滋肾清热利湿化瘀方治疗多囊卵巢综合征的网络药理学作用机制及实验研究

目的采用网络药理学探讨滋肾清热利湿化瘀方(Zishen Qingre Lishi Huayu Prescription,ZQLHP)治疗多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)的作用机制,并进行实验验证。方法基于网络药理学预测滋肾方的核心成分、靶基因和主要通路,对其中PCOS相关成分、靶基因、通路进行筛选;采用来曲唑(letrozole,LET)诱导PCOS小鼠模型,观察滋肾方对PCOS小鼠的作用,并对网络药理学结果进行机制验证。结果网络药理学结果表明,滋肾方456个成分中含有361个相关靶点,PCOS相关靶点1397个,交集靶点125个;获得槲皮素、豆甾醇、β-谷甾醇等主要活性成分与丝裂原活化蛋白激酶3(mitogen-activated protein kinase 3,MAPK3)、蛋白激酶1(AKT serine/threonine kinase 1,AKT1)和信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)等核心靶点;GO分析得到BP 663条目,CC 64条目,MF 119条目,其中富集基因数量较多的条目为negative regulation of apoptotic process,plasma membrane,protein binding;KEGG分析显示潜在作用靶点主要富集在癌症信号通路、PI3K-AKT和TNF等信号通路;PPI网络分析结果显示,MAPK3、AKT1和STAT3可能是滋肾方治疗PCOS的关键靶点。动物实验结果表明,与模型组比较,滋肾方组的小鼠的体重降低(P<0.05),且能有效改善PCOS模型小鼠的组织病理学表现,囊性卵泡数量降低(P<0.05),黄体数量增加(P<0.01)。降低卵巢组织中IL-10水平(P<0.01),升高IL-6、TNF-α水平(P<0.05,P<0.01)。Western blot和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)结果显示,PCOS小鼠卵巢组织p-AKT蛋白表达量下降(P<0.05,P<0.01),p-p38MAPK和p-STAT3蛋白表达较正常组升高(P<0.05,P<0.01),而经滋肾方治疗后p-AKT蛋白表达上升(P<0.05),p-p38MAPK和p-STAT3蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论滋肾方可能通过调控AKT/p38MAPK/STAT3信号改善来曲唑诱导的PCOS小鼠的炎性损伤。

补虚化瘀组方治疗原发性胆汁性胆管炎的效果

目的探究补虚化瘀组方对原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC)中医临床症状及免疫功能的影响。方法选取80例PBC患者作为研究对象,用单双球法随机分为对照组和治疗组,每组40例。对照组给予基础治疗,治疗组在基础治疗的基础上予以补虚化瘀组方治疗。比较治疗前和治疗6个月后,2组患者中医症候积分(腹胀、胁肋疼痛、乏力、皮肤瘙痒及大便不调)、肝功能指标[天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷氨酰转肽酶(glutamyl transpeptidase,GGT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)及总胆红素(total bilirubin,TB)]、免疫功能[免疫细胞(CD4^(+)、CD8^(+))、免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)及免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)],记录2组患者不良反应(头晕、恶心呕吐、腹泻及皮疹)的发生情况。结果治疗6个月后,2组患者的中医症候积分、肝功能指标及免疫功能均降低,且治疗组低于对照组(均P<0.05);6个月内,治疗组熊去氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA)应答率高于对照组(P<0.05),2组患者总不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论补虚化瘀组方可以改善PBC患者中医临床症状及肝功能,增强患者免疫力,减少不良反应的发生。

基于网络药理学及分子对接探讨温阳化瘀解毒方治疗结直肠癌作用机制

目的 通过网络药理学及分子对接探讨温阳化瘀解毒方治疗结直肠癌作用机制。方法 通过HERB数据库检索温阳化瘀解毒方活性成分及相关靶点,利用DisGeNET数据库检索结直肠癌相关疾病靶点,将药物活性成分与疾病靶点取交集,上传至STRING平台构建蛋白相互作用网络;利用Cytoscape3.7.2软件构建中药-活性成分-靶点网络;利用OmicShare平台对核心靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析,利用CB-Dock2数据库进行分子对接。结果 温阳化瘀解毒方治疗结直肠癌交集靶点共142个,核心靶点包括TP53、AKT1、TNF,涉及黄芩素、大黄素、没食子酸等活性成分;GO功能富集分析结果显示,温阳化瘀解毒方可能参与细胞增殖、免疫系统过程、生物过程的负调控等方面;KEGG通路富集分析结果显示,温阳化瘀解毒方可能涉及AGE-RAGE、MAPK及TNF等信号通路。分子对接结果表明,芹菜素、粉防己碱、芦荟大黄素、大黄素、黄芩素和β-榄香烯与TP53之间结构稳定,结合活性良好。结论 温阳化瘀解毒方治疗直肠癌作用靶点与TP53密切相关,可能通过败酱草、大黄、赤芍和细辛中多种活性成分作用于TP53,从而抑制结直肠癌进展。

补虚化瘀方对联合化疗荷瘤小鼠骨髓造血功能的影响

目的观察补虚化瘀方对联合化疗荷瘤小鼠骨髓造血的作用。方法采用P388瘤株造成荷瘤小鼠模型后,再以环磷酰胺、阿糖胞苷腹腔注射获得联合化疗荷瘤小鼠骨髓抑制模型,实验分为正常组、模型组及补虚化瘀方组,进行血常规、骨髓有核细胞(BMC)计数、粒单系祖细胞(CFU-GM)集落计数、骨髓细胞增殖能力测定。结果联合化疗可致荷瘤小鼠血红蛋白(Hb)、白细胞计数(WBC),BMC、CFU-GM集落计数及骨髓细胞增殖能力明显低于正常组(P<0.01),补虚化瘀方可提高联合化疗荷瘤小鼠外周血Hb、WBC数,提高BMC、CFU-GM集落计数及骨髓细胞增殖能力(P<0.01)。结论补虚化瘀方对联合化疗荷瘤小鼠骨髓抑制模型具有保护造血细胞和促进其化疗损害后的修复作用。

基于GEO数据挖掘与网络药理学探讨活血化瘀方治疗口腔扁平苔藓的机制研究

基于GEO数据库挖掘OLP的潜在治疗靶点,基于网络药理学分析活血化瘀方治疗OLP的主要化学成分、潜在作用靶点与治疗机制。采用R语言爬取GEO数据库中GSE52130数据集,通过差异分析得出OLP的异常表达基因;基于TCMSP数据库获取活血化瘀方中相关化学成分与靶点,利用Perl、Cytoscape软件和String绘制该药方成分-靶点网络与蛋白-蛋白互作网络;通过R语言完成关键靶基因的基因本体论(GO)分析与基因组百科全书(KEGG)分析。结果表明:活血化瘀方治疗OLP的关键化学成分共28个,包括槲皮素、山奈酚、豆甾醇等;核心作用靶点共13个,包括IL-1β、PTGS2(COX-2)、MAO等。KEGG分析发现活血化瘀方可影响神经递质代谢、巨细胞病毒感染、AGE-RAGE等通路,为后续中医药治疗口腔扁平苔藓的深入研究提供理论参考。

基于网络药理学研究扶正化瘀方抗肝纤维分子机制

目的:基于网络药理学方法分析扶正化瘀方抗肝纤维化分子机制研究。方法:利用OMIM、GeneCards等数据库获得肝纤维化相关靶点,采用Venn图对扶正化瘀方活性成分作用靶点和肝纤维化相关靶点进行交互处理;利用String数据库和metascape数据库对交互靶点进行基因和信号通路注释,明确扶正化瘀方抗肝纤维化的分子机制。结果:选择了扶正化瘀方中的抗肝纤维化成分:有桃仁中的苦杏仁苷、丹参中的丹酚酸B和虫草菌丝中的虫草等。其中丹参主要化学成分为水溶性成分(丹参素、丹酚酸A及B、迷迭香酸、原儿茶酸、原儿茶醛等)和脂溶性成分(二氢丹参酮I、丹参酮IIA等)。丹参酮类是丹参的主要脂溶性成分,主要包括TanⅡA、隐丹参酮(cryptotanshinone,CPT)、丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮等。TanⅡA是含量最多、目前研究最为深入的丹参酮。TanⅡA属二萜醌类化合物,具有抗炎、抗肿瘤、心血管保护等多种活性。通过TCMSP数据库对扶正化瘀方的这些活性成分进行筛选,并获得扶正化瘀方活性成分作用靶点。将获得的作用靶点,通过UniProt数据库将其转换为基因名,并将其导入String数据库获得作用靶点互作数据,利用Cyctoscape3.4.0构建互作网络。通过OMIM、GeneCards数据库获得肝纤维化相关靶点蛋白,对化合物靶点与肝纤维化靶点进行交互处理,获得重叠靶点。结论:体现了扶正化瘀方多靶点-多通路的作用特点,其所作用的多条通路均存在关联性,为进一步研究提供了良好的基础。

扶正解毒化瘀方拆方的体外抑菌作用及其对抗生素体外抑制多重耐药铜绿假单胞菌作用的研究

目的:观察扶正解毒化瘀方拆方含药血清的抑菌作用及其对4种抗生素体外抑制多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)作用的影响。方法:将该方拆分为4组,即扶正组、解毒组、化瘀组、化痰组,使用微量稀释法检测拆方血清对4种抗生素体外抑制MDRPA的最小抑菌浓度(MIC)影响。结果:空白血清及含药血清对MDRPA无显著抑菌作用;但在较高浓度下,即扶正组、解毒组、化痰组占体系≥20%、化瘀组≥15%,具有较弱的抑菌作用。解毒组、化痰组血清能降低哌拉西林他唑巴坦钠对MDRPA的MIC值,从512μg/mL降至256μg/mL;解毒组血清能降低亚胺培南西司他丁钠对MDRPA的MIC值,从8μg/mL降至4μg/mL。结论:扶正解毒化瘀方拆方血清在高浓度时具有弱抑菌作用,解毒组血清能一定程度恢复哌拉西林他唑巴坦钠和亚胺培南西司他丁钠对MDRPA的敏感性,化痰组血清能一定程度恢复哌拉西林他唑巴坦钠对MDRPA的敏感性。