HPLC-ELSD法测定硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊中庆大霉素C组分及有关物质含量

目的为硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊中庆大霉素C组分及有关物质建立质控方法。方法采用HPLC-ELSD方法,色谱柱:GRACEApollo C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.2 mol/L三氟乙酸溶液-甲醇(96:4,V/V),流速0.6 mL/min;柱温30℃;进样量20μL;Waters低温分流型蒸发光散射检测器,载气流量40 psi,漂移管温度55℃。结果所建方法通过方法学验证,庆大霉素C组分与各杂质间分离完全,庆大霉素、西索米星和小诺霉素分别在0.5~6 mg/mL、25~100μg/mL和25~100μg/mL的浓度范围内,各浓度的对数值与对应色谱峰面积的对数值呈现出良好的线性。采用所建方法对市售16家生产企业43批次硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊样品进行测定,获得该制剂产品中各组分及有关物质的数据。结论所建方法是在中国药典方法基础上优化并验证适用于硫酸庆大霉素碳酸铋胶囊C组分及有关物质的含量测定,方法简便准确,专属性强,稳定性好。由获得的实验数据可知,该复方制剂中C组分及有关物质的含量在各厂家间或同厂家不同批次间差异显著,可能存在影响用药安全的潜在隐患,建议在该剂型质量标准中增加相关质控项。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法分析庆大霉素C组分

目的:建立一种理想的庆大霉素C组分分析方法,为克服现行药典方法的不足提供新思路。方法:应用高效液相色谱-蒸发光散射检测法分析庆大霉素C组分。色谱条件为:Diamonsil(钻石)C_(18)色谱柱,规格:150 mm×4.6 mm,5 μm;流动相:0.2mol·L^(-1)三氟醋酸水溶液-甲醇(94:6),流速为0.6mL·min^(-1);检测器条件:漂移管温度为110℃,载气流速为2.80L·min^(-1)。应用随行标准曲线法确定庆大霉素C组分组成。结果:庆大霉素中的4个主要组分C_(1a),C_2,C_(2a),C_1在上述色谱条件下能完全分离,分析时间仅需30 min;精密度优于1.0％;庆大霉素各组分在蒸发光散射检测器中的响应因子一致。庆大霉素标准品采用本法测定结果(C_(1a):29.4％;C_2:26.5％;C_(2a):13.1％;C_1:31.1％)与BP方法标化结果(C_(1a):30.1％;C_2:24.9％;C_(2a):14.1％;C_1:30.9％)一致。结论:本法操作简单,方法的精密度、准确性、重现性均能很好地满足质量控制的要求,能有效克服现行药典方法的不足,是一种比较理想的庆大霉素C组分分析方法。

庆大霉素C组分测定误差的比较分析

中国药典自１９９０版收载庆大霉素Ｃ组分ＨＰＬＣ检查法以来，不同实验室间的测定误差一直相对较大，为此，９个药品检验所协同开展工作，寻找不同实验室间相对误差较大的原因及有效控制不同实验室间测定误差的方案。研究结果表明，Ｃ１组分前后多个不能和Ｃ１峰达到基线分离的小杂质峰组分，可使得在不同条件下积分测得的Ｃ１组分的含量明显不同，导致各实验室利用规一化法测定庆大霉素Ｃ１组分的相对含量结果差异较大。采用英国药典和欧洲药典已收载的相对峰高法测定庆大霉素Ｃ组分的含量。

高效液相色谱法测定庆大霉素C组分的不同检测方式测定结果的比较

各国药典中关于庆大霉素C组分的测定方法均为高效液相色谱法,但检测方式及分离效果不同。为此采用直观推导式演进特征投影法(HELP),对高效液相色谱-二极管阵列检测采集的庆大霉素C组分色谱数据进行解析,分辨出各物质的色谱曲线,在扣除了未分离的杂质峰对庆大霉素C1组分的干扰后,对柱前邻苯二醛衍生化-二极管阵列检测法及目前中国药典2005版收载的高效液相色谱-蒸发光散射检测方法测定庆大霉素C组分的准确性进行了比较,并运用柱切换技术,证明二者测定结果的一致性。

柱切换HPLC-ELSD法测定硫酸庆大霉素颗粒中庆大霉素C组分的研究

目的建立柱切换高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定硫酸庆大霉素颗粒中庆大霉素C组分含量,并对2017年国家评价性抽验190批次样品进行检测。方法采用配置切换六通阀的高效液相色谱仪,GRACE Apollo C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.2mol/L三氟乙酸溶液:甲醇(96:4,V/V),柱温35℃,流速0.6mL/min,进样量25μL,ELSD漂移管温度110℃,载气流量2.5L/min,增益1。结果采用新建的柱切换HPLC-ELSD法可有效去除辅料蔗糖等对测定的干扰,庆大霉素C组分(C1、C1a、C2、C2a)的平均回收率分别为98.9%、102.0%、100.1%和98.6%,RSD(n=9)分别为0.5%、0.4%、0.3%和0.6%,线性范围分别为0.0517~0.6465、0.0538~0.6729、0.0651~0.8136和0.0299~0.3738mg/mL。190批次样品中12批次样品的庆大霉素C1偏低,2批次样品的庆大霉素总C组分含量偏低,3批次样品的庆大霉素总C组分含量偏高。结论新建方法准确简便,专属性良好,可为硫酸庆大霉素颗粒中庆大霉素C组分的控制提供参考。

HPLC-ELSD测定硫酸庆大霉素有关物质及其C组分质量标准改进

目的建立HPLC—ELsD测定硫酸庆大霉素有关物质及改进C组分的测量方法。方法色谱柱采用耐酸的c18柱（pH适应范围0．8-8．0），流动相为0．2mol／L的三氟醋酸-甲醇（92：8）；流速为0．6mL／min；用蒸发光散射检测器检测，漂移管温度110℃，载气为2．8L／min。结果硫酸庆大霉素各组分与有关物质分离完全，可用外标法测定硫酸小诺霉素和西索米星的含量及庆大霉素C组分的含量。结论所用方法准确，灵敏度高，重现性好，可有效地控制药品的质量。

庆大霉素C组分和有关物质测定的HPLC-柱后衍生化法与脉冲安培电化学法的比较研究

目的：参考《欧洲药典》的HPLC-脉冲安培电化学法建立高效液相色谱-柱后衍生化法测定庆大霉素C组分含量及其有关物质,同时与电化学法进行比较研究。方法：采用亲水性Hydrosphere C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以含0.7%三氟乙酸及0.025%五氟丙酸的50 mmol·L-1氢氧化钠溶液（pH 2.6）-乙腈（98.5∶1.5）为流动相。衍生化法反应温度30℃,荧光激发波长340 nm,发射波长430 nm。电化学法采用脉冲安培检测器,金电极为工作电极,四电位波形工作模式。结果：两种方法测定的庆大霉素C组分（C1a,C2,C2a和C1）分别在5.82~233.00,6.92~277.00,4.00~160.00和6.23~249.00μg·ml-1的浓度范围内线性关系良好（r均≥0.999 3）,检测限和定量限范围分别为0.92~3.28 ng和1.37~5.19 ng。结论：两种方法的检测结果无明显差异。

眼镜蛇毒C组分对白血病细胞中基质金属蛋白酶-2、9表达的影响

目的探讨眼镜蛇毒C组分对白血病细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9表达和活性的影响。方法用10 ng/mL的眼镜蛇毒C组分对白血病细胞进行0、12、24、48 h处理。用ELISA、明胶酶谱法和荧光RT-PCR法检测不同时间处理后白血病细胞MMP-2和MMP-9的表达水平。结果与处理0 h相比,白血病细胞经10 ng/mL的眼镜蛇毒C组分分别处理12、24、48 h后,用ELISA检测结果显示MMP-2、MMP-9活性下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);明胶酶谱法检测结果显示MMP-2、MMP-9活性下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);荧光定量RT-PCR检测结果显示,MMP-2、MMP-9 mRNA相对含量下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 10 ng/mL眼镜蛇毒C组分对白血病细胞MMP-2和MMP-9的表达均有抑制作用,眼镜蛇毒C组分对白血病细胞的抑制作用可能与其抑制MMP-2和MMP-9表达和活性相关。

用核磁共振方法测定庆大霉素C组分比率

利用核磁共振氢谱 (1HNMR)峰面积积分法建立了一种测定庆大霉素C组分比率的新方法 ,可以通过计算准确、快速地得到C1、C1a和C2 各组分的比率。C1、C1a和C2 的相对标准偏差分别为 0 .5 8% ,0 .5 1%和 0 .5 0 %。与常用的高效液相色谱法相比 ,此法具有简单、方便、无需标准品等优点 ,为庆大霉素的质量控制提供了一种新的有效方法。

中华眼镜蛇毒C组分诱导U251细胞凋亡及P53基因表达的实验研究

目的以人神经胶质瘤细胞系U251为实验对象,研究中华眼镜蛇毒C组分诱导细胞凋亡的机制。方法将中华眼镜蛇毒C组分分为1.5μg/mL(A组),3μg/mL(B组),4.5μg/mL(C组),15μg/mL(D组)和30μg/mL(E组)5个浓度组,以顺铂(DDP)40μg/mL为阳性对照组,另设一阴性对照组,观察光镜下细胞的形态变化,采用DNA凝胶电泳检测法,观察FC诱导细胞凋亡的情况;采用SP免疫组化法和RT-PCR法检查P53基因的表达。结果中华眼镜蛇毒C组分对U251细胞具有诱导凋亡的作用,FC诱导U251细胞凋亡率与药物浓度密切相关(P<0.01),使用FC前后,P53表达有显著增高。结论FC有诱导U251细胞凋亡的作用,但其诱导凋亡依赖于P53基因的改变。

直观推导式演进特征投影法测定庆大霉素C组分含量

目的:验证中国药典方法测定庆大霉素 C 组分含量的准确性,同时考察直观推导式演进特征投影(HELP)法应用于多组分药物色谱分析的适用性。方法:用直观推导式演进特征投影(HELP)法,对高效液相色谱仪-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)采集的色谱数据进行解析,分辨出各物质的色谱曲线,用庆大霉素 C_1组分的纯色谱曲线进行积分定量,并进行了方法学考察。结果:解析结果扣除了未分离的杂质峰的干扰,对样品中的庆大霉素 C_1组分进行了准确定量。结论:运用化学计量学方法为色谱难分离的多组分抗生素的分析提出了一种有效途径。

硫酸庆大霉素注射液的C组分检查

用高效液相色谱法检查 1 999年及 2 0 0 0年共抽检的 41批硫酸庆大霉素注射液的 C组分及含量其中有 1 6批 C组分检查不合格。《中国兽药典》二年版中增加了硫酸庆大霉素的 C组分检查 ,而注射液没有增加 [1] ,根据检测结果建议在硫酸庆大霉素注射液的标准中应增加此项检查。

康奈尔净碳水化合物和蛋白质体系定义的C组分的小肠可消化性

本试验旨在评定康奈尔净碳水化合物和蛋白质体系(CNCPS)的C组分的小肠可消化性。从奶牛场采集10种饲料样品,测定其C组分的瘤胃降解率,采用体外法测定饲料原料及12 h瘤胃降解残渣的C组分的小肠消化率。结果表明,10种饲料C组分的瘤胃降解速度常数(k c)在0.39%/h^3.89%/h之间;饲料原料C组分小肠消化率在0~81.61%之间,饲料12 h瘤胃降解残渣C组分小肠消化率在0~43.21%之间,表明不同的饲料原料和12 h瘤胃降解残渣之间的C组分小肠消化率存在差异,部分饲料具有很高的C组分小肠消化率,不应忽略。结果提示,CNCPS定义的C组分在瘤胃中可以降解,且部分种类饲料该组分具有很高的小肠消化率,在评定饲料品质时应考虑C组分对小肠可消化氨基酸流量的贡献。

庆大霉素C组分三国药典测定方法的对比研究

对硫酸庆大霉素Ｃ组分进行了测定，并用中国药典、英国药典、美国药典不同的计算方法，对实验结果进行计算。通过分析实验结果，比较三国药典的计算方法和色谱控制条件，可以看出。

硫酸庆大霉素C组分测定方法的初步研究

本文通过6个独立周期实验，考察了中国药典1995年版庆大霉素C组分测定方法的重复性。同时，将中国药典方法与美国药典1993年版方法进行了对比研究。实验数据证明：中国药典方法的系统适用性指标不能有效地确保检测的准确度；英国药典方法更为可靠，关键是采用了标准品进行校正计算。作者通过大量实验数据证实了上述结论，并就其原因进行了理论分析，同时提出了相关建议。

高效液相色谱-串联质谱法检测水产品中庆大霉素C组分残留量

目的:构建一种准确高效快速检测水产品中庆大霉素C组分的高效液相色谱-串联质谱检测方法。方法:样品用C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,5μm),乙腈-0.1%五氟丙酸梯度洗脱,ESI+离子源,MRM检测模式,外标法定量。结果:在0.005~0.800 mg·L^(-1)浓度与峰面积线性良好,r≥0.9998;在5.0~100.0μg·kg^(-1)加标浓度,平均回收率在71.9%~101.0%,RSD在3.32%~8.55%,方法检出限为5μg·kg^(-1)。结论:该方法可检测水产品中庆大霉素C组分,方法回收率高、准确、灵敏、高效。

硫酸庆大霉素注射液C组分含量测定方法的改进

目的改进传统分析方法,采用以乙醇为流动相有机相的HPLC法测定硫酸庆大霉素注射液C组分的含量。方法采用Welch Ultimate C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流速0.7 mL·min^(-1),流动相为0.2 mol·L^(-1)三氟乙酸溶液-乙醇(96∶4),柱温40℃,蒸发光散射检测器的漂移管温度50℃,载气压力为350 kPa。结果硫酸庆大霉素C1、C1a、C2、C2a的线性范围分别为0.1725~0.8503、0.1649~0.8129、0.1834~0.9038、0.1118~0.5508 mg·mL^(-1)(r≥0.9998),平均回收率为99.80%~100.18%,RSD为0.36%~1.03%(n=6)。结论乙醇与蒸发光检测器有良好兼容性,适用于硫酸庆大霉素注射液C组分的含量测定。所用方法安全、环保,结果准确,建议推广使用。

裂解C_(9)组分制备高纯度双环戊二烯技术研究

裂解C_(9)组分中含有大量的双环戊二烯馏分,为了提高回收双环戊二烯的纯度,采用常压蒸馏的方式从裂解C9组分中回收双环戊二烯,然后通过气相解聚的方式将其裂解成环戊二烯,最后再通过聚合的方式制备高纯度的双环戊二烯。不同阶段工艺参数优化实验结果表明:当精馏塔顶温度为106℃、回流比为2时,常压蒸馏后回收双环戊二烯的效果最好,收率可以达到85.6%;当氮气与双环戊二烯的摩尔比为2、反应时间为8 s、一段反应温度为260℃、二段反应温度为280℃时,气相解聚效果最好,双环戊二烯的解聚率可以达到99.9%,环戊二烯的收率可以达到98.8%;当聚合反应时间为10h、聚合反应温度为80℃时,采用聚合法制备的双环戊二烯纯度可以达到99.1%,达到了高纯度产品的要求。

轻烃回收装置液化气C5组分超标原因分析

通过对轻烃回收装置液化气中C5组分超标情况进行原因分析,发现是稳定塔进料温度波动、带炼T-35104罐污油、加工脱丁烷塔顶气、稳定塔塔顶水冷器冷却效果不佳等因素所造成。对稳定塔重沸器温度、塔42层温度、塔进料温度、塔顶压力等工艺参数进行优化调整,产品分析报告显示,液化气C5组分含量均≯3%,产品质量满足工艺要求,为同类装置的安全经济运行积累了经验。

离子色谱法测定硫酸庆大霉素片的C组分及有关物质

目的:建立离子色谱法测定硫酸庆大霉素片的C组分含量及有关物质。方法:采用ThermoAcclaim^(TM) AmG C_(18)(4.6 mm×150 mm,3μm)色谱柱,流动相为0.7%三氟乙酸(含0.025%五氟丙酸,50%氢氧化钠4 mL,用50%氢氧化钠溶液调节pH至2.6)-乙腈(96.5∶3.5);流速为1.0 mL·min^(-1),柱后溶液为2%的氢氧化钠溶液,柱后流速0.3 mL·min^(-1),柱温35℃;检测器为脉冲安培电化学检测器,工作电极为金电极(直径3 mm),检测电位为四电位。结果:硫酸庆大霉素片C_1、C_(1a)、C_2、C_(2a)分别在1.328～132.8、1.606～160.6、7.378～737.8、1.276～127.6μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,回收率范围为98.2%～101.8%;有关物质测定,西索米星在2.632～52.64μg·mL^(-1)、小诺霉素在2.006～25.07μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,西索米星检测下限为0.01μg,小诺霉素检测下限为0.02μg;各杂质与硫酸庆大霉素各C组分色谱峰间均能完全分离。结论:该方法准确灵敏,可用于硫酸庆大霉素片的质量控制。