补肾健脾活血方调节尾部悬吊大鼠肌蛋白合成与分解的机制研究

目的探究补肾健脾活血方对废用性肌萎缩的影响及过程中肌蛋白合成与分解机制。方法选取40只2月龄雌性大鼠,分为5组:空白组(A)、造模组(B)、低药量组(C)、中药量组(D)、高药量组(E),每组8只。除A组自由活动外,其余4组按照尾部悬吊法进行造模。C、D、E组给予不同剂量补肾健脾活血汤干预,A、B组给予等量蒸馏水。给药28 d后处死大鼠,称重比目鱼肌,测量湿重/体质量比。采用HE染色法对比目鱼肌肌肉组织形态与细胞核聚集状态进行病理形态学观察。ELISA检测补肾健脾活血方对血清中肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)的干预情况。Western blot检测补肾健脾活血方对比目鱼肌肌肉组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激(AKT)、SMAD蛋白3(Smad3)、叉头蛋白转录因子(FOXO1)、肌萎缩F-box蛋白(MAFbx)、肌环指蛋白-1(MuRF1)蛋白表达的干预情况。结果形态学观察显示,同A组相比,B组大鼠比目鱼肌湿重/体质量比值显著降低(P<0.01),肌纤维横截面明显减少,肌纤维密度明显增加,肌纤维间筋膜横截面明显增加,肌束间筋膜横截面明显减少,细胞核高度聚集;同B组比较,C、D、E组肌肉湿重/体质量比值有所上升(P<0.05),肌纤维横截面明显增加,肌纤维密度明显降低,肌束间筋膜横截面显著增加,核聚集程度降低;同D组比较,C组和E组肌肉湿重/体质量比值无明显差异(P>0.05),但伴随药物浓度的增加,C、D、E组肌肉湿重/体质量比值呈现逐渐增加趋势,且肌纤维横截面逐渐增大,肌纤维密度逐渐减小,肌束间筋膜横截面增加逐渐显著,核聚集减少逐渐显著。ELISA检测发现,同A组相比,B组大鼠血清中的MSTN水平显著升高(P<0.01);同B组相比,C组MSTN水平下降(P<0.05),D、E组MSTN水平明显下降(P<0.01);同D组比较,C、E组MSTN水平没有显著性差异(P>0.05)。Western blot检测结果显示,同A组相比,B组大鼠体内Smad3、Akt蛋白表达量减少(P<0.05),FOXO1、MuRF1、MAFbx表达增加(P<0.05);同B组比较,C、D、E组AKT表达均有所增加(P<0.05),FOXO1、MuRF1、MAFbx表达均减少(P<0.05),但C组Smad3表达无明显差异(P>0.05),D组和E组Smad3表达明显增加(P<0.01);同D组比较,C组Smad3、AKT、MuRF1表达减少(P<0.01),FOXO1与MAFbx表达参数差异无统计学意义(P>0.05),E组Smad3、MuRF1表达明显增加(P<0.01),AKT、FOXO1、MAFbx表达参数差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾健脾活血方可以调控肌蛋白合成与分解,对废用性肌萎缩起到防治作用,其机制可能与调节TGF-β/myostatin信号通路以及泛素蛋白酶体途径相关。

补肾健脾活络方联合针刺治疗肾炎蛋白尿临床研究

目的 观察总结补肾健脾活络方联合针刺治疗对慢性肾炎的临床疗效。方法 将60例患者随机分为治疗组、对照组,分别为30例。治疗组方案为西医基础治疗+补肾健脾活络方联合针刺;对照组方案为西医基础治疗+针刺治疗。结果 治疗组总有效率分别为86.7%,高于对照组、60.0%(P<0.05)。两组组内比较尿转铁蛋白测定(尿)、视黄醇结合蛋白(尿)、免疫球蛋白测定(尿)、α-1微球蛋白(尿)、β-2微球蛋白(尿)、胱抑素-C(尿)、尿24 h蛋白定量、尿微量白蛋白、尿红细胞数有统计学差异(P<0.05),两组间比较经统计学处理有差异。肾功能方面:两组组内血肌酐、尿素氮水平比较有统计学意义(P<0.05),两组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。血白蛋白方面:治疗组血清白蛋白较疗前升高(P<0.05);两组间有统计学意义(P<0.05)。结论 提示补肾健脾活络方联合针刺治疗可有效降低尿蛋白、尿红细胞,改善患者肾功能,同时有升高血清白蛋白的作用。

基于Wnt通路研究补肾活血复方对心力衰竭大鼠心肌肥厚及纤维化的影响

目的探讨补肾活血复方能否通过抑制Wnt通路改善心力衰竭大鼠心肌肥厚及纤维化。方法将45只SD大鼠随机分为4组,即假手术组、模型组、补肾活血复方组及赖诺普利组,按照实验分组采用结扎左冠状动脉前降支配合力竭式游泳造成慢性心力衰竭模型,在结扎冠状动脉前后进行超声心电图检测,判断手术结扎成功后进行力竭式游泳,并行超声心动图检查,当左室射血分数(LVEF)<45%为造模成功。模型建立完成后采用补肾活血复方或赖诺普利或0.9%氯化钠溶液持续灌胃4周。治疗结束后,称取体质量(BM)、全心质量(HM)和左心室质量(LVM),计算全心质量指数(HWI)和左心室质量指数(LVMI),判断心肌肥厚程度;ELISA检测大鼠中脑钠肽(BNP)、N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白(cTnI)、Wnt家族成员3a(Wnt3a)含量;马松染色检测心肌纤维化情况,并测定心肌间质胶原容积分数(CVF)、心肌细胞横截面积(CSA)、血管周围胶原面积(PVCA)变化;Western blot检测心肌组织中Ⅰ型胶原(Col I)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、蓬乱蛋白1(Dvl1)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK3β)、β-连环蛋白(β-catenin)表达;Real-time PCR检测心肌组织中基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)mRNA表达。结果与结扎前比,结扎后大鼠心电图显示T波倒置或低平,ST段较术前明显抬高(绝对值≥0.1 mV)。与假手术组相比,模型组、赖诺普利组及补肾活血复方组的LVMI,血清中BNP、NT-proBNP、cTnI、Wnt3a、CSA、CVF及PVCA,心肌组织中Col I、ColⅢ、α-SMA、Dvl1、p-GSK3β、β-catenin蛋白表达及MMP2、MMP9 mRNA表达均上调,模型组与赖诺普利组HWI升高,差异有统计学意义(P<0.05),补肾活血复方组HWI升高,差异无统计学意义。与模型组相比,赖诺普利组及补肾活血复方组的HWI、LVMI,血清中BNP、NT-proBNP、cTnI、Wnt3a、CSA、CVF及PVCA,心肌组织中Col I、ColⅢ、α-SMA、Dvl1、p-GSK3β、β-catenin蛋白表达及MMP2、MMP9 mRNA表达均降低,差异有统计学意义(P<0.01),赖诺普利组与补肾活血复方组比差异无统计学意义。马松染色检测结果显示,假手术组心肌细胞呈红色,结构完整,心肌纤维排列完整,心肌间质可见少量胶原蓝染;模型组心肌细胞数量变少,心肌间质排列松散且无规则,出现大量胶原纤维的增生,呈波状;与模型组相比,赖诺普利及补肾活血复方组心肌细胞排列相对整齐,心肌间质内胶原纤维增生减少。结论补肾活血复方通过抑制Wnt通路改善心力衰竭大鼠心肌肥厚及纤维化。

补肾活血方对肾虚血瘀型不明原因月经过少患者血清中VEGF、TGF-β1的影响

目的补肾活血方治疗肾虚血瘀型不明原因月经过少患者临床疗效并探讨其对患者血清中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的影响。方法对收集2019年6月—2021年6月南京市中西医结合医院门诊诊治肾虚血瘀型不明原因月经过少患者60例,随机分为观察组和对照组。对照组给予戊酸雌二醇联合黄体酮胶囊序贯治疗,观察组在此基础上给予补肾活血汤口服,疗程为3个月经周期。同时收集月经正常的30例妇女作为正常组,观察两组治疗前后分泌晚期血清中VEGF、TGF-β1及子宫内膜厚度、月经失血图积分、中医证候积分的变化,并与正常组比较。结果(1)观察组脱落2例,剔除1例,对照组脱落3例,剔除1例,最终观察组共27例,对照组26例。(2)观察组、对照组分泌晚期血清中VEGF、TGF-β1均低于正常组(P<0.05);治疗后两组VEGF、TGF-β1较前均明显升高(P<0.05);观察组上升趋势明显,优于对照组(P<0.05),且与正常组无明显差异(P>0.05)。子宫内膜厚度比较,治疗前观察组与对照组内膜厚度均明显低于正常组(P<0.05);治疗后,两组子宫内膜厚度较前均明显增厚(P<0.05),但观察组优于对照组(P<0.05)。对于中医证候积分的改善及月经失血图评分的评估,观察组优于对照组(P<0.05)。结论不明原因月经过少的发病机制可能与分泌晚期血清中的VEGF、TGF-β1水平下降有关,补肾活血方可通过提高分泌晚期血清中VEGF及TGF-β1水平,使得子宫内膜增厚、增加月经量,明显改善患者的中医证候,临床疗效显著,优于单用雌孕激素序贯治疗。

基于“心脑肾轴”理论探究补肾活血方对慢性心衰大鼠心肌线粒体能量代谢及PGC-1α、NRF-1、mtTFA mRNA表达影响

目的旨在基于“心脑肾轴”理论通过该实验探讨补肾活血方对心肌梗死后慢性心衰(chronic heart failure,CHF)大鼠心肌线粒体能量代谢及PGC-1α、NRF-1、mtTFA mRNA和蛋白表达的影响。方法从80只健康雄性大鼠中,随机选取20只大鼠,作为空白对照组,其余大鼠经结扎法配以节食、力竭式游泳以建立慢性心衰大鼠模型,将造模成功的60只大鼠随机分为中药组、西药组以及模型对照组。中药组(9.2 g·kg^(-1)·d^(-1))、西药组(1.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)),灌胃予以相应药物,空白对照组、模型对照组予以等量的去离子水,对每组大鼠行灌胃处理,每日1次。予以灌胃处理28 d后,通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠外周血中ATP、ADP、NT-proBNP浓度;采用实时荧光定量PCR和免疫蛋白印迹法(Western blot)检测大鼠心肌组织中PGC-1α、NRF-1、mtTFA mRNA和蛋白表达量。结果与空白对照组比较,心衰模型对照组、中药组、西药组大鼠的ATP浓度明显下降,ADP、NTproBNP浓度显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,中药组和西药组大鼠ATP表达升高,ADP、NT-proBNP表达下降(P<0.05)。与空白对照组比较,心衰模型对照组、中药组、西药组大鼠的PGC-1α、NRF-1、mtTFA mRNA和蛋白表达水平降低,组内之间的差异均有统计学意义(P<0.05);与模型对照组比较,中药组和西药组大鼠PGC-1α、NRF-1、mtTFA mRNA和蛋白表达水平升高,组内之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。中药组与西药组的ATP、ADP、NT-proBNP浓度以及PGC-1α、NRF-1、mtTFA mRNA和蛋白表达水平无明显差异,组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾活血方可使得心梗后心衰大鼠心肌细胞PGC-1α、NRF-1、mtTFA mRNA的表达上调,促进PGC-1α、NRF-1、mtTFA蛋白含量增加,从而增加线粒体的生成和ATP产能,改进心肌细胞的能量代谢,以此来改善和纠正心衰。

补肾活血化浊方对肝豆状核变性肝纤维化肝肾亏虚、痰瘀互结证患者血清IL-4、IL-13影响及联合APRI、FIB-4对其诊断价值

目的观察补肾活血化浊方对肝豆状核变性[hepatolenticular degeneration,HLD,又称Wilson病(Wilson disease,WD)]肝纤维化肝肾亏虚、痰瘀互结证患者血清白细胞介素-4(interleukin 4,IL-4)、白细胞介素-13(interleukin 13,IL-13)的影响,及IL-4、IL-13联合无创性诊断模型APRI评分、FIB-4指数对该类患者的联合诊断价值。方法以106例WD肝纤维化肝肾亏虚、痰瘀互结证患者(WD组)和53例健康体检者(健康组)作为研究对象,按照随机数字表法将WD组分为观察组和对照组。其中,对照组患者采用常规西药驱铜保肝治疗,观察组患者在对照组的基础上加用自拟方补肾活血化浊方,连续治疗4个疗程。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析IL-4、IL-13联合无创性诊断模型APRI评分、FIB-4指数诊断WD肝纤维化肝肾亏虚、痰瘀互结证的价值。结果WD组患者IL-13水平、APRI评分及FIB-4指数均显著高于健康组,IL-4水平明显低于健康组;WD组患者治疗4个疗程后,观察组患者IL-13水平、APRI评分及FIB-4指数显著下降(P<0.05),且观察组降低幅度较对照组更为明显(P<0.05),IL-4水平显著升高(P<0.05),且观察组较对照组升高幅度更为显著(P<0.05);IL-4、IL-13水平及APRI评分、FIB-4指数诊断WD肝纤维化肝肾亏虚、痰瘀互结证的最佳临界值分别为34.65 pg/mL、275.25 pg/mL、0.78、1.85,4项指标联合诊断WD肝纤维化肝肾亏虚、痰瘀互结证的ROC曲线下面积(AUC)为0.953,其灵敏度(87.50%)和特异度(92.80%)较高。结论补肾活血化浊方可有效缓解WD肝肾亏虚、痰瘀互结证患者肝纤维化进程,其机制可能与抑制IL-4、IL-13相关的炎症反应有关;FIB-4、APRI联合检测IL-4、IL-13在WD肝纤维化肝肾亏虚、痰瘀互结证的诊断中具有一定的价值。

补肾活血协定方治疗膝关节骨性关节炎肾虚血瘀证的疗效及机制

目的观察补肾活血协定方治疗膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)(肾虚血瘀证)的疗效。方法选取2018年2月—2020年2月医院收治的KOA患者186例,按照随机数字表法将患者分为对照组(n=93例)和观察组(n=93例)。对照组给予依托考昔片口服,观察组在对照组基础上加用补肾活血协定方口服,连续治疗2个月。分别以疼痛视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)、美国特种外科医院量表(hospital for special surgery scores,HSS)评价膝关节疼痛程度与膝关节功能,用膝关节高频超声检查软骨厚度、滑膜厚度,检测关节液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、Toll样受体-4(Toll-like receptor 4,TLR-4)、P物质(Substance P,SP)含量及血清中脂联素(adiponectin,APN)、低氧诱导因子1α(hypoxic induction factor-1α,HIF-1α)水平,对比两组治疗效果。结果:观察组的有效率93.55%(87/93),与对照组82.79%(77/93)的有效率比较,以观察组显著升高(χ2=5.155,P<0.05);两组患者的VAS评分在治疗治疗2周、治疗4周后均降低,HSS评分在治疗2周、治疗4周后均升高,以观察组VAS评分显著高于对照组,HSS评分显著高于对照组(P<0.05);治疗后,两组在增加关节软骨厚度、降低滑膜厚度等方面均具有一定效果,以观察组软骨厚度增加程度、滑膜厚度降低程度更明显(P<0.05);观察组患者经治疗后关节液中TNF-α、TLR-4、P物质水平均显著低于对照组(P<0.05);血清APN水平显著升高,HIF-1α水平显著降低(P<0.05)。结论补肾活血协定方利于减轻膝骨性关节炎患者的关节疼痛,提高膝关节功能,其机制可能与调节关节液、血清中相关因子水平以减轻滑膜炎症、调节软骨代谢有关,值得进行临床推广。

心理护理干预联合补肾活血方治疗再生障碍性贫血的应用及对心理、生理状态的影响

目的研究探讨心理护理干预联合补肾活血方治疗再生障碍性贫血的应用及对患者心理、生理状态的影响。方法收集2018年7月—2020年7月在医院接受治疗的88例再生障碍性贫血患者,随机分组抽签分为观察组和对照组各44例。对照组以补肾活血方治疗加常规护理,观察组增加心理护理干预。评估比较组间中医症候、心理情绪、生活质量和护理满意度。结果观察组中医证候包括气短乏力、神疲脉虚、低热盗汗、面色苍白等评分均低于对照组(P<0.05)。干预后患者的汉密尔顿焦虑量表-14(HAMA-14)、汉密尔顿抑郁量表-17(HAMD-17)均低对照组(P<0.05)。观察组生活质量评分高于对照组(P<0.05)。观察组护理满意度93.18%(41/44),高于对照组为77.27%(34/44),差异有统计学意义(P<0.05)。结论心理护理干预联合补肾活血方治疗再生障碍性贫血的应用效果良好,改善患者的中医证候、负性情绪和生活质量,提高护理满意度。

益气健脾补肾生血方联合小剂量铁剂治疗小儿缺铁性贫血患儿的临床疗效

目的探讨益气健脾补肾生血方联合小剂量铁剂治疗小儿缺铁性贫血患儿的临床疗效。方法选取2019年1月至2020年1月就诊于保定华医中医医院的120例小儿缺铁性贫血患儿作为研究对象,按随机数字表法分为对照组与观察组,各60例。对照组患儿采用右旋糖酐铁口服液治疗,观察组患儿在对照组治疗基础上采用益气健脾补肾生血方治疗,比较两组治疗效果。结果观察组治疗有效率93.33%,显著高于对照组83.33%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患儿治疗前血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组Hb、RBC、MCV、MCHC明显升高,且观察组患儿Hb、RBC、MCV、MCHC显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患儿治疗前转铁蛋白饱和度(TSAT)、血清铁(SI)比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组TSAT、SI明显升高,且观察组患儿TSAT、SI优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患儿不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气健脾补肾生血方联合小剂量铁剂治疗小儿缺铁性贫血临床疗效显著。

中西医治疗抗心磷脂抗体阳性复发性流产概况

抗心磷脂抗体可使子宫内膜呈分泌不足状态,干扰受精卵着床以致不孕或自然流产,是导致复发性流产原因之一。肾虚导致冲任不固,系胎无力;脾虚则气血不足,胎元失养。肾虚元气不足或脾虚中气不足则运血无力,瘀血内阻,胎失所养而胎元不固。西医口服小剂量阿司匹林、皮下注射小剂量低分子肝素、口服小剂量阿司匹林联合强的松、口服小剂量阿司匹林合并低分子肝素皮下注射治疗。中医辨证论治,脾肾两脏虚损为本,血瘀、热毒为标,补肾、健脾、活血、清热、解毒,补肾益气方可明显提高活产率,大补元煎明显降低流产率,参芪归芍汤可使抗心磷脂抗体阳性全部转阴,消抗地黄汤促进体液免疫,提高免疫球蛋白含量,降低血小板聚粘附性,抗凝血,改善微循环,恢复胎盘血运以充分供血供氧,补肾消抗汤补益脾肾,活血化瘀,清热解毒,标本兼顾。中西医治疗各有优势,亦存在一定局限性,中西医结合治疗既可降低西药所产生的不良反应,又具备中医辨证论治思想,还需从基础理论及药理学方面深入研究。