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人类新基因Bzw2的克隆、抗体制备及表达分析 被引量:1
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作者 姚力群 李志 +3 位作者 江志钢 万永奇 吴秀山 袁婺州 《激光生物学报》 CAS CSCD 2011年第6期798-801,共4页
Bzw2(basic leucine zipper and W2 domains 2)基因是人类心脏发育候选基因,它由bzip结构域和W2结构域构成。为了研究该基因在心脏发育过程中的作用,利用生物信息学信息克隆了人类Bzw2基因全长,将所得的片段插入到原核表达载体pGEXT-4T-... Bzw2(basic leucine zipper and W2 domains 2)基因是人类心脏发育候选基因,它由bzip结构域和W2结构域构成。为了研究该基因在心脏发育过程中的作用,利用生物信息学信息克隆了人类Bzw2基因全长,将所得的片段插入到原核表达载体pGEXT-4T-1载体中,利用BL21菌株表达该重组质粒,经过IPTG诱导,得到GST-Bzw2融合蛋白,蛋白经纯化分离后免疫新西兰大白兔,并用Western blotting检测抗体效价。利用抗体进行了心脏,肌肉,脑组织表达检测,结果显示,Bzw2在心脏,肌肉,脑组织中高表达。 展开更多
关键词 bzw2 原核表达 多克隆抗体
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Bzw2 Promotes Proliferation and Lactation of Mammary Epithelial Cell in Dairy Goat 被引量:2
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作者 SUN Rui-qiu LI Qing-zhang +2 位作者 YAN Hong-bo ZHAO Jing GAO Xue-jun 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CSCD 2012年第11期1884-1891,共8页
Mitosis of mammary epithelial cell is foundation of mammal lactation. We developed a strategy of combined application of generation of longer cDNA fragments from the serial analysis of gene expression (SAGE) tags fo... Mitosis of mammary epithelial cell is foundation of mammal lactation. We developed a strategy of combined application of generation of longer cDNA fragments from the serial analysis of gene expression (SAGE) tags for gene identification (GLGI) to screen and identify genes influencing lactating ability of mammary epithelial cell in dairy goat. GLGI as a new tag identification technique was brought about with SAGE. Bzw2 was found as a candidate gene related to lactation by screening Long-SAGE library of mammary gland in dairy goat. Bzw2 cDNA was synthesized by switching mechanism at 5"-end of RNA transcript (SMART) technology. The mRNA level of Bzw2 was relatively higher in early lactation than in other development stages of mammary gland. The proliferation of mammary epithelial cell was inhibited by transfecting specific shRNA of Bzw2. The mRNA levels of Stat5, Csn2 and Prlr were also down-regulated, suggesting the lactating ability of mammary epithelial cell was attenuated after Bzw2 RNAi. The reduction of mammary epithelial cell growth and lactation by Bzw2 RNAi was rescued through over-expression of Bzw2. These results revealed that Bzw2 might play an important role in lactation though the molecular mechanism was still unclear. 展开更多
关键词 bzw2 mammary epithelial cells PROLIFERATION LACTATION RNAI OVER-EXPRESSION
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BZW2和IVD在肝癌组织中的表达及其对肝癌肝移植受者预后的影响 被引量:2
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作者 杜俊杰 刘仕成 +3 位作者 江哲龙 潘凡 江艺 吕立志 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期213-218,共6页
目的探讨碱性亮氨酸拉链和W2结构域2(BZW2)及异戊酰辅酶A脱氢酶(IVD)在肝细胞癌(肝癌)中的表达及其对肝移植受者预后的影响。方法回顾性分析87例肝癌肝移植受者的病理标本及临床资料,分析肝癌肝移植受者术后肿瘤复发转移情况。采用免疫... 目的探讨碱性亮氨酸拉链和W2结构域2(BZW2)及异戊酰辅酶A脱氢酶(IVD)在肝细胞癌(肝癌)中的表达及其对肝移植受者预后的影响。方法回顾性分析87例肝癌肝移植受者的病理标本及临床资料,分析肝癌肝移植受者术后肿瘤复发转移情况。采用免疫组织化学染色检测BZW2和IVD的表达情况,分析BZW2和IVD与肝癌临床病理参数的关系及其对肝移植术后肿瘤复发和受者预后的影响。结果87例受者中,共有31例肿瘤复发,复发率为36%,复发时间为术后2~49个月,复发时间中位数为7个月。免疫组织化学染色结果显示,肝癌组织的BZW2阳性表达率高于正常肝组织(76%比30%),IVD阳性表达率低于正常肝组织(51%比69%),差异均有统计学意义(均为P<0.01)。BZW2表达与肿瘤直径、有否肿瘤包膜有关(均为P<0.05),IVD表达与肿瘤直径,甲胎蛋白(AFP)水平,肿瘤、淋巴结、转移(TNM)分期,有否血管侵犯有关(均为P<0.05)。BZW2高表达组受者肿瘤累积复发率高于BZW2低表达组,累积生存率低于BZW2低表达组;IVD低表达组患者肿瘤累积复发率高于IVD高表达组,累积生存率低于IVD高表达组(均为P<0.05)。结论在肝癌组织中,BZW2蛋白表达水平上调,IVD蛋白表达水平下调。且BZW2高表达和IVD低表达的肝移植受者的累积复发率较高,累积生存率较低。 展开更多
关键词 肝细胞癌 肝移植 碱性亮氨酸拉链和W2结构域2(bzw2) 异戊酰辅酶A脱氢酶(IVD) 甲胎蛋白 血管侵犯 肿瘤包膜 肿瘤分期 肿瘤复发
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miR-4458靶向结合BZW2对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 魏志鸿 郭娟 +2 位作者 江哲龙 江艺 吕立志 《中华肝脏外科手术学电子杂志》 CAS 2023年第1期108-113,共6页
目的探讨miR-4458及其靶向蛋白BZW2在肝细胞癌(肝癌)中的表达及其对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法本研究标本来源于2019年1月至2020年12月中国人民解放军联勤保障部队第九〇〇医院收治的247例肝癌患者空腹血清、肝癌组织标本(... 目的探讨miR-4458及其靶向蛋白BZW2在肝细胞癌(肝癌)中的表达及其对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法本研究标本来源于2019年1月至2020年12月中国人民解放军联勤保障部队第九〇〇医院收治的247例肝癌患者空腹血清、肝癌组织标本(肝癌组),并收集同期200例健康志愿者空腹血清标本作为对照组。其中肝癌组男153例,女94例;年龄35~71岁,中位年龄49岁。对照组男120例,女80例;年龄30~70岁,中位年龄41岁。所有入组人员均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。采用实时荧光定量PCR检测两组患者miR-4458和BZW2 mRNA表达量;Western blot检测肝癌组织和癌旁组织中BZW2蛋白表达情况,分析肝癌组织中BZW2 mRNA表达量与患者临床病理特征的关系;生物信息学预测miR-4458和BZW2的作用关系,并采用双荧光素酶检测验证。培养和转染人肝癌细胞株HepG2,采用CCK-8法、Transwell实验检测调控miR-4458表达对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果肝癌组患者血清miR-4458平均相对表达量为0.85±0.23,明显低于健康对照组的1.06±0.30(t=-7.886,P<0.05)。肝癌组织miR-4458相对表达量为0.77±0.27,明显低于癌旁组织的1.23±0.35(t=-12.646,P<0.05)。肝癌组血清BZW2 mRNA相对表达量为1.67±0.44,明显高于健康对照组的1.13±0.29(t=13.674,P<0.05)。肝癌组织BZW2 mRNA相对表达量为1.98±0.31,明显高于癌旁组织的1.27±0.30(t=16.537,P<0.05)。肝癌组织BZW2蛋白相对表达量为1.57±0.44,明显高于癌旁组织的0.83±0.38(t=16.483,P<0.05)。肝癌组织BZW2 mRNA相对表达量与肝癌患者肿瘤直径、肿瘤包膜、微血管侵犯和肿瘤分化相关(t=-8.208,-13.248,-7.981,7.145;P<0.05)。生物信息平台预测并荧光素酶验证miR-4458和BZW2互为靶向关系。HepG2细胞转染miR-4458抑制剂后BZW2蛋白相对表达量为1.95±0.24,明显高于转染miR-4458模拟物的0.43±0.11(LSD-t=3.384,P<0.05)。HepG2细胞转染miR-4458抑制剂后24、48、72 h增殖、迁移和侵袭能力上调。结论肝癌患者中miR-4458低表达,BZW2高表达。miR-4458靶向结合BZW2后下调miR-4458表达可促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,可能与肝癌患者不良预后相关。 展开更多
关键词 肝细胞 微RNAS miR-4458 碱性亮氨酸拉链和W2结构域2 细胞增殖 细胞迁移 肿瘤侵润
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MSC-exo一种新型细胞递送工具转运靶向基因调控胰腺癌增殖效应分析
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作者 朱磊 李瑞雪 +4 位作者 鲍长磊 黄晨宸 梁书鑫 赵振林 朱洪 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第2期39-48,共10页
目的 观察1种新型细胞递送工具(MSC-exo)转运靶向基因调控胰腺癌增殖效应。方法 透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)和纳米颗粒跟踪分析技术(nanoparticle tracking analysis,NTA)鉴定人间充质干细胞外泌体(human me... 目的 观察1种新型细胞递送工具(MSC-exo)转运靶向基因调控胰腺癌增殖效应。方法 透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)和纳米颗粒跟踪分析技术(nanoparticle tracking analysis,NTA)鉴定人间充质干细胞外泌体(human mesenchymal stem cell exosomes,MSC-exo)并转运miR-450a-5p进入CFPAC-1,探讨miR-450a-5p靶向BZW2抑制胰腺癌细胞增殖效应。基因技术处理Pc-BZW2,CCK-8、EdU、细胞划痕、Transwell验证MSC-exo与MSC-exo-miR-450a-5p对细胞的抑制作用。结果 与胰腺正常组织相比miR-450a-5p在胰腺癌组织中低表达(P<0.05),CFPAC-1细胞MSC-exo-miR-450a-5p外泌体标记蛋白CD63、TSG101表达高于MSC-exo(P<0.05)。CCK-8、EdU、细胞划痕、Transwell实验显示MSC-exo-miR-450a-5p较MSC-exo可显著抑制CFPAC-1细胞增殖、侵袭和迁移(P<0.05)。通过双荧光素酶实验证实,miR-450a-5p靶向BZW2,并且RT-qPCR和免疫印迹检测miR-450a-5p和BZW2表达成负性相关(P<0.05)。过表达BZW2,CCK-8、EdU、细胞划痕、Transwell实验均证实,pc-BZW2逆转MSC-exo-miR-450a-5p对CFPAC-1的抑癌功能,免疫印迹检测PCNA、Ki-67、MMP2、MMP9,结果与上述实验一致(P<0.05)。结论 hMSC-exo是1种新的递送系统,靶向BZW2转运miR-450a-5p抑制胰腺癌细胞的生物学恶性,为胰腺癌靶向治疗研究提供了重要线索。 展开更多
关键词 胰腺癌 间充质干细胞 外泌体 miR-450a-5p bzw2
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胰腺癌患者BZW1和BZW2表达水平及其与预后的相关性分析
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作者 漆处梅 唐小龙 《医学信息》 2022年第21期26-33,39,共9页
目的 探讨基本亮氨酸拉链和含W2结构域的蛋白质1、2(BZW1,BZW2)对胰腺癌患者的预后价值。方法 截至2021年12月,提取癌症基因组图谱-胰腺腺癌(TCGA-PAAD)数据库中4名健康和178例胰腺癌患者的RNA-seq数据和对应的临床信息以及基因型-组织... 目的 探讨基本亮氨酸拉链和含W2结构域的蛋白质1、2(BZW1,BZW2)对胰腺癌患者的预后价值。方法 截至2021年12月,提取癌症基因组图谱-胰腺腺癌(TCGA-PAAD)数据库中4名健康和178例胰腺癌患者的RNA-seq数据和对应的临床信息以及基因型-组织表达数据库(GTEx)中167名健康人胰腺组织的RNA-seq数据。比较胰腺癌组织和正常组织中BZW1和BZW2的表达差异;受试者工作特征(ROC)曲线分析BZW1和BZW2在胰腺癌和正常组织中的预测准确性;时间依赖ROC曲线分析BZW1和BZW2的表达与时间相关的结局的预测效能;蛋白-蛋白互作网络(PPI)筛选与BZW1和BZW2相互作用的基因;京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)分析共表达基因的生物学功能和作用途径;免疫浸润分析BZW1和BZW2与免疫细胞的相关性;采用Kaplan-Meier曲线分析BZW1和BZW2的表达水平对胰腺癌患者预后的影响。结果 BZW1和BZW2在胰腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析显示,BZW1和BZW2的曲线下面积(AUC)和95%置信区间(CI)分别为0.974(0.954~0.994)和0.944(0.918~0.970);时间依赖ROC曲线分析显示,BZW1的表达预测胰腺癌患者1、3、5年总生存期的概率分别为0.611、0.673、0.825;BZW2的表达预测胰腺癌患者1、3、5年总生存期的概率分别为0.623、0.584、0.601;BZW1、BZW2及其共表达基因主要定位于细胞核膜上,具有翻译启动因子活性,参与细胞质翻译起始复合物的形成;BZW1与Th2细胞、T辅助细胞、Tcm细胞、Th1细胞、中性粒细胞和巨噬细胞呈正相关,与pDC细胞和Th17细胞呈负相关(P<0.05)。BZW2仅与Th2细胞呈正相关,与NK细胞、TFH细胞、pDC、肥大细胞、细胞毒性细胞、iDC细胞、B细胞、T细胞、CD8 T细胞、嗜酸性粒细胞、树突状细胞、Tem细胞呈负相关(P<0.05)。高表达BZW1与患者的主要治疗结果有关,而高表达BZW2与T分期、M分期、肿瘤分期和病理分级有关(P<0.05)。单因素Cox回归分析显示,BZW1、BZW2可作为预测胰腺癌患者总生存期的风险因子,高表达BZW1的胰腺癌患者拥有更短的总生存期、疾病特异性生存期和无进展间期,而高表达BZW2的胰腺癌患者拥有更短的总生存期和无进展间期。结论 BZW1和BZW2在胰腺癌组织中异常高表达,其水平升高与胰腺癌患者的不良预后有密切关系。因此,BZW1和BZW2可作为胰腺癌患者潜在的预后标志物。 展开更多
关键词 BZW1 bzw2 胰腺癌 预后标志物 生物信息学
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