C组轮状病毒主要基因全片段扩增及武汉地方株Wu82的VP6和VP7编码基因序列分析

目的建立C组轮状病毒VP6、VP7、VP4和NSP4基因全片段扩增方法;明确武汉地方株Wu82与其他毒株的系统发生关系。腹泻患者大便。方法PAGE筛查病毒;设计9对引物RT-PCR扩增VP6、VP7、VP4和NSP4基因;VP6、VP7序列及亲水位点分析。结果Wu82VP6和VP7基因核酸序列与其它人C组轮状病毒相比同源性分别为98.45%～97.12%和99.34%～94.83%。结论C组轮状病毒基因非常保守,进化缓慢。2001年武汉地方株Wu82与1995年武汉地方株208株相比,VP7和VP6抗原表位存在差异。

C组轮状病毒的分子生物学研究进展

通过基因组的cDNA克隆序列测定和与A组轮状病毒的比较分析,C组轮状病毒部分蛋白的编码基因已确定。现有资料表明在引起人类腹泻的A、B、C三组轮状病毒中,A组与C组的遗传学关系更为密切,不同来源的C组轮状病毒株之间存在高度的序列同源性。

哈尔滨地区首次从腹泻病人粪便中检出C组轮状病毒

轮状病毒是人类及动物腹泻的重要病原因子。根据组抗原和RNA基因组电泳图型的不同分有A、B、C、D和E组。其中A、B组在我国引起婴幼儿及成人的腹泻已有多篇报道,但C组引起感染的报道极少,仅见两篇,这两篇报道中患者都为湖南省郴州地区。我们于1986年从采集的婴幼儿腹泻粪便中检出一株非典型轮状病毒,根据电镜形态、病毒核酸电泳等实验结果,初步可以认为属于C组轮状病毒。

P[5]型猪C组轮状病毒Por2011 VP8*蛋白的表达及糖结合特征研究

轮状病毒(Rotaviruses,RVs)是引起人和动物病毒性腹泻的重要病原,本文旨在研究猪C组轮状病毒(Group C rotaviruses,RVCs)VP8*蛋白的受体结合特征。本研究合成一株P[5]型猪C组轮状病毒(Por2011)的VP8*基因,经体外原核表达,采用亲和层析纯化获得VP8*目的蛋白,利用糖点阵实验、寡糖结合实验研究其寡糖结合特征,再通过序列比对和突变分析确定其潜在受体结合位点。结果显示猪C组轮状病毒Por2011 VP8*蛋白与P1抗原特异性结合,但第108位氨基酸突变后的蛋白则不能与P1抗原结合。本研究表明猪C组轮状病毒的某些型别可能以P1抗原为潜在受体,该受体结合位点与人C组轮状病毒的受体结合位点较为接近,这为猪C组轮状病毒感染机制的研究提供了一定的依据和基础。

人和动物C组轮状病毒VP8*蛋白糖结合特征的研究

目的研究人和动物C组轮状病毒VP8^*蛋白与糖的结合特征,为人和动物C组轮状病毒感染机制提供基础和依据.方法利用原核表达系统表达并纯化人和动物病毒毒株的VP8^*蛋白,通过糖点阵实验、寡糖结合实验及血凝实验等方法研究其糖结合特征.结果人C组轮状病毒sz94 VP8^*蛋白不仅与A糖结合,还与黏蛋白核心mucin core 4糖结合.狗C组轮状病毒糖点阵实验显示,可以结合A糖,人和狗C组轮状病毒可以凝集A型红细胞,猪P[5]、P[8]、P[19]、P[21]与实验中的寡糖都没有结合,也都没有凝集各型红细胞.结论黏蛋白核心在人C组轮状病毒可能是潜在的粘附分子,A型组织血型抗原可能也是某些动物C组轮状病毒的粘附分子,猪C组轮状病毒具体结合的糖类型还需进一步探索.