治疗,治疗组在此基础上口服补肾化痰方。观察两组患者治疗前后中医证候积分;比较两组治疗后体重指数(BMI),妊娠率;检测黄体生成素(LH),雌二醇(E2),子宫内膜螺旋动脉血流参数搏动指数(PI),阻力指数(RI),比较两组患者HCG注射日子宫内膜厚度及类型。结果治疗组治疗后中医证候积分明显低于对照组(P<0.05);治疗组在治疗后体重指数较治疗前有显著下降(P<0.05);治疗组妊娠率高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。两组在治疗后E2、LH水平较治疗前均有显著提升(P<0.05),治疗后组间比较E2水平差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前后子宫内膜螺旋动脉血流参数PI、RI均有显著性下降(P<0.05),但治疗组优于对照组(P<0.05)。HCG注射日子宫内膜厚度治疗组优于对照组(P<0.05);治疗组A型内膜显著多于对照组(P<0.05)。结论在西医治疗的基础上,补肾化痰方能显著改善子宫内膜容受性,更好地调节生殖内分泌水平,同时减轻患者临床症状,降低患者体重,对妊娠结局有优化作用。

补肾活血化痰方对多囊卵巢综合征模型大鼠的治疗作用机制研究

目的:考察补肾活血化痰方对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠的治疗作用机制。方法:将50只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组[罗格列酮,3.0 mg/(kg·d)]和补肾活血化痰方高、低剂量组[7.5、5.0 g/(kg·d)],每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠均采用Poresky法复制PCOS模型。造模后,正常对照组和模型对照组大鼠ig生理盐水,各给药组大鼠ig相应药液,每天1次,连续22 d。给药结束后,测定大鼠血清中睾酮(T)、抗苗勒氏管激素(AMH)、胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平和卵巢组织中转化生长因子β1(TGF-β_1)阳性表达情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清中T、AMH、IGF-Ⅰ、TNF-α水平及卵巢组织中TGF-β_1阳性表达率均显著升高(P<0.05);与模型对照组比较,各给药组大鼠血清中T、AMH、IGF-Ⅰ、TNF-α水平及卵巢组织中TGF-β_1阳性表达率均显著降低(P<0.05),且补肾活血化痰方各剂量组指标优于阳性对照组(P<0.05)。结论:补肾活血化痰方能明显降低PCOS模型大鼠血清中T、AMH、IGF-Ⅰ、TNF-α水平以及卵巢组织中TGF-β_1阳性表达率,这可能是其治疗PCOS的作用机制之一。

穴位埋线联合补肾化痰方治疗痰湿内盛型肥胖的疗效观察

目的:探究穴位埋线联合补肾化痰方治疗痰湿内盛型肥胖的临床疗效。方法:将符合纳入和排除标准的痰湿内盛型肥胖患者70例作为研究对象,用随机数字表法按照患者的就诊先后顺序,将其分为对照组及观察组,每组35例。在基础治疗的基础上对照组给予补肾化痰方,观察组患者给予穴位埋线联合补肾化痰方治疗,持续治疗8周,对比两组患者治疗效果、体重、体重指数、腰围。结果:经治疗,观察组总有效率较对照组高(97.14%,34/35 vs 77.14%,27/35),差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗前,对照组与观察组体重、体重指数、腰围组间对比差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,对照组与观察组体重、体重指数、腰围均较同组治疗前明显下降(P<0.05),而且观察组治疗2个疗程后体重、体重指数、腰围均低于对照组,对比差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,对照组与观察组中医证候积分均较同组治疗前明显下降(P<0.05),而且观察组治疗2个疗程后中医证候积分均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:穴位埋线联合补肾化痰方对痰湿内盛型肥胖患者具有良好的治疗效果。

穴位埋线联合中药对多囊卵巢综合征患者胰岛素抵抗及血清瘦素的影响

目的观察穴位埋线联合中药治疗多囊卵巢综合征的临床疗效。方法将90例多囊卵巢综合征患者随机分为治疗组和对照组,每组45例。对照组予补肾健脾化痰方,治疗组在对照组治疗措施基础上加用穴位埋线。两组疗程均为3个月经周期,观察临床疗效,比较血清相关指标(FPG、FINS、HOMA-IR、LP)、体质量指数及腰臀比的变化情况。结果 1共有84例病例完成试验,治疗组41例,对照组43例。2治疗组、对照组总有效率分别为80.49%和65.15%;组间临床疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05)。3治疗前后组内比较,两组HOMA-IR、LP、WHR水平差异均有统计学意义(P<0.05);组间治疗后比较,HOMA-IR、LP、WHR水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论穴位埋线联合中药治疗多囊卵巢综合征疗效满意,其机制可能与降低血清瘦素水平、减轻胰岛素抵抗有关。

补肾活血调营化痰方对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型肺功能及转化生长因子-β1、炎性因子的影响

目的通过建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,探讨阳和平喘颗粒对COPD大鼠模型肺功能及转化生长因子-β1(TGF-β1)、炎性因子的影响,分析可能影响病情的作用环节和途径,为缓解COPD病程进展提供研究基础。方法Wistar雄性大鼠120只,20只作为正常组[灌服生理盐水10ml/(kg·d)],其余采用气管内滴入脂多糖加烟熏双因素联合建立COPD大鼠模型,随机分为模型组[生理盐水10ml/kg·d)]、实验药物低剂量组、中剂量组、高剂量组[分别灌胃阳和平喘颗粒混悬液1.75 g/(kg·d)、3.5 g/(kg·d)、7g/(kg·d)]、阳性药物对照组(桂龙咳喘宁混悬液3.5ml/100 g),每组20只。分别于第0、8、20周检测各组大鼠肺功能,包括出潮气量(VT)、呼气峰流速(PEF)、50%潮气量时的呼气流量(EF50);检测血清和肺组织TGF-β1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)含量。结果模型组、实验药物低剂量组、中剂量组、高剂量组和阳性药物对照组8周和20周VT、EF50和PEF均低于正常组,大鼠血清和肺组织TNF-α、TGF-β1、IL-1β、IL-6和IL-8均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);实验药物高剂量组和阳性药物对照组20周VT、EF50和PE结果均高于模型组、实验药物低剂量组、中剂量组,血清和肺组织TNF-α、TGF-β1、IL-1β、IL-6和IL-8结果均低于模型组、实验药物低剂量组、中剂量组,差异有统计学意义(P<0.05),阳性药物对照组与实验药物高剂量组各项指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论各组COPD大鼠模型肺功能均显著降低,TNF-α、TGF-β1、IL-1β、IL-6和IL-8结果显著增高,随着阳和平喘颗粒剂量的增加,COPD大鼠模型肺功能均显著提升,TNF-α及各项炎性因子水平呈现降低趋势,桂龙咳喘宁组与阳和平喘颗粒高剂量组结果相似。

补肾化痰防喘方配合穴位贴敷治疗慢性阻塞性肺疾病的临床研究

目的探讨补肾化痰防喘方配合穴位贴敷治疗慢性阻塞性肺疾病的临床效果。方法将150例COPD患者随机分为试验组与对照组,各75例。对照组常规吸入布地奈德福莫特罗粉吸入剂(160∶4.5),1吸bid;试验组在对照组治疗的基础上加用补肾化痰防喘方同时配合穴位贴敷法治疗,10 d为1个疗程,连续治疗3个疗程。对比两组患者CAT评分、中医兼见症状评分及总疗效、1 s用力吸气容积占肺活量比例(FEV1%)、最大呼气流速(PEFR)、6 min步行距离及步行前后血氧饱和度下降分数、用药结束后慢阻肺复发例数及复发时间。结果试验组在CAT评分、中医兼见症状评分及总疗效、1 s用力吸气容积占肺活量比例(FEV1%)、最大呼气流速(PEFR)、6 min步行距离及步行前后血氧饱和度下降分数、用药结束后慢阻肺复发例数及复发时间改善方面明显优于对照组(P<0.05)。结论补肾化痰防喘方配合穴位贴敷可以改善患者肺功能,减少急性加重,改善患者症状、体征,提高生活质量,对慢性阻塞性肺疾病可起到积极的治疗作用。

补肾化痰方通过调控肠道菌及PPARγ通路治疗多囊卵巢综合征的机制

目的:探究补肾化痰方对多囊卵巢综合征(PCOS)模型小鼠肠道菌群多样性的调节作用及其治疗PCOS的相关机制。方法:24只无特定病原体级成年雌性C57BL/6J小鼠随机分为三组:空白对照组、模型对照组(使用来曲唑联合高脂饲料诱导)、中药治疗组(造模结束后连续灌服补肾化痰方混悬液35 d)。采用酶联免疫吸附测定法检测小鼠性激素水平;苏木精-伊红染色后光镜下观察卵巢形态;收集各组小鼠结肠内粪便,采用16S rRNA测序进行肠道菌群检测;气相色谱-质谱法检测短链脂肪酸含量;免疫组织化学法检测结肠过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)表达;实时逆转录聚合酶链反应法检测肠道上皮黏蛋白2、闭合蛋白1和紧密连接蛋白1(ZO-1)、PPARγ的mRNA表达;蛋白质印迹法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、PPARγ蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型对照组体重、血清卵泡刺激素、黄体生成素和睾酮水平均升高,血清雌二醇水平降低(均P<0.01),光镜下卵巢结构符合PCOS病理特征;中药治疗组血清性激素水平和卵巢结构较模型对照组改善。模型对照组肠道菌群多样性较空白对照组发生变化。与空白对照组比较,在门水平,模型对照组厚壁菌丰度下降,疣微菌、变形菌、放线菌丰度升高(均P<0.05);在属水平,模型对照组乳酸菌丰度显著下降,阿克曼菌、乳梭菌、乳球菌、产粪甾醇真细菌丰度升高(均P<0.05)。补肾化痰方治疗后小鼠肠道菌群紊乱状态得到一定程度的改善。与空白对照组比较,模型对照组粪便中乙酸、丙酸、丁酸含量均下降(均P<0.05),而中药治疗组乙酸、丙酸、丁酸含量较模型对照组均增加,其中丙酸和丁酸含量与模型对照组差异有统计学意义(均P<0.05)。与空白对照组比较,模型对照组肠道PPARγ表达降低,ZO-1 mRNA表达增加,黏蛋白2、闭合蛋白1 mRNA表达减少,iNOS蛋白表达增加(均P<0.05);与模型对照组比较,中药治疗组PPARγ蛋白表达增加,闭合蛋白1、黏蛋白2 mRNA表达显著增加(均P<0.05),ZO-1 mRNA表达减少,iNOS蛋白表达减少。结论:来曲唑联合高脂饲料诱导的PCOS小鼠存在菌群失调状态,补肾化痰方通过调节肠道菌群种属分布可能有助于提高短链脂肪酸水平从而激活肠PPARγ通路,改善肠屏障功能,达到治疗PCOS的目的。

补肾活血化痰方治疗肾虚痰湿夹瘀肥胖型多囊卵巢综合征的临床观察

目的观察"补肾活血化痰方"治疗多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)肾虚痰湿夹瘀型患者后,患者血清性激素、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIN)、胰岛素抵抗(IR)及子宫内膜容受性的变化,并评估其临床疗效,为PCOS患者临床治疗寻找更多有利的依据。方法选取西安市中医医院妇科门诊2015年3月—2017年11月就诊并同时符合中西医诊断标准的PCOS患者30例,使用自身先后对照法。结果(1)治疗后PCOS患者血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)、黄体生成素/血清卵泡刺激素(LH/FSH)比值较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);血清卵泡刺激素(FSH)治疗后较治疗前轻度升高,差异无统计学意义(P>0.05);血清雌激素(E2)、子宫内膜厚度(ET)较治疗前明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)治疗后PCOS患者FPG、FIN及IR较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)治疗后PCOS患者子宫内膜螺旋动脉搏动指数(PI)、阻力指数(RI)均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);(4)治疗后PCOS患者中医症状评分和月经周期天数比治疗前减低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论补肾活血化痰方治疗肾虚痰湿夹瘀型多囊卵巢综合征能够减轻患者临床症状,改善血清性激素水平及内分泌环境,提高子宫内膜容受性。

补肾健脾化痰方治疗糖尿病合并高血压阴虚阳亢夹瘀证的临床研究

目的观察补肾健脾化痰方治疗糖尿病合并高血压阴虚阳亢夹瘀证的临床疗效。方法选取2015年9月—2016年9月我院确诊的糖尿病合并高血压阴虚阳亢夹瘀证病人72例,根据随机数字表法将所有病人分为两组,每组36例。对照组予以常规治疗联合西药治疗,观察组在对照组的基础上予以补肾健脾化痰方治疗。治疗3个疗程后,比较两组中医症状积分、临床疗效、血糖、血脂、血压。结果治疗后,观察组中医症状积分为(4.67±2.69)分,低于对照组的(12.68±3.34)分,差异有统计学意义(P <0.05);观察组治疗总有效率为94.44%,高于对照组的75.00%,差异有统计学意义(P <0.05);两组治疗后空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白比较差异均具有统计学意义(P <0.05);观察组总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇水平均低于对照组,高密度脂蛋白胆固醇水平高于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05);观察组舒张压、收缩压水平均低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论补肾健脾化痰方治疗糖尿病合并高血压阴虚阳亢夹瘀证病人,能有效缓解病人临床症状,提高临床疗效,改善血糖、血脂、血压水平。

补肾益气活血化痰方治疗老年全身麻醉后认知障碍及对血清E2、T、Aβ、BNP的影响

目的研究补肾益气活血化痰方治疗老年全身麻醉后认知障碍及对患者血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、Tβ-淀粉样蛋白(Aβ)、脑钠肽(BNP)的影响。方法选择医院2017年10月—2018年9月诊治的老年全身麻醉后认知障碍96例作为研究对象,遵照知情同意原则并按照随机数字表法分为两组,每组48例。对照组采用常规西医治疗,观察组在常规西医治疗基础上采用补肾益气活血化痰方治疗。比较两组患者的治疗效果,简易精神状态量表(MMSE)与蒙特利尔认知评估量表(MoCA),患者血清E2、T、Aβ、BNP水平以及不良反应发生情况。结果观察组总有效率显著高于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者的MMSE、MoCA评分差异无统计学意义(P>0.05),两组治疗后1周、2周MMSE、MoCA评分均有改善,治疗后1周两组间MMSE、MoCA评分差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2周观察组MMSE、MoCA评分显著优于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者的血清E2、T、Aβ、BNP差异无统计学意义(P>0.05),治疗后1周、2周两组患者的血清E2、T、Aβ、BNP均有改善,但治疗后1周两组间各指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2周观察组的血清E2、T显著高于对照组,血清Aβ、BNP显著低于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率为12.5%(6/48),对照组为10.4%(5/48),组间无显著性差异(P>0.05)。结论补肾益气活血化痰方治疗老年全身麻醉后认知障碍可获得满意的临床效果,能够降低患者的血清Aβ、BNP水平、升高血清E2、T水平,改善患者的认知功能,是有效安全的治疗方案。

醒脑开窍针刺法合并补肾化痰活血方治疗急性脑梗死风痰瘀阻证的临床研究

目的:探究醒脑开窍针刺法合并补肾化痰活血方治疗急性脑梗死风痰瘀阻证的临床效果。方法:选择北京中医药大学孙思邈医院2021年1月-2023年12月收治的急性脑梗死风痰瘀阻证患者106例,采用随机数字表法分为针刺组和联合组,每组53例。两组均给予抗凝、改善微循环、控制血压、神经保护、吸氧、心脏监测等常规西医治疗,针刺组给予醒脑开窍针刺法治疗,联合组在针刺组基础上给予补肾化痰活血方口服治疗。观察两组患者的中医证候积分、神经功能指标、血流动力学指标、神经功能与运动功能及日常生活能力评分、临床疗效、不良反应发生情况。结果:治疗后,两组中医证候积分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、中枢神经特异蛋白(S100β)、血流峰值时间(TTP)与阻力指数(RI)水平均较治疗前降低(P<0.05),且联合组低于针刺组(P<0.01);治疗后,两组血清神经生长因子(NGF)、脑血容量(CBV)、平均血流量(Qmean)水平、简式Fugl-Meyer评分(FMA)与Barthel指数(BI)评分均较治疗前升高(P<0.05),且联合组高于针刺组(P<0.01);联合组治疗总有效率高于针刺组(P<0.05);两组不良反应总发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:醒脑开窍针刺法合并补肾化痰活血方治疗急性脑梗死风痰瘀阻证可降低中医证候积分,缓解临床症状,增加脑血流量,改善神经功能,提高临床疗效,且安全性较高。

哈氏补肾化痰方改善肥胖型多囊卵巢综合征大鼠胰岛素抵抗的机制

目的:探索哈氏补肾化痰方改善肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠胰岛素抵抗的作用机制。方法:30只SPF级雌性SD大鼠随机分为空白组,模型组,中药低、中、高剂量组,每组6只。除空白组外,其余各组以来曲唑+高脂饮食法建立肥胖型PCOS大鼠模型。中药低、中、高剂量组药物浓度分别为2.64、4.84、7.04 g/mL,以1 mL/100 g标准灌胃,正常组和模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液,每日1次,连续4周。血糖仪测定空腹血糖(FPG),放射免疫法检测空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);靶向代谢组学检测肠道短链脂肪酸(SCFA);ELISA法检测血清炎症因子及卵巢、脂肪、骨骼肌组织中脂联素受体水平。结果:与模型组比较,中药中、高剂量组FINS、HOMA-IR、IL-1β水平,以及中药中剂量组丁酸水平显著降低(P<0.05);而脂肪组织中药各剂量组及卵巢组织中药中、高剂量组脂联素受体,中药低剂量组丙酸,以及高剂量组乙酸及丙酸显著升高(P<0.05)。结论:哈氏补肾化痰方可能通过促进肠道短链脂肪酸的生成,降低促炎因子分泌,提高脂联素受体表达,从而改善胰岛素抵抗。

卵巢局部糖原合成酶激酶3β过表达对大鼠卵巢功能的影响及补肾化痰方干预机制

目的:探讨大鼠卵巢局部糖原合成酶激酶3β(GSK3β)基因过表达对卵巢功能的影响及补肾化痰方的干预作用。方法:将SD大鼠随机分为对照组,模型组,补肾化痰方低、中、高剂量组。对照组大鼠给予卵巢包膜内10μL 0.9%氯化钠溶液注射,其余4组动物均卵巢包膜内注射10μL Lenti-GSK3β病毒溶液。各组分别给予0.9%氯化钠溶液及相应剂量的补肾化痰方药物灌胃,治疗15d后,检测卵巢组织中细胞凋亡水平,凋亡相关因子、胰岛素信号通路因子、甾体激素合成关键酶及PPARγ-LXRα信号通路关键因子的表达水平以及血清睾酮(T)、孕酮(Prog)、雌二醇(E_2)、卵泡刺激素(FSH)及促黄体生成素(LH)水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠卵巢组织TUNEL染色阳性细胞核密度增加,卵巢组织甾体激素合成酶HSD3β、CYP17a1 mRNA表达水平上升及血清T水平显著上升(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组对卵巢组织TUNEL染色后阳性细胞核密度及胰岛素信号通路关键因子的表达水平差异无统计学意义,但能以剂量依赖的方式激活PPARγ-LXRα信号通路,降低CYP17a1、HSD3βmRNA的表达水平(除补肾化痰方低剂量组CYP17a1)及血清T水平(除补肾化痰方低剂量组外)(P<0.05,P<0.01)。结论:卵巢GSK3β基因表达水平的上升可能是卵巢胰岛素信号通路异常所体现出的结果,而非造成PCOS患者卵巢病理变化的直接原因;补肾化痰方可能激活PPARγ-LXRα信号通路调节PCOS患者异常的生殖内分泌临床表型。

补肾化痰方对肥胖型多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢组织NLRP3/ASC2/Caspase-1炎症小体信号通路的影响

目的探讨补肾化痰方治疗肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)的可能作用机制。方法采用来曲唑联合高脂乳剂制备肥胖型PCOS模型,并将造模成功的99只SD大鼠随机分为模型组19只,二甲双胍组及补肾化痰方低、中、高剂量组各20只,另设空白组23只。补肾化痰方低、中、高剂量组分别给予补肾化痰方16.65、41.63、83.25 g/(kg·d)灌胃,二甲双胍组给予盐酸二甲双胍片300 mg/(kg·d)灌胃,模型组和空白组给予5 ml/kg蒸馏水灌胃,各组均每日1次,共灌胃21天。观察各组大鼠卵巢组织病理情况,ELISA法检测血清睾酮(T)及游离脂肪酸(FFAs),Western blotting法检测卵巢组织NOD样受体蛋白3(NLRP3)、含CARD结构域的凋亡相关颗粒样蛋白2(ASC2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达水平,免疫组化染色法检测卵巢组织白细胞介素1受体(IL-1R)、核因子κB(NF-κB)阳性产物。结果与空白组比较,模型组大鼠卵巢内基本未见优势卵泡生长,血清T、FFAs,卵巢组织IL-1R、NF-κB平均光密度及Caspase-1、NLRP3、ASC2蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,补肾化痰方高、中剂量组及二甲双胍组大鼠卵巢可见明显的黄体或生长卵泡,卵巢组织NLRP3、Caspase-1、ASC2蛋白表达显著下调;二甲双胍组、补肾化痰方高剂量组血清T、FFAs含量显著降低,IL-1R、NF-κB平均光密度显著降低(P<0.05或P<0.01)。补肾化痰方各剂量组及二甲双胍组Caspase-1、NLRP3、ASC2蛋白表达及IL-1R、NF-κB平均光密度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾化痰方可能通过抑制卵巢组织NLRP3/ASC2/Caspase-1炎症小体信号通路治疗肥胖型PCOS,且对该通路的调节未见明显量效关系。

补肾化痰方对超重及肥胖型多囊卵巢综合征患者卵母细胞及胚胎发育潜能的影响

目的:分析体外受精(IVF)过程中超重及肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵子质量、胚胎发育潜能的差异,探讨补肾化痰方对此类患者IVF过程及结局的影响。方法:根据不同体质量将行IVF助孕的PCOS患者96个周期,分为3组:偏瘦型/正常组(A组)、超重/肥胖组(B1组)、中药+超重/肥胖组(B2组);比较3组一般资料、代谢水平、促排卵过程中药物使用情况、激素及实验室相关指标;分析各组间卵子质量、胚胎发育潜能及临床结局的差异。结果:与A组比较,B1组Gn使用总量、早期自然流产率显著升高(P<0.05),囊胚形成率、HCG日E;水平、临床妊娠率则显著降低(P<0.05)。超重/肥胖组经补肾化痰方预处理后,与B1组比较,B2组囊胚形成率、临床妊娠率均显著升高,早期自然流产率则显著降低(P<0.05)。进一步比较各组4个时点的葡萄糖(GLU)、胰岛素(INS)、胰高血糖素样肽(GLP-1)水平,与A组比较,B1、B2组的空腹及糖负荷后血糖及胰岛素水平均显著升高(P<0.05);空腹及餐后血GLP-1水平则显著降低,且餐后30 min的分泌高峰均消失。经补肾化痰方干预后,各时点GLP-1分泌均显著提高;60、120 min时GLU、INS则显著降低(P<0.05)。GC-MS代谢组学共鉴定出A组与B组患者卵泡液中存在6种代谢差异产物:戊糖醇1、反式乌头酸、亚油石酸、甘油酸、草酸、核酸。进一步进行通路分析(KEGG),代谢网络构建结果显示,A组与B组间主要存在二羧酸代谢与磷酸肌醇代谢通路。结论:在进行IVF助孕的PCOS患者中,BMI指数的升高会降低卵巢对Gn的敏感性,导致Gn用量增加;且随着BMI增加,其胚胎发育潜能、临床妊娠率均显著下降,早期自然流产率显著升高;超重/肥胖PCOS全身糖脂代谢紊乱更明显,同时卵巢局部存在显著代谢差异,其胚胎发育潜能的降低可能与卵巢局部代谢障碍及磷酸肌醇代谢通路有关。