C型尼曼-匹克病小鼠小脑的胶质反应

探讨C型尼曼 匹克病 (Niemann PickdiseasetypeC ,NPC)小脑胶质细胞的变化及其意义。应用组织蛋白酶D(Cat D)和胶质原纤维酸性蛋白 (GFAP)抗体以及免疫组织化学方法 ,观察生后不同年龄的NPC和正常小鼠小脑内小胶质细胞和星形胶质细胞的变化。结果显示随着年龄的增长 ,NPC小鼠小脑内Cat D深染的小胶质细胞的数量呈进行性增加 ,细胞逐渐增大 ,尤以皮质分子层为甚。小脑髓质和颗粒层内GFAP阳性星形胶质细胞肿胀 ,数量增多 ;皮质内Bergmann胶质细胞逐渐增多 ,其放射状突起伸至分子层的表面。上述胶质细胞反应在小脑小结和蚓垂比较轻微。结果提示NPC小鼠小脑内小胶质细胞和星形胶质细胞显著激活 。

C型尼曼-匹克病小鼠脑内胶质细胞的变化

目的 研究C型尼曼 匹克病 (Niemann PickdiseasetypeC ,NPC)脑内胶质细胞的变化及其与神经退行性变的关系。方法 应用组织蛋白酶D(Cat D)和胶质原纤维酸性蛋白 (GFAP)抗体 ,对生后不同年龄的NPC小鼠和正常小鼠的脑组织切片进行免疫组织化学PAP法染色 ,观察小胶质细胞和星形胶质细胞在不同脑区的变化。结果 NPC小鼠脑内Cat D深染的小胶质细胞和GFAP免疫反应性星形胶质细胞的数量随着年龄增加 ,出现细胞肿胀 ,尤其在大脑皮质、丘脑、脑干和黑质等最为显著。两种胶质细胞在分布区域上重叠 ,且与神经元严重损伤、丢失的脑区相吻合。

酪氨酸羟化酶在C型尼曼-匹克病小鼠小脑中的异常表达

目的 探讨C型尼曼 匹克病 (NPC)小脑中酪氨酸羟化酶 (TH)异常表达的时间、部位及其与临床表现的关系。 方法 应用TH抗体 ,对不同周龄NPC小鼠和正常小鼠的脑组织切片进行免疫组织化学染色 ,部分相邻切片以抗维生素D依赖性钙结合蛋白抗体染色。 结果 1～ 3周NPC小鼠小脑的浦肯野细胞 (PC)未见明显减少 ,TH染色阴性。 5周时PC开始减少 ,8～ 11周期间PC显著丢失 ,但小脑蚓小结和蚓垂有较多的PC存活。 8周后 ,部分存活的PC及其树突树出现TH免疫反应。其轴突局部球形膨大 ,树突不规则 ,弯曲、断裂、局部膨大 ,树突树萎缩。 结论 NPC1基因突变引起小脑PC严重丢失 ,存活的PC有形态改变和异常基因活动 ,提示其功能不正常 。

C型尼曼-匹克病与细胞胆固醇转运

C型尼曼 -匹克病 (NPC)是一种致命的常染色体隐性遗传性疾病 ,游离胆固醇等脂类沉积于溶酶体内 ,导致神经系统退行性变。本文综述了NPC的细胞生化表型 ,神经表型 ,NPC1基因结构及其突变 ,以及NPC1蛋白的分子结构。

1例C型尼曼-匹克病患者的护理

对1例C型尼曼-匹克病患儿采取抗感染、排痰、营养神经及全身支持治疗。结果患儿住院15d,生命体征稳定,肺部听诊双肺未闻及痰鸣音及湿性啰音,病情好转出院。提出C型尼曼-匹克病的护理重点是密切观察病情,做好基础护理、对症护理,加强营养、饮食指导;同时强调产前检查的重要性,以降低此病的发病率。

儿童C型尼曼-匹克病1例报告及文献复习

尼曼-匹克病是一组由于鞘磷脂沉积引起的罕见的常染色体隐性遗传疾病,自1914年首次报道以来,亚洲人发病率最低,本病在我国非常罕见。根据本院收治的1例儿童C型尼曼-匹克病病例报告,进行相关文献复习。

生物制药公司准备申报热休克应激反应诱导剂arimoclomol治疗C型尼曼-匹克病

Orphazyme生物制药公司准备2020年申报新药arimoclomol。该药为一种热休克应激反应诱导剂,用于治疗C型尼曼-匹克病。美国FDA提供该药治疗C型尼曼-匹克病新药申报中的全面指导。公司会尽快为导致严重致残甚至致死的该病患儿提供重要的治疗选项。公司在2019年秋引入早期使用计划,目的是使ari moclomol更快用于该病的治疗。

精原细胞瘤放化疗后继发C型尼曼匹克病1例报道并文献复习

目的报道1例在鞍区精原细胞瘤放化疗后出现C型尼曼-匹克病(Niemann-Pick disease type C,NPC)的病例,加强对尼曼-匹克病(Niemann-Pick disease,NPD)的了解。方法对南部战区总医院内分泌科2021年6月收治的1例鞍区精原细胞瘤切除术、放化疗后逐渐出现垂体功能减退、重度肝损害、肝脾大,激素替代治疗后引起继发性糖尿病的青少年患者长达4年的病史进行回顾性分析。结果本例患者为青少年女性,鞍区精原细胞瘤切除术及放化疗后,逐渐出现不同程度血细胞下降、脂代谢异常、肝功能异常、肝脾增大等,行骨髓穿刺,形态学发现2%尼曼-匹克细胞,最终诊断为NPC。经输血、护肝、胰岛素降糖、激素替代等对症治疗后,各项指标较治疗前好转,精神较入院时稍好转,但患者仍存在黄疸、肝脾大,偶有精神异常。目前继续门诊随访,予对症治疗。结论对于颅内肿瘤术后或放化疗后所致内分泌与代谢相关症状,且同时伴有难以解释的神经、精神、脏器功能异常时,要考虑到NPC的可能性,可通过骨髓穿刺涂片发现尼曼-匹克细胞初步诊断。目前NPC的治疗以对症为主。

基因诊断C型尼曼-匹克病一例

患儿,男,11岁,智力减退伴运动障碍4年、反复下呼吸道感染2年.患儿自7岁开始出现智力减退、语言倒退、学习困难、感情易变、步态不稳、共济失调、震颤及吞咽困难,未予特殊治疗.上述症状进行性加重,并出现惊厥,表现为全身强直阵挛性发作.自2年前开始出现反复下呼吸道感染.既往史及家族史：患儿为一胎一产,足月顺产,出生时体检正常,母乳喂养,生后曾出现一过性黄疸,未予特殊治疗,自然消退.发病前体格发育和智力发育正常.父母非近亲婚配,家族史无特殊记载.

C型尼曼-匹克病一例

患儿，女，9岁，主因“智力、语言、运动倒退2年，呛咳半年，间断抽搐3个月”来院。患儿7岁左右开始出现智力、语言、运动倒退，表现为注意力不集中，反应迟钝，智力、认知能力差，学习成绩下降，并逐渐出现走路缓慢、不稳，不能上下楼梯，不能跑跳，双手抓物定向不准确，语速慢，

小脑微量注射cdc2-siRNA对C型尼曼-匹克病小鼠共济运动的影响

目的观察抑制cdc2基因的异常激活对C型尼曼-匹克病（Niemann-PickdiseasetypeC，NPC）小鼠共济运动的影响。方法包装携带ode2-siRNA的重组腺相关病毒（rAAV），将该病毒注射至2周龄npc-/-小鼠的小脑中，8周龄时采用足印实验、垂直屏实验检查小鼠的共济运动，并用HE染色及蛋白免疫印迹法分别检查小脑浦肯野细胞数量及微管相关蛋白Tau的磷酸化（由PHF-1抗体识别）情况。结果（1）足印实验显示cdc2-siRNAnpc组的步长[（4．92±0．31）cm]比空载体npe。组[（4．05±0．19）em]显著增加（P〈O．05）。（2）垂直屏实验显示cdc2-siRNAnpc。一组小鼠转头向r、爬至网屏上边缘的时间[（26．01±1．82）s、（50．93±1．98）s]分别比空载体npc组[（31．96±3．47）s、（56．89±2．97）S]明显缩短（均P〈0．05）。（3）cde2-siRNAnpe。一组小鼠小脑浦肯野细胞数目[（11．0±2．5）个]较空载体npc组[（5．1±2．2）个]显著增加（P〈0．05）。（4）cdc2-siRNAnpc。组小鼠cdc2及磷酸化Tau蛋白免疫反应条带相对灰度值（1．42±0．22、0．95±0．31）分别较空载体npc-/-组（2．11±0．29、2．61±0．62）明显降低（均P〈0．05）。结论抑制cdc2基因的异常激活可通过挽救浦肯野细胞的脱失和减轻小脑Tau蛋白的过度磷酸化以改善npe-/-小鼠的共济运动。

C1型尼曼-匹克病小鼠生长繁殖及血液生理生化指标的测定分析

目的测定SPF级C1型尼曼-匹克病小鼠(Npc1^(-/-)小鼠)的生长繁殖及血液生理生化指标,为开展NPC1病人的研究提供理论性的基础资料。方法 (1)选取0~77日龄Npc1^(-/-)、Npc1^(+/-)和Npc1+/+小鼠雌雄各40只,定期称重并绘制生长曲线;(2)Npc1^(-/-)小鼠由Npc1^(+/-)小鼠交配繁殖产生,统计Npc1^(+/-)小鼠连续4代的繁殖数据;(3)检测60日龄Npc1^(-/-)和Npc1+/+小鼠的血液生理生化指标。结果 (1)Npc1^(-/-)小鼠的体重在7周前随着日龄的增加而增加,7周后随着日龄的增加而减少,直至11周左右死亡。Npc1+/+和Npc1^(+/-)小鼠的体重均随着日龄的增长而逐渐增加,两者之间并没有显著差别。4周后雄性比雌性体重增加明显比雌性小鼠快;(2)Npc1^(+/-)小鼠不同代内交配分娩间隔、窝产仔数、离乳仔数、离乳仔数中雌雄数量及阳性数量差异无显著性(P>0.05),而第2代的离乳率明显大于第1代(P<0.05);(3)Npc1^(-/-)和Npc1+/+小鼠血液生理指标中平均红细胞血红蛋白含量(MCH)和平均过氧化物酶指数(MPXI)差异有显著性(P<0.05),其余差异无显著性(P>0.05)。生化指标中尿素(UREA)差异有极显著性(P<0.01),而天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、葡萄糖(GLU)、乳酸脱氢酶(LDH)、钾(K)和铜(Cu)等差异有显著性(P<0.05),其余差异无显著性(P>0.05)。结论 (1)Npc1^(-/-)、Npc1^(+/-)和Npc1+/+小鼠的生长曲线因基因型和性别的不同而存在差异;(2)Npc1^(+/-)小鼠不同代的繁殖能力差异无显著性;(3)Npc1^(-/-)和Npc1+/+小鼠的部分血液生理生化指标差异有显著性。

C1型尼曼-匹克病小鼠肝脏功能及病理变化

目的探讨晚期(P60)Npc1^(-/-)小鼠肝脏功能和病理变化,为C1型尼曼-匹克病(NPC1)患者肝脏的病理发生及临床治疗提供实验依据。方法小鼠称重后,眼内眦取血检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性变化,评价Npc1^(-/-)小鼠的肝功能变化;取肝组织进行石蜡和冷冻切片,通过HE染色和油红O染色评估肝脏组织的形态变化和脂肪储存情况,以及Masson染色评估肝脏组织胶原沉积情况;Real-time PCR和Western blotting分别检测肝脏组织促炎症因子,白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的mRNA和蛋白水平表达情况;TUNEL染色评估肝脏组织凋亡情况。结果与Npc1^(+/+)小鼠相比,Npc1^(-/-)小鼠的体重及肝脏系数显著降低(P<0.001);LDH、ALT及AST活性显著升高(P<0.001);HE染色发现,Npc1^(-/-)小鼠肝脏组织形态改变明显,出现大量泡沫细胞;油红O染色显示,Npc1^(-/-)小鼠肝脏脂肪含量显著降低;Real-time PCR显示,Npc1^(-/-)小鼠肝脏组织IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著升高(P<0.01,P<0.05和P<0.001),同时,Western blotting也显示,3个因子的蛋白表达均显著升高(P<0.05,P<0.05和P<0.01),证实Npc1^(-/-)小鼠肝脏晚期发生炎症反应;Masson染色未发现Npc1^(-/-)小鼠肝脏纤维化的发生;TUNEL染色显示,Npc1^(-/-)小鼠肝脏组织凋亡细胞数量增加。结论 Npc1基因突变导致肝脏组织形态发生改变,大量的巨噬细胞聚集引发炎症反应,而炎症反应的发生可能是引起肝脏细胞凋亡和肝功能受损的重要途径之一。

NPC1基因复合杂合突变致尼曼-匹克病C型一家系

目的报道NPC1基因新发复合杂合突变致尼曼-匹克病C型一家系的临床及遗传学特点,提高临床医师对该病的认识水平。方法对云南省昆明医科大学第一附属医院神经内科2020年收治的1个非近亲结婚家系中的2例患者进行详细的神经科体格检查,提取外周血DNA,应用二代测序技术对患者进行全外显子测序,结合Sanger测序对患者家系进行一代验证,应用软件对突变位点进行分析。结果该家系呈常染色体隐性遗传,2例患者的发病年龄不同,先证者9岁起病,主要表现为:构音不良、吞咽困难、认知障碍、共济失调、双侧锥体束损害、垂直核上凝视麻痹和脾脏肿大。先证者弟弟临床表型与患者相似,但比患者更为严重,发病年龄更早,婴幼儿期发病,伴有严重的精神运动发育迟缓。全外显子组测序结果显示,两兄弟均携带NPC1基因的两种罕见变异:c.352_353del,p.Gln119ValfsTer8和c.593A>G,p.Asn198Ser。Sanger测序验证结果提示复合杂合突变分别来源于先证者的父母。根据美国医学遗传学与基因组学学会指南,上述变异评级分别为致病和疑似致病变异。该家系患者携带的c.593A>G,p.Asn198Ser变异为未报道的新变异。先证者从症状出现开始延迟诊断7年,服用麦格司他1年后吞咽困难、共济失调及眼球垂直运动障碍等症状有明显的好转。结论该家系患者的临床表型符合尼曼-匹克病C型的临床表型,NPC1基因复合杂合突变(c.352_353del和c.593A>G)为该家系的遗传学病因。

尼曼-匹克病C型一家系基因突变分析及产前基因诊断

目的 研究1例临床疑诊尼曼-匹克病C型（Niemann-Pick disease type C,NPC）先证者的基因诊断,以及其家系的产前基因诊断.方法 采用DNA抽提试剂盒提取先证者（NPC晚发婴儿型）和其父母外周血白细胞基因组DNA,采用聚合酶链反应-直接测序法进行NPC1基因突变检测.测序结果与GenBank人类NPC1基因（NM 000271）进行比较,突变外显子片段均行DNA双向测序证实.同时选取50例正常人作为对照,通过直接测序法以排除新错义突变为基因多态性.采用ClustalX 1.81分析软件对人类和其他种属的NPC1氨基酸序列进行同源性比较.在先证者母亲再次妊娠18周时抽取羊水细胞,对培养后羊水细胞进行相应的基因突变检测,用于产前基因诊断.抽取新生儿外周血白细胞基因组DNA进行NPC1基因分析.结果 NPC1基因测序发现先证者携带2个新杂合突变c.2284-2287 delCTCT和p.V959G,分别来源于父亲和母亲,50例正常人中未发现这2种突变.通过ClustalX 1.81软件比对人、小鼠、大鼠、兔、猫及猪的NPC1蛋白的氨基酸发现,p.V959为中度保守氨基酸区域,此位点氨基酸错义突变p.V959G可能导致NPC蛋白功能异常.胎儿羊水直接抽提基因组DNA及培养后羊水细胞DNA检测均未发现这2种突变,为正常胎儿.新生儿外周血白细胞的NPC1基因分析未发现携带c.2284-2287 delCTCT和p.V959G突变,与产前基因诊断结果相符.结论 聚合酶链反应-直接测序法可为NPC先证者进行基因诊断,也可为其家系进行产前基因诊断,p.V959突变可能与晚期婴儿型临床表型相关.

Npc1基因突变引起脂质代谢异常从而诱导肾脏细胞凋亡并促进纤维化

目的:研究Npc1基因突变小鼠肾脏细胞及组织功能异常情况,为C1型尼曼-匹克病(NPC1)患者的治疗提供借鉴。方法:取出生后60 d的Npc1^-/-与Npc1^+/+小鼠,HE染色检测肾脏组织形态变化;油红O染色检测肾脏组织中脂质代谢变化;TUNEL染色检测肾脏细胞凋亡情况;Western blot检测肾脏组织中凋亡相关蛋白的表达变化;免疫荧光检测肾脏组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(vimentin)的表达变化。结果:形态学观察表明,与Npc1^+/+小鼠相比,Npc1^-/-组小鼠肾组织出现明显空泡,且无脂质沉积;随后,TUNEL染色结果显示Npc1^-/-小鼠肾脏中凋亡细胞数量显著增多(P<0.01),并且凋亡相关蛋白Bax和Bad表达水平显著增高(P<0.01),而抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平显著下降(P<0.05);免疫荧光检测显示Npc1^-/-小鼠肾脏组织中α-SMA及vimentin染色阳性区域强度及面积均显著提高(P<0.01)。结论:Npc1基因突变可引起小鼠肾脏结构变化及细胞脂质代谢异常,从而诱导肾脏细胞凋亡并促进肾脏组织纤维化。

Zavesca

瑞士Actelion制药公司日前宣布，Zavesca（miglustat）在欧盟获得批准，用于治疗成年和儿童C型尼曼一匹克病患者[Niemann-Picktype Cdisease（NPC）]的进行性神经系统症状。Zavesc是首个获批用于治疗C型尼曼一匹克病的药物，