减数分裂恢复前期小鼠卵巢组织中M-CSF和NPPC的表达曲线

目的通过建立促排卵小鼠模型,研究减数分裂恢复前期小鼠卵巢组织中巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和其受体(M-CSFR)、C型尿钠肽前体(NPPC)及其编码的C型尿钠肽(CNP)表达曲线及其相互关系。方法建立促排卵小鼠模型,在人绒毛膜促性腺激素(hCG)促排卵后0、0.5、1、2、4 h分别以免疫组化和RT-PCR方法检测卵巢组织中M-CSF、M-CSFR、NPPC蛋白及mRNA的表达水平。结果促排卵后,M-CSF、M-CSFR蛋白及mRNA表达水平均呈下降趋势,而NPPC mRNA表达水平呈上升趋势,并在1 h达峰值后显著下降,CNP表达水平在2 h上升至峰值后,随即快速下降至较低水平。结论排卵前促黄体生成素峰后,卵巢组织中M-CSF及其受体表达显著下降,引起一系列信号传导,导致CNP表达水平在2 h达到峰值,随即快速下降至较低水平,最终卵母细胞减数分裂恢复及排卵。

小鼠卵泡内M-CSF和NPPC的表达情况及相互影响

目的观察小鼠卵泡中巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)及其受体(M-CSFR)对C型尿钠肽前体(NPPC)表达的影响,探讨其是否参与减数分裂恢复中的信号传导。方法通过培养小鼠卵泡,根据培养基的不同分为5组,分别为空白对照组:置于37℃MEMα培养液中培养;人绒毛膜促性腺激素(HCG)组:在MEMα培养液中滴入HCG 5IU;M-CSF组:在MEMα培养液中加入M-CSF 200ng/ml;GW2580组:在MEMα培养液中加入M-CSFR阻滞剂GW25801μmol/L;M-CSF+GW2580组:在MEMα培养液中同时加入M-CSF 200ng/ml及GW25801μmol/L。分别于0.5、1、2、4h收集卵泡,采用荧光定量聚合酶链式反应检测各组卵泡内M-CSF、M-CSFR及NPPC mRNA表达水平。结果空白对照组M-CSF、M-CSFR mRNA表达水平呈上升趋势,而HCG组M-CSF、M-CSFR mRNA均呈低水平表达。空白对照组NPPC mRNA未见明显增减,而HCG组可见NPPC mRNA先逐步上升后快速下降,并在2h达到峰值。M-CSF组NPPC mRNA变化曲线与HCG组相类似。GW2580组和M-CSF+GW2580组NPPC mRNA表达水平与空白对照组未见明显差异。结论黄体生成素峰在卵泡内可能经由M-CSF介导的一系列信号传导而影响NNPC的表达,最终使得减数分裂恢复。