二次免疫应答促进c—FOS蛋白表达的分子机制初探

目的：以小鼠为实验对象探讨二次免疫应答促进C—FOS蛋白表达的分子机制。方法：实验选用绵羊红细胞（SR—BC）作为外源性抗原免疫小鼠，注射生理盐水（NS）设置对照组，加强免疫后获得对外源性抗原刺激的高免疫应答实验组小鼠。取小鼠脑做石蜡切片应用SABC免疫组化方法检测其海马结构内c—Fos蛋白的表达，采用密度梯度离心法制备脾淋巴细胞悬液，细胞涂片染色检测小鼠血清中C—fos诱导因子的表达。结果：实验发现在免疫组小鼠与对照组小鼠之间C—FOS蛋白表达有统计学显著性差异（P〈0．05），实验组血清比较对照组血清更能促进C—FOS蛋白的表达。结论：可能是实验组血清内存在的诱导因子促进了c—Fos蛋白的表达。

热性惊厥大鼠海马区c-Fos蛋白表达及苔藓纤维发芽特征

目的探讨热性惊厥(FS)大鼠海马区c-Fos蛋白表达及苔藓纤维发芽(MFS)特征。方法21日龄雄性SD大鼠36只分为热性惊厥(FS)组、发热对照(FG)组及正常对照(NG)组,每组12只。采用热水浴法建立FS模型,应用免疫组织化学和Timm′s染色方法对海马CA1、CA3区的c-Fos蛋白表达和MFS进行观察。结果FS组大鼠海马CA1区有c-Fos蛋白过度表达,FS组c-Fos蛋白面积百分比[(2.26±0.23)%]较FG组[(1.08±0.19)%]和NG组[(0.71±0.14)%]高,FS组与其他两组的差异有显著意义(χ2=10.48 P<0.01);FS、FG、NG组c-Fos蛋白平均灰度值依次为(139.43±3.64)(、159.26±3.66)、(170.88±3.58),3组差异有显著意义(F=12.31 P<0.01)。NG组海马CA3区未见MFS,FS、FG组的MFS评分依次为(4.30±0.80)、(1.45±0.68)分,两组差异有显著意义(t=12.14 P<0.001),提示FS组海马CA3区出现显著的MFS;FS组大鼠惊厥2、6、10次后MFS的平均宽度及面积百分比依次为[(19.71±4.68)μm、(21.53±6.87)%]、[(28.57±5.19)μm、(38.22±7.15)%]及[(43.16±5.65)μm、(54.42±7.69)%],不同惊厥次数间的差异有显著意义(F=22.47 P<0.01;χ2=18.77 P<0.01)。结论FS发作可引起大鼠海马CA1区c-Fos蛋白过度表达,并促使CA3区异常苔藓纤维发芽。FS可导致近期及远期海马结构病变。

急性应激对小鼠空间学习记忆功能及海马和前脑皮层c-Fos蛋白表达的影响

采用足底电击急性应激模型,通过旷场实验和Morris水迷宫实验分别测试小鼠的行为和空间学习记忆能力;以免疫组织化学方法检测c-Fos蛋白在海马和前脑皮层的表达.结果显示,与对照组小鼠比较,急性应激组小鼠在新异环境下的自发行为明显降低(P<0.05,P<0.01),而在水迷宫实验中,急性应激组小鼠空间学习记忆能力明显提高(P<0.05,P<0.01);与对照组小鼠比较,急性应激组小鼠海马CA1区、齿状回和前脑皮层c-Fos蛋白的表达在应激后1h明显增强(P<0.05,P<0.05,P<0.01).结果提示,急性应激所致小鼠空间学习记忆功能的改变可能与c-Fos蛋白表达的上调有关.

莲心碱对大鼠局灶性脑缺血C-Fos蛋白表达的影响

目的观察莲心碱对大鼠局灶性脑缺血C-Fos蛋白表达的影响并探讨其保护作用机制。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型,通过免疫组化法检测脑缺血24 h C-Fos蛋白的表达以及经莲心碱(3 mg/kg)处理后对该蛋白表达的影响。结果脑缺血24 h C-Fos蛋白的表达明显增加,莲心碱可显著抑制脑缺血后C-Fos蛋白表达。结论莲心碱的神经保护机制可能与抑制C-Fos蛋白的表达有关。

莲心碱对大鼠脑缺血/再灌注后NOS和C-Fos蛋白表达的影响

目的:观察莲心碱对大鼠脑缺血/再灌注后一氧化氮合酶(NOS)和C-Fos蛋白表达的影响并探讨其作用机制。方法:将24只SD雄性大鼠随机平均分为假手术组、缺血/再灌组和莲心碱组。采用大鼠大脑中动脉线栓(MCAO)法制备局灶性脑缺血/再灌注模型,应用免疫组化法分别检测各组大鼠脑组织NOS和C-Fos蛋白表达。结果:与假手术组比较,大鼠脑缺血/再灌注24h后NOS和C-Fos蛋白的表达明显增多(P<0.01),莲心碱能明显减少大鼠梗死灶范围,减少脑缺血/再灌注后NOS和C-Fos蛋白表达(P<0.05)。结论:莲心碱对大鼠脑缺血/再灌注具有保护作用,其机制可能与抑制NOS和C-Fos蛋白的表达有关。

腺苷对大鼠缰核神经元自发放电活动及c-fos蛋白表达的影响

目的:观察腺苷(Adenosine,Ado)对缰核(Habenula nucleus,Hb)神经元单位放电的影响及外侧缰核内c-fos蛋白表达的变化,探讨腺苷对影响睡眠的缰核神经元活动及相关基因表达的影响及可能机制。方法:脑薄片灌注、腹腔内注射、原位免疫细胞化学等。结果:脑薄片灌注腺苷,导致内侧缰核神经元自发放电活动受到抑制,而外侧缰核神经元自发放电活动明显增加;腹腔注射腺苷0.5小时后,与注射生理盐水组相比较,外侧缰核c-fos蛋白的表达量明显增加。结论:腺苷对大鼠内侧缰核神经元自发放电起抑制作用,对外侧僵核神经元自发放电则有兴奋作用,并可促进外侧缰核c-fos蛋白表达,这为腺苷在外侧缰核内可促进睡眠提供了依据。

冠心病猝死心肌c-fos蛋白表达的研究

目的观察冠心病猝死(SCD)病例心肌c-fos蛋白的表达,探讨免疫组化检测心肌c-fos蛋白作为SCD诊断指标的可行性。方法运用免疫组化SABC法对86例尸检病例(SCD组46例、冠心病非猝死组20例及阴性对照组20例)心肌c-fos蛋白的表达进行检测,比较其表达差异。结果①自症状出现至死亡的时间>30min的SCD者心肌组织c-fos蛋白呈阳性表达;②自症状出现至死亡的时间≤30min的SCD者仅个别病例心肌组织出现了c-fos蛋白的弱阳性表达;③冠心病非猝死组病例仅有3例出现了微弱的c-fos蛋白阳性表达;④阴性对照组没有出现阳性表达。结论c-fos蛋白的免疫组化检测结果可以作为自症状出现至死亡时间>30min的SCD案例确诊的一个重要指标。

电针对慢性内脏痛敏大鼠脊髓背角c-fos蛋白表达的影响(英文)

目的:针刺治疗对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)患者的慢性腹痛具有良好疗效,然而,其神经生物学机制仍不清楚。本研究在电针缓解IBS模型大鼠慢性内脏痛敏基础上,观察和分析IBS大鼠脊髓背角中内脏反应神经元的兴奋性在针刺治疗前后的改变,探讨针刺缓解IBS模型大鼠慢性内脏痛敏的机制。方法:采用新生9d的Sprague-Dawley雄性幼鼠,通过结直肠机械扩张刺激制作IBS慢性内脏痛敏模型。饲养至6～8周后,观察大鼠由结直肠扩张诱发的腹部撤回反射(abdominal withdraw reflex,AWR)评分变化。电针组穴位取双侧"足三里"和"上巨虚",连续隔日治疗4次,假电针组不通电,其余与电针组同。治疗结束后,取材并用免疫组化方法观察各组大鼠脊髓背角中c-fos蛋白表达的变化。结果:与正常大鼠比较,IBS模型大鼠AWR评分明显升高(P<0.01),电针治疗后AWR评分明显降低(P<0.05);与正常大鼠相比,IBS模型大鼠脊髓L6-S2节段浅层(superficial laminae,SDH,laminaeⅠandⅡ)、固有层(nucleus proprius,NP,laminaeⅢandⅣ)、背角颈段 (neck of dorsal horn,NECK,laminae V and VI),以及T13-L2节段的NECK中,c-fos阳性神经元明显高于正常对照组(P<0.05),而电针治疗后IBS大鼠脊髓L6-S2节段SDH、NP、NECK以及T13-L2节段的NECK亚区中,c-fos阳性神经元明显下降(P<0.05);假电针对AWR评分、c-fos蛋白表达没有影响。结论:电针可以明显抑制IBS模型大鼠脊髓背角中内脏反应神经元异常增高的兴奋性,这可能是针刺缓解慢性内脏痛敏的机制之一。

氯化锂-匹罗卡品诱发大鼠癫痫持续状态后脑内c-fos蛋白表达的动态观察

目的在氯化锂-匹罗卡品诱发癫痫持续状态模型中观察c-fos蛋白表达的时程变化。方法采用氯化锂-匹罗卡品诱发癫痫持续状态大鼠模型,观察大鼠的行为改变,并用免疫组化方法观察癫痫持续状态后不同时间点脑内c-fos蛋白表达的变化。结果癫痫持续状态后6h,1d时脑内c-fos蛋白表达最高,3d时表达次之,7d时极少数表达并接近对照组表达水平。结论癫痫持续状态后脑内c-fos蛋白表达持续较长时间;在此时期应给予干预措施,以减低脑内神经元损伤可能。

大鼠三叉神经慢性缩窄环术后延髓尾侧段和上颈髓后角c-Fos蛋白表达

目的 :探讨慢性压缩性损害引起三叉神经痛的中枢机制。方法 :将 2 0只大鼠随机分为两组 ,手术组 (10只 )进行三叉神经分支 (眶下神经 )缩窄环术 ,即用两根铬线将眶下神经疏松环扎 ,对照组 (10只 )只暴露眶下神经 ,但不结扎。在痛觉超敏期 ,将大鼠处死 ,进行免疫组化 ,观察延髓尾侧段及上颈段 (C1～ 2 )后角c Fos蛋白表达。结果 :术后 15天左右 ,手术组动物出现痛觉超敏。两组动物c Fos蛋白主要分布于延髓尾侧段及上颈段脊髓后角Ⅰ、Ⅱ层内 ,手术同侧c Fos较对侧及对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,在统计学上有显著差异。结论 :三叉神经慢性压缩性损害诱导中枢传入信号的改变 ,是构成神经性疼痛的基础。

旋覆代赭汤及其倍用甘补方对混合性反流性食管炎模型大鼠延髓神经核团c-Fos蛋白表达的影响

目的:观察旋覆代赭汤对混合性反流性食管炎模型大鼠延髓神经核团c-Fos蛋白表达的影响。方法:采用"食管十二指肠端侧吻合术"制作动物模型。110只大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药(莫沙必利)对照组、旋覆代赭汤原方组、原方倍用甘补组,给予相应处理或用药后,取延髓组织,用免疫组化的方法测其c-Fos的表达。结果:旋覆代赭汤原方倍用甘补组能显著提高反流性食管炎模型大鼠c-Fos的表达,与正常组、假手术和模型组相比,c-Fos的表达率显著升高(P<0.01),与原方组和西药组相比,c-Fos的表达率升高(P<0.01),而原方组与西药组相比无显著性差异(P>0.05)。结论:旋覆代赭汤原方倍用甘补组可明显升高混合性反流性食管炎延髓神经核团c-Fos蛋白表达,从而反映该药物对增强中枢神经系统的迷走-迷走反射强度,能够更高程度地激活胆碱能抗炎通路,发挥其对食管炎大鼠积极的保护作用。

沙土鼠短时氧惊厥海马各区神经元c—fos蛋白表达的变化

目的观察短时氧惊厥沙土鼠脑海马各区神经元c—fos蛋白的表达，探讨氧惊厥时神经元激活部位。方法18只健康雄性沙土鼠经观察和检疫1周后进行实验。按体质量采用随机数字法分为3组（正常对照组、短时氧惊厥组、压力对照组），每组3只。沙土鼠暴露在0．5MPa压力的高压氧下，引起短时氧惊厥（首次惊厥5min后，减压出舱）后应用LSAB染色法观察海马各区神经元c—fos蛋白的表达情况。结果沙土鼠在发生短时氧惊厥后，用免疫组化染色的脑切片上发现海马各区神经元c—fns蛋白阳性表达，依次为CA1、CA2、CA4、CA3区。结论海马是氧惊厥时神经元激活的部位之一，海马CA1区作用最强。

奥扎格雷钠对大鼠局灶性脑缺血C-Fos蛋白表达的影响

目的:观察奥扎格雷钠对大鼠局灶性脑缺血C-Fos蛋白表达的影响并探讨其作用机制。方法:采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型,通过免疫组化法检测脑缺血24 h C-Fos蛋白的表达以及经奥扎格雷钠(8 mg/kg)处理后对该蛋白表达的影响。结果:脑缺血24 h C-Fos蛋白的表达明显增加;奥扎格雷钠可显著抑制脑缺血后C-Fos蛋白表达。结论:奥扎格雷钠对脑血的保护作用可能与抑制C-Fos蛋白的表达有关。

补肾中药对大鼠杏仁核c-Jun、c-Fos蛋白的影响

目的探讨补肾中药对大鼠c-Jun、c-Fos表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为女贞子组、淫羊藿组、氯米芬组、倍美力组和蒸馏水组5组,分别给予女贞子水煎液、淫羊藿水煎液、氯米芬水溶液、倍美力水溶液、蒸馏水,连续灌胃15d后腹主动脉真空负压取血及快速脱颈椎处死取杏仁核,用酶联免疫吸附法检测血浆E2、T、Fsh及杏仁核c-Jun、c-Fos蛋白的含量。结果女贞子组、淫羊藿组的血浆激素水平及脑杏仁核c-Jun、c-Fos蛋白含量均比蒸馏水组有显著升高(P<0.05),两组之间的血浆激素水平及c-Fos蛋白含量无统计学意义(P<0.05),淫羊藿组的c-Jun的蛋白含量比女贞子组有升高(P<0.05),女贞子组、淫羊藿组的血浆激素水平及脑杏仁核c-Jun、c-Fos蛋白含量均较氯米芬组和倍美力组低(P<0.05)。脑杏仁核c-Jun、c-Fos蛋白含量的增多和血浆激素水平的升高有相关性,呈S曲线相关(P<0.05)。结论补肾中药在一定范围内能增强c-Jun、c-Fos的表达。

电刺激坐骨神经对新生期大鼠脊髓背角浅层及海马CAl区突触可塑性及c—fos蛋白表达的影响

目的观察电刺激坐骨神经对新生期大鼠脊髓背角浅层、海马CAl区突触可塑性及O—fos蛋白表达的影响。方法（1）将大鼠分为新生组及成年期组，记录左侧胸13-腰I脊髓背角浅层及右侧海马CAl区诱发场电位，予条件电刺激后，记录电位幅度，潜伏期变化至120min，再在脊髓表面加D．AP5，继续观察场电位的幅度及潜伏期变化至175min。（2）大鼠分为新生组、成年期组，每组数字随机法随机分为3组：空白对照、单刺激、条件电刺激后组，其中，条件电刺激后组分为条件电刺激后60、120和175min组，实验后动物脊髓和海马做免疫组织化学染色，观察c．fos蛋白表达。结果（1）电刺激坐骨神经在新生期组大鼠脊髓背角浅层及海马CAl区诱发产生NMDA受体依赖的长时程增强（LTP），主要由脊髓A类神经纤维诱发；成年期组大鼠以C类神经纤维诱发产生LTP。（2）条件电刺激后，在新生期大鼠脊髓（L1组由阳的10±8上升至T3的45±14；L2组由11D的13±10上升至r13的41±10；L3组由哟的19±7上升至T3的41±9）及海马CAl区c—los蛋白（由110的25±7上升为49±8）表达都增加，成年期大鼠脊髓背角浅层海马CAl区c-fos蛋白表达增加。结论条件电刺激在新生期组大鼠脊髓背角诱发A类神经纤维特征，NMDA受体依赖的TJTP，同时c—fos蛋白在脊髓不同层和海马表达，说明痛觉信号随发育而变化。

增殖性细胞核抗原和c-Fos蛋白参与调控人胚胎脊髓的发育

目的探讨人胚胎发育早、中期脊髓内神经细胞增殖与凋亡的变化规律及其相关蛋白增殖性细胞核抗原(PCNA)和c-Fos在脊髓中的分布规律及其表达意义。方法应用免疫组织化学法检测第2～4月龄段人胚胎(共16例)脊髓组织中央管、前角和后角处PCNA和c-Fos蛋白的表达情况。结果第2个月龄段,人胚脊髓基板处无PCNA蛋白阳性表达,中央管神经上皮细胞和翼板均有PCNA蛋白阳性表达;而c-Fos蛋白在脊髓基板、翼板和中央管神经上皮细胞处均呈阳性表达。随着胎龄的增大,PCNA蛋白在脊髓前角、中央管和后角均有阳性表达;c-Fos蛋白在脊髓前角神经细胞的阳性表达数量和染色强度均值均呈先降低再升高的趋势(P<0.01),而在脊髓后角的阳性表达无明显变化。结论 PCNA和c-Fos蛋白参与调控人胚胎神经管神经上皮细胞的生长发育。

癫痫小鼠颅脑损伤后海马与顶叶皮质中C-FOS蛋白的表达

【目的】探讨具有癫痫基础病变小鼠在遭受颅脑损伤时,海马和顶叶皮质中C-FOS表达与损伤的相关性及其在损伤中的意义,为癫痫后颅脑损伤复合病变研究提供理论依据。【方法】用腹腔注射匹罗卡品法构建小鼠(2周龄)癫痫模型,饲养4周后(6周龄)采用自由落体法构建闭合性颅脑损伤小鼠模型和癫痫+闭合性颅脑损伤小鼠模型,同时以正常小鼠为对照,于造模后0.5,3h及1,3,7d取小鼠大脑,制备切片,采用尼氏染色、免疫组织化学染色方法,从形态学以及蛋白质水平上研究各组小鼠大脑海马和顶叶皮质中C-FOS的表达情况。【结果】癫痫模型、闭合性颅脑损伤模型及癫痫+闭合性颅脑损伤小鼠模型均构建成功。免疫组织化学染色结果显示,癫痫合并闭合性颅脑损伤小鼠顶叶皮质、海马均有着色深浅不同、数目不等的C-FOS阳性细胞。与对照组相比,单纯癫痫组、单纯闭合性颅脑损伤组、癫痫+闭合性颅脑损伤组C-FOS灰度值均显著(P<0.05)或极显著降低(P<0.01);癫痫+闭合性颅脑损伤组小鼠海马和顶叶皮质C-FOS阳性细胞数均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于单纯癫痫组与单纯闭合性颅脑损伤组。【结论】癫痫小鼠颅脑损伤后,海马和顶叶皮质持续高表达C-FOS,从而促进神经细胞凋亡,加重颅脑损伤后的病理变化。

地塞米松和川芎嗪对肾缺血再灌注时c-Fos、Bcl-2、ICAM-1蛋白表达的影响

目的 :探讨大鼠肾缺血再灌注 (IR)损伤不同时间c -Fos、Bcl- 2、ICAM - 1蛋白的表达及地塞米松(Dex )和川芎嗪 (TMPz )对其影响。方法 :用免疫组化法检测大鼠急性肾缺血再灌注不同时间内及Dex、TMPz干预后c-Fos、Bcl- 2、ICAM - 1蛋白表达的分布及强度变化。结果 :c -Fos蛋白分布于近曲小管、远曲小管、集合管上皮细胞的细胞核、细胞浆内 ,再灌注后 1h表达明显增强 ,3h达高峰 ,6h锐减。Bcl- 2蛋白主要分布于近曲小管上皮细胞的细胞浆 ,再灌注后 1h表达明显增强 ,6h达高峰 ,2 4h仍有较强表达。ICAM - 1蛋白分布在肾血管、肾小管等部位 ,其中以肾血管为著 ,其表达增强于再灌注后 1h ,直到 2 4h表达仍有增强。Dex +TMPz +IR组 ,Dex +IR及TMPz+IR组c-Fos、ICAM - 1蛋白表达明显低于IR组 (P <0 .0 1) ,Bcl- 2表达则明显高于IR组 (P <0 .0 1)。结论 :地塞米松和川芎嗪可能通过诱导Bcl- 2蛋白的合成 ,下调c-Fos、ICAM - 1蛋白的合成 ,减轻肾损伤。

急性应激大鼠的心血管反应与脑内c-fos蛋白表达

目的 观察急性躯体 心理应激对大鼠心血管活动的影响及心血管相关脑区c fos蛋白的表达。 方法 采用足底电击结合噪声的应激模型,检测应激后SD大鼠血压、心率和脑内c fos蛋白表达等变化。 结果 (1)应激即刻引起血压和心率明显增加。收缩压从应激前(10 4 .8±9.4 )mmHg升至(132 .3±10 .7)mmHg ,明显高于对照组[(112 .0±8.0 )mmHg ,(P <0 .0 1) ];应激大鼠心率明显高于应激前和对照组(P <0 .0 1)。应激停止后2～3h ,血压和心率恢复到对照水平。(2 )应激组大鼠杏仁核群c fos蛋白阳性细胞为(2 5 .4±3.8) % ,明显高于对照组[(3.4 1±0 .5 ) % ,(P <0 .0 1) ]。下丘脑室旁核c fos蛋白阳性细胞为(2 1.9±2 .0 ) % ,与对照组(7.1±0 .8) %比较,差异有显著性(P <0 .0 5 ,n =8)。额颞叶皮层c fos蛋白阳性细胞为(5 7.5±3.9) % ,显著高于对照组[(16 .4±2 .5 ) % ,(P <0 .0 1,n =8) ]。 结论 急性躯体 心理应激引起的快速心血管反应可能与下丘脑室旁核、杏仁核群神经元激活有关。