补肾化瘀方加减对肾虚血瘀型子宫内膜异位症术后复发的预防作用与机制研究

[目的]探讨补肾化瘀方加减对肾虚血瘀型子宫内膜异位症术后复发的预防作用与机制。[方法]选择于2019年1月—2021年1月在衡水市第四人民医院治疗的子宫内膜异位症患者320例,按随机数字表法随机分组,常规西医组160例,给予患者常规西医治疗,补肾化瘀方组160例,在常规西医治疗同时给予患者补肾化瘀方加减治疗,治疗前后检测两组患者血清性激素[促黄体生成素(LH)、孕激素(P)、雌激素(E2)],肿瘤坏死因子-α(TNF-α),血管内皮生长因子(VEGF),抗子宫内膜抗体(EMAb)水平,通过语言描述评分法(VRS)评价患者痛经及非经期盆腔痛情况,给予患者中医证候评分,比较两组临床疗效,记录两组患者2年复发率及治疗期间两组患者不良反应发生情况。[结果]补肾化瘀方组患者痛经及非经期盆腔痛评分低于常规西医组(P<0.05),补肾化瘀方组TNF-α、VEGF、EMAb水平较常规西医组低(P<0.05),补肾化瘀方组患者LH、P、E2含量较常规西医组明显低(P<0.05),补肾化瘀方组患者中医证候评分较常规西医组明显降低(P<0.05),补肾化瘀方组患者总有效率(97.50%)较常规西医组(88.13%)高(P<0.05),常规西医组2年复发率为12.90%,补肾化瘀方组2年复发率为3.21%,两组2年复发率比较,差异有统计学意义(P<0.05),补肾化瘀方组开始复发时间长于常规西医组(P<0.05);治疗期间两组患者均无明显不良反应发生。[结论]补肾化瘀方加减治疗肾虚血瘀型子宫内膜异位症术后疗效显著,可有效缓解患者痛经及非经期盆腔痛,降低复发率,其作用机制可能与其抑制机体炎症,降低VEGF、EMAb水平,改善性激素水平有关。

补肾化瘀方治疗排卵障碍性不孕症临床观察

目的:观察补肾化瘀方对排卵障碍性不孕症患者优势卵泡直径、例数的影响。方法:选取符合纳入标准的肾虚血瘀证排卵障碍性不孕症患者40例,随机分为治疗组(予补肾化瘀方治疗)和对照组(予来曲唑片治疗)各20例。比较两组临床疗效、治疗前及治疗两周期后同时期(月经第3天)性激素水平、治疗前及治疗两周期后子宫内膜厚度、优势卵泡直径、优势卵泡例数、成功排卵例数及治疗6个月后妊娠成功率。结果:治疗组总有效率80.00%,高于对照组的50.00%(P﹤0.05)。治疗后,两组FSH、LH水平均降低且治疗组低于对照组(P﹤0.05),两组E2水平均上升且治疗组高于对照组(P﹤0.05);两组子宫内膜厚度增厚、优势卵泡直径增加,且治疗组子宫内膜厚度厚于对照组、优势卵泡直径大于对照组(P﹤0.05);两组优势卵泡例数、成功排卵例数均增加(P﹤0.05),且治疗组优势卵泡例数、成功排卵例数多于对照组(P﹤0.05)。治疗6个月后,经随访统计治疗组妊娠率为70.00%,高于对照组的35.00%(P﹤0.05)。结论:补肾化瘀方能改善排卵障碍性不孕症患者的性激素水平、优势卵泡直径及例数,提高妊娠成功率。

补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症大鼠PKC信号通路的影响

目的:研究补肾温阳化瘀方治疗子宫内膜异位症(EMs)的作用,探讨其调控蛋白激酶C(PKC)信号通路的机制。方法:将50只SPF级8~10周龄雌性SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组和西药组,每组10只。采用自体移植法复制EMs大鼠模型,造模成功后分别给予补肾温阳化瘀方低、高剂量及孕三烯酮灌胃,假手术和模型组灌胃蒸馏水,连续21 d。HE染色观察在位内膜及异位灶的病理形态改变;Western blot测定在位内膜及异位灶磷酸化蛋白激酶C的α亚型(p-PKCα)、蛋白激酶C的α亚型(PKCα)蛋白的表达水平。结果:模型组在位内膜和异位灶p-PKCα蛋白水平升高;给予补肾温阳化瘀方治疗后,p-PKCα的蛋白表达水平降低(P<0.05),PKCα的蛋白表达水平无明显变化。结论:补肾温阳化瘀方通过抑制PKC信号通路来治疗EMs。

补肾化瘀解毒方对小鼠肝癌H_(22)的抑瘤增效作用

目的 :探讨补肾化瘀解毒方水煎液对肿瘤的抑制和化疗的协同增效作用。方法 :选择小鼠移植性肝癌H2 2 为模型 ,分别观察补肾化瘀解毒方水煎液单用以及与顺铂 (DDP)联合应用时的抑瘤率。结果 :补肾化瘀解毒方水煎液对小鼠移植性肝癌H2 2 有显著的抑制作用 (P <0 0 5 ) ,并能增强DDP对小鼠肝癌H2 2 的抑瘤作用 ,但无统计学差异。结论 :补肾化瘀解毒方水煎液对小鼠移植性肝癌有抑制作用 ,对化疗药物DDP有一定的协同增效作用。

补肾化瘀解毒方药对肺癌耐药细胞的耐药逆转及机制研究

目的 :探讨补肾化瘀解毒方对肺癌耐药细胞的耐药逆转和逆转机制。方法 :选择人肺腺癌 A5 4 9、A5 4 9/DDP细胞株 ,采用细胞毒试验 (MTT)和流式细胞仪法 (FCM) ,分别观察补肾化瘀解毒方荷瘤动物血清对A5 4 9/DDP细胞的细胞毒和耐药逆转作用 ,以及对 A 5 4 9/DDP细胞肺耐药蛋白 L RP- 5 6的表达、耐药细胞内游离Ca2 +浓度等指标的影响。结果 :补肾化瘀解毒方含药血清对肺癌 A5 4 9/DDP耐药细胞有细胞毒作用和增强A5 4 9/DD对顺铂 (DDP)的敏感性 ,并能显著抑制肺耐药蛋白 L RP的表达 (P<0 .0 1) ,降低细胞内 Ca2 +浓度(P<0 .0 0 1)。结论 :补肾化瘀解毒方药物血清对化疗药物具有增敏和化疗耐药逆转作用 ,其机制与抑制肺癌耐药细胞耐药基因表达 ,阻止肺癌耐药细胞内 ca2

补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌A549/DDP耐药细胞内药物浓度的影响

探讨补肾化瘀解毒方对肺癌耐药细胞内DDP浓度的作用 ,选择人肺腺癌耐药细胞株A5 4 9/DDP为模型 ,采用荷瘤动物血清药理及流式细胞法 ,结果补肾化瘀解毒方荷瘤动物含药血清能显著提高肺癌A5 4 9/DDP耐药细胞内DDP浓度 (P <0 .0 5 ) ,与正常动物含药血清无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,表明补肾化瘀解毒方含药血清能提高肺癌耐药细胞内化疗药物浓度 ,对探讨补肾化瘀解毒方逆转肺癌耐药性具有重要作用。

化瘀补肾方对卵巢切除小鼠骨折愈合的作用

目的观察化瘀补肾方对卵巢切除小鼠骨折愈合的作用。方法3月龄雌性C57BL/6小鼠48只分为假手术组、模型组和化瘀补肾方组各16只。模型组和化瘀补肾方组小鼠采用双侧卵巢切除术(OVX)建立骨质疏松症模型。术后12周,各组小鼠建立左侧胫骨中段骨折模型。术后给予化瘀补肾方组小鼠化瘀补肾方灌胃,给予假手术组与模型组小鼠等体积生理盐水灌胃,至骨折术后4周取材。检测各组小鼠血清雌二醇水平,采用Micro-CT检测小鼠第4腰椎及左侧胫骨的骨密度,检测左侧胫骨最大应力,对左侧胫骨石蜡切片进行阿尔辛蓝/橙黄G染色,观察骨组织形态学变化。结果OVX后4周开始,模型组小鼠体重明显升高,并持续高于假手术组(P<0.01)。骨折术后4周,模型组小鼠血清雌二醇和第四腰椎骨密度(BMD)明显低于假手术组(P<0.01),化瘀补肾方组小鼠血清雌二醇水平和第四腰椎BMD高于模型组(P<0.01)。Micro-CT三维重建显示,模型组左侧胫骨仍有明显的骨折线,骨痂生长不明显,化瘀补肾方组骨折线模糊,骨痂形成明显。与假手术组相比,模型组小鼠的BV/TV(P<0.01)、Tb.Th(P<0.05)和Tb.N(P<0.01)均明显降低,Tb.Sp明显升高,化瘀补肾方组小鼠的BV/TV(P<0.05)、Tb.Th(P<0.05)相较于模型组则显著升高,但Tb.N、Tb.Sp差异无统计学意义。与假手术组比较,模型组小鼠胫骨的最大应力在骨折术后28 d时显著低于假手术组(P<0.01),化瘀补肾方组小鼠胫骨的最大应力显著高于模型组(P<0.01)。阿尔辛蓝/橙黄G染色显示,假手术组和化瘀补肾方组骨痂组织处于塑形期,可见明显骨小梁结构,而模型组骨痂组织内见大量脂肪组织,骨小梁稀疏。结论化瘀补肾方能有效促进去卵巢小鼠的骨折愈合,改善愈合骨组织的生物力学性能。

补肾化瘀方合逍遥散加减治疗青春期多囊卵巢综合征临床研究

目的:观察补肾化瘀方合逍遥散加减治疗青春期多囊卵巢综合征(PCOS)的疗效。方法:选取符合纳入标准的青春期多囊卵巢综合征患者35例,给予补肾化瘀方合逍遥散加减治疗3个月经周期,观察患者治疗前后的月经情况、血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)/卵泡刺激素(FSH)及超声下双侧卵巢体积和卵泡数目的变化情况。结果:治疗后患者月经情况明显改善,治愈11例(31.43%),好转16例(45.71%),无效8例(22.86%),总有效率77.14%;T、LH/FSH、卵泡数目和卵巢体积均较治疗前降低(P<0.05)。结论 :补肾化瘀方合逍遥散加减可改善青春期PCOS患者的月经情况,使LH/FSH及T水平下降,减少卵泡数目,缩小卵巢体积。

活血化瘀补肾法联合针刺对血管性痴呆患者认知功能及血清IL-18、IFN-γ水平影响

目的研究活血化瘀补肾法联合针刺对血管性痴呆(VD)患者认知功能及血清白细胞介素-18(IL-18)、干扰素-γ(IFN-γ)水平影响。方法选择2015年3月至2017年1月间收治的112例VD患者,将其随机分为对照组和治疗组,每组56例。两组均进行西药治疗和常规护理。对照组患者加用针刺治疗,治疗组患者采用针刺联合活血化瘀补肾方治疗,4周为1个疗程,连续治疗2个疗程后,比较两组患者认知功能(MMSE评分),行为能力(BBS评分),血清IL-18、IFN-γ含量的变化,中医证候评分和不良反应,并评价疗效。结果治疗后,两组患者MMSE评分升高,BBS评分降低,其中治疗组MMSE评分高于对照组,BBS评分低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。两组患者血清IL-18、IFN-γ含量均减少,其中治疗组含量都低于对照组,差异有统计学意义(P<0. 05)。两组患者中医证候评分均降低,其中治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。治疗组有效率为87. 5%,高于对照组的71. 43%,差异有统计学意义(P <0. 05)。比较两组不良反应发生率,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论采用活血化瘀补肾法联合针刺治疗VD患者,疗效显著,能够明显提高患者认知功能和行为能力,改善临床症状,可能是通过抑制IL-18、IFN-γ的表达,减少炎症反应发挥作用。

健脾补肾化瘀方对小鼠Lewis肺癌的抑瘤增效作用的研究

目的:探讨健脾补肾化瘀方对肺癌的抑制和化疗的协同增效作用。方法:选择小鼠移植性Lewis肺癌为模型,分别观察健脾补肾化瘀方以及与顺铂(DDP)联合应用时的抑瘤率。结果:健脾补肾化瘀方对小鼠移植性Lewis肺癌有显著的抑制作用(P<0.01),并能显著增强DDP对小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用(P<0.05)。结论:表明健脾补肾化瘀方对动物移植性肺癌有抑制和对化疗药物的协同增效作用。

益气化瘀补肾方联合西药治疗肾虚血瘀型腰椎退行性骨关节炎伴骨质疏松临床观察

目的 探讨益气化瘀补肾方联合西药对腰椎退行性骨关节炎伴骨质疏松患者血清炎性因子、骨代谢标志物、骨密度、定量CT(QCT)的影响及临床疗效。方法 选取2018年10月—2021年10月温岭市中医院门诊及住院的120例肾虚血瘀型腰椎退行性骨关节炎伴骨质疏松患者,随机分为两组,对照组予塞来昔布胶囊、硫酸氨基葡萄糖胶囊、阿法骨化三醇胶囊、碳酸钙D3片、阿仑膦酸钠片治疗,研究组在对照组药物基础上加用益气化瘀补肾方治疗。1个月为1个疗程,共3个疗程。分别在治疗前、后观察患者中医证候评分、视觉模拟(VAS)评分、日本骨科协会评估治疗分数(JOA)评分、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、骨代谢标志物、骨密度、QCT,同时评定患者临床疗效。结果 治疗后,研究组临床疗效优于对照组(P<0.05);研究组TNF-α、IL-6指标低于对照组(P<0.05);研究组β-胶原特殊序列(β-CTX)、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(PINP)、N-端骨钙素(N-MID)指标低于治疗前(P<0.05),低于对照组(P<0.05);研究组BMD、QCT测量值高于对照组(P<0.05)。结论 益气化瘀补肾方联合西药治疗腰椎退行性骨关节炎伴骨质疏松患者安全有效,具有改善炎性反应、抑制骨吸收、改善骨密度等作用。

健脾补肾化瘀方对小鼠Lewis肺癌的抑瘤增效作用的研究

目的:探讨健脾补肾化瘀方对肺癌的抑制和化疗的协同增效作用。方法:选择小鼠移植性Lewis肺癌为模型,分别观察健脾补肾化瘀方以及与顺铂(DDP)联合应用时的抑瘤率。结果:健脾补肾化瘀方对小鼠移植性Lewis肺癌有显著的抑制作用(P<0.01),并能显著增强DDP对小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用(P<0.05)。结论:表明健脾补肾化瘀方对动物移植性肺癌有抑制和对化疗药物的协同增效作用。

补肾化瘀方对多囊卵巢综合征模型大鼠细胞因子NF-κB(P65)的影响

目的:通过动物实验研究观察核转录因子-κB(NF-κB)(P65)对多囊卵巢综合征(PCOS)形成的作用及补肾化瘀方干预后NF-κB(P65)蛋白表达变化。方法:选取6周龄SPF级雌性大鼠120只,随机分为空白组,模型组,二甲双胍组,中药低、中、高剂量组,造模并进行药物干预,7周后取肝脏、卵巢、脂肪组织。取材后运用Western blot、RT-PCR、免疫组化,来检测NF-κB(P65)对PCOS影响情况。结果:与空白组相比,模型组肝脏、卵巢、脂肪组织NF-κB(P65)蛋白及m RNA的表达均高于空白组(P<0.05);与模型组相比,二甲双胍组、中药各剂量组肝脏、卵巢、脂肪组织NF-κB(P65)蛋白及m RNA的表达量均低于模型组(P<0.05);中药中剂量组为最优剂量组,其NF-κB(P65)蛋白及m RNA的表达量均低于二甲双胍组(P<0.05)。结论:补肾化瘀方可能通过抑制NF-κB(P65)的活性起到抑制PCOS的作用。

补肾化瘀解毒方对中晚期非小细胞肺癌化疗患者uPA及PAI-1的影响

目的:观察补肾化瘀解毒方对中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗患者血浆尿激酶型纤溶酶原激活因子(u PA)及其抑制因子-1(PAI-1)的影响及临床疗效。方法:98例符合纳入标准的中晚期NSCLC患者,按随机数字表法分为观察组和对照组各49例,两组患者均给予常规TP方案化疗,对照组加用补肾化瘀解毒方内服,3周为1个疗程,2个疗程后观察血浆u PA及PAI-1的变化情况及临床疗效。结果:观察组治疗后总有效率为63.26%,对照组治疗后总有效率为40.81%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后血浆u PA及PAI-1均下降,观察组下降更明显,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾化瘀解毒方可以通过降低中晚期NSCLC化疗患者血浆u PA及PAI-1,控制肿瘤的生长及转移,值得临床推广应用。

基于miR-221介导的细胞自噬探讨补肾温阳化瘀方治疗肾阳虚血瘀型子宫内膜异位症的作用机制

目的:探讨补肾温阳化瘀方治疗大鼠肾阳虚血瘀型子宫内膜异位症(EMs)的疗效及可能的作用机理。方法:将100只实验大鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组和西药组,每组20只,肾阳虚血瘀组EMs造模成功后分别给予补肾温阳化瘀方高、低剂量及孕三烯酮灌胃,假手术组和模型组纯净水灌胃,连续3周。Western blot检测Beclin-1、P62蛋白表达;RT-PCR检测miR-221及Beclin-1、P62 mRNA水平。结果:与假手术组比较,模型组在位内膜的Beclin-1蛋白及mRNA水平显著升高(P<0.01,P<0.05),P62蛋白及mRNA水平显著下降(P<0.01,P<0.05),miR-221水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,中药高、低剂量组在位内膜及异位灶的Beclin-1蛋白及mRNA水平显著下降(P<0.05),P62蛋白及mRNA水平显著升高(P<0.01,P<0.05),miR-221水平显著下降(P<0.01,P<0.05)。miR-221与Beclin-1 mRNA呈现正相关,与P62 mRNA呈现负相关,相关系数(r)分别为0.515、-0.796(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾温阳化瘀方能够通过调节自噬基因Beclin-1、P62活性从而抑制细胞自噬水平,其机制可能与在转录水平下调miR-221有关。

补肾泄浊化瘀通络方调控膜性肾病足细胞转分化保护肾功能机制研究

目的:研究补肾泄浊化瘀通络方对阳离子化牛血清白蛋白(Cationized Bovine Serum Albumin,C-BSA)诱导的膜性肾病(Membranous Nephropathy,MN)大鼠肾保护作用及对MN足细胞转分化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的调节作用。方法:SD大鼠采用C-BSA尾静脉注射法制备MN大鼠模型,造模成功后随机分为模型对照组、盐酸贝那普利10 mg/kg组、补肾泄浊化瘀通络方10.2、21.3、42.6 g/kg组,另设正常对照组,各组灌胃给药相应药物或蒸馏水,1次/d,给药4 w后取材检测。采用光镜(MASSON染色、PAS染色)、电镜、IgG免疫荧光进行肾组织病理观察;记录大鼠24 h尿蛋白定量(24-UTP)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)含量;应用免疫组化及Real-time PCR法检测肾组织突触足蛋白(Synaptopodin)、转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白及mRNA的表达情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠出现较为明显的肾组织病理损伤,肾小球基底膜不均匀增厚,上皮下免疫复合物沉积伴特有的“钉突”样改变,IgG弥漫性、条带状沉积于基底膜区;24-UTP、TG、TC含量明显升高(P<0.05),血清TP、ALB含量明显降低(P<0.05),肾组织足细胞标志物Synaptopodin蛋白及mRNA表达下调,EMT相关标志物TGF-β1蛋白及mRNA表达上调(P<0.05);与模型对照组比较,补肾泄浊化瘀通络方10.2、21.3、42.6 g/kg组明显减轻MN模型大鼠肾组织损伤程度,明显降低24-UTP、TG、TC含量(P<0.05),增加血清TP、ALB含量(P<0.05),上调肾组织Synaptopodin蛋白及mRNA表达,下调TGF-β1蛋白及mRNA表达。结论:补肾泄浊化瘀通络方对C-BSA致MN大鼠具有肾保护作用,可能与其能够上调肾组织中Synaptopodin表达,下调TGF-β1表达,抑制足细胞EMT、修复足细胞损伤有关。

化瘀补肾方对去卵巢小鼠骨折愈合及氧化应激的影响

目的:观察化瘀补肾方对去卵巢小鼠骨折愈合及氧化应激的影响。方法:3月龄雌性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、化瘀补肾方组,每组10只。模型组和化瘀补肾方组小鼠行双侧卵巢切除术(OVX),假手术组仅切除卵巢周围部分脂肪组织。术后3个月,各组小鼠均建立左侧胫骨骨折复合髓内固定模型。造模后,化瘀补肾方组小鼠灌胃给予7.33 g/kg化瘀补肾方药液,另两组小鼠灌胃给予等体积0.9%NaCl溶液,连续14 d。末次给药后,取血,分离胫骨组织。X线及Micro-CT扫描观察骨折愈合情况;阿尔新蓝/橙黄G染色后镜下观察骨痂组织形态学变化。试剂盒测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;免疫组化检测骨痂组织Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达;免疫荧光检测骨痂组织Runt相关转录因子2(Runx2)、SOD表达;试剂盒检测骨痂组织MDA含量。TUNEL法检测骨痂组织细胞凋亡。结果:(1)胫骨X线及Micro-CT检测显示,模型组小鼠骨痂稀疏,骨折线清晰;化瘀补肾方组小鼠骨痂较致密,骨折线略模糊。(2)阿尔新蓝/橙黄G染色显示,模型组小鼠骨痂组织中软骨基质较多,骨小梁稀疏;化瘀补肾方组骨痂组织中软骨基质较少,骨小梁致密。(3)模型组骨痂组织Runx2、CollagenⅠ的表达较假手术组显著降低(P<0.01),化瘀补肾方组骨痂组织Runx2、CollagenⅠ的表达较模型组明显升高(P<0.05)。(4)化瘀补肾方组骨痂组织细胞凋亡较模型组明显减少(P<0.01)。(5)与假手术组相比,模型组小鼠血清及骨痂组织SOD水平显著降低(P<0.01),MDA含量显著升高(P<0.01);与模型组相比,化瘀补肾方组小鼠血清及骨痂组织SOD水平明显升高(P<0.05),MDA含量明显下降(P<0.01)。结论:化瘀补肾方能够促进去卵巢小鼠的骨折愈合,其作用机制可能与提高血清及局部骨痂组织的抗氧化酶水平、减轻氧化应激状态、抑制细胞凋亡有关。