马尔尼菲青霉对巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4、Dectin-1的表达及TNF-α分泌的影响

目的研究马尔尼菲青霉对巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4、Dectin-1的表达及促炎因子TNF-α分泌的影响。方法马尔尼菲青霉酵母相菌液与小鼠腹腔巨噬细胞共培养24h,采用流式细胞技术检测巨噬细胞TLR-2、TLR-4及Dectin-1的平均荧光强度;共聚焦显微镜观察荧光染色的受体;ELISA法测定培养液上清中TNF-α的浓度;Real time PCR检测不同时间段TNF-α的mRNA表达。结果马尔尼菲青霉可使巨噬细胞TLR-2、TLR-4、Dectin-1的平均荧光强度均增高,并激活巨噬细胞产生TNF-α。结论马尔尼菲青霉上调了巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4及Dectin-1的表达,巨噬细胞的激活与TLR-2、TLR-4及Dectin-1的表达上调相关。

Dectin-1在角膜抗真菌免疫中的作用

β-葡聚糖是真菌细胞壁多糖成分中一种高度保守的结构成分，树突状细胞相关性C型植物血凝素-1（dectin-1）作为β-葡聚糖的主要模式识别受体，广泛分布于单核巨噬细胞系统、树突状细胞（DC）及中性粒细胞等细胞中，通过对真菌的识别作用及细胞的信号转导，诱导机体产生一系列的细胞因子及趋化因子，启动非特异性免疫及特异性免疫，对机体的抗真菌免疫反应发挥重要作用。就dectin-1的分子结构、组织细胞分布、信号传导及其在角膜免疫、炎症反应中的作用等进行综述。

姬松茸多糖对树突状细胞Dectin-1、Syk及CARD9基因表达和T淋巴细胞增殖的影响

目的:探讨低相对分子质量姬松茸多糖(low molecular weight polysaccharide isolated from Agaricus blazei Murill,LMPAB)对树突状细胞C型植物血凝素1(Dectin-1),脾酪氨酸激酶(Sky)和胱天蛋白募集域蛋白9(CARD9)基因表达和T淋巴细胞增殖的影响。方法:体外培养ICR小鼠骨髓来源的树突状细胞;通过流式细胞术检测树突状细胞表面CD11c和CD86分子的表达;采用WST方法检测LMPAB增强树突状细胞对T淋巴细胞的增殖作用;应用实时定量PCR方法检测Dectin-1,Sky和CARD9 mRNA的表达水平。结果:树突状细胞表面CD11c表达98.6%,CD86表达96.97%;与正常组(4.84±0.21)比较,LMPAB+OVA组(6.59±0.19)可增强树突状细胞对T淋巴细胞的增殖作用(P<0.05);与正常组Dectin-1(6.13±0.27),Sky(0.36±0.11)和CARD9(1.85±0.20)比较,LMPAB+OVA组Dectin-1(8.25±0.19),Sky(1.63±0.16)和CARD9(4.40±0.19)明显升高,统计学具有显著意义(P<0.05)。结论:所培养的髓系细胞为树突状细胞;LMPAB可通过调控树突状细胞Dectin-1,Sky和CARD9 mRNA的表达增强树突状细胞的免疫效能。

烟雾暴露对大鼠肺泡巨噬细胞曲霉防御功能的影响

目的研究烟雾暴露对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)曲霉防御功能的影响。方法建立烟雾暴露大鼠模型,分离肺泡巨噬细胞,并用免疫荧光法进行鉴定。加入烟曲霉孢子共培养,测定AM的吞噬率及吞噬指数;用ELISA方法检测培养上清中TNF-α和IL-1β的浓度;用免疫组化检测树突状细胞相关性C型植物血凝素-1(Dectin-1)蛋白的表达。结果烟雾暴露组AM对烟曲霉孢子的吞噬率下降(P<0.05),吞噬指数无显著变化。孢子刺激后,烟雾暴露组培养上清中TNF-α和IL-1β的浓度显著低于对照组(P<0.05)。烟雾暴露组AM中Dectin-1蛋白的表达低于对照组(P<0.05)。结论烟雾暴露使大鼠AM吞噬能力下降,对曲霉的防御功能受损,这种功能变化可能与Dectin-1蛋白表达降低有关。