油桐尺蠖病毒杀虫剂的药效分析

油桐尺蠖核型多角体病毒（BsSNPV）是一种高致病力的病毒株，生物测定nPIB（LC50）=1．657×104mL．经过全国7个省20多个单位联合试验，生物统计结果表明：BsSNPV防治第1代油桐尺蠖虫口下降率为97．2％；防治第2代油桐尺蠖虫口下降宰为93．97％；F测验其t值为0．184，小于理论t0．05（29）＝2．045．优于敌百虫、DDVP、辛硫磷和BT等农药是一种杀虫效果稳定、使用安全、经济有效的生物杀虫剂．

油桐尺蠖核型多角体病毒(BusuNPV)生物学与检测技术研究

油桐尺蠖（Buzura suppressartia Guenee）又称油桐尺蛾、大尺蠖,是一种暴食性害虫,主要危害茶、油桐、柑桔、杨梅、桉树等多种植物,常造成巨大的经济损失。国内主要分布在湖北、湖南、广东、广西等地区,国外在孟加拉西部以及印度地区有分布。目前对其采取的治理方法主要为化学农药防治,虽能起到一定的防效,却带来了污染环境,伤害天敌,生态环境平衡失调,降低茶叶、柑橘。

油桐尺蛾肠道菌群与桉树叶片内生菌差异分析

[目的]植食性昆虫肠道微生物的多样性与其食物密切相关,本研究通过探讨油桐尺蛾(Buzura suppressaria)幼虫肠道菌群及其取食的桉树叶内生菌群的多样性,分析两者之间的关系。[方法]利用Illumina Miseq技术对油桐尺蛾5龄幼虫肠道和桉树叶部内生的细菌16s rDNA和真菌ITS rDNA进行测序,分析油桐尺蛾肠道和桉树叶部内生的细菌和真菌的多样性和丰度。[结果]油桐尺蛾肠道细菌共注释到6门、11纲、19目、38科、43属,真菌共注释到8门、29纲、67目、159科、257属;桉树叶部内生细菌共注释到10门、19纲、26目、54科、74属,真菌共注释到8门,31纲,79目,171科,291属。桉树叶内和油桐尺蛾肠道中均发现桉树主要病害病原菌所属菌属,分别为炭疽菌属(Colletotrichum)、假单胞菌属(Pseudomonas)、假尾孢属(Pseudocercospora)、短梗霉属(Aureobasidium)、壳针孢属(Septoria)、毛色二孢属(Lasiodiplodia)、新壳梭孢属(Neofusicoccum)。[结论]油桐尺蛾肠道的细菌、真菌的多样性和丰度与桉树叶之间存在差异,桉树叶对油桐尺蛾肠道微生物的群落结构有重要影响,而携带某些病原菌的油桐尺蛾啃食或其排泄物接触可能是导致该病原菌侵染健康桉树叶的原因。

油桐尺蛾核型多角体病毒lef-8基因结构及系统进化分析

lef-8基因作为杆状病毒重要的早期表达基因,编码病毒RNA聚合酶的最大亚基。本文通过对油桐尺蛾核型多角体病毒lef-8基因进行测序,对其基因结构及其在杆状病毒中的系统进化进行了分析。发现lef-8基因在油桐尺蛾核型多角体病毒中编码区长2 634 bp,编码877个氨基酸。在5’-UTR区具有可能为其启动子及转录起始位点的信号序列,在3’-UTR区具有加尾信号序列,但这些序列的具体功能还有待进一步研究。其蛋白序列与常见的模式NPV同源性较低,但具有共同的签名序列。通过对杆状病毒lef-8基因的系统进化分析,发现颗粒体病毒和核型多角体病毒明显分为两支,而核型多角体病毒中又明显分为4个分支,其进化关系在很大程度上与其寄主的进化关系相关。

油桐尺蠖越冬蛹在桉树林空间分布型及其生物学特性研究

于2015年3—4月、11月,在油桐尺蠖Buzura suppressaria Guenée危害的桉树人工林,采取逐株、随机抽取样树的方法调查油桐尺蠖越冬蛹分布情况;采用5种聚集度指标法分析越冬蛹空间分布格局;室内人工饲养观察雌雄蛹形态、寄生蜂与成虫羽化、性比等生物学特性。结果表明:油桐尺蠖越冬蛹在桉树林主要分布在距树干基部半径0~60 cm、深度0~10 cm的土层,呈聚集分布,环境因素是聚集原因。雌蛹臀棘端部分叉,雄蛹臀棘端部不分叉,雌雄性比为2.5∶1;成虫羽化孔呈纵裂状,羽化率为46.67%,雌雄性比为1.5∶1;寄生蜂为强姬蜂Cratichneunon sp.,羽化孔呈圆孔状,寄生率为29.33%,性比1∶1。

油桐尺蛾核型多角体病毒广西株全基因组序列

油桐尺蛾核型多角体病毒广西株基因组序列由Sanger测序的方法得到。拼接后获得了121 268 bp序列,GC含量为36.76%。以长度不小于50 aa的序列认定为功能基因,共预测到131个开放阅读框,通过Blast比对,其中87个能注释到功能基因。对基因组序列进重复序列分析,共发现SSR位点174个,同源重复序列1个。在SSR位点中,包含6种长度的重复基序,且以富含AT的重复基序为主。同源重复序列两端为一59 bp片段或其一部分组成的重复序列,两端分别重复12次和7次,中间则为一段与重复片段无关的236 bp片段。与武汉株相比,广西株病毒在37个核心基因中有4个存在蛋白序列长度上的差异,而在其他非核心基因中有6个基因仅存在于一个病毒株中,另有13个基因存在蛋白序列长度上的差异。

油桐叶品质对油桐尺蠖生长发育的影响

用上年受害树和未受害树的当年新发叶在室内饲养油桐尺蠖幼虫，并用Folin－Denis分析方法测定了当年受害叶，受害后新发叶和未受害叶的总单宁含量。结果表明，取食受害叶的幼虫比取食未受害叶者存活率低20．5％，发有速度慢2天，体长短5.0mm，蛹重轻25．3％。叶内总单宁含量不因受害而上升，反而呈下降趋势，说明叶内成分中影响幼虫生长发育的是非单宁物质。

油桐尺蠖单粒包埋核型多角体病毒(BusuNPV)BamHI-H片段的序列分析

对油桐尺蠖单粒包埋核型多用体病毒（Buzurasuppressariasingle－nucleocapsidnucleopolyhedrovirus，BusuNPV）基因组中BamHI－H片段的序列进行分析，该片段全长2422bp，包括三个开放阅读框：p47基因（AcMNPVORF40的同源区）的5′端，完整的组织蛋白酶基因（cathepsin）（AcMNPVORF127的同源区）和p74基因（AcMNPVORF138的同源区）的3′端。序列比较分析表明，BusuNPV的这三个基因与其它杆状病毒的同源基因具有相同的结构保守区。BusuNPV基因组BamHI－H片段上这三个基因的排列顺序完全不同于AcMNPV相应基因的排列顺序。

油桐尺蠖幼虫对3种桉树无性系的取食选择性初探

采用叶碟法对油桐尺蠖幼虫取食3种桉树无性系叶片的选择性差异进行了研究。结果表明:油桐尺蠖幼虫对DH184-1(尾赤桉Eucalyptus urophylla×E.camaldulensis)、GL-WC3(尾赤桉E.urophylla×E.camaldulensis)和GL-UG9(巨尾桉E.grandis×E.urophylla)桉叶取食量没有明显差异(P<0.05),均为其理想寄主;油桐尺蠖幼虫对GL-UG9桉叶的成熟叶的取食量明显大于老叶(P<0.05)。

保存时间对油桐尺蠖核型多角体病毒杀虫剂毒力的影响

以半合成人工饲料饲养的8天龄油桐尺蠖幼虫为供试虫,测定用同一标准方法生产的油桐尺蠖核型多角体病毒杀虫剂的毒力。当年生产的病毒杀虫剂感染幼虫,其死亡率达97.03％,LC50为2.35×10~3PIB/ml。室温保存2年、7年和10年的病毒杀虫剂,其病毒活性分别丧失6.1％,20.6％和90.2％。

油桐尺蠖核型多角体病毒(羊楼洞株)基因组特性

用多种限制性内切酶单酶切、双酶切分析了油桐尺蠖核型多角体病毒（羊楼洞株）基因组DNA，同时用[α－32p）－dATP对几种酶的酶切产物进行末端标记。结果表明，此株病毒基因组约129kb，组成比较单一。与国内其它分离株基因组大小及酶切电泳图谱均有较大差别。

油桐尺蠖核型多角体病毒感染Bs484细胞的研究

本文报道利用油桐尺蠖核型多角体病毒感染处于不同培养基及不同培养时间的Ｂｓ４８４细胞的部分感染效果和特征。结果表明，细胞培养基的类型和细胞传代后的时间对病毒感染率和多角体产量以及其它感染特征都有比较明显的影响；经过比较，处于Ｇｒａｃｅ培养基组的传代后三天的Ｂｓ４８４细胞是一个理想的ＢｓＮＰＶ感染受试系统。同时发现，健康的油桐尺蠖血淋巴具有提高细胞活性及病毒感染效果的作用。

油桐尺蠖核型多角体病毒毒力的生物测定

我们分离的油桐尺蠖(Buzura suppressaria)核型多角体病毒(BsNPV)GW-846是一种极有潜力的生物杀虫剂。本文通过叶片感染,添食饲喂进行其毒力的生物测定,感染剂量与三龄幼虫死亡率的回归直线方程为y=2.23+x。由此计算的LD_(50)为5.91×10~2/cm^2叶片。当感染剂量为1.25和2.0×10~4PB/头虫时,LT_(50)为4.8和4.9d,各龄幼虫均很敏感。五龄幼虫的LT_(50)也只有7.7d。工作中,我们推导了一个计算死亡率的公式,有一定的实用价值。

油桐尺蠖核多角体病毒多角体蛋白基因定位与克隆

以[^(32)P]-dATP标记含AcNPV DNA的EcoRI-I片段的重组质粒为探针,在35℃条件下对油桐尺蠖核多角体病毒(BsNPV)多角体蛋白基因进行了定位,将其分别定位在BamH Ⅰ-A,Bgl Ⅰ-A,Bgl Ⅱ-F,EocR Ⅰ-R,Hind Ⅲ-A,Kpn Ⅰ-Ⅰ,Pst Ⅰ-D,Xba Ⅰ-A(或B),Xho Ⅰ-F和G片段上,并以M13mp18为载体,克隆了Kpn Ⅰ-Ⅰ片段。

油桐尺蠖核型多角体病毒增殖及其活性检测

为探索利用油桐尺蠖核型多角体病毒(BuSuNPV)来防控危害桉树的油桐尺蠖的方法,以一定浓度的病毒感染室内人工饲养的油桐尺蠖幼虫,幼虫致死后分离提纯其上病毒并使其增殖,对所用增殖病毒感染的幼虫观测幼虫死亡率,并计算半致死浓度LC50、半致死量LD50、半致死时间LT50。结果表明BuSuNPV专一性强,对危害桉树上的油桐尺蠖幼虫具有较强的浸染力;病毒的增殖量随龄期增加而加大,2~5龄幼虫病毒的增殖量为2.06×105PIB^1×108PIB/虫,所增殖的病毒特异性强,对油桐尺蠖幼虫具有较强的致死性,其LC50=2.15×104PIB/mL,LD50=8.395×103PIB/头,以1×107PIB/mL感染3龄幼虫的LT50为6.7 d。说明用室内人工饲养的油桐尺蠖幼虫来增殖的BuSuNPV具有较高的杀虫活性,可考虑进一步开发利用用于林间防治该害虫。

油桐尺蠖核型多角体病毒DNA在3株昆虫细胞系中的转染

使用 DNA 磷酸钙共沉淀方法,把油桐尺蠖核型多角体病毒 DNA 导入3株昆虫细胞株。结果表明,同源细胞株的被转染率显著高于非同源细胞株。用间接免疫酶技术检测细胞中病毒多角体蛋白的存在来确定转染率的方法,可在转染21小时后就获得结果,该方法快速、简便。同时,还研究了吸附时间和病毒 DNA 浓度对转染的影响。

油桐尺蠖核型多角体病毒DNA聚合酶基因的克隆和序列分析

用PCR方法从油桐尺蠖核型多角体病毒 (BusuNPV)中扩增出DNA聚合酶基因片段 ,经pGEM T载体克隆到大肠杆菌DH5α菌株中。经自动序列分析仪测出DNA聚合酶基因 2 379bp长的核苷酸序列 ,推导出 793的氨基酸序列。氨基酸同源性比较显示 ,BusuNPV与HzSNPV的同源性最高 ,达 57% ;与OpMNPV的同源性最低 ,为 39.6 %。

油桐尺蠖防治指标的研究

本试验用人工剪叶方法,模拟油桐尺蠖对油桐的为害。结果表明,油桐尺蠖的为害对油桐的生长发育、产量和桐油的品质,均有不同程度的影响。为害程度(x)与产量损失率(y)之间,具有幂函数回归关系y=ax^b,按照Headley的防治指标原理,利用Chiang H C的防治指标计算公式,求得进行化防时,以成年树每株3龄幼虫数及卵块数为标准的防治指标分别为:第1代191.3条和1.06个印块;第2代212.8条和1.18个卵块。人工挖蛹的防治指标舞株蛹置为:第1代2.58个.第2代2.53个。

不同寄主植物对油桐尺蛾生长的影响

植食性昆虫取食寄主植物以维持自身生长发育,不同寄主植物的营养成分和次生代谢物存在较大差别,同一种植食性昆虫取食不同寄主植物,其生长发育也存在差异。测定油桐尺蛾(Buzura suppressaria)幼虫分别取食桉树和油桐(Vernicia fordii)叶片后的增重及营养效应,研究不同寄主植物对油桐尺蛾生长的影响。结果表明,油桐尺蛾幼虫取食油桐叶后的体重、相对生长率、食物利用率和食物转化率明显高于取食桉树叶片的幼虫,相对取食速率则明显较低。初步证实油桐更利于油桐尺蛾的生长。

桉树害虫油桐尺蛾林间防治试验

摘要：对桉树害虫油桐尺蛾幼虫进行林问药剂防治试验，结果表明：使用单剂生物药剂0．6％阿维菌素水剂4000倍液、16000IU·mg^-1苏云金杆菌粉剂1000倍液喷雾防治幼虫，10d后的防治效果达89％～97％；使用混合化学药剂A3B3C3、A2B2C3和A1B3C3这3种组合喷雾防治油桐尺蛾幼虫，7d后的防治效果达84％以上；使用混合生物药剂a1b1c2、a1b3c3和a1b1c1这3种组合喷雾防治油桐尺蛾幼虫，10d后的防治效果达80％～96％；使用烟雾剂柴油5k＋20％氰戊菊酯乳油0．375kg、柴油5kg＋20％氰戊菊酯乳油0．25kg、柴油5kg＋20％氰戊菊酯乳油0．125kg喷雾防治幼虫，7d后的防治效果达89％以上。