可溶性肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子和高敏C反应蛋白与急性心肌梗死患者出院后短期主要不良心血管事件发生的关系及预测模型构建

目的探讨可溶性肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子(sTWEAK)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平与急性心肌梗死(AMI)患者出院后短期主要不良心血管事件(MACE)发生的关系,并构建风险预测模型。方法选择2019年10月至2022年10月南阳市第二人民医院收治的135例AMI患者为研究对象,出院后随访6个月,统计MACE发生情况,将发生MACE的患者纳入MACE组,未发生MACE的患者纳入无MACE组。比较2组患者的血清sTWEAK、hs-CRP水平及年龄、性别、体质量指数(BMI)、吸烟史、饮酒史、贫血、糖尿病史、高血压史、高脂血症史、脑卒中史、陈旧性心肌梗死、前壁梗死、Killip心功能分级、冠状动脉病变支数、冠状动脉Gensini积分、急性生理学及慢性健康状况评分系统(APACHEⅡ)评分、白细胞计数、血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)及发病至再灌注时间等临床资料;采用logistic回归模型分析AMI出院后短期MACE发生的危险因素,将logistic回归模型分析结果作为依据建立预测AMI出院后短期MACE发生风险的模型,应用受试者操作特征(ROC)曲线、校准曲线评估模型预测效能及校准能力。结果AMI患者出院后6个月MACE发生率为27.73%(33/135)。MACE组患者>60岁占比、有吸烟史占比、冠状动脉病变支数≥2占比、APACHEⅡ评分及血清cTnT、sTWEAK、hs-CRP水平显著高于无MACE组(P<0.05);MACE组与无MACE组患者的性别分布、BMI、饮酒史、贫血、糖尿病史、高血压史、高脂血症史、脑卒中史、陈旧性心肌梗死、心房纤颤、前壁梗死、Killip心功能分级、发病至再灌注时间、冠状动脉Gensini积分、白细胞计数、血清CK-MB比较差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归模型分析显示,年龄>60岁、冠状动脉病变支数≥2、高APACHEⅡ评分、高血清cTnT水平、高血清sTWEAK水平、高血清hs-CRP水平是AMI出院后短期MACE发生的危险因素(P<0.05)。基于年龄、冠状动脉病变支数、APACHEⅡ评分、血清cTnT水平、血清sTWEAK水平、血清hs-CRP水平构建了AMI患者出院后发生MACE的风险预测模型,该模型预测MACE发生的曲线下面积为0.860(95%置信区间:0.784~0.916),灵敏度为84.85%(95%置信区间:68.100~94.900),特异度为83.72%(95%置信区间:74.200~90.800)。Hosmer-Lemeshow拟合优度检验结果显示,该模型预测AMI出院后短期MACE的发生概率与实际概率差异无统计学意义(χ^(2)=5.541,P>0.05)。结论血清sTWEAK、hs-CRP水平高是AMI患者出院后发生MACE的危险因素,基于这2个指标建立的风险预测模型对MACE的预测具有良好的效能,可为临床指导AMI患者出院后的管理及治疗提供参考。

二次免疫应答促进c—FOS蛋白表达的分子机制初探

目的：以小鼠为实验对象探讨二次免疫应答促进C—FOS蛋白表达的分子机制。方法：实验选用绵羊红细胞（SR—BC）作为外源性抗原免疫小鼠，注射生理盐水（NS）设置对照组，加强免疫后获得对外源性抗原刺激的高免疫应答实验组小鼠。取小鼠脑做石蜡切片应用SABC免疫组化方法检测其海马结构内c—Fos蛋白的表达，采用密度梯度离心法制备脾淋巴细胞悬液，细胞涂片染色检测小鼠血清中C—fos诱导因子的表达。结果：实验发现在免疫组小鼠与对照组小鼠之间C—FOS蛋白表达有统计学显著性差异（P〈0．05），实验组血清比较对照组血清更能促进C—FOS蛋白的表达。结论：可能是实验组血清内存在的诱导因子促进了c—Fos蛋白的表达。

血清缺氧诱导因子-1α、髓鞘碱性蛋白和超敏C反应蛋白在糖尿病周围神经病变中的变化及临床意义

目的检测糖尿病周围神经病变患者血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和氧化应激反应水平,分析其相关性。方法选择2015年7月~2016年7月在新疆医科大学第五附属医院(以下简称"我院")接受治疗的糖尿病周围神经病变患者90例为研究组,选择同期在我院体检的年龄、性别相匹配的健康人群80名为对照组。检测两组一般生化指标、血清HIF-1α、MBP、hs-CRP及超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)氧化应激指标水平。糖尿病周围神经病变发生的影响因素采用多因素Logistic回归分析。研究组患者血清HIF-1α、MBP、hs-CRP与SOD、GSH、MDA的相关性分析采用Spearman相关性检验。结果研究组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA_(1c))、空腹胰岛素(FINS)水平均明显高于对照组(P﹤0.05)。研究组血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。研究组血清SOD、GSH水平均明显低于对照组(P<0.05),MDA水平明显高于对照组(P<0.05)。多因素Logistic分析表明,年龄、糖尿病病程、TC、TG、FPG、HbA_(1c)、FINS、HIF-1α、MBP、hs-CRP、MDA是糖尿病周围神经病变发生的独立危险因素(P<0.05),SOD、GSH是糖尿病周围神经病变的保护性因素(P<0.05)。Spearman相关检验分析显示,研究组血清HIF-1α、MBP、hs-CRP均与MDA水平呈正相关(r=0.547、0.624、0.685,P<0.05),均与SOD、GSH水平呈负相关(r=-0.565、-0.583、-0.592,r=-0.492、-0.551、-0.572,均P<0.05)。结论血清HIF-1α、MBP、hs-CRP水平的上升和氧化应激反应均参与糖尿病周围神经病变的发生及发展,可能成为临床辅助诊断糖尿病周围神经病变患者的生物指标,为临床干预治疗提供理论依据。

宫颈癌中活化的蛋白激酶C受体1、低氧诱导因子1α与血管内皮生长因子的表达及病理学意义

目的检测活化的蛋白激酶C受体1(RACK1)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈癌组织中的表达并探讨其病理学意义。方法选取2014年6月至2018年6月于本院行手术切除并经病理确诊的85例宫颈癌组织样本及其对应的癌旁组织,通过免疫组织化学染色ABC法分别检测RACK1、HIF-1α、VEGF蛋白在宫颈癌组织及其癌旁组织中的表达。结合患者的临床病理资料,分析宫颈癌组织中RACK1、HIF-1α和VEGF蛋白表达与患者年龄及肿瘤直径、浸润深度、病理分级、淋巴结转移之间的关系,并分析三者表达之间的相关性。结果RACK1、HIF-1α、VEGF蛋白在宫颈癌组织中的表达均高于癌旁组织(P均<0.05),阳性表达率分别为81.2%(69/85)、63.5%(54/85)、89.4%(76/85)。RACK1表达与肿瘤浸润深度、病理分级和淋巴结是否转移有关(P均<0.05),HIF-1α和VEGF表达均与肿瘤直径、浸润深度、病理分级及淋巴结是否转移有关(P均<0.05)。RACK1、HIF-1α、VEGF蛋白的表达两两之间呈正相关(RACK1 vs HIF-1α:r=0.523,P=0.0439;RACK1 vs VEGF:r=0.428,P=0.0337;HIF-1αvs VEGF:r=0.689,P=0.0245)。结论RACK1、HIF-1、VEGF蛋白在宫颈癌组织中高表达且三者之间的表达呈正相关,提示其可能在肿瘤的发生、发展过程中起协同作用,可作为判断肿瘤侵袭、转移及预后的重要指标。

缺血预适应对大鼠急性心肌梗死缺氧诱导因子1α表达的影响及蛋白激酶C信号通路的作用

目的研究缺血预适应后急性心肌梗死缺氧诱导因子1α表达的变化及蛋白激酶C的信号传导作用。方法选择雄性Wistar大鼠32只,随机分为4组:缺血预适应组、单纯急性心肌梗死组、缺血预适应加蛋白激酶C抑制剂组和假手术组。缺血预适应加蛋白激酶C抑制剂组预适应前10min静脉注射蛋白激酶C抑制剂白屈菜季铵碱5mg/kg,然后结扎左前降支;假手术组不结扎左前降支。1天后,10%水合氯醛腹腔注射麻醉,活体取出心脏,测量心肌梗死面积,测定缺氧诱导因子1α和血管内皮生长因子mRNA表达,蛋白印记分析检测缺氧诱导因子1α和血管内皮生长因子蛋白的表达,术前术后测定血管内皮生长因子含量。结果缺氧诱导因子1α mRNA表达,缺血预适应组明显增加(P<0.01),缺血预适应加蛋白激酶C抑制剂组与单纯急性心肌梗死组差异无显著性(P>0.05),其蛋白表达有相同的变化。缺血预适应加蛋白激酶C抑制剂后,缺氧诱导因子1α mRNA表达明显减少(P<0.01),其靶基因血管内皮生长因子mRNA表达也明显减少,其蛋白表达有相同的变化。缺血预适应组心肌梗死面积(24.18%±2.25%)明显小于缺血预适应加蛋白激酶C抑制剂组(38.11%±2.94%)和单纯急性心肌梗死组(37.73%±3.32%;P<0.01)。结论缺氧诱导因子1α的表达是缺血预适应重要的内源性保护机制,其表达是依赖于蛋白激酶C的激活,蛋白激酶C是缺氧诱导因子1α表达的重要信号传导通路。

缺氧诱导因子通过FOXC1促进脑胶质瘤细胞侵袭

目的:探究在缺氧情况下,缺氧诱导因子(HIF)能否改变胶质瘤细胞内叉头框蛋白C1(FOXC1)的表达水平,并对胶质瘤细胞的侵袭产生影响。方法:通过RT-qPCR和Western blot实验检测正常氧条件及缺氧条件下胶质瘤细胞系U87和U251中FOXC1的mRNA和蛋白表达水平以及HIF-1α和HIF-2α的蛋白水平变化。缺氧情况下,在胶质瘤U87和U251细胞系中分别转染HIF-1αsiRNA和HIF-2αsiRNA,通过Western blot检测转染HIF-1αsiRNA和HIF-2αsiRNA后U87和U251细胞中FOXC1的蛋白水平变化。体外Transwell实验比较正常氧条件和缺氧情况下U87细胞和U251细胞的侵袭能力,检测转染FOXC1 siRNA后胶质瘤细胞系U87和U251侵袭能力改变及与侵袭能力相关标志蛋白(N-cadherin、E-cadherin和vimentin)的表达水平。结果:缺氧条件下,FOXC1的mRNA和蛋白表达明显升高,HIF-1α和HIF-2α的蛋白水平也明显升高,并随缺氧程度的增加而升高(P<0.05);缺氧情况下,将HIF-1αsiRNA转染至胶质瘤细胞系U87和U251后,发现细胞系中FOXC1的蛋白表达水平较阴性对照组无明显变化;转染HIF-2αsiRNA后,U87细胞系和U251细胞系中FOXC1的蛋白表达水平较阴性对照组明显降低(P<0.05);缺氧条件下,胶质瘤细胞系U87和U251的侵袭能力较正常氧条件下强(P<0.05)。但转染FOXC1 siRNA后,U87和U251细胞的侵袭能力较阴性对照组明显减弱,且侵袭相关标志蛋白N-cadherin和vimentin的表达降低,E-cadherin的表达升高(P<0.05)。结论:缺氧情况下,HIF-2α通过升高FOXC1的表达,进而增强恶性胶质瘤细胞的侵袭能力。

金雕肺的组织结构及KGF、c-Fos和Bax的表达

为了解金雕(Aguila chrysaetos)肺的组织结构特征,观察角质细胞生长因子(KGF)、c-Fos蛋白和Bax蛋白在肺中的表达情况,应用生物显微技术和免疫组织化学方法观察了金雕肺的组织结构,检测KGF、c-Fos和Bax蛋白在肺中的表达。结果表明,金雕的肺由各级支气管及其周围的呼吸毛细管组成,肺房呈辐射状开口于三级支气管周围,呼吸毛细管相互吻合成网状,周围有丰富的毛细血管网。KGF、c-Fos和Bax在三级支气管、肺房和呼吸毛细管的上皮细胞中呈免疫反应阳性,三者的表达强度有差异。KGF、c-Fos和Bax可能发挥不同的功能,它们的协同表达可能调控鸟肺细胞的生长、发育及成熟。

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与冠心病临床类型的关系

目的探讨基质金属蛋白酶(MMPs)上游调控因子细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)与动脉粥样硬化形成及冠心病临床类型的关系。方法根据临床表现和冠状动脉造影结果,223例患者分成ST段抬高心肌梗死(STEMI)组(n=65)、非ST段抬高急性冠状动脉综合征(NSTE ACS)组(n=42)、稳定型心绞痛(SAP)组(n=75)、冠状动脉造影正常组(正常对照组,n=41)。使用流式细胞仪检测患者外周血单核细胞(PBMCs)表面EMMPRIN的平均荧光强度(MFI);ELISA法测定血清中MMP-9的质量浓度;免疫速率法检测血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)的质量浓度。结果SAP组、STEMI组及NSTE ACS组PBMCs表面EMMPRIN MFI均高于正常对照组(P<0.05或P<0.01);而STEMI组和NSTEACS组又高于SAP组(P<0.05或P<0.01)。各组中PBMCs表面EMMPRIN的表达特点与hs-CRP和MMP-9的表达特征一致。相关性分析显示,PBMCs表面的EMMPRIN MFI与血清MMP-9、hs-CRP质量浓度呈正相关(r=0.168,P<0.05;r=0.305,P<0.01)。结论EMMPRIN作为MMPs上游调控因子可能对动脉粥样硬化形成和冠心病的不稳定有促进作用。

溃疡性结肠炎患者血清低氧诱导因子-1α、CRP的含量及其临床意义

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者血清低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、C反应蛋白(CRP)的含量及其临床意义。方法选择2013年1月至2015年1月期间我院收治的UC患者65例,根据Mayo疾病活动性评分标准将65例患者分为缓解期组(25例)和活动期组(40例),选择同期健康体检人员30例作为对照组。观察三组受试者的Mayo评分及血清CRP、HIF-1α水平,并分析缓解期组、活动期组患者的HIF-1α、CRP与Mayo评分、临床病型严重程度、内镜表现的相关性。结果活动期组CRP、HIF-1α水平明显高于对照组及缓解期组,差异均有统计学意义(P<0.05),而对照组与缓解期组的血清CRP、HIF-1α水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);缓解期组的CRP水平与Mayo评分无相关性(r=0.095,P>0.05);活动期组HIF-1α水平与Mayo评分也无相关性(r=0.138,P>0.05);活动期的CRP水平与临床病情、内镜表现则呈显著的相关性(r=0.538,0.714,P<0.05),活动期的HIF-1α水平与临床病情、内镜表现也呈显著的相关性(r=0.544,0.698,P<0.05)。结论血清HIF-1α、CRP检测UC能够客观地反应患者病情活动性、严重程度、炎症变化等,为完善临床诊断及病情监测提供了有效的补充,适于临床应用。

冠心病患者临床类型与细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达水平的关系

目的：研究冠心病临床类型与细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）的关系。方法根据临床表现和冠状动脉造影结果，179例患者分成稳定型心绞痛（SAP）35例，不稳定型心绞痛（UAP）76例，急性心肌梗死（AMI）68例，健康对照组30例。流式细胞仪检测患者外周血单个核细胞（PBMCs）表面EMMPRIN的平均荧光强度（MFI）；免疫速率法检测血清高敏C反应蛋白（hs-CRP）浓度，分析冠心病组患者EMMPRIN水平与冠状动脉造影Gensini评分的相关性。结果 PBMCs表面EMMPRIN表达在冠心病临床分型中AMI组、UAP组、SAP组明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。病变血管累及支数越多，其表达增加越明显，三支病变＞双支病变＞单支病变＞对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。相关性分析显示，PBMCs表面EMMPRIN（MFI）与血清hs-CRP浓度及冠状动脉病变Gensini评分呈正相关。结论 EMMPRIN水平与冠心病临床分型相关。

低氧诱导因子短期活化后诱导miR-29c表达上调可延缓5/6肾切除大鼠的肾病进展

目的：探讨适度活化低氧诱导因子（hypoxia-inducible factor,HIF）对延缓残肾慢性肾脏病进展的作用及可能机制。方法：雄性SD大鼠采用二步法5/6肾大部切除术建立残肾模型,随机分为L-mimosine（L-Mim）治疗组（术后5～12周短期给予脯氨酸羟化酶抑制剂,隔日50 mg/kg腹腔给药）和未治疗残肾组,同时设立假手术对照组。术后12周末处死大鼠留取标本。结果：L-Mim治疗组大鼠血肌酐水平[（82.4±6.3）比（130.1±24.1）μmol/L,P〈0.05]、24 h尿蛋白水平[（0.7±0.1）比（1.7±0.5）g/d,P〈0.05]以及残肾病理改变较未治疗残肾组大鼠有显著改善。miRNA芯片分析结果提示：L-Mim治疗组肾皮质miR-29c丰度高于未治疗残肾组,伴HIF-1α和HIF-2α表达增强。经荧光素酶报告检测系统和体外突变实验明确原肌球蛋白1（TPM1）为miR-29c靶基因之一。HK2细胞转染pre-miR-29c寡核苷酸后可以抑制TGF-β1（3 ng/mL,24 h）诱导的原肌球蛋白水平上调（P〈0.05或0.01）。结论：大鼠残肾肾间质纤维化病变明显并伴miR-29c水平下调,适度活化HIF水平可通过上调miR-29c表达延缓残肾功能恶化。

不同剂量依托咪酯在麻醉诱导气管插管的应用效果及对患者CRP的影响

目的探讨不同剂量依托咪酯在麻醉诱导气管插管的应用效果及对患者CRP的影响。方法60例择期手术的患者,均为气管插管全麻。将患者分为A组、B组和C组各20例,患者均在应用丙泊酚麻醉诱导之后给予患者依托咪酯,三组依托咪酯剂量分别为,A组0.3 mg/kg,B组0.5 mg/kg,C组1.0 mg/kg。对比三组的麻醉效果,VAS评分,炎症因子水平以及不良反应情况。结果结果显示,C、B组优良率高于A组(P<0.05);三组患者术后3,6 h的VAS评分比较无差异(P>0.05),但与术后1,2 h的VAS的评分比较差异显著(P<0.05);术后1 h,C组与A组VAS评分对比无明显差异,但是两者均低于C组(P<0.05),术后2 h,VAS评分C组高于B组高于A组(P<0.05);麻醉前,三组TNF-α、CRP和IL-6水平比较无差异(P>0.05),手术结束时,三组患者TNF-α、CRP和IL-6水平均较麻醉前有显著差异(P<0.05),但C组与B组比较无差异(P>0.05);三组不良反应率情况为,C组与A、B组比较差异显著(P<0.05),但A、B组比较无差异(P<0.05)。结论0.5 mg/kg剂量依托咪酯的不良反应较低,在麻醉诱导气管插管中更适合应用0.5 mg/kg依托咪酯。

环指蛋白146在Aβ诱导的C6细胞凋亡中的作用研究

目的:探讨环指蛋白146(RNF146)在Aβ诱导C6细胞的凋亡过程中的作用。方法:大鼠神经胶质瘤细胞株C6细胞分为对照组(control)和Aβ处理组(Aβ)。Annexin V-EGFP/PI染色法检测细胞凋亡,Western Blot方法检测C6细胞中RNF146的表达和凋亡诱导因子(AIF)蛋白的表达和分布。结果:与对照组比较,Aβ处理能够促进细胞凋亡,同时减少细胞中RNF146的表达,并促进AIF核转位。结论:Aβ可导致C6细胞凋亡,其机制与RNF146表达下调并激活AIF核转位有关。

多囊卵巢综合征不孕患者血清CTRP9、睾酮水平与药物诱导排卵反应的关系

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者血清C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)、睾酮(T)水平与药物诱导排卵反应的关系。方法:选取2019年1月-2021年5月本院治疗的PCOS不孕患者123例临床资料,药物诱导排卵治疗后监测排卵情况,依据是否排卵分为排卵组75例、未排组48例。比较两组、基础血清CTRP9、T水平并分析与药物诱导排卵反应关系;受试者工作特征曲线(ROC)分析CTRP9、T预测患者药物诱导排卵治疗后不排卵价值。结果:未排组血清CTRP9(174.36±26.25 ng/ml)低于排卵组(235.28±29.56 ng/ml),T(58.19±12.35 ng/dl)高于排卵组(49.86±11.43 ng/dl)(P<0.05)。多因素分析,低CTRP9及高T水平均为药物诱导排卵失败的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析,当基础血清CTRP9水平<198.43 ng/ml时,预测药物诱导排卵失败的曲线下面积(AUC)为0.805,敏感性83.3%、特异性69.3%;T>56.66 ng/dl时,预测药物诱导排卵失败的AUC为0.824,敏感性87.5%、特异性68.0%;二者联合预测药物诱导排卵失败的AUC为0.881,特异性84.0%;结论:基础血清CTRP9水平降低、总T水平升高为PCOS不孕患者药物诱导排卵失败的危险因素,二项指标对药物诱导排卵效果有一定价值。

拉喹莫德抑制成骨细胞中缺氧诱导因子2α的表达及其功能

背景:由于骨折会诱导骨细胞缺氧,使骨细胞中的氧张力明显下降,现已证明,其中低氧诱导因子2α是机体在低氧状态下调剂机体功能的一种重要氧依赖转录激活因子,其介导骨折发生时多种炎性因子的释放。目的:探讨拉喹莫德对成骨细胞中缺氧诱导因子2α的表达和功能的影响。方法:缺氧处理前分别在蛋白酶体抑制剂MG132或N-乙酰基-亮氨酰-亮氨酰-正亮氨酸存在和不存在的情况下,用10-100μmol/L的拉喹莫德处理小鼠成骨细胞MC3T3-E1(克隆14)。然后分别在体积分数1%或21%氧张力下进行1-24 h的预处理。结果与结论:(1)缺氧诱导因子2α在成骨细胞缺氧中表达明显增高。而拉喹莫德可以抑制成骨细胞中缺氧诱导因子2α及其目标基因在小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)中的表达。(2)拉喹莫德以蛋白酶依赖、von Hippel-Lindau(VHL)蛋白不依赖的方式促进缺氧诱导因子2α的降解,可打断缺氧诱导因子2α和它的分子伴侣热休克蛋白90之间的相互作用,促进缺氧诱导因子2α和激活的蛋白酶C受体之间的相互作用。(3)结果显示拉喹莫德可能通过影响缺氧诱导因子2α蛋白的折叠和成熟从而促进其降解,可通过改变与伴侣蛋白热休克蛋白90和RACK1的功能性相互作用来抑制成骨细胞中的缺氧诱导因子2α。

脑胶质瘤患者不良预后的危险因素及血清低氧诱导因子-1α、泛素耦联酶2C、髓鞘碱性蛋白、乳酸脱氢酶/白蛋白联合检测的预测作用

目的 探讨脑胶质瘤患者不良预后的危险因素及血清低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、泛素耦联酶2C(UBE2C)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、乳酸脱氢酶/白蛋白(LAR)水平联合检测对其的预测作用。方法 将2018年12月至2021年1月在河南省新乡市中心医院接受手术治疗的101例脑胶质瘤患者纳入研究,随访3年,根据预后情况,分为死亡组(n=46)和存活组(n=55)。通过单因素筛选及多因素logistic回归,分析血清HIF-1α、UBE2C、MBP、LAR水平与脑胶质瘤患者不良预后的关系。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析HIF-1α、UBE2C、MBP、LAR指标单独及联合检测对脑胶质瘤患者不良预后的诊断价值。结果 与存活组比较,死亡组患者术式为非全切、病理分级Ⅲ~Ⅳ级、肿瘤直径>3 cm、术前卡氏评分≤60分、未放化疗结合的比例更低(P<0.05);死亡组患者的血清HIF-1α、UBE2C、MBP、LAR水平更高(P<0.05)。多因素分析结果显示,术式非全切、病理分级Ⅲ~Ⅳ级、术前卡氏评分≤60分、未放化疗结合、血清HIF-1α、UBE2C、MBP、LAR水平升高为脑胶质瘤患者不良预后发生的危险因素(P<0.05)。根据Logistic回归结果构建血清HIF-1α、UBE2C、MBP、LAR四项指标联合诊断模型。ROC曲线分析显示,血清HIF-1α、UBE2C、MBP、LAR单独及联合检测对脑胶质瘤患者不良预后的诊断价值最高,曲线下面积(AUC)分别为0.775、0.783、0.817、0.774、0.941,联合检测均最高(Z分别为3.352、2.938、2.492、3.104,P<0.05)。结论脑胶质瘤患者不良预后的危险因素包括术式非全切、病理分级Ⅲ~Ⅳ级、术前卡氏评分≤60分、未放化疗结合、血清HIF-1α、UBE2C、MBP、LAR水平升高等,联合检测血清HIF-1α、UBE2C、MBP、LAR水平对其的预测作用较高。

编码糖蛋白B的裸基因疫苗诱导单纯疱疹病毒Ⅰ型感染小鼠的体液和细胞免疫

[目的]用编码单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)糖蛋白B的pDNA转染小鼠,研究基因疫苗治疗感染性疾病的有效性,并分析免疫反应.[方法]采用血管内注射方法,将含有不同剂量、不同pDNAs的生理盐水注入Balb/c小鼠体内,1周后行再次免疫,观察以不同组合pDNA进行免疫的实验组和对照组小鼠被致死剂量HSV-1感染后生存率间的差异.通过潜伏感染的检测、血清中细胞因子水平的测定、细胞毒性反应的测定及中和实验评价免疫效果.[结果]接种pG.gB或接种pGEG.gB的小鼠,与相应对照组比较,生存率和诱导产生中和抗体的效价与剂量呈正相关,pGEG.gB免疫组对P815.gB细胞有显著的细胞毒性作用,pGEG.gB免疫小鼠的脾细胞增殖反应显著强于pG.gB免疫的小鼠;pG.gB和pGEG.gB免疫后的小鼠血清中IL-12和IFN-γ水平均显著升高.[结论]裸pDNA的经小鼠尾静脉免疫可诱导HSV-1感染小鼠的体液和细胞免疫应答,对小鼠HSV-1急性感染有明显的预防和治疗作用,且含有EBNA1和oriP的EBV质粒载体明显增强CTL活性和增殖反应.

重组人肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子对小鼠主动脉内皮舒张功能及凝血相关因子的影响

目的采用重组人肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子（rhTWEAK）经腹腔注射，诱导血管内皮损伤模型，观察rhTWEAK对小鼠主动脉内皮舒张功能和凝血相关因子的影响。方法3～4周龄C57BL小鼠32只，随机分成4组，每组8只，腹腔注射各药物：@rhTWEAK组：rhTWEAK按5μg/（kg·d）的量溶于生理盐水，共0．3mL，腹腔注射，连续注射7天；②rhTWEAK-4-抗rhTWEAK组：先给予抗rhTⅣEAK腹腔注射，15min后再给予rhTWEAK注射；③IgG组：给予小鼠非特异性IgG腹腔注射；④对照组：给予0．3mL生理盐水注射。分别在干预1周后眼球取血，分离上清；取小鼠胸主动脉段进行血管舒张功能的检测。酶联免疫吸附法检测血浆中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、高敏C反应蛋白（hs·CRP）、一氧化氮（NO）、组织因子（TF）、组织因子途径抑制物（TFPI）含量。结果①与对照组、rhTWEAK＋抗rhTWEAK组、IgG组相比，rhTWEAK组内皮依赖性血管舒张功能、血浆中eNOS、NO、TFPI水平明显降低，TF水平明显升高，均有统计学意义（均P〈0．05）；血浆中hs—CRP含量未见明显改变（P〉0．05）；②rhTWEAK组、IgG组与对照组相比，血管内皮舒张功能、血浆中NO、TF、TFPI、eNOS、hs—CRP含量变化均无统计学差异（均P〉0．05）。结论rhTWEAK可诱导内皮功能紊乱和凝血相关因子含量的改变，这可能是TWEAK参与动脉粥样硬化早期血管内皮损害的机制。

肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子在慢性阻塞性肺疾病患者血浆中的表达及意义

目的检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血浆中肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)水平及其临床意义。方法筛选COPD稳定期患者72例(COPD稳定期组)和COPD急性加重期78例(COPD急性加重期组),同期纳入健康查体者75名(对照组)。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组血浆中TWEAK和高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。应用便携式肺功能仪检测3组肺功能。比较3组BODE指数。Pearson直线相关性分析COPD患者血浆中TWEAK水平与hs-CRP和BODE指数相关性。结果与对照组比较,COPD稳定期组和COPD急性加重期组血浆中TWEAK和hs-CRP水平及BODE指数显著增加(P<0.01);与COPD稳定期组比较,COPD急性加重期组提高更明显(P<0.01)。与对照组比较,COPD稳定期组和COPD急性加重期组肺功能指标呼气流量峰值(PEF%)、第1秒最大呼气量(FEV1%)、25%肺活量时用力呼气量占正常预计值百分比(V25%)、V50%及V75%显著下降(P<0.01);与COPD稳定期组比较,COPD急性加重期组上述肺功能指标降低更显著(P<0.01)。经Pearson相关性分析,COPD患者血浆中TWEAK水平与肺功能指标PEF%、FEV1%、V25%、V50%、V75%呈负相关,与血浆中hs-CRP水平和BODE指数呈正相关(P<0.01)。结论 COPD患者血浆中TWEAK水平明显升高,与hs-CRP、肺功能及BODE指数具有相关性,可能是COPD病情和患者预后的有效评价指标。

补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白13通过盐诱导激酶1/环磷酸腺苷调节转录共激活因子2通路参与高糖诱导的人肝窦内皮细胞滤过功能障碍

目的探讨血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白13(CTRP13)参与高糖诱导的人肝窦内皮细胞(HLSEC)滤过功能障碍的分子机制。方法体外培养HLSEC,构建慢病毒CTRP13过表达载体(LV-CTRP13)并感染HLSEC,依据不同处理条件将细胞分为正常对照(5.5 mmol/L葡萄糖,NC)组、高糖(25 mmol/L,HG)组、NC+LV-CTRP13组、HG+LV-CTRP13组、NC+空载对照(LV-CON)组、HG+LV-CON组、HG+LV-CTRP13+盐诱导激酶1(SIK1)抑制剂(HG-9-91-01)组、HG+LV-CON+HG-9-91-01组、HG+LV-CTRP13+环磷酸腺苷调节转录共激活因子2(CRTC2)抑制剂(GW4064)组、HG+LV-CON+GW4064组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting法检测CTRP13、SIK1、CRTC2、P130 Crk相关底物(P130Cas)的mRNA及蛋白表达水平。采用单因素方差分析进行组间比较。结果与NC组相比,HG组CTRP13、SIK1、P130Cas的mRNA和蛋白表达降低,CRTC2的mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。与HG+LV-CON组相比,HG+LV-CTRP13组CTRP13、SIK1、P130Cas的mRNA和蛋白表达升高,CRTC2的mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与HG+LV-CTRP13组相比,HG+LV-CTRP13+HG-9-91-01组CRTC2的mRNA和蛋白表达升高,而SIK1、P130Cas的mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与HG+LV-CTRP13组相比,HG+LV-CTRP13+GW4064组CRTC2的mRNA和蛋白表达降低,P130Cas的mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。结论CTRP13、SIK1、CRTC2、P130Cas参与了高糖诱导的HLSEC滤过功能障碍,CTRP13过表达可以抑制高糖诱导的HLSEC滤过功能障碍,这一机制是通过SIK1/CRTC2通路实现的。