通隧补肾解语汤治疗缺血性脑卒中后失语症疗效分析与探讨

目的探讨缺血性脑卒中后失语症实施通隧补肾解语汤进行治疗的效果。方法回顾性选取2021年1月—2022年10月泰安市中医医院接收的90例缺血性脑卒中后失语症患者的临床资料,按不同治疗方法分为对照组和观察组,各45例。对照组给予常规治疗,观察组加用通隧补肾解语汤治疗,对比两组治疗效果。结果研究组治疗总有效率(97.78%)高于对照组(82.22%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.444,P<0.05)。治疗后,观察组口语表达、听语理解、阅读以及书写方面均优于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。治疗后,观察组脑血流变化优于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论常规治疗加用通隧补肾解语汤治疗缺血性脑卒中后失语症的效果较为显著,同时可以改善患者的言语能力以及脑血流变化情况。

补肾活血汤治疗早发性卵巢功能不全患者的临床疗效及对其免疫因子的影响

目的探讨补肾活血汤治疗早发性卵巢功能不全(Premature ovarian insufficiency,POI)患者的临床疗效及对其免疫因子的影响。方法选取2020年1月—2022年9月期间苏州市中医医院收治的80例POI患者,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组各40例。对照组予常规治疗,观察组在对照组基础上加用补肾活血汤治疗。连续治疗3个月经周期,观察比较两组患者临床疗效、不良反应情况,治疗前后中医证候积分,Kupperman评分,血清促卵泡激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)、促黄体生成激素(Luteinizing hormone,LH)、雌二醇(Estrogen,E_(2))水平,卵巢体积、窦卵泡数(Antral follicle count,AFC),及外周血细胞免疫(CD4^(+)、CD8^(+)及CD4^(+)/CD8^(+))水平。结果治疗后观察组总有效率92.5%(37/40)明显高于对照组75.0%(30/40),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者中医证候积分及Kupperman评分均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组中医证候积分及Kupperman评分均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清FSH、LH水平均较治疗前明显降低,E_(2)水平均较治疗前明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组血清FSH、LH水平均明显低于对照组,E_(2)水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者卵巢体积及AFC均较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组卵巢体积及AFC均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)较治疗前升高,CD8^(+)较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)高于对照组,CD8^(+)明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,两组患者均未发生严重不良反应。结论补肾活血汤能够有效减轻POI患者临床症状,调节体内激素水平,促进卵泡发育,改善卵巢功能,提高临床疗效,其机制可能与该方能够调节POI患者机体自身免疫水平有关,且该方案具有较高安全性,值得推广。

肝豆补肾汤治疗男性肝豆状核变性合并生殖损害的理想点法综合疗效评价研究

目的:使用理想点法(TOPSIS法)综合评价肝豆补肾汤对男性肝豆状核变性合并生殖损害患者的临床疗效,为规范治疗男性肝豆状核变性合并生殖损害提供临床依据。方法:基于前期构建的肝豆状核变性疗效评价体系以及对男性肝豆状核变性合并生殖损害的临床调查和文献研究,制定专家调查问卷。通过德尔菲法(Delphi法)对结局指标进行赋权,确定权重系数。将60例男性肝豆状核变性合并生殖损害患者随机分为对照组和试验组各30例。对照组:西医常规排铜治疗(5%葡萄糖注射液250mL+二巯丙磺钠注射液20mg/kg,1次/d,连续静滴6d;间歇期2d予以葡萄糖酸钙注射液补钙)。试验组:在对照组的基础上予肝豆补肾汤治疗(1剂/d,早晚分服)。疗程:8d为1疗程,连续治疗4个疗程。应用TOPSIS法对60例男性肝豆状核变性合并生殖损害患者的结局指标进行临床疗效综合评价。结果:试验组的相对接近程度C值(0.878),高于对照组(0.122),更接近于最优治疗方案。结论:该研究表明肝豆补肾汤结合西药治疗男性肝豆状核变性合并生殖损害患者的临床疗效明显优于单纯西药治疗。

益气补肾强底汤对重度子宫脱垂术后创伤康复的影响

目的:探讨益气补肾强底汤对重度子宫脱垂(SUP)术后创伤康复的影响。方法:选取2021年1月—2023年1月60例SUP患者,随机分为对照组和观察组,每组30例。对照组术后行常规治疗,观察组术后增加益气补肾强底汤治疗。观察两组患者血清指标、盆腔脏器脱垂程度、性生活及生活质量。结果:术后1周、2周观察组患者血清缺血修饰白蛋白、肌红蛋白、总抗氧化能力均低于对照组(P<0.05);术后6个月两组患者盆腔脏器脱垂程度低于术前(P<0.05),但两组对比差异无统计学意义(P>0.05);术后6个月观察组患者生理、情感、性伴侣因素评分及术后生活质量评分均高于对照组(P>0.05)。结论:益气补肾强底汤用于重度子宫脱垂术后治疗,可有效促进手术创伤的恢复,改善盆腔脏器脱垂,提高性生活质量及生活质量。

补肾祛瘀汤治疗老年肾虚血瘀证骨质疏松症患者的效果

目的 探讨补肾祛瘀汤治疗老年骨质疏松症(OP)患者的临床效果。方法 选取2018年1月至2022年12月江苏省苏州市中西医结合医院收治的老年OP患者160例,采用随机数字表法将其分为补肾祛瘀组和西药组,各80例。西药组给予碳酸钙D3片+阿法骨化醇片治疗,补肾祛瘀组在西药组基础上加用补肾祛瘀汤。比较两组临床疗效;比较两组治疗前后中医证候积分、骨密度(腰椎、股骨颈)、骨代谢指标[骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、Ⅰ型原胶原N-端前肽(PINP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP-5b)、Ⅰ型原胶原C-端前肽(CTX)]水平;比较两组不良反应发生率。结果 两组各有2例患者中途退出研究。补肾祛瘀组临床疗效优于西药组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组中医证候积分均低于治疗前,且补肾祛瘀组低于西药组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组腰椎和股骨颈骨密度均高于治疗前,且补肾祛瘀组高于西药组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组PINP、CTX及补肾祛瘀组BALP、TRACP-5b均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。补肾祛瘀组BALP、TRACP-5b、PINP、CTX低于西药组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 补肾祛瘀汤联合西药用于治疗老年OP可有效改善患者临床症状,调节骨代谢转换平衡,增加骨密度。

戈舍瑞林联合定坤丹与自拟补肾活血汤灌肠在肾虚血瘀型子宫内膜异位症患者术后应用的效果

目的:观察戈舍瑞林联合定坤丹与自拟补肾活血汤灌肠在肾虚血瘀型子宫内膜异位症患者术后应用的效果。方法:选取2021年3月—2022年3月于宁乡市中医医院行腹腔镜下保留生育能力手术的60例子宫内膜异位症患者作为研究对象,采用双色球法分为对照组与观察组,各30例。对照组术后采用戈舍瑞林治疗,观察组在对照组基础上给予定坤丹与自拟补肾活血汤灌肠治疗。比较两组治疗效果。结果:观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P=0.032)。术后当天,两组血清糖类抗原125(CA125)水平比较,差异无统计学意义(P=0.132);术后1年,两组血清CA125水平低于术后当天,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。观察组受孕率高于对照组,复发率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:戈舍瑞林联合定坤丹与自拟补肾活血汤灌肠在肾虚血瘀型子宫内膜异位症患者术后应用的效果显著,可提高受孕率,降低血清CA125水平及复发率。

补肾活血汤联合INTERTAN治疗老年股骨粗隆间骨折临床效果观察

探讨补肾活血汤联合InterTAN治疗老年股骨粗隆间骨折(ITF)的临床效果。选取2021年3月—2023年3月纳雍县人民医院收治的84例ITF患者为研究对象,按随机数字表法将其分为对照组和观察组两组,每组各42例。对照组予以InterTAN内固定治疗,观察组在对照组的基础上加用补肾活血汤治疗。比较两组疼痛评分、肢体肿胀情况、骨折愈合时间、血液流变学指标、髋关节功能、日常生活能力、生活质量及并发症。观察组术后VAS评分、肿胀处周径差低于对照组,骨折愈合时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后7d时血清D-D、血浆黏度、FIB指标低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后3个月关节功能、畸形、疼痛程度、关节活动度及总分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究发现,补肾活血汤联合InterTAN内固定可增强老年ITF治疗效果,减轻术后疼痛、肿胀,改善患者血液流变学指标,缩短骨折愈合时间,促进关节功能恢复,且并发症少。

补肾健脾强骨汤联合唑来膦酸治疗骨质疏松的效果及对激素、骨代谢的影响

目的:分析补肾健脾强骨汤联合唑来膦酸治疗骨质疏松(Osteoporosis,OP)的效果及对激素、骨代谢的影响。方法:选取我院2020年4月~2022年3月收治80例OP患者为例,随机法将其分为2组,对照组(n=40例)采取唑来膦酸,观察组(n=40例)另加用补肾健脾强骨汤治疗,对比两组疗效、骨代谢指标、激素指标、腰椎功能。结果:观察组治疗有效率97.50%高于对照组70.00%(P<0.05)。治疗后,两组骨代谢指标、激素指标、腰椎功能对比(P<0.05)。结论:对OP患者采取补肾健脾强骨汤联合唑来膦酸治疗,可显著改善其临床症状,提高其腰椎功能,可推广应用。

基于脏腑学说探讨补肾通痹法对膝骨关节炎的疗效及炎性细胞因子的影响

目的:基于脏腑学说探讨补肾通痹法治疗膝骨关节炎(KOA)的疗效。方法:选取2019年3月至2020年4月就诊于石家庄市人民医院的KOA患者90例,按随机数字表法分为2组,每组45例,对照组给予服用双氯芬酸钠缓释胶囊,试验组给予补肾通痹汤联合艾灸及双氯芬酸钠缓释胶囊,治疗30 d,比较2组的膝关节疼痛视觉模拟量表评分(VAS)、西安大略麦克马斯特大学骨关节炎指数评分(WOMAC)、临床疗效及血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果:治疗后,试验组有效率高于对照组(P<0.05),2组VAS、WOMAC评分及血清IL-6、TNF-α水平比较,均较治疗前下降(P<0.05),且试验组低于对照组(P<0.05)。结论:补肾通痹法治疗KOA可有效减轻临床症状,降低炎性细胞因子水平,具有良好的临床疗效。

补肾健脾汤、血液透析治疗慢性肾脏功能衰竭的临床效果分析

目的:分析补肾健脾汤、血液透析治疗慢性肾脏功能衰竭的临床效果。方法:选取2018年1月—2023年1月常州市中医医院收治的慢性肾脏功能衰竭患者62例为研究样本,随机分为新式组与传统组,各31例。传统组患者予以常规治疗(血液透析方案),新式组患者在传统组基础上使用补肾健脾汤治疗疾病,比较两组肾脏功能指标、治疗效果及血液净化指标。结果:干预后,新式组患者内生肌酐清除率水平高于传统组,尿素氮、血清肌酐水平低于传统组,差异有统计学意义(P<0.05);新式组患者治疗效果总有效率高于传统组,差异有统计学意义(P<0.001)。干预后,两组患者甲状旁腺激素水平降低,新式组低于传统组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:慢性肾脏功能衰竭患者应用补肾健脾汤、血液透析治疗可以改善肾脏功能指标、血液净化指标,提升疾病治疗效果。

益气补肾止喘汤与布地奈德联用对咳嗽变异性哮喘患儿中医证候及肺功能的影响

目的:评价益气补肾止喘汤与布地奈德联合治疗对咳嗽变异性哮喘(CVA)患儿中医证候及肺功能的影响。方法:依随机分组法将我院2021年2月—2022年9月接收的124例CVA患儿分为常规组(62例)、研究组(62例)。常规组予以布地奈德治疗,研究组予以益气补肾汤联合布地奈德治疗。比较两组疗效、不良反应、治疗前后中医证候积分、肺功能相关指标[呼出一氧化氮(FeNO)、第1秒最大呼气流量(FEV_(1))、呼气峰流速(PEF)]、炎症相关指标[血清淀粉样蛋白A(SAA)、水通道蛋白5(AQP5)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素-4(IL-4)]水平。结果:研究组总有效率(95.16%,59/62)高于常规组(75.81%,47/62)(P<0.05);治疗后研究组咳嗽、咽干咽痒、咳痰、胸闷气短等积分低于常规组(P<0.05);治疗后研究组FeNO低于常规组,FEV1、PEF高于常规组(P<0.05);治疗后研究组SAA、TGF-β1、IL-4水平均低于常规组,AQP5水平高于常规组(P<0.05);研究组不良反应总发生率(4.84%,3/62)与常规组(9.68%,6/62)相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益气补肾止喘汤与布地奈德联合治疗CVA疗效确切,能抑制炎症反应,改善肺功能,缓解临床体征、中医证候,促进恢复,安全可靠。

补肾活血汤提取物促进大鼠骨髓间充质干细胞体外迁移及CXCR4表达的研究

目的筛选补肾活血汤促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外迁移的活性部位并研究其对CXCR4蛋白表达的影响。方法补肾活血汤采用索氏提取法,得到石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇及水提物4个部位。全骨髓贴壁培养法培养BMSCs,取第三代(P3)BMSCs进行实验。补肾活血汤4个部位按照10,50,100μg·mL^(-1)浓度梯度对BMSCs进行Transwell实验,筛选出有效部位。使用Western blot和细胞免疫荧光检测补肾活血汤有效部位对CXCR4蛋白表达的影响。结果 Transwell结果显示,补肾活血汤石油醚部位具有明显促进大鼠BMSCs体外迁移的作用,以100μg·mL^(-1)浓度最佳(P<0.05)。Western blot、细胞免疫荧光结果显示,补肾活血汤石油醚部位呈浓度依赖性上调大鼠BMSCs的CXCR4蛋白表达(P<0.05)。结论补肾活血汤促进大鼠BMSCs体外迁移的有效部位为石油醚部位,其相关机制可能与上调CXCR4蛋白表达,激活SDF-1/CXCR4信号轴有关。

补肾健骨汤对膝关节病患者氧自由基代谢的影响

对５８例膝关节病患者用补肾健骨汤治疗前后的红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及血清脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量进行了动态检测。结果：患者治疗前ＳＯＤ活性低于正常，ＬＰＯ含量高于正常（Ｐ均＜０．０１）。经治疗病情好转者其氧自由基代谢指标相应改善，显效者恢复正常，无效者仍异常。提示氧自由基可能参入骨关节病的病理过程；补肾健骨汤治疗骨关节病的机理与其改善患者体内氧自由基代谢的紊乱状况有关。

微创髓芯减压打压支撑植骨术结合补肾活血汤口服治疗ARCOⅡ、Ⅲ期股骨头坏死的近期疗效观察

目的:观察微创髓芯减压打压支撑植骨术结合补肾活血汤口服治疗ARCOⅡ、Ⅲ期股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)的近期疗效。方法:将符合要求的61例91髋ARCOⅡ、Ⅲ期ONFH患者随机分为2组,联合治疗组32例47髋、手术治疗组29例44髋。2组均行微创髓芯减压、死骨清理、打压植骨、异体腓骨支撑术。联合治疗组在术后第3天开始服用补肾活血汤,每天1剂,连续服用6个月。采用陈卫衡教授制定的影像学评价标准,利用X线片评定患者治疗后股骨头形态的稳定性,同时采用Harris髋关节功能评分量表评定髋关节功能。结果:治疗后12个月,按照陈卫衡教授制定的影像学标准评定,联合治疗组稳定39髋、加重8髋,手术治疗组稳定36髋、加重8髋;2组患者股骨头形态稳定性比较,差异无统计学意义(Z=-0.145,P=0.885)。治疗前2组患者的Harris评分比较,差异无统计学意义(t=4.629,P=0.190);治疗后12个月2组患者的Harris评分均增加[(69.97±5.77)分,(89.00±2.70)分,t=19.965,P=0.000;(69.09±5.02)分,(85.84±2.93)分,t=18.654,P=0.000],联合治疗组的评分高于手术治疗组(t=5.355,P=0.000)。结论:微创髓芯减压打压支撑植骨术在短期内可有效防止ARCOⅡ、Ⅲ期ONFH患者股骨头塌陷,配合口服补肾活血汤则更有利于患者关节功能恢复。

口服补肾活血汤联合微创保髋术治疗股骨头坏死肾虚血瘀证的临床研究

目的：探讨口服补肾活血汤联合微创保髋术治疗股骨头坏死肾虚血瘀证的临床疗效和安全性。方法：回顾性分析52例60髋股骨头坏死肾虚血瘀证患者的病例资料，其中采用单纯微创保髋术28例，采用口服补肾活血汤联合微创保髋术24例。男30例37髋，女22例23髋。年龄26～48岁，中位数34岁。激素性股骨头坏死30例31髋，酒精性股骨头坏死20例27髋，外伤性股骨头坏死2例2 髋。按照国际骨循环研究会（the association research circulation osseous，ARCO）分期标准，ⅡA3例3髋、ⅡB35例43髋、ⅡC14例 14 髋。比较2组患者治疗前和治疗后12个月的 Harris 髋关节功能评分、治疗后并发症发生情况及治疗后12个月根据 Harris 总评分评价的临床综合疗效。结果：治疗前2组患者的 Harris 髋关节功能评分比较，差异无统计学意义[（17．1±4．8）分，（16．8±4．7）分，t ＝－0．532，P ＝0．684]；治疗后12个月，口服补肾活血汤联合微创保髋术组的 Harris 髋关节功能评分高于微创保髋术组[（41．2±2．9）分，（39．8±3．6）分，t ＝－3．175，P ＝0．012]，2组患者的 Harris 髋关节功能评分均增加（t ＝－13．520， P ＝0．001；t ＝－12．790，P ＝0．001）。治疗后12个月，微创保髋手术组 Harris 总评分（89．5±4．7）分，口服补肾活血汤联合微创保髋术组 Harris 总评分（90．3±3．8）分；微创保髋术组优16例、良10例、差2例，口服补肾活血汤联合微创保髋术组优16例、良7例、差1例；2组患者的临床综合疗效比较，差异无统计学意义（Z ＝0．729，P ＝0．466）。单纯微创保髋术组出现不明原因发热及手术切口周围肿痛1例、股骨头塌陷2例，口服补肾活血汤联合微创保髋术组出现不明原因的疼痛加重1例；2组并发症发生率比较，差异无统计学意义（χ2＝0．131，P ＝0．718）。结论：对于股骨头坏死肾虚血瘀证患者而言，口服补肾活血汤联合微创保髋术与单纯微创保髋术在临床综合疗效、安全性方面比较无明显差异，但是其在改善髋关节功能方面优于单纯微创保髋术，值得临床推广应用。

补肾祛瘀汤对子宫内膜异位症大鼠治疗的机制研究

目的研究补肾祛瘀汤对子宫内膜异位症(EMS)模型大鼠血管内皮生长因子(VEGF)及survivin蛋白的影响,探讨补肾祛瘀汤对EMS的疗效机制。方法 SD大鼠50只随机均分为5组:正常组、模型组、补肾祛瘀汤组、孕三烯酮组、补肾祛瘀汤加孕三烯酮组,除正常组外其余均采用大鼠子宫内膜组织自体移植手术建立子宫内膜异位症模型,灌胃给药28 d后检测各组大鼠血清中和子宫内膜移植物局部VEGF和survivin蛋白表达。结果与模型组比较,各治疗组大鼠VEGF及survivin蛋白含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论补肾祛瘀汤对大鼠子宫内膜异位症具有治疗作用,其作用机制可能与抑制异位内膜的血管新生有关,中西医结合治疗子宫内膜异位症效果更佳。

敦煌医方小补肾汤对镉染毒大鼠骨和肾功能的影响

目的:探讨敦煌医方小补肾汤对镉染毒大鼠骨和肾功能的影响。方法:将SPF级Wistar大鼠60只按体质量随机分为6组:空白组、乙酰半胱氨酸组、模型组及小补肾汤高、中、低剂量组。空白组腹腔注射0.9%Na Cl,其余5组均腹腔注射0.1%氯化镉,1.5 mg/kg注射,相当于1.5 m L/kg,每周5次,共5周,进行染毒。染毒的同时,分别给予相应干预,乙酰半胱氨酸组组予乙酰半胱氨酸泡腾片溶液(5.4 mg/m L)1 m L/100 g,小补肾汤各剂量组予相应剂量(高:2.7 g/m L,中:1.35 g/m L,低:0.675 g/m L)小补肾汤1 m L/100 g灌胃治疗,每天1次,连续5周。最后1次注射后,取血检测。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠血清钙、磷、骨钙素(OC)显著降低,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,乙酰半胱氨酸组、小补肾汤高中低剂量组大鼠血清钙、磷、OC显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组大鼠血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)、尿素氮(BUN)显著升高,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,乙酰半胱氨酸组、小补肾汤高中低剂量组大鼠血清ALP、TRACP-5b、BUN显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:小补肾汤对于镉染毒大鼠骨和肾功能具有一定的修复作用。

补肾抗衰汤对氧化应激所致的秀丽隐杆线虫生育缺陷的影响(英文)

目的:探讨补肾抗衰汤对秀丽隐杆线虫因氧化应激诱导所致生育缺陷的作用。方法:将终浓度为0.33g/mL的补肾抗衰汤按25%、50%、75%和100%梯度稀释后对L4期线虫培养。应激方式采用紫外线照射[20J/(m2.min)]、热休克(36℃,2h)和百草枯(2mmol/L,2h)处理。通过子宫内卵数、卵的大小和传代时间来评价秀丽隐杆线虫的生育能力。结果:野生型N2线虫经过紫外线照射、热休克和百草枯处理后,子宫内卵数、卵的大小均显著减少,传代时间明显增加;过氧化氢酶和过氧化物歧化酶活性被抑制。补肾抗衰汤对野生型线虫没有毒性或其他副作用。高浓度补肾抗衰汤不仅能够减轻由紫外线照射、热休克和百草枯所导致的生育缺陷,而且可以增加过氧化氢酶和超氧化物歧化酶被各种应激抑制的活性。此外,高浓度补肾抗衰汤可以明显恢复mev-1突变体线虫受损的生育能力。结论:氧化应激对生育能力有负面影响,高浓度补肾抗衰汤可明显逆转氧化应激所致的线虫生育缺陷。

补肾壮筋汤对腰椎间盘退变大鼠椎间盘及行为学特征影响的实验研究

目的:观察补肾壮筋汤对腰椎间盘退变大鼠椎间盘及行为学特征的影响,并观察其安全性。方法:选取40只清洁级8周龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、补肾壮筋汤组、吲哚美辛组,每组10只。应用椎间盘穿刺法对模型组、补肾壮筋汤组、吲哚美辛组大鼠L5~6椎间盘进行椎间盘退变造模,假手术组充分暴露L5~6椎间盘前缘,不进行穿刺干预。造模后24 h,补肾壮筋汤组大鼠以补肾壮筋汤(1.5 g·kg^(-1))灌胃,吲哚美辛组大鼠以吲哚美辛胶囊水溶液(7.5 mg·kg^(-1))灌胃,假手术组、模型组大鼠均以生理盐水(10 mL·kg^(-1))灌胃,每天1次,连续给药7周。分别于造模前及药物干预开始后1、3、5、7周时进行机械痛阈实验和斜板实验。最后一次行为学特征测定结束后,从眼底静脉丛取血测定血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,AAT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、肌酐(creatinine,CRE)、尿素氮(urea nitrogen,UN)的水平;取L5~6椎间盘、肝脏及肾脏,椎间盘组织分别进行HE染色、改良番红O-固绿染色后观察组织形态变化,肝脏及肾脏组织进行HE染色、Masson染色后观察组织病理改变。结果:(1)机械痛阈实验痛阈值。造模前及药物干预开始后不同时点痛阈值的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=36.245,P=0.000)。假手术组痛阈值随时间变化趋势不明显;模型组痛阈值随时间变化逐渐降低;补肾壮筋汤组和吲哚美辛组的痛阈值于药物干预开始后1周时降至最低,后期变化不明显。4组大鼠痛阈值总体比较,差异有统计学意义,即存在分组效应(F=54.170,P=0.000)。除造模前外(F=1.375,P=0.266),药物干预开始后各时点4组大鼠痛阈值比较,组间差异均有统计学意义(F=30.059,P=0.000;F=34.117,P=0.000;F=33.454,P=0.000;F=35.617,P=0.000);药物干预开始后各时点假手术组痛阈值均高于模型组(P=0.000;P=0.000;P=0.000;P=0.000);除药物干预开始后1周时外(P=0.197,P=0.191),其余各时点模型组的痛阈值均低于补肾壮筋汤组和吲哚美辛组(P=0.010,P=0.013;P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000);药物干预开始后各时点补肾壮筋汤组和吲哚美辛组痛阈值比较,组间差异均无统计学意义(P=0.100;P=0.067;P=0.108;P=0.097)。时间因素和分组因素存在交互效应(F=16.490,P=0.000)。(2)斜板实验角度。造模前及药物干预开始后不同时点斜板实验角度的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=3.746,P=0.019)。假手术组、补肾壮筋汤组和吲哚美辛组斜板实验角度随时间变化整体呈上升趋势;模型组斜板实验角度随时间变化整体呈下降趋势。4组大鼠斜板实验角度总体比较,差异有统计学意义,即存在分组效应(F=7.640,P=0.000)。造模前及药物干预开始后1周和3周时,4组大鼠斜板实验角度比较,组间差异均无统计学意义(F=0.575,P=0.635;F=2.664,P=0.063;F=0.994,P=0.407)。药物干预开始后5周和7周时,4组大鼠斜板实验角度比较,组间差异均有统计学意义(F=9.666,P=0.000;F=2.685,P=0.006);假手术组斜板实验角度均大于模型组(P=0.000;P=0.026),模型组斜板实验角度均小于补肾壮筋汤组和吲哚美辛组(P=0.000,P=0.007;P=0.000,P=0.042),补肾壮筋汤组斜板实验角度均大于吲哚美辛组(P=0.000;P=0.047)。时间因素和分组因素存在交互效应(F=2.934,P=0.012)。(3)血清学检测结果。药物干预结束后4组大鼠血清中AAT、AST、CRE、UN含量比较,组间差异均无统计学意义(F=1.023,P=0.398;F=0.237,P=0.869;F=0.629,P=0.602;F=1.141,P=0.350)。(4)组织学检测结果。HE染色及改良番红O-固绿染色显示,与模型组相比,补肾壮筋汤组和吲哚美辛组大鼠腰椎间盘组织退变程度较轻,3组中补肾壮筋汤组椎间盘组织退变程度最轻;肝、肾组织HE染色和Masson染色显示,模型组、补肾壮筋汤组及吲哚美辛组均未见肝、肾组织纤维化。结论:补肾壮筋汤在延缓腰椎间盘退变大鼠椎间盘退变及改善其行为学特征方面具有一定作用,效果略优于吲哚美辛,短期应用不会对肝肾组织及肝肾功能造成损伤。

补肾活血汤含药血清干预体外培养大鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化及补肾活血汤联合骨髓间充质干细胞治疗大鼠膝骨关节炎的实验研究

目的:观察补肾活血汤含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cell,BMSC)成软骨分化的作用,及补肾活血汤联合BMSC治疗大鼠膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的作用。方法:从4周龄SD大鼠股骨中分离培养BMSC,以8周龄SD大鼠制备补肾活血汤含药血清和空白血清。选择体外培养的第3代BMSC,分为3组,分别加入含10%空白血清的DMEM培养液(空白组)、含10%空白血清的DMEM培养液及基础诱导液(诱导组)、含10%补肾活血汤含药血清的DMEM培养液及基础诱导液(含药血清组),干预后分别进行甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色,并以Real-time PCR法检测各组细胞中Ⅱ型胶原mRNA、聚集蛋白聚糖mRNA的水平。取18只8周龄SD大鼠,随机分为模型组、BMSC组及联合组,每组6只。通过切断右前交叉韧带对各组大鼠进行KOA造模。造模术后1周,向BMSC组与联合组大鼠右侧膝关节腔内注射5×10~6个·m L^(-1)BMSC-PBS溶液(每次0.1 m L,每周1次),向模型组大鼠右侧膝关节腔注射等量PBS溶液;联合组在关节腔注射的基础上每天以补肾活血汤灌胃(每次4 m L,每天1次)。干预8周后处死大鼠,取右侧膝关节软骨及软骨下骨组织,HE染色后在光学显微镜下观察。结果:干预7 d后,含药血清组细胞甲苯胺蓝染色呈阳性,细胞质呈蓝紫色;空白组和诱导组染色均为阴性。干预14 d后,含药血清组染色进一步加深,染色面积增大,呈明显的紫蓝色;空白组染色为阴性,诱导组可见少量蓝紫色染色。干预7 d、14 d后,Ⅱ型胶原免疫组化染色结果显示,空白组细胞均未见明显阳性染色,诱导组及含药血清组细胞胞浆和细胞间质内呈棕黄色或棕褐色染色,其中干预14 d后含药血清组细胞内染色深于诱导组。干预7 d后,3组大鼠BMSC中Ⅱ型胶原mRNA水平、聚集蛋白聚糖mRNA水平比较,组间差异均有统计学意义(1.02±0.23,1.33±0.11,2.11±0.23,F=47.181,P=0.000;1.03±0.32,1.36±0.16,1.93±0.10,F=26.508,P=0.000)。含药血清组的Ⅱ型胶原mRNA水平、聚集蛋白聚糖mRNA水平均高于空白组和诱导组(P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000),诱导组的Ⅱ型胶原mRNA水平、聚集蛋白聚糖mRNA水平均高于空白组(P=0.017;P=0.029)。药物干预8周后,模型组大鼠膝关节软骨表面粗糙,破坏严重,可见明显纤维增生;BMSC组软骨可见部分修复,表面仍较粗糙,细胞纤维化不明显;联合组关节软骨面光滑,软骨表面磨损不明显,无软骨表面纤维化。结论:补肾活血汤含药血清能有效促进体外培养的大鼠BMSC向软骨细胞分化;补肾活血汤灌胃联合BMSC膝关节腔内注射能有效防治KOA大鼠膝关节软骨破坏。