补肾固胎方联合黄体酮注射液治疗肾虚型早期先兆流产疗效及对妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子的影响

目的 观察补肾固胎方联合黄体酮注射液治疗肾虚型早期先兆流产疗效及对妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子的影响。方法 采用随机数字表法将符合入选标准的120例肾虚型早期先兆流产患者分为观察组和对照组。对照组予黄体酮注射液治疗,观察组同联合补肾固胎方治疗。连续治疗2周后,比较两组中医证候积分(妊娠期阴道流血、小腹坠胀或疼痛、腰酸痛、膝关节酸软)、妊娠激素水平[雌二醇(Estradiol, E_(2))、人绒毛膜促性腺激素(Human chorionic gonadotropin, β-HCG)、孕酮(Progesterone, P)]、Th1/Th2细胞因子[白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、γ干扰素(Interferon-γ,INF-γ)]改善情况,统计两组治疗总有效率、妊娠结局及不良反应发生率。结果 两组治疗后妊娠期阴道流血、小腹坠胀或疼痛、腰酸痛、膝关节酸软积分,IL-2、INF-γ水平均低于治疗前(P<0.05),且观察组治疗后以上中医证候积分和IL-2、INF-γ水平均低于对照组(P<0.05);两组治疗后IL-4水平均高于治疗前(P<0.05),且观察组治疗后IL-4水平高于对照组(P<0.05);观察组总有效率为(91.7%,55/60),高于对照组(75.0%,45/60)(P<0.05);观察组足月分娩率为(85.0%,51/60),高于对照组(56.7%,34/60)(P<0.05);观察组不良反应发生率为3.3%,低于对照组(25.0%)(P<0.05)。结论 补肾固胎方联合黄体酮注射液能够有效调节肾虚型早期先兆流产患者妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子水平,纠正免疫功能紊乱,降低患者流产率,提高足月妊娠率,改善妊娠结局。

基于大鼠肝星状细胞氧化应激探讨化浊解毒补肾方治疗绝经后女性肝纤维化机制

目的通过研究化浊解毒补肾方含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)氧化应激的影响,进一步探讨该方治疗绝经后女性肝纤维化的机制。方法制备化浊解毒补肾方含药血清和正常血清。将肝星状细胞随机分为空白组、模型组、空白血清组、氟维司群(ICI 182780,以下简记为ICI)组、中药组、中药+ICI组、雌二醇(estradiol,E2)组、E2+ICI组,随后按照分组处理细胞。采用流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;ELISA法检测细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平;免疫荧光染色法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达;Western Blot法检测胞浆细胞色素C(cytochrome C)、环氧化酶-Ⅰ(cyclooxygenase-Ⅰ,COX-Ⅰ)、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)表达。结果与空白组比较,模型组细胞中ROS、MDA水平和α-SMA、collagenⅠ蛋白表达以及α-SMA平均荧光强度均明显升高(P<0.0001,P<0.001),SOD水平、cytochrome C、COX-Ⅰ蛋白表达均明显降低(P<0.0001);与模型组比较,中药组和E2组ROS、MDA水平和α-SMA、collagenⅠ蛋白表达以及α-SMA平均荧光强度均有明显降低(P<0.0001,P<0.001,P<0.01,P<0.05),SOD水平、cytochrome C、COX-Ⅰ蛋白表达均有明显升高(P<0.0001);与中药组和E2组比较,在各自加入ICI处理后,对应的ROS、MDA水平和α-SMA、collagenⅠ蛋白表达以及α-SMA平均荧光强度均有明显升高(P<0.0001,P<0.001,P<0.05),SOD水平和cytochrome C、COX-Ⅰ蛋白表达均有明显降低(P<0.001,P<0.05,P<0.01)。结论化浊解毒补肾方含药血清可通过雌激素受体降低ROS、MDA水平和α-SMA、collagenⅠ蛋白表达以及α-SMA平均荧光强度,提高SOD水平和cytochrome C、COX-Ⅰ蛋白表达,从而提高抗氧化能力,减轻氧化应激反应,最终起到防治绝经后女性肝纤维化的作用。

通过调控VEGF信号通路探讨补肾通络方对子宫内膜损伤后HUVECs促增殖、血管生成和迁移作用

目的探析补肾通络方对子宫内膜损伤后人脐静脉内皮细胞模型(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)促增殖、血管生成和迁移作用,及对调控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)信号通路的影响。方法选择2020年1月—2021年12月,购自武汉大学典型培养物保藏中心的12份HUVECs,给予50 ng/mL VEGF处理后,分别实施20%、10%、5%补肾通络方含药血清和无补肾通络方含药血清干预处理。比较补肾通络方对子宫内膜损伤后,VEGF信号通路的影响及对HUVECs增殖、迁移、血管生成的影响。结果比较20%、10%、5%补肾通络方含药血清和无补肾通络方含药血清干预后24 h的HUVECs活性和24 h细胞生长检测所得OD值,差异无统计学意义(P>0.05);20%补肾通络方含药血清组48 h、72 h的HUVECs活性、细胞生长检测所得OD值及VEGF表达量、HUVECs细胞迁移数均高于10%、5%补肾通络方含药血清组和无补肾通络方血清组,差异有统计学意义(P<0.05)。20%补肾通络方含药血清干预组的血管网状结构完整度优于10%、5%补肾通络方含药血清和无补肾通络方血清,无补肾通络方血清干预组的血管网状结构完整度最差,补肾通络方可逆转VEGF抑制细胞活性的趋势,促进HUVECs的血管形成。结论将补肾通络方应用到子宫内膜损伤中,可逆转VEGF抑制细胞活性的趋势,增强HUVECs的细胞活性,促进细胞增殖、迁移,促进血管新生,促进内皮细胞网络结构的重建,利于促进内皮细胞损伤的修复,利于子宫内膜功能的恢复,且与补肾通络方含药血清浓度呈一定量效关系。

补肾健脾通络方治疗老年衰弱综合征临床疗效观察

目的观察补肾健脾通络方治疗老年衰弱综合征临床疗效及安全性。方法研究纳入2021年1月—2022年6月收治的老年衰弱综合征患者共计102例,以随机数字表法将患者分为对照组与观察组,每组51例,对照组患者采取临床常规治疗,观察组患者采取常规治疗结合补肾健脾通络方治疗。观察各组数据:治疗总有效率、治疗前后患者中医证候总积分变化及Fried表型衰弱量表(frailty phenotype,FP)评分变化及白介素-6(interleukin 6,IL-6)、超敏C反应蛋白(C-ReactiveProtein,hs-CRP)水平变化、握力变化及起立-行走计时测试(Timed Up and Go test,TUG)变化、5次坐立试验(five-times-sit-to-stand test,FTSST)变化、步速变化、体质指数(Body Mass Index,BMI)变化及四肢骨骼肌质量指数(appendicular skeletal muscle mass index,ASMI)变化、简易精神状态评分(Mini-mental State Examination,MMSE)变化、匹兹堡睡眠指数(Pittsburgh sleep quality index,PSQI)评分变化、日常生活能力(Activity of Daily Living,ADL)评分变化、微型营养评估(mini nutritionaal assessment,MNA)评分变化、患者治疗满意度、不良反应。结果观察组患者治疗总有效率比对照组高[96.08%(49/51)vs84.31%(43/51)],P<0.05;治疗前,各组患者中医证候总积分、FP评分、IL-6、hs-CRP水平、握力、TUG测试结果及FTSST测试结果、步速、BMI、ASMI、MMSE评分、PSQI评分、ADL评分、MNA评分比较,P>0.05,治疗后各组患者中医证候总积分、FP评分、IL-6、hs-CRP水平、握力、TUG测试结果及FTSST测试结果、步速、BMI、ASMI、MMSE评分、PSQI评分、ADL评分、MNA评分均改善,观察组患者治疗后中医证候总积分、FP评分、IL-6、hs-CRP水平、握力、TUG测试结果及FTSST测试结果、步速、BMI、ASMI、MMSE评分、PSQI评分、ADL评分、MNA评分均优于对照组患者,P<0.05;观察组患者治疗满意度高于对照组[98.04%(50/51)vs84.31%(43/51)],P<0.05;观察组与对照组不良反应率均较低,且可自行缓解,P>0.05。结论补肾健脾通络方治疗老年衰弱综合征临床疗效显著,能缓解衰弱综合征患者的临床症状,抑制患者机体炎性反应,增加肌肉质量,改善睡眠,提高生活质量,且无不良反应,较为安全可靠,值得应用。

补肾宣肺方对慢性支气管炎急性发作期患者IP-10、Rantes及炎症因子的影响

目的 观察补肾宣肺方联合西药治疗慢性支气管炎急性发作对患者干扰素-γ诱导蛋白10(IP-10)、T细胞表达分泌的活化调节因子(Rantes)及炎症因子的影响。方法 选取青岛市中医医院(市海慈医院)青岛大学附属青岛市海慈医院于2021年6月—2022年12月收治的慢性支气管炎急性发作患者140例,采用随机数字表法,将合格受试者按1∶1原则分为两组。对照组70例采用西药治疗,观察组70例采用补肾宣肺方联合西药治疗,两组均治疗2周。统计两组2周后的总有效率和不良反应率,记录两组中医证候积分、生活质量评分及IP-10、Rantes、炎症因子、血气指标、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)预计值的变化。结果 疗效方面:观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。中医证候方面:治疗后,两组咳嗽、咳痰、胸满气短及痰黄黏稠积分较治疗前下降(P<0.05),观察组上述中医证候积分低于对照组(P<0.05)。检验方面:治疗后,两组干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)较治疗前上升,IP-10、Rantes、高敏-C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)较治疗前下降(P<0.05),观察组IFN-γ、IL-10高于对照组,IP-10、Rantes、hs-CRP、IL-6低于对照组(P<0.05)。血气和肺功能方面:治疗后,两组动脉血氧分压(PaO_(2))、FEV1%预计值较治疗前上升(P<0.05),动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))较治疗前下降(P<0.05),观察组血气指标、FEV1%预计值优于对照组(P<0.05)。生活质量方面:治疗后,两组生理机能、社会功能、生理职能、躯体疼痛、精力、一般健康、情感职能及精神状况评分较治疗前上升(P<0.05),观察组生活质量评分高于对照组(P<0.05)。安全性方面:两组不良反应比较,无统计学意义(P>0.05)。结论 补肾宣肺方联合西药治疗慢性支气管炎急性发作可降低IP-10、Rantes及炎症因子的表达,改善血气指标和FEV1%预计值,提高生活质量和疗效。

基于氧化应激及肠道菌群探讨逍遥补肾方对实验性自身免疫性甲状腺炎模型大鼠作用机制的影响

目的通过观察逍遥补肾方对实验性自身免疫性甲状腺炎模型(experimental autoimmune thyroiditis,EAT)大鼠氧化应激及肠道菌群的影响,探讨逍遥补肾方的疗效机制。方法将65只大鼠随机分为正常组10只,造模组55只。造模组采用高碘水喂养联合甲状腺球蛋白皮下注射复刻EAT大鼠模型,造模成功的EAT大鼠随机分为模型组、硒酵母组及逍遥补肾组,每组17只。硒酵母组予25.2 mg/(kg·d)硒酵母片水溶液,逍遥补肾组予11.79 g/(kg·d)逍遥补肾方溶液,正常组、模型组灌胃给予等体积的蒸馏水。连续灌胃8周后,采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测各组大鼠血清游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine3,FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)水平,采用免疫荧光检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。收集各组大鼠的粪便进行16S rDNA高通量测序,分析肠道菌群多样性和物种丰度的变化,通过相关性分析筛选逍遥补肾方改善EAT大鼠的相关菌群。结果与正常组相比,模型组大鼠血清TSH、SOD、SOD/MDA、GPx明显下降,TPOAb、TGAb、MDA水平明显升高,ROS的免疫荧光强度明显增强(P<0.01)。给予治疗药物后,逍遥补肾组及硒酵母组的上述指标均较模型组有一定改善(P<0.01或P<0.05)。16S rDNA测序结果显示,逍遥补肾方能够调节厚壁菌门、拟杆菌门等相对丰度调节EAT大鼠的肠道菌群紊乱。脱硫弧菌属及粪球菌属是逍遥补肾组的优势菌群。结论逍遥补肾方能够调节EAT大鼠血清TSH及甲状腺双抗体水平,改善氧化应激状态,其作用机制可能与调节多种肠道菌群失调有关。

补肾助孕方对复发性流产患者子宫内膜容受性及妊娠结局影响的临床研究

目的观察补肾助孕方对复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)患者子宫内膜容受性及妊娠结局的影响。方法纳入2019年10月—2021年3月就诊于广安门医院妇科的符合复发性流产诊断的患者共100例,按照随机数字表法分成对照组50例和治疗组50例。观测指标包括治疗前后中医证候评分、月经情况评分、子宫内膜容受性相关指标和妊娠结局等。结果对照组有3例患者失访,治疗组有2例患者治疗期间未按规定试验方案服药剔除,最终95例患者完成本次研究,其中对照组47例,治疗组48例。治疗3个月经周期后,治疗组总有效率、月经情况改善、临床妊娠率均优于对照组,中医证候评分降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组的子宫内膜厚度、血流分布和Salle评分均得到明显优化,血流阻力指数(resistance index,RI)显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),在血流灌注指数(perfusion index,PI)方面差异无统计学意义(P>0.05)。随访后发现治疗组临床妊娠率显著升高,妊娠失败例数低于对照组,具差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论研究表明补肾助孕方可改善肾虚中医证候,提高RSA患者临床妊娠率。补肾助孕方具有明显促进子宫内膜生长、增加子宫内膜血流灌注、降低RI和PI的作用,验证了补肾助孕方孕前干预可提高子宫内膜容受性治疗RSA。

基于涎腺超声评估补肾润燥方治疗原发性干燥综合征的疗效

目的:通过运用涎腺超声技术评估补肾润燥方治疗肝肾阴虚型原发性干燥综合征累及涎腺的临床疗效,进而探索涎腺超声技术评估中医药治疗原发性干燥综合征疗效的作用。方法:将78例原发性干燥综合征患者随机分为治疗组和对照组,每组39例。对照组服用硫酸羟氯喹,治疗组在此基础上加用补肾润燥方。2组疗程均为12周。观察2组治疗前后ESSDAI评分、中医证候积分、超声半定量分级、剪切波弹性模量。结果:2组各脱落1例,最终每组纳入38例。治疗后,2组ESSDAI评分较治疗前下降(P<0.05);且治疗组下降程度优于对照组(P<0.05)。治疗组临床痊愈0例,显效10例,有效25例,无效3例,总有效率为92.10%;对照组临床痊愈0例,显效3例,有效25例,无效10例,总有效率为73.68%。2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组涎腺超声半定量分级均有所改善,治疗组改善率为73.68%,对照组改善率为47.37%(P<0.05);2组4个腺体的剪切波弹性模量较治疗前均下降(P<0.05),且治疗组下降程度优于对照组(P<0.05)。结论:补肾润燥方对肝肾阴虚型原发性干燥综合征累及涎腺的患者疗效确切,涎腺超声可以协助评估中医药治疗原发性干燥综合征疗效。

补肾活血方促进骨髓间充质干细胞的成骨及其防治大鼠骨质疏松症机制研究

目的 研究表明微核糖核酸(microRNA,MiRNA)和Kruppel样因子10(Kruppel-like factor10, KLF10)调控骨质疏松症的进程。研究旨在探讨miR-26b/KLF10信号调控骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs)分化的机制。方法 流失鉴定分离的大鼠BMSCs,不同剂量的补肾活血方处理BMSCs,检测其^([1-2])增殖能力,碱性磷酸酶活性和茜素红染色检测BMSCs的成骨分化潜能。qPCR检测不同剂量的补肾活血方处理BMSCs后,miR-26b和KLF10的表达水平。mirtarBase数据库检测KLF10 mRNA的3’非翻译区(untranslated regions, 3'UTR)上是否有miR-26b的结合位点,双荧光素酶报告实验检测miR-26b对KLF10启动子活性的影响。qPCR检测miR-26b/KLF10信号对BMSCs增殖和成骨分化标志物的表达的影响。Western blot检查Wnt/β-catenin信号是否被激活。结果 流式分析显示分离的原代细胞大部分是BMSCs。补肾活血方显著促进骨髓间充质干细胞的增殖,补肾活血方显著提高了BMSCs中碱性磷酸酶的水平和成骨分化的潜能。补肾活血方促进BMSCs中miR-26b和KLF10的表达。在KLF10 mRNA的3’UTR上有miR-26b的结合位点。在BMSCs中,miR-26b抑制KLF10的3’UTR荧光素酶活性。此外,miR-26b也抑制了KLF10的表达水平。CCK8(Cell Counting Kit-8)显示KLF10促进BMSCs增殖,qPCR显示miR-26b显著抑制成骨分化标志物的表达。而KLF10能够逆转miR-26b的抑制效应,提示miR-26b/KLF10信号介导了补肾活血方在BMSCs增殖和成骨分化中的效应,且补肾活血方通过激活Wnt/β-Catenin信号通路促进成骨。结论 补肾活血方促进BMSCs的成骨由miR-26b/KLF10/Wnt/β-Catenin信号轴调控。

补肾调经方对雄激素诱导无排卵大鼠氧化损伤、抗氧化能力及卵巢雌激素水平的影响

目的 :探讨补肾调经方对无排卵大鼠血浆丙二醛 (MDA )、血清总胆红素 (Tbil)、直接胆红素 (Dbil)、间接胆红素 (I bil)、总抗氧化能力 (T AOC)及卵巢雌激素水平的影响。方法 :采用雄激素诱导无排卵模型大鼠为研究对象 ,应用苯甲酸钠—咖啡因比色法、比色法、放免法测定大鼠血浆丙二醛 ,血清总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、总抗氧化能力和雌激素水平。结果 :无排卵大鼠血浆丙二醛含量显著高于正常大鼠 ,血清总胆红素、直接胆红素和总抗氧化能力明显低于正常组。补肾调经方能显著提高无排卵大鼠血清总胆红素、直接胆红素、间接胆红素及总抗氧化能力 ,降低丙二醛含量。结论 :氧化损伤可能影响无排卵的发生 ,补肾调经方具有提高无排卵大鼠血清总胆红素、直接、间接胆红素水平及总抗氧化能力 。

补肾活血方“导法”调控5/12-LOX/LXA4/FPR2改善子宫内膜容受性不良大鼠的助孕机制

目的观察补肾活血方“导法”调控肾虚血瘀子宫内膜容受性不良大鼠种植窗期LXA4相关信号轴的助孕机制。方法通过分子对接预测补肾活血方有效组分与脂氧素A4(LipoxinA4,LXA4)合成酶及受体的结合程度;通过羟基脲灌胃+肾上腺素皮下注射构建肾虚血瘀内膜容受性不良复合模型大鼠;随机分为模型组、空白组、补肾活血导法低、中、高组、阳性组6组;各组造模同时予以相应干预方法,连续10 d,并于动情期按照2∶1雌雄合笼,次日晨检发现阴栓脱落或阴道涂片发现阴栓记为1.0 dpc,于6.0 dpc麻醉处死剖出子宫组织;记录每组子宫内膜、胞饮突形态并评分,观察子宫内膜上胰岛素样生长因子结合蛋白1(insulin-like growth factor-binding protein-1,IGFBP-1)、血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)蛋白分布表达和同源盒基因A10(HomeoboxA10,HOXA10)mRNA表达,测定子宫组织匀浆中炎症介质LXA4、合成酶5/12/15-脂氧合酶(Lipoxygenase,LOX)、受体甲酰肽受体2(Formyl Peptide Receptor-2,FPR2)和IGFBP-1、VEGF的蛋白含量。结果与空白组相比,模型组子宫内膜被覆上皮菲薄、腺体较少,与模型组对比;补肾活血方导法低、中、高剂量组、阳性组可下调肾虚血瘀PER模型大鼠种植窗期5-LOX、12-LOX、LXA4及FPR2的表达(P<0.05),提高了子宫内膜容受性标记物IGFBP-1、VEGF蛋白和HOXA10 mRNA表达。结论补肾活血方导法通过调控大鼠种植窗期子宫5/12-LOX/LXA4/FPR2信号通路纠正炎性微环境的平衡,进而改善子宫内膜容受性,促进胚-膜交互提高种植及妊娠成功率。

补肾止颤方联合针刺治疗帕金森病睡眠障碍的疗效及对血谷氨酸、胱抑素C水平的影响

目的分析补肾止颤方联合针刺在治疗帕金森病(Parkinson’s disease,PD)睡眠障碍中的疗效及其对血谷氨酸(glutamate,Glu)、胱抑素C(cystatin C,CysC)水平的影响。方法随机选取医院2019年6月—2021年6月收治的124例肝肾阴虚型PD合并睡眠障碍患者,随机数字表法将其均分为观察组与对照组,对照组接受常规西医治疗,观察组在此基础上联合应用补肾止颤方与针刺治疗,观察两组治疗后睡眠质量[帕金森病睡眠量表(Parkinson’s disease sleep scale,PDSS)、匹兹堡睡眠质量指数量表(Pittsburgh sleep qulality,PQSI)]、生活质量[39项帕金森生存质量量表(the 39-item Parkinson’s disease questionnaire,PDQ-39)]、中医临床疗效、治疗前后血浆Glu、血清CysC水平,日平均多巴丝肼用量以及不良反应。结果治疗后,两组PDSS量表得分均较其同组治疗前上升,PQSI量表得分均较其同组治疗前下降,差异具有统计学意义(P<0.05),且观察组治疗后PDSS量表得分高于对照组,PQSI量表得分低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后,PDQ-39量表中运动能力、日常生活、躯体不适、社交、社会支持、耻辱感、情感、认知等维度得分及量表总得分均较其治疗前下降,差异具有统计学意义(P<0.05),且观察组治疗后PDQ-39量表各维度得分及总得分均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组睡眠障碍中医临床治疗有效率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血浆Glu水平均较同组治疗前上升,血清CysC水平均较同组治疗前下降,差异具有统计学意义(P<0.05),且观察组治疗后血浆Glu水平高于对照组,血清CysC水平低于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,对照组多巴丝肼日平均用量与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05),观察组多巴丝肼日平均用量较同组治疗前下降,差异具有统计学意义(P<0.05),且明显低于对照组治疗后药物平均用量(P<0.05)。观察组治疗中恶心欲吐发生率低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),两组流涎、便秘发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05),此外,观察组针刺治疗后,有5例患者出现针刺部位过敏现象,经热敷等简单处理后均好转。结论在常规西药治疗基础上联合补肾止颤方与针刺能有效改善PD合并睡眠障碍患者相关临床症状,提高其生活质量,且治疗安全性高,值得临床推广。

活血补肾方联合左氧氟沙星治疗湿热瘀结型慢性盆腔炎效果分析

目的分析活血补肾方联合左氧氟沙星治疗湿热瘀结型慢性盆腔炎效果。方法选取医院2017年4月—2019年5月收治的湿热瘀结型慢性盆腔炎患者108例,采用随机数字法分为两组。对照组给予左氧氟沙星治疗,观察组给予活血补肾方联合左氧氟沙星治疗,分析两组患者治疗后的临床效果。结果两组治疗前中医证候积分组间比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后主证(小腹胀痛、腰骶胀痛、带下量多)积分、次证(神疲乏力、口腻或纳呆、小便黄、大便干燥)积分低于对照组(P<0.05)。两组治疗前C反应蛋白(CRP)、血红素氧和酶-1(HO-1)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平组间比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后CRP、HO-1、GM-CSF水平低于对照组(P<0.05)。两组治疗前盆腔炎性包块直径组间比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后盆腔炎性包块直径(1.24±0.42)cm低于对照组(P<0.05)。观察组不良反应率(7.41%,4/54)与对照组(5.56%,3/54)比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论活血补肾方联合左氧氟沙星治疗湿热瘀结型慢性盆腔炎可调节CRP、HO-1、GM-CSF的表达水平,缩小盆腔炎性包块直径,改善症状积分,且不增加不良反应。

补肾活血方对不明原因复发性流产未孕患者血清PP14、IL-17及IL-23影响的研究

目的 通过临床试验,以人胎白蛋白(PP14)蛋白和白介素17(IL-17)、白介素23(IL-23)为观察指标,观察补肾活血方在孕前治疗复发性流产(RSA)的疗效,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定PP14蛋白和IL-17、IL-23用药干预前后的表达情况。结合中医治疗滑胎的理念“未病先防”“预培其损”,探究PP14蛋白和IL-17、IL-23的表达情况与不明原因型复发性流产(URSA)的关系。方法 选择30例未孕URSA肾虚血瘀型患者作为试验组,29例正常未孕女性作为对照组。两组均于月经相分泌晚期采血后入组,3个月后分泌晚期再次采血。此期间观察组口服补肾活血方。在相应时间用ELISA法检测正常未孕女性和补肾活血方干预后的URSA肾虚血瘀型未孕女性外周血中PP14蛋白和IL-17、IL-23水平。结果 补肾活血方可使URSA未孕女性外周血中PP14表达水平升高,IL-17及IL-23水平降低。且三者之间具有显著相关性。结论 未孕状态下,PP14、IL-17及IL-23与URSA相关,可能是由于三者的表达失衡导致了URSA发生。补肾活血方可能通过提高未孕女性血清PP14含量,同时降低IL-17及IL-23的表达,达到改善URSA的效果。

补肾活血复方调控Wnt通路抑制心力衰竭心肌损伤及细胞凋亡的机制研究

目的 研究补肾活血复方通过抑制Wnt信号通路(Wingless)抑制心力衰竭大鼠心肌损伤及细胞凋亡的分子机制。方法 将45只斯泼累格·多雷(Sprague-Dawley, SD)大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾活血复方组及赖诺普利组。采用结扎冠状动脉配合力竭式游泳构建心力衰竭模型。造模成功后按照实验分组利用补肾活血复方或赖诺普利给予大鼠持续灌胃4周。治疗结束后,采用彩色超声多普勒心动图评价大鼠心功能,称取体质量(body weight, BM)及左心室湿质量(left ventricular wet mass, LVM),计算左心室质量指数(left ventricular mass index, LVMI),苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色检测心肌病理组织学损伤,蛋白质印迹(Western blot)检测BCL2凋亡调节器(BCL2 apoptosis regulator, Bcl-2)、BCL2相关X,凋亡调节器(BCL2 associated X,apoptosis regulator, Bax)、活化半胱天冬酶3(cleaved-caspase-3)、Wnt家族成员3A(wnt family member 3A,Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测Bcl-2、Bax、半胱天冬酶3(Caspase-3)、Wnt3a、β-catenin mRNA表达。结果 与假手术组比,模型组的左心室舒张末内径(left ventricular end diastolic diameter, LVEDD)及左心室收缩末内径(left ventricular end systolic diameter, LVESD)、LVMI、Bax、Wnt3a、β-catenin蛋白及mRNA,cleaved-caspase-3蛋白,Caspase-3 mRNA表达均显著上调,左室短轴缩短率(left ventricular short axis shortening rate, LVFS)、左心室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)、Bcl-2蛋白及mRNA,cleaved-caspase-3蛋白,Caspase-3 mRNA表达均显著下调,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比,补肾活血复方组及赖诺普利组LVEDD、LVESD、LVMI、Bax、cleaved-caspase-3、Wnt3a、β-catenin蛋白及mRNA表达显著下调,LVFS、LVEF、Bcl-2蛋白及mRNA表达显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。假手术组心肌细胞形态正常,肌纤维排列整齐,结构清晰;模型组心肌纤维紊乱,存在炎性细胞浸润;赖诺普利组及补肾活血复方组心肌损伤及炎症浸润明显改善。结论 补肾活血复方可通过抑制Wnt信号通路抑制心力衰竭大鼠心肌损伤及细胞凋亡。

补肾化瘀生新方优化缺血缺氧微环境对间充质干细胞旁分泌效应及分化率的影响

目的观察补肾化瘀生新方优化缺血缺氧微环境对间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)旁分泌效应调控作用,探讨其对MSCs增值分化能力的影响。方法采用无血清的1640培养基和低氧细胞工作站培养24 h建立缺血缺氧微环境细胞体外模型。随机分为:正常组:以完全培养基培养(L-DMEM+10%FBS);对照组:加入生理盐水血清培养基,放入低氧细胞工作站培养24 h;模型组:以完全培养基培养(L-DMEM+10%FBS),低氧细胞工作站培养24 h;治疗组:加入含有补肾化瘀生新方含药血清培养基,低氧细胞工作站培养24 h。采用液相色谱-串联质谱技术分析鉴定补肾化瘀生新方大鼠体内吸收入血成分。采用流式细胞仪检测MSCs细胞周期、ELISA法检测VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10和TNF-α含量变化;免疫细胞化学染色检测NF-κBp65的细胞核转位;实时荧光PCR技术检测microRNA-124a-mRNA表达情况;Western blot检测microRNA-124a蛋白表达;免疫荧光技术检测MSCs向内皮细胞、神经元、神经胶质分化情况。结果与正常组比较,模型组S期细胞数增多,G0/G1期明显降低(P<0.05),与模型组比较,治疗组、对照组S期细胞数减少,G0/G1期比例逐渐升高(P<0.05),与对照组相比,治疗组S期细胞数减少,G0/G1期比例逐渐升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10降低明显(P<0.05),与模型组比较,治疗组VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10增多明显(P<0.05),与治疗组相比,对照组VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10减少(P<0.05)。随缺血缺氧时间延长VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10呈减少动态变化。与正常组比较,模型组NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达增多明显(P<0.05),与模型组比较,治疗组NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达降低明显(P<0.05),与治疗组相比,对照组NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达增多(P<0.05)。随缺血缺氧时间延长NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达呈升高动态变化。与正常组比较,模型组GFAP、Ⅲβ-Tubulin、VWF阳性细胞数增多明显(P<0.05),与模型组比较,治疗组GFAP、Ⅲβ-Tubulin、VWF阳性细胞数增多明显(P<0.05),与治疗组相比,对照组GFAP、Ⅲβ-Tubulin、VWF阳性细胞数降低明显(P<0.05)。随缺血缺氧时间延长GFAP、Ⅲβ-Tubulin、VWF阳性细胞数呈升高动态变化。补肾化瘀生新方动物含药血清共分析鉴定出阿魏酸、黄芩苷、梓醇、地黄苦苷、甲基异茜草素、大黄素甲醚6个为主要吸收入血成分。结论补肾化瘀生新方通过优化缺血缺氧微环境调控MSCs旁分泌效应可以提高MSCs增殖、分化能力,其体内吸收入血成分可能是参与此过程发挥药效的物质基础。

基于蛋白质组学的补肾化痰方治疗多囊卵巢综合征痰湿证患者血清差异蛋白的研究

目的应用临床及蛋白质组学结合的方法观察补肾化痰方治疗多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)痰湿证的疗效。方法以鹿特丹诊断标准纳入PCOS痰湿证患者30例,应用补肾化痰方治疗3个月,采集治疗前后临床及血清样本,进行性激素、糖脂代谢水平检测,并选取12例血清样本采用相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)联合液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术筛选治疗前后血清差异表达蛋白。结果补肾化痰方治疗后患者空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、甘油三酯(TG)、载脂蛋白B/A1(ApoB/A1)显著下降,SHBG较治疗前升高;经质谱分析PCOS痰湿证组与健康对照组比较,共发现87个差异蛋白,上调蛋白10个,下调蛋白77个。补肾化痰方组与PCOS痰湿证组比较,共发现63个差异蛋白,上调蛋白25个,下调蛋白38个。在PCOS痰湿证组表达上调或下调,经补肾化痰方干预后,明显回调的蛋白有7个。补肾化痰方干预后主要富集的KEGG通路包括补体和凝血级联、Fc-γ-R介导的吞噬作用和Jak-STAT信号通路。结论补肾化痰方治疗PCOS痰湿证的作用机制可能与调控炎症反应、糖脂代谢、抗氧化反应、补体活化调节等病理环节相关。

益气补肾活血方联合甲氨蝶呤治疗肾虚瘀血痹阻型类风湿关节炎28例临床观察

目的:观察益气补肾活血方联合甲氨蝶呤治疗肾虚瘀血痹阻型类风湿关节炎的临床疗效。方法:将56例肾虚瘀血痹阻型类风湿关节炎患者随机分为治疗组和对照组,每组28例。对照组给予甲氨蝶呤片治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用益气补肾活血方。2组均以3个月为1个疗程。观察2组治疗前后中医证候积分、红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、IL-1和TNF-α的变化。结果:治疗后,2组患者中医证候均较治疗前明显改善(P<0.05)。2组患者ESR、CRP、RF、抗CCP抗体、IL-1、TNF-α较治疗前均明显下降(P<0.05),治疗组RF、IL-1、TNF-α下降较对照组更明显(P<0.05)。结论:益气补肾活血方联合甲氨蝶呤治疗肾虚瘀血痹阻型类风湿关节炎具有较好的疗效,能有效下调炎症因子IL-1、TNF-α水平,具有明显的抑制免疫炎症作用。

补肾止颤方对帕金森病大鼠Caspase-4/11表达的影响

目的探讨补肾止颤方对帕金森病(Parkinson′s disease,PD)大鼠Caspase-4/11表达的影响。方法采用蛋白酶抑制因子注射法建立慢性PD大鼠模型,将造模成功的大鼠分为模型组、多巴丝肼组(2 g·kg^(-1)·d^(-1)),补肾止颤方低、中、高剂量组(15、30、60 g·kg^(-1)·d^(-1)),假手术组采用等量的70%乙醇溶液注射。假手术组、模型组给予10 mL·kg^(-1)·d^(-1)生理盐水;其余各组给予相应药物;连续灌胃3周。观察大鼠的一般情况,于灌药前1周及灌药后第3周进行悬挂实验并评分。采用HE染色、透射电镜观察中脑黑质区神经元病理改变,qPCR技术检测中脑黑质区α-syn、TH、IL-1β、GSDMD、Caspase-4/11的mRNA表达变化。结果补肾止颤方能增加悬挂实验时间及评分,减轻神经元病理损伤,明显抑制α-syn、IL-1β、GSDMD、Caspase-4/11表达,增加TH表达。结论补肾止颤方可有效改善PD模型大鼠的行为障碍、减轻神经元病理损伤,可能通过下调Caspase-4/11,抑制GSDMD蛋白的表达,减少α-syn、IL-1β分泌,从而减轻细胞焦亡,达到神经元保护作用。

补肾活血方对免疫性血小板减少症模型小鼠免疫因子及骨髓巨核细胞的影响

目的研究补肾活血方对免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠白细胞介素(IL)-6、IL-17、IL-21、IL-22、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等免疫因子及骨髓巨核细胞的影响。方法建立小鼠ITP模型,随机分为正常组、模型组、泼尼松组、补肾活血高、中、低剂量组。相应干预措施持续14 d。采用ELISA法测定检测各组小鼠IL-6、IL-17、IL-21、IL-22、TNF-α含量,并取股骨骨髓测定骨髓巨核细胞数量。结果与正常组相比,ITP模型组小鼠骨髓巨核细胞数量明显增多,产板巨核细胞数量显著下降,IL-6、IL-17A、IL-21、IL-22、TNF-α水平明显上调,差异有统计学意义(P<0.01)。补肾活血方高剂量组小鼠巨核细胞数量显著低于模型组(P<0.05),产板巨核细胞数差异无统计学意义,但有一定回升。IL-6、IL-17A、IL-21、IL-22、TNF-α水平补肾活血方高剂量组与模型组相比显著下调(P<0.01),补肾活血方中剂量组与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论补肾活血方能通过下调ITP小鼠模型体内IL-6、IL-17A、IL-21、IL-22、TNF-α水平,一定程度改善巨核细胞成熟障碍,提高血小板数量。