补肾健脾通络方结合五行健骨操对老年骨质疏松脾肾两虚证患者骨密度、骨代谢及炎症水平的影响

目的:观察补肾健脾通络方结合五行健骨操对老年骨质疏松脾肾两虚证患者骨密度、骨代谢及炎症水平的影响。方法:选取100例老年骨质疏松脾肾两虚证患者,采用简单随机法分为两组。西药组给予碳酸钙D_(3)联合骨化三醇治疗,综合组在西药组基础上给予补肾健脾通络方结合五行健骨操干预。比较两组治疗前后动态平衡、骨密度、骨代谢、炎症水平及中医症候积分差异,统计不良反应。结果:综合组治疗后睁眼和闭眼的动态平衡参数低于西药组(均P<0.05)。综合组股骨颈和腰椎骨密度(BMD)及骨钙素(BGP)、总Ⅰ型前胶原氨基端前肽(T-PINP)、25-(OH)D_(3)治疗后较治疗前升高,综合组治疗后高于西药组(均P<0.05)。综合组C反应蛋白(CRP)、β-胶原特殊序列(β-CTX)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)治疗后较治疗前降低,综合组治疗后低于西药组(均P<0.05)。综合组中医症候积分治疗后较治疗前降低,综合组治疗后低于西药组(均P<0.05)。两组不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾健脾通络方结合五行健骨操可减轻老年骨质疏松脾肾两虚证患者炎症反应,改善骨密度和骨代谢,提高平衡功能。

补肾通络方对大鼠膝骨关节炎膝关节软骨细胞外基质代谢的影响

目的探讨补肾通络方对膝骨关节炎大鼠的膝关节软骨中基质金属蛋白酶-3/13(matrix metalloproteinase-3/13,MMP-3/13)、组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)m RNA和蛋白聚糖酶-1(aggrecanase-1即ADAMTs-4)蛋白的表达影响。方法将42只雄性Wistar大鼠随机分为7组:正常组,模型组,西药组,成药组,补肾通络方低、中、高剂量组,向大鼠双侧后肢膝关节腔内分别注射4%木瓜蛋白酶生理盐水溶液0.2 mL,于第1、4、7天注射以建立膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)模型。造模成功后,分别以蒸馏水、美洛昔康水溶液、抗骨增生胶囊水溶液、补肾通络颗粒方低、中、高浓度水溶液对大鼠进行灌胃给药干预,干预过程中观察大鼠的一般状态,于灌胃给药干预4周后处死,并刮取双膝关节内胫骨平台及股骨内、外侧髁软骨组织,置于冻存管中备用,用实时定量反转录酶-聚合酶链锁反应(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction,RTPCR)法测定软骨中MMP-3/13和TIMP-1在m RNA水平表达的变化及Western blot法测定ADAMTs-4蛋白表达情况。结果 MMP-3和MMP-13的m RNA表达情况在模型组最高(P<0.05),正常组表达最低(P<0.05),不同药物对其影响不同,其中补肾通络方的中剂量组表达水平在各给药组中最小,成药组表达含量在各给药组中最大,补肾通络方中剂量组与高剂量组相比,中剂量组表达低于高剂量组,然二者之间差异无统计学意义(P>0.05)。TIMP-1的m RNA含量在模型组中最低(P<0.05),正常组中表达最多(P<0.05),在各给药组中补肾通络方高剂量组含量接近正常组,而低剂量组表达最少。软骨ADAMTs-4蛋白表达情况,模型组含量最高,正常组含量最低,各给药组之间含量不同,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾通络方治疗KOA疗效明显,其作用机制可能是通过抑制MMP-3/13和ADAMTs-4的水平,增加TIMP-1的表达,减轻膝关节软骨的破坏情况,改善KOA的症状,从而达到治疗KOA的作用。

不同浓度补肾通络方对膝骨关节炎大鼠OPG/RANKL系统mRNA的影响

目的:观察不同浓度补肾通络方对膝骨关节炎大鼠模型膝关节软骨组织OPG/RANKL系统的影响,分析本方对KOA骨破坏/重建的作用机制。方法:采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶溶液法复制KOA模型,36只Wistar大鼠采用随机数字表法分为6组,分别为正常组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,观察不同浓度补肾通络方对KOA大鼠膝关节软骨组织OPG/RANKL系统mRNA表达水平的影响。结果:软骨OPG的mRNA水平是在模型组中含量最低(P<0.05),正常组中含量最高(P<0.05),中药中剂量组含量接近正常组,而在低剂量组中表达最少,且中剂量组与高剂量组之间差异无统计学意义(P>0.05)。RANKL的mRNA表达情况是模型组最高(P<0.05),正常组最低(P<0.05),不同浓度的中药对其影响不同,但中药高、中、低三个剂量组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。二者的比值变化趋势与OPG相类似,以模型组最小,正常组最大,随着中药浓度的升高,其比值逐渐增加,且中剂量组与高剂量组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾通络方能够提高KOA大鼠软骨OPG的mRNA表达水平,降低RANKL水平,具有双向调节OPG/RANKL轴的作用。既可促进成骨,又可抑制或延缓破骨,维持KOA大鼠模型中OB/OC活动的平衡,改善骨质代谢水平,缓解KOA病情进一步进展。

补肾破血通络方治疗早期糖尿病肾病疗效观察

目的 :观察补肾破血通络方治疗早期糖尿病肾病的临床疗效。方法 :依照Mogensen诊断分期标准,选择早期糖尿病肾病患者80例为研究对象。患者采用随机数字表法分为治疗组和对照组各40例,治疗组采用糖尿病基础治疗,加用补肾破血通络方,对照组采用糖尿病基础治疗,加缬沙坦80 mg口服,治疗8周后观察两组治疗前后中医证候积分,24 h尿蛋白定量及综合疗效变化,并进行两组疗效比较。结果:补肾破血通络方可明显改善证候积分,减少尿中微量蛋白,显著改善综合疗效,总有效率治疗组97.5%,对照组62.5%,两组疗效比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾破血通络方能有效治疗早期糖尿病肾病,在减少尿中微量蛋白及减缓肾功能损害方面有一定优势。

HPLC法同时测定灌胃补肾通络方大鼠血浆中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷含量

目的：建立灌胃补肾通络方大鼠血浆中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的含量测定方法.方法：以甲醇-乙酸乙酯（V甲醇∶V乙酸乙酯=3∶1）提取处理血浆,氮气吹干后流动相复溶进样.色谱条件：Johnson spherigel C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：甲醇-0.01%乙酸水溶液,梯度洗脱;检测波长：马钱苷为235 nm,阿魏酸和二苯乙烯苷为320 nm;流速：1 m L/min;柱温：30℃;进样量：10μL.结果：空白血浆中内源性物质不干扰样品的测定.马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷分别在0.03-3.00,0.03-3.00和0.02-2.00 mg/L范围内均有良好的线性关系（r≥0.999）,检测限依次为0.020,0.015和0.010 mg/L;提取回收率分别大于79%、74%和58%,日间、日内精密度（RSD）均分别小于10%,7.3%和9.7%.结论：所建立的含量测定方法操作简便,灵敏,准确,适用于大鼠灌胃补肾通络方后血浆中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的同时测定,为补肾通络方中有效成分药动学研究提供参考.

补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态的影响

目的观察补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态的影响。方法采用博来霉素诱导建立实验性肺纤维化大鼠模型,以氢化可的松琥珀酸钠为对照,观察补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态及血清羟脯氨酸(HYP)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)的影响。结果同正常组比较,模型组大鼠肺组织病理纤维化显著,炎性反应明显,同时伴有血清HYP,HA,LN升高(P<0.05,P<0.01)。同模型组相比,各治疗组肺组织病理形态明显改善,补肾通络高剂量组大鼠血清HYP,HA,LN含量明显下降(P<0.05);补肾通络低剂量组LN含量明显下降(P<0.01),氢化可的松琥铂酸钠对照组HYP、HA、LN含量明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论补肾通络方可改善实验性肺纤维化大鼠肺组织病理形态,抑制肺纤维化。

补肾通络方对腰椎间盘突出症患者疗效及外周血免疫细胞平衡的影响

【目的】探究补肾通络方对腰椎间盘突出症(LDH)肾虚血瘀证患者的疗效及外周血免疫细胞平衡的影响。【方法】将72例LDH肾虚血瘀证患者随机分为观察组和对照组,每组各36例。对照组给予腰椎牵引治疗,观察组在对照组的基础上加用补肾通络方治疗,疗程为4周。观察2组患者治疗前后疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、日本骨科协会(JOA)腰椎功能评分、外周血炎症相关因子及T淋巴细胞亚群的变化情况,并评价2组患者的临床疗效。【结果】(1)治疗4周后,观察组的总有效率为88.89%(32/36),对照组为66.67%(24/36),组间比较,观察组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)治疗后,2组患者的JOA评分均较治疗前明显升高(P<0.05),VAS评分均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组对JOA评分的升高作用和对VAS评分的降低作用均明显优于对照组(P<0.05)。(3)治疗后,2组患者外周血肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平均较治疗前明显降低(P<0.05),白细胞介素10(IL-10)水平均较治疗前明显升高(P<0.05),且观察组对TNF-α、IL-6水平的降低作用和对IL-10水平的升高作用均明显优于对照组(P<0.05)。(4)治疗后,2组患者外周血T淋巴细胞亚群CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均较治疗前明显下降(P<0.05),CD8^(+)水平均较治疗前略有升高,但差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后组间比较,观察组对外周血T淋巴细胞亚群CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平的下降作用均明显优于对照组(P<0.05)。【结论】补肾通络方对LDH肾虚血瘀证患者疗效显著,可有效促进机体免疫平衡,降低患者机体炎症反应,提高患者机体免疫力。

补肾通络方抑制肺纤维化及对相关细胞因子含量的影响

目的从调节细胞因子含量的角度来探讨补肾通络方对抑制肺纤维化的作用机制。方法采用博来霉素诱导建立实验性肺纤维化大鼠模型,以氢化可的松琥珀酸钠为对照,观察补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态、血清羟脯氨酸(HYP)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)及肺组织白介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量的影响。结果与正常组比较,模型组大鼠肺组织病理纤维化显著,炎性反应明显,同时伴有血清HYP、HA、LN升高(P<0.05,P<0.01),肺组织IL-1、IL-6、TNF-α含量升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比,补肾通络高剂量组大鼠血清HYP、HA、LN含量明显下降(P<0.05);补肾通络低剂量组LN含量明显下降(P<0.01),氢化可的松琥珀酸钠对照组HYP、HA、LN含量明显下降(P<0.05,P<0.01),补肾通络高剂量组和氢化可的松琥珀酸钠对照组大鼠IL-1、IL-6、TNF-α含量明显下降(P<0.05,P<0.01),肺组织病理形态的改善。结论补肾通络方可通过调节实验性肺纤维化大鼠肺组织炎性细胞因子含量,抑制肺纤维化。

补肾通络方对肺纤维化大鼠碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的观察补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法采用博来霉素诱导建立实验性肺纤维化大鼠模型,以氢化可的松琥珀酸钠为对照,观察补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态及肺组织bFGF和bFGF mRNA表达的影响。结果同正常组比较,模型组大鼠肺组织病理纤维化显著,炎性反应明显,同时伴有肺组织bFGF和bFGF mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。同模型组相比,补肾通络方高剂量组和氢化可的松琥珀酸钠对照组大鼠肺组织bFGF和bFGF mRNA表达明显下降(P<0.05,P<0.01),肺组织病理形态与模型组比较也得到改善。结论补肾通络方可能通过从蛋白和基因水平调节实验性肺纤维化大鼠肺组织bFGF表达,抑制肺纤维化。

自拟补肾通络方联合人工周期治疗卵巢储备功能下降所致不孕

目的:观察自拟补肾通络方联合"戊酸雌二醇+黄体酮"治疗卵巢储备功能下降所致不孕的临床疗效。方法:将我院符合肾虚血瘀、卵巢储备功能下降所致不孕60例患者分为治疗组和对照组,每组均30例。对照组采用"戊酸雌二醇+黄体酮"治疗,治疗组在对照组基础上加服补肾通络方治疗,1月为1疗程,共治疗3疗程,比较两组治疗后总疗效、治疗前后中医症候积分情况,治疗前后FSH、LH、AMH水平;随访3个月,比较两组妊娠率。结果:治疗组患者治疗总有效率为96.7%,对照组治疗总有效率的76.7%(P<0.05);治疗组治疗后月经提前、月经推迟、月经量少、烦躁焦虑、头晕耳鸣、失眠健忘、腰膝酸软和中医症候总积分低于对照组(P<0.05);治疗组治疗后FSH、LH水平低于对照组,治疗组治疗后AMH水平高于对照组(P<0.05);随访3个月,实验组、对照组妊娠率分别为40%、16.7%,治疗组均高于对照组。结论:补肾通络方联合人工周期比单独人工周期能更有效的降低患者的中医症候积分,降低FSH、LH水平,提高AMH水平,从而显著提高受孕机率。

补肾解毒通络方阻止白血病复发机制的网络药理学分析

目的:探讨补肾解毒通络方(BSJDTLF)的作用机制。方法:使用网络药理与蛋白组学相结合的研究方法,对其靶点与作用通路进行了分析、预测。将补肾解毒通络方进行液相色谱质谱分析,对质谱结果中的化合物通过TCMSP与CTD数据库进行分析,得到对应化合物的作用靶点,再通过NCBI和GENE CARD数据库筛选与白血病相关的作用靶点基因。分选给药小鼠的间充质干细胞进行高通量蛋白组学分析筛选出差异蛋白。将差异蛋白与靶点基因进行比对,经GO、KEGG和K核分析得到BSJDTLF作用机制通路。结果:共筛选到潜在靶点50个,关键靶点10个,包括Mmp2、Stmn1、Icam1等。主要涉及慢性白血病、急性白血病、VEGF信号等通路。结论:预测了补肾解毒通络方作用于间充质干细胞的具体机制。

补肾通络方中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的体内药代动力学研究

研究灌胃补肾通络方后大鼠血浆中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷药代动力学特征。采用液-液萃取法处理血浆样品;HPLC-UV检测含量,色谱柱为Johnson spherigel C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.01%冰醋酸水溶液,梯度洗脱,流速为1 m L·min-1,柱温为30℃,检测波长:马钱苷为235 nm,阿魏酸和二苯乙烯苷为320 nm,进样量为10μL。采用DAS 2.0软件对所测数据进行处理,得到大鼠血浆中马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷的主要药动学参数如下:Cmax分别为(0.369±0.042),(0.387±0.071),(0.233±0.044)mg·L-1;tmax分别为(0.226±0.022),(0.282±0.031),(0.233±0.044)h;t1/2β分别为(6.89±0.20),(10.7±0.11),(6.93±0.090)h;AUC0-∞分别为(1.91±0.36),(3.22±0.52),(1.52±0.33)mg·h·L-1;AUC0-t分别为(1.62±0.33),(2.58±0.43),(1.30±0.30)mg·h·L-1;CL分别为(20.2±4.0),(1.39±0.23),(31.7±6.9)L·h-1·kg-1。药代动力学研究结果表明,灌胃补肾通络方后马钱苷、阿魏酸和二苯乙烯苷药动学曲线均符合血管外给药二室模型,且3种成分吸收快,马钱苷和二苯乙烯苷消除速度中等,阿魏酸消除慢(但生物利用度为最高),每天给药3次能维持血药浓度,适合制成普通口服制剂。

补肾通络方通过抑制chemerin及炎性因子干预骨质疏松症的机制研究

目的评价补肾通络方对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨、成脂分化以及小鼠单核巨噬细胞RAW264.7破骨分化模型的干预作用,并探究其调节骨形成及骨吸收的相关机制。方法分别给予补肾方、通络方和补肾通络方进行干预,采用茜素红染色法鉴定BMSCs成骨分化后各组钙结节形成情况;采用油红O染色鉴定BMSCs成脂分化后各组脂滴形成情况;采用q RT-PCR法检测BMSCs成骨、成脂分化后各组成骨、成脂分化标志基因m RNA表达,成骨、成脂分化过程和炎症模型中chemerinm RNA表达;采用ELISA法检测BMSCs成骨、成脂分化过程和炎症模型中各组chemerin分泌量。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant alkaline phosphatase,TRAP)染色鉴定各组RAW264.7细胞破骨分化程度,并测定各组TRAP活性;采用Westernblotting法检测RAW264.7细胞破骨分化中各组TRAP蛋白表达情况;采用q RT-PCR法及ELISA法检测RAW264.7细胞破骨分化后各组chemerin、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)mRNA表达及分泌。结果与对照组比较,补肾通络方组钙结节显著增多(P<0.01),脂滴显著减少(P<0.01),成骨分化标志基因表达显著升高(P<0.01),成脂分化标志基因表达显著下降(P<0.05),chemerin分泌及基因表达在成骨分化第3天及成脂分化第3、7天显著下降(P<0.05、0.01)。与对照组比较,BMSCs炎症模型chemerin分泌及基因表达显著升高(P<0.01);与BMSCs炎症模型比较,补肾通络方组chemerin分泌及基因表达显著下降(P<0.01)。与对照组比较,RAW264.7细胞破骨分化中TRAP阳性细胞、活力、蛋白表达以及IL-6、TNF-α分泌与基因表达均显著升高(P<0.05、0.01);与模型组比较,补肾通络方组TRAP阳性细胞、活力、蛋白表达以及IL-6、TNF-α分泌与基因表达显著降低(P<0.01)。结论补肾通络方可通过抑制chemerin及炎症因子来调节成骨、成脂分化及破骨细胞分化,从而促进骨形成、抑制骨吸收、改善骨质疏松症。

补肾通络方对骨质疏松斑马鱼效应评价及破骨细胞自噬机制

目的:评价补肾通络方对斑马鱼骨质疏松模型的干预效应,并明确其对破骨细胞分化的自噬调控机制。方法:选取新生3 d健康斑马鱼幼鱼260尾,25 mmol·L-1泼尼松龙(Pred)干预3 d,通过钙黄绿素染色确认建模成功,分为空白组,Pred组(25 mmol·L-1),依替磷酸二钠组(300 mg·L-1),补肾组(180 mg·L-1),通络组(30 mg·L-1)和补肾通络组(210 mg·L-1)各40尾。药物干预4 d后采用钙黄绿素染色后拍照,统计斑马鱼脊椎骨荧光面积;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测斑马鱼碱性磷酸酶(ALP),骨形态发生蛋白-2b(BMP-2b),Runt相关转录因子2(Runx2),组织蛋白酶K(CTSK),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)及活化T细胞核因子(NFATC-1)mRNA表达。培养RAW264.7细胞至80%~90%密度后分为空白组,Rankl诱导组(10μg·L-1),补肾组(180 mg·L-1),通络组(30 mg·L-1)和补肾通络组(210 mg·L-1)。经Rankl诱导细胞破骨分化及药物干预4 d后,采用FITC标记鬼笔环肽染色检测肌动蛋白环表达,Real-time PCR检测RAW264.7细胞TRAP,CTSK和自噬相关基因5(ATG5),自噬相关基因7(ATG7),泛素结合蛋白62(p62)mRNA表达。结果:在体内研究中,与空白组比较,Pred组斑马鱼椎骨面积及ALP,BMP-2b,Runx2表达显著下降(P<0.01),CTSK,TRAP,NFATC-1表达显著升高(P<0.01)。与Pred组比较,通络组椎骨面积明显增加(P<0.05),而补肾通络组椎骨面积显著增加(P<0.01),补肾组,通络组及补肾通络组ALP,BMP-2b,Runx2表达均显著升高(P<0.01),补肾通络组CTSK,TRAP,NFATC-1表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。体外研究显示,与空白组比较,Rankl诱导组肌动蛋白环数目显著增多(P<0.01),CTSK,TRAP和ATG5表达显著升高(P<0.01),ATG7,p62表达明显升高(P<0.05)。与Rankl诱导组比较,补肾组、通络组及补肾通络组均明显减少了肌动蛋白环数目及CTSK,TRAP表达(P<0.05,P<0.01),而补肾通络组同时降低了ATG5,ATG7,p62表达(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾通络方能够显著改善泼尼松龙诱导的斑马鱼骨质疏松症,并通过降低自噬相关基因表达抑制破骨细胞分化。

补肾通络方促进骨质疏松症大鼠骨形成机制

目的探讨补肾通络方干预绝经后骨质疏松症骨形成机制。方法将72只大鼠采用去卵巢方式制备骨质疏松症动物模型,随机分为模型组、阿仑膦酸钠组、氟化钠组、补肾组、通络组、补肾通络组等6组,另设假手术组,每组12只,分别予生理盐水(5 mL/kg)、阿仑膦酸钠(1 mg/kg)、氟化钠(5 mg/kg)、补肾方(5.4 g/kg)、通络方(0.9 g/kg)、补肾通络方(6.3 g/kg)灌胃70天,1次/日,假手术组干预同模型组。采用ELISA法检测血清碱性磷酸酶(TALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP);双能X线吸收法测定股骨颈骨密度(BMD);Micro-CT观察骨微结构;RT-PCR、Western Blot分别检测骨组织β-catenin mRNA及蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组TALP水平、BMD、β-catenin mRNA及蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05),TRAP水平升高(P<0.05)。与模型组比较,阿仑膦酸钠组、补肾组、补肾通络组TALP升高(P<0.01,P<0.05);补肾组、通络组及补肾通络组血清TRAP水平降低(P<0.05);各给药组BMD、β-catenin mRNA及蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05)。与通络组比较,补肾通络组血清TALP水平升高(P<0.05),血清TRAP水平降低(P<0.05)。与补肾组、通络组比较,补肾通络组BMD、β-catenin蛋白表达升高(P<0.05)。结论补肾通络方增加β-catenin表达,促进骨形成,逆转绝经后骨质疏松症骨量丢失,方中两类中药配伍具有协同效应。

补肾泄浊化瘀通络方调控膜性肾病足细胞转分化保护肾功能机制研究

目的:研究补肾泄浊化瘀通络方对阳离子化牛血清白蛋白(Cationized Bovine Serum Albumin,C-BSA)诱导的膜性肾病(Membranous Nephropathy,MN)大鼠肾保护作用及对MN足细胞转分化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的调节作用。方法:SD大鼠采用C-BSA尾静脉注射法制备MN大鼠模型,造模成功后随机分为模型对照组、盐酸贝那普利10 mg/kg组、补肾泄浊化瘀通络方10.2、21.3、42.6 g/kg组,另设正常对照组,各组灌胃给药相应药物或蒸馏水,1次/d,给药4 w后取材检测。采用光镜(MASSON染色、PAS染色)、电镜、IgG免疫荧光进行肾组织病理观察;记录大鼠24 h尿蛋白定量(24-UTP)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)含量;应用免疫组化及Real-time PCR法检测肾组织突触足蛋白(Synaptopodin)、转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白及mRNA的表达情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠出现较为明显的肾组织病理损伤,肾小球基底膜不均匀增厚,上皮下免疫复合物沉积伴特有的“钉突”样改变,IgG弥漫性、条带状沉积于基底膜区;24-UTP、TG、TC含量明显升高(P<0.05),血清TP、ALB含量明显降低(P<0.05),肾组织足细胞标志物Synaptopodin蛋白及mRNA表达下调,EMT相关标志物TGF-β1蛋白及mRNA表达上调(P<0.05);与模型对照组比较,补肾泄浊化瘀通络方10.2、21.3、42.6 g/kg组明显减轻MN模型大鼠肾组织损伤程度,明显降低24-UTP、TG、TC含量(P<0.05),增加血清TP、ALB含量(P<0.05),上调肾组织Synaptopodin蛋白及mRNA表达,下调TGF-β1蛋白及mRNA表达。结论:补肾泄浊化瘀通络方对C-BSA致MN大鼠具有肾保护作用,可能与其能够上调肾组织中Synaptopodin表达,下调TGF-β1表达,抑制足细胞EMT、修复足细胞损伤有关。

补肾解毒通络方对急性淋巴细胞白血病骨髓微环境间充质干细胞修复作用

目的:研究补肾解毒通络方对急性淋巴细胞白血病(ALL)骨髓微环境的间充质干细胞(MSCs)的修复作用。方法:将BALB/C小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、西药治疗组、补肾解毒通络组。通过照射后尾静脉注射L1210细胞株制备ALL模型。采用镜下观察骨髓涂片评估造模及治疗效果,集落培养检测细胞增殖,流式细胞术检测凋亡,CCK-8检测细胞存活率,ELISA检测小鼠骨髓微环境MSCs相关细胞因子(SCF、CCR4、CXCL12、ICAM1)的分泌。结果:骨髓涂片显示造模成功,补肾解毒通络组小鼠骨髓MSCs的细胞集落数较西药治疗组显著增多(P<0.05),而细胞凋亡率较西药组显著下降(P<0.05);补肾解毒通络组和西药治疗组的细胞活性均显著高于模型对照组(P<0.01),ELISA结果显示,补肾解毒通络方对SCF、CCR4、CXCL12、ICAM1的分泌均有影响,且在MSCs与CD_(34)^(+)细胞共培养时效果更好。结论:补肾解毒通络方可以修复ALL小鼠骨髓微环境的MSCs。