补肾助孕方对LPD模型大鼠垂体GnRH受体信号转导系统的影响

目的通过观察补肾助孕方对大鼠垂体促性腺激素及促性腺激素释放激素(GnRH)受体信号系统的影响,探究其作用机制,寻找中医心-肾-子宫轴理论的现代科学依据。方法采用米非司酮对SD雌鼠进行造模,并进行药物干预。采用ELISA法检测大鼠血清样本促黄体生成激素(LH)和促卵泡成熟激素(FSH)水平,qPCR法检测各组大鼠垂体FSHβ、LHβ基因转录水平。对大鼠垂体GnRH受体信号转导系统关键分子以及下游重要转录因子分别采用qPCR与Western blot方法检测其基因转录与蛋白表达水平。结果补肾助孕方显著提高了由米非司酮诱导的血清低FSH水平与垂体GnRH受体低表达(P<0.05),补肾助孕方组高、低剂量组中PKC、p38MAPK、JNK、ERK、PKA等关键信号转导分子以及c-Jun、Elk-1、Egr-1、CREB等转录因子的mRNA及蛋白表达均显著高于模型组(P<0.05),但CAM及其下游的Nur77在各组间均无显著差异。结论补肾助孕方能够通过调节垂体GnRH受体信号转导系统调节垂体促性腺激素的分泌水平,证明该方具有调节生殖轴整体功能的作用,阐释了中医心-肾-子宫轴理论与现代医学下丘脑-垂体-卵巢轴在内容上的一致性。

补肾助孕方对肾虚薄型子宫内膜大鼠内膜容受性的影响及机制研究

目的:观察补肾助孕方对肾虚薄型大鼠子宫内膜容受性的影响,探讨中药的作用机制。方法:雌性SD大鼠30只,随机分为对照组10只,造模组20只,通过羟基脲灌胃建立肾虚合并着床障碍型子宫内膜大鼠模型。随后将20只造模组大鼠随机分为模型组和补肾助孕方组,每组10只。对照组、模型组均灌服蒸馏水10 mL/kg;补肾助孕方组灌服中药0.3 mg/kg,均1次/d,持续3个动情周期(15 d)。在第3个动情期后处死大鼠,酶联免疫吸附法检测动脉血中雌二醇、孕酮的水平。取子宫标本,光镜下观察子宫内膜形态,测量子宫内膜厚度、子宫间质厚度、子宫腺体数、子宫血管数。免疫组化法检测各组内膜组织中整合素β3和白血病抑制因子的表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠动脉血雌二醇、孕酮的水平减少;子宫内膜腺体稀少,上皮变薄,间质致密,血管少;子宫内膜厚度、子宫间质厚度、子宫腺体数、子宫血管数均减少;整合素β3和白血病抑制因子的表达减少。补肾助孕方组较之模型组,有明显的改善。结论:补肾助孕方可改善肾虚合并着床障碍型状态大鼠子宫内膜的容受性,可能与提高血中激素水平,增加内膜中整合素aβ3和白血病抑制因子的表达有关。

补肾助孕方联合克罗米芬治疗排卵障碍性不孕的疗效观察

目的:观察探讨补肾助孕方联合克罗米芬治疗排卵障碍性不孕的疗效。方法:从2016年1月-2017年12月来我院就诊的排卵障碍性不孕患者中随机抽取100例患者进行研究分析,按照就诊顺序、治疗模式的不同,将100例排卵障碍性不孕患者划分成对照组、研究组两组。对照组患者运用药物克罗米芬进行治疗,研究组患者在克罗米芬药物治疗的基础上联合补肾助孕方进行治疗,所有患者治疗后(疗程为3个月)进行疗效对比。结果:研究组患者在基础体温(BBT)测定双向型发生概率、排卵率检测指标方面测评结果明显比对照组同期相比更优,同时研究组治疗总有效率比对照组同期相比更高,两组比较有显著的差别,符合统计学意义(P<0.05)。结论:针对排卵障碍不孕患者,在常规克罗米芬药物治疗的基础上增加补肾助孕配方治疗,能够有效调理患者月经周期和性激素水平,助于排卵,大大增加了妊娠成功的概率,疗效安全有效,可以在临床进一步应用或者探索。

益肾调心法治疗低促性排卵障碍理法探析

低促性腺激素性性腺功能减退是排卵障碍的原因之一,其对于女性生殖内分泌的不利影响受到临床重视。目前,中医尚缺乏对其病机治法的研究,国医大师夏桂成教授创立的“心(脑)-肾-子宫轴”为中医妇科生殖内分泌疾病的研究提供了方向。文章从中西医生殖轴互参中分析了低促性排卵障碍的病因病机,提出了“心肾不交”为病机关键,论证了益肾调心治法的有效性,并根据肾中阴阳偏颇拟定治疗方案,革新了该病的论治理念,以期为临床提供指导。

中药周期疗法治疗子宫内膜异位症合并黄体功能不全性不孕症疗效观察

目的:观察中药周期疗法联合黄体酮治疗子宫内膜异位症合并黄体功能不全性不孕症的临床疗效,以及对子宫内膜的影响。方法:将84例子宫内膜异位症合并黄体功能不全性不孕症患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组42例。对照组给予黄体酮胶囊治疗,观察组在对照组治疗基础上加用中药周期疗法治疗。两组患者均治疗6个月经周期。检测两组患者性激素水平,评估子宫血流动力学、子宫内膜形态、黄体功能情况,比较两组临床疗效,统计妊娠结局和不良反应。结果:观察组治疗6个月经周期后雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)、高温相评分(high-temperature phase score,HPS)分别为(154.27±27.74)ng·L^(-1)、(8.56±1.53)μg·L^(-1)、(6.15±1.10)分均显著高于对照组的(139.66±25.17)ng·L^(-1)、(7.75±1.38)μg·L^(-1)、(5.58±1.02)分,差异均有统计学意义(P<0.05);子宫内膜下螺旋动脉搏动指数(pulse index,PI)、阻力指数(resistance index,RI)分别为(1.82±0.32)、(0.77±0.13)低于对照组的(2.03±0.35)、(0.86±0.15),差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗6个月经周期后子宫内膜形态A+B型率、治疗有效率、生化妊娠率分别为76.2%、83.3%、57.1%显著高于对照组的54.8%、64.3%、35.7%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:中药周期疗法联合黄体酮治疗子宫内膜异位症合并黄体功能不全性不孕症可以提高子宫内膜容受性,改善黄体功能,提高妊娠率。

补肾助孕方对黄体功能不全模型大鼠垂体PKC/MAPK/ERK信号通路及黄体功能的影响

目的探讨补肾助孕方治疗黄体功能不全(LPD)的可能作用机制。方法 40只雌性育龄SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肾助孕方组、H-7组、H-7+补肾助孕方组,每组8只。除正常组外,其余各组大鼠均给予米非司酮混悬液建立LPD模型。补肾助孕方组(2.4g/100g灌胃)、H-7组(0.005mg/只腹腔注射)、H-7+补肾助孕方组(给药同补肾助孕方组和H-7组)均于第4个性周期(D13)开始,于D13、D17的16:00,及D14、D18的8:00给药,模型组、正常组均于以上给药时间点灌胃(1.2ml/100g)和腹腔注射(20μl/只)生理盐水。末次给药6h后,用ELISA法检测血清促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)含量,并计算FSH/LH值;HE法观察卵巢组织病理及卵泡、黄体数;Western blot法检测垂体组织蛋白激酶C(PKC)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白酶(p-p38MAPK)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)蛋白水平。结果与正常组比较,模型组和H-7+补肾助孕方组大鼠卵巢组织闭锁卵泡增多,黄体细胞发育不良,血清LH含量升高(P<0.05),卵巢组织卵泡数及黄体数,血清FSH含量及FSH/LH值,垂体组织PKC、p-p38MAPK、p-ERK1/2蛋白水平均降低(P<0.05);与模型组和H-7+补肾助孕方组比较,补肾助孕方组大鼠卵巢内闭锁卵泡减少,黄体细胞发育有所改善,血清LH含量降低(P<0.05),卵巢组织卵泡数及黄体数,血清FSH含量及FSH/LH值,垂体组织PKC、p-p38MAPK、p-ERK1/2蛋白水平升高(P<0.05)。结论补肾助孕方可激活垂体组织PKC/MAPK/ERK通路,促进血清FSH分泌,从而改善黄体功能。

补肾助孕方、逍遥丸对超促排卵小鼠围着床期妊娠结局和子宫内膜容受性的影响

目的研究补肾助孕方、逍遥丸对超促排卵小鼠妊娠结局和子宫内膜容受性的影响及可能作用机制。方法将240只动情周期正常的昆明系雌性小鼠随机分为正常组、模型组、补肾组、疏肝组,每组各60只。除正常组,其余各组小鼠建立控制性超促排卵模型。造模第1天始补肾组、疏肝组分别给予补肾助孕方混悬液(浓度1.5 g/mL)和逍遥丸混悬液(浓度0. 09 g/mL),均0.4 mL/(30 g·d)灌胃,模型组及正常组给予同等剂量蒸馏水灌胃,连续11天。比较各组小鼠围着床期血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、NO含量及子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白及其mRNA表达,测量子宫内膜厚度,观察小鼠内膜胞饮突表达,统计各组小鼠妊娠数、胚胎着床数。结果与正常组比较,模型组小鼠妊娠数、胚胎着床数减少(P<0.05),同时模型组血清E2、P降低,子宫内膜ER、PR蛋白,VEGF、eNOS蛋白及其mRNA表达,子宫组织匀浆内NO含量均降低(P<0.05),子宫内膜厚度变薄,胞饮突发育不良;与模型组比较,补肾组、疏肝组小鼠妊娠数及胚胎着床数增加,血清E2、P含量及子宫内膜ER、PR蛋白,VEGF、eNOS蛋白及其mRNA表达,子宫组织匀浆内NO含量均升高(P<0.05),子宫内膜厚度增加,胞饮突发育接近正常组。结论补肾法、疏肝法均能够增加超促排卵小鼠妊娠率及胚胎着床数,其作用机制可能与调节雌、孕激素水平及其受体,影响VEGF、eNOS表达,调控NO释放,改善小鼠子宫内膜组织形态及血管通透性有关。