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牛MSTN启动子与MEF2C转录因子相互作用的研究 被引量:2
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作者 杨涛 许厚强 +3 位作者 陈伟 周迪 王圆圆 朱晓锋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1567-1575,共9页
旨在解析牛MSTN启动子与MEF2C之间的相互调控作用,进一步探讨MSTN基因在肉牛肌肉生长发育方面的调控机制。首先,通过PCR扩增关岭牛MSTN启动子序列2 267 bp和MEF2C基因CDS区1 425 bp。其次,构建pGL3-Basic-MSTN和pcDNA3.1(+)-MEF2C双荧... 旨在解析牛MSTN启动子与MEF2C之间的相互调控作用,进一步探讨MSTN基因在肉牛肌肉生长发育方面的调控机制。首先,通过PCR扩增关岭牛MSTN启动子序列2 267 bp和MEF2C基因CDS区1 425 bp。其次,构建pGL3-Basic-MSTN和pcDNA3.1(+)-MEF2C双荧光素酶报告载体,采用脂质体法共转染至小鼠C2C12成肌细胞,24 h后检测其双荧光素酶活性。最后,通过PCR扩增MSTN启动子核心片段MSTN-P1,重新构建以MSTN-P1片段替代(CMV)区的重组表达载体pEGFP-N3-MSTN-P1-MEF2C,将其分别转染至小鼠C2C12成肌细胞和大鼠下颌腺上皮细胞,24 h后观察绿色荧光蛋白发光情况,48 h后提取细胞总RNA,利用qRT-PCR检测MEF2C基因在不同细胞中的表达情况。结果显示,在小鼠C2C12成肌细胞中,共转染pcDNA3.1(+)-MEF2C试验组较pGL3-Basic-MSTN试验组能显著增强MSTN启动子的活性(P<0.05),较pGL3-Basic对照组能极显著增强MSTN启动子的活性(P<0.01);MSTN启动子核心片段MSTN-P1能驱动MEF2C基因在小鼠C2C12成肌细胞中的表达量极显著上调(P<0.01),且能驱动MEF2C基因在大鼠下颌腺上皮细胞中的表达量显著上调(P<0.05)。结果表明,在转录水平,MSTN启动子与MEF2C可能同时参与了牛肌肉生长和分化的调控。 展开更多
关键词 MSTN启动子 MEF2c转录因子 互作
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烟草C2H2锌指蛋白转录因子家族成员的鉴定与表达分析 被引量:16
2
作者 杨明磊 晁江涛 +4 位作者 王大伟 胡军华 吴华 龚达平 刘贯山 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期337-349,共13页
C2H2锌指蛋白转录因子家族在真核生物中具有重要的生物学功能,广泛参与植物叶的发生、花器官的调控、侧枝的形成及逆境胁迫等生命过程。植物C2H2锌指蛋白不仅结合DNA和RNA,而且与蛋白质之间相互作用。本研究利用普通烟草(Nicotiana taba... C2H2锌指蛋白转录因子家族在真核生物中具有重要的生物学功能,广泛参与植物叶的发生、花器官的调控、侧枝的形成及逆境胁迫等生命过程。植物C2H2锌指蛋白不仅结合DNA和RNA,而且与蛋白质之间相互作用。本研究利用普通烟草(Nicotiana tabacum)基因组数据库,运用Blastp比对,结合Pfam和SMART分析,鉴定了118条普通烟草C2H2锌指蛋白家族成员;对烟草C2H2锌指蛋白家族进行了进化树分析、结构域分析、物理化学性质分析、染色体定位、基因结构分析、三维结构分析及组织表达分析等。结果表明:不同成员的氨基酸长度差异较大;系统进化及结构域分析显示,所有C2H2家族成员可以被分为5个亚家族,同一亚家族成员之间在结构域和理化性质上呈现较高一致性;每个成员都含有C2H2结构域,在数量上存在较大差异;将所有基因家族成员定位在22条染色体上;组织表达分析表明,每个C2H2亚家族都有成员在不同组织中表达,在叶及根中有些基因的表达量较高。 展开更多
关键词 c2H2锌指蛋白转录因子 烟草 基因家族
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转录因子C/EBP β的生物学功能 被引量:6
3
作者 成军 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第2期408-412,共5页
0 引言。转录因子CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT enhancer binding protein,C/EBP)包括C/EBPα、C/EBPβ、C/EBP δ、C/EBP ε等蛋白,在体内的生物学作用各不相同.C/EBPα在粒细胞形成中具有重要的调节作用C/EBPα基因缺陷可以... 0 引言。转录因子CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT enhancer binding protein,C/EBP)包括C/EBPα、C/EBPβ、C/EBP δ、C/EBP ε等蛋白,在体内的生物学作用各不相同.C/EBPα在粒细胞形成中具有重要的调节作用C/EBPα基因缺陷可以导致早期的粒细胞分化障碍.C/EBPα功能异常在人急性髓性白血病中十分常见。 展开更多
关键词 转录因子c EBPβ 生物学 脂肪代谢 信号转导 细胞凋亡
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恶性黑素瘤细胞miR-508-3p与叉头框转录因子C1的关系及对增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 朱世文 王刚 +2 位作者 罗文娟 王丽雯 王倩 《实用皮肤病学杂志》 2020年第5期257-261,共5页
目的探讨miR-508-3p与叉头框转录因子C1(forkhead box C1,FOXC1)的关系及其在恶性黑素瘤中的表达和作用机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测mi R-508-3p和FOXC1在HEM正常黑素细胞及A375恶性黑素瘤细胞中的表达;将体外... 目的探讨miR-508-3p与叉头框转录因子C1(forkhead box C1,FOXC1)的关系及其在恶性黑素瘤中的表达和作用机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测mi R-508-3p和FOXC1在HEM正常黑素细胞及A375恶性黑素瘤细胞中的表达;将体外培养的A375细胞分为mimics NC组、mi R-508-3p mimics组、inhibitor NC组和mi R-508-3p inhibitor组,RT-qPCR检测其沉默效果及对FOXC1 mRNA水平的影响;免疫印迹法(Western blot)分别检测FOXC1蛋白的表达量;MTT法检测A375细胞的增殖能力;Transwell实验检测转染后A375细胞侵袭及迁移能力的变化;荧光素酶报告基因技术检测FOXC1是否为mi R-508-3p的直接靶基因。结果与人正常黑素细胞相比,A375细胞中mi R-508-3p表达明显降低,而FOXC1表达明显升高;与inhibitor NC组相比,转染mi R-508-3p inhibitors的A375细胞中mi R-508-3p的表达明显下调,FOXC1 mRNA和蛋白表达、细胞的增殖、侵袭及迁移能力明显升高;与mimics NC组相比,转染mi R-508-3p mimics的A375细胞中mi R-508-3p的表达明显升高,FOXC1 mRNA和蛋白表达、细胞的增殖、侵袭及迁移能力明显降低;mi R-508-3p mimics可降低野生型FOXC1 3’-UTR的荧光素酶报告基因相对活性。结论 mi R-508-3p通过负向调控FOXC1抑制恶性黑素瘤的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 黑素瘤 恶性 叉头框转录因子c1 miR-508-3p 增殖 迁移 侵袭
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植物B、C类热激转录因子研究进展 被引量:2
5
作者 李红颖 王凤德 +4 位作者 邱念伟 张一卉 李化银 李景娟 高建伟 《山东农业科学》 2015年第1期144-148,共5页
热激转录因子(HSFs)在调控植物生长发育和胁迫响应中具有重要的作用。根据结构的不同,植物HSFs可分为A、B和C三类。由于B类和C类HSFs缺少AHA转录激活结构域,因此人们对HSFs的研究重点放在了A类。但近年来越来越多的证据表明B类和C类HSF... 热激转录因子(HSFs)在调控植物生长发育和胁迫响应中具有重要的作用。根据结构的不同,植物HSFs可分为A、B和C三类。由于B类和C类HSFs缺少AHA转录激活结构域,因此人们对HSFs的研究重点放在了A类。但近年来越来越多的证据表明B类和C类HSFs在调控植物生长发育和响应逆境胁迫的过程中也具有重要的作用,并日益得到人们的重视。本文综合了近几年的研究结果,对植物B类和C类HSFs的结构、组成以及生物学功能作了简要综述,以期为其研究和利用提供参考。 展开更多
关键词 植物B、c类热激转录因子 结构 组成 生物学功能
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胃癌组织中转录因子叉盒蛋白C1表达与肿瘤临床生物学行为及预后的关系 被引量:3
6
作者 万爱民 李冬 《检验医学与临床》 CAS 2019年第9期1215-1217,共3页
目的探讨胃癌组织中转录因子叉盒蛋白C1(FOXC1)表达与肿瘤临床生物学行为及预后的关系,并对FOXC1与干细胞标志物CD44和醛脱氢酶1(ALDH1)的关系进行分析。方法采用免疫组织化学法检测FOXC1、CD44、ALDH1在胃癌及癌旁中的表达,整理患者的... 目的探讨胃癌组织中转录因子叉盒蛋白C1(FOXC1)表达与肿瘤临床生物学行为及预后的关系,并对FOXC1与干细胞标志物CD44和醛脱氢酶1(ALDH1)的关系进行分析。方法采用免疫组织化学法检测FOXC1、CD44、ALDH1在胃癌及癌旁中的表达,整理患者的临床病理资料并进行随访。结果 FOXC1、CD44及ALDH1在胃癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。FOXC1与患者淋巴结转移、TNM分期有相关性(P<0.05)。FOXC1阳性表达患者总体生存率为7.69%,明显低于FOXC1阴性表达患者(56.25%)。Cox比例风险回归分析显示,FOXC1阳性表达是胃癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。FOXC1与CD44呈正相关(P<0.05)。结论 FOXC1与胃癌的侵袭转移有关,FOXC1阳性表达是胃癌预后不良的标志。 展开更多
关键词 胃癌 转录因子叉盒蛋白c1 转移 预后
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小麦热激蛋白转录因子C家族基因的结构及其在干旱胁迫中的表达 被引量:1
7
作者 王付娟 李宗震 +1 位作者 仝胜利 李淑梅 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期416-424,共9页
小麦热激蛋白转录因子在热胁迫和耐热性产生的过程中发挥重要作用。为进一步了解小麦热激蛋白转录因子C亚家族,本研究采用全基因组信息保守结构域比对和进化聚类分析,共鉴定了24个小麦TaHsfC基因,并对TaHsfC亚家族成员染色体定位、基因... 小麦热激蛋白转录因子在热胁迫和耐热性产生的过程中发挥重要作用。为进一步了解小麦热激蛋白转录因子C亚家族,本研究采用全基因组信息保守结构域比对和进化聚类分析,共鉴定了24个小麦TaHsfC基因,并对TaHsfC亚家族成员染色体定位、基因结构、亚细胞定位、对应蛋白质的氨基酸特点、基因表达进行了分析。结果表明,24个TaHsfCs主要分布在5条染色体上,其中A基因组中有7个,B基因组中9个,D基因组中有6个,另外两个所在染色体位置不清楚。TaHsfCs含有0~2个内含子,其中TaHsfC1亚族基因含有1~2个内含子,TaHsfC2亚族基因则含有0~1个内含子。聚类分析表明,小麦TaHsfC成员共分为TaHsfC1和TaHsfC2两个亚族。24个TaHsfCs成员全部定位于细胞核。在15%PEG模拟干旱条件下,干旱敏感品种矮抗58和耐旱品种晋麦47中有10个TaHsfC基因显著上调表达,其中TaHsfC2亚族基因的表达量上调倍数均高于TaHsfC1亚族基因(其中TaHsfC2j和TaHsfC2k未在晋麦47中检测到表达量)。本研究可为探索小麦热激蛋白转录因子C家族基因在小麦抗旱中的分子机制提供一定的理论支撑。 展开更多
关键词 热激蛋白转录因子c 干旱胁迫 基因结构分析 表达模式分析 小麦
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滇龙胆C2H2基因家族鉴定及响应茉莉酸甲酯诱导表达分析
8
作者 谷云霞 王梦琦 +2 位作者 张婷 单李铭 刘小莉 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第9期51-57,共7页
滇龙胆(Gentiana rigescens)是龙胆药材的基源植物之一,C2H2锌指蛋白是锌指蛋白家族中的一个大家族,其成员在1年生滇龙胆转录中最为丰富,本研究拟在对滇龙胆转录组中C2H2基因家族进行鉴定并分析响应茉莉酸甲酯(MeJA)诱导表达模式,为滇龙... 滇龙胆(Gentiana rigescens)是龙胆药材的基源植物之一,C2H2锌指蛋白是锌指蛋白家族中的一个大家族,其成员在1年生滇龙胆转录中最为丰富,本研究拟在对滇龙胆转录组中C2H2基因家族进行鉴定并分析响应茉莉酸甲酯(MeJA)诱导表达模式,为滇龙胆C2H2转录因子功能研究提供参考。基于滇龙胆转录组数据,利用NCBI、MAFFT、MEME、STRING等在线网站及TBtools软件对其基因信息、进化关系、表达模式等进行分析。结果表明,从滇龙胆转录组中共鉴定出31个含有C2H2保守结构域的序列(GrC2H2 1~GrC2H2 31),编码的氨基酸数量在53(GrC2H2 14)~604个(GrC2H2 31)之间,等电点介于4.23~9.92之间,且31个家族成员都定位在细胞核中,其家族分为10个亚家族,GrC2H2 5、GrC2H2 6、GrC2H2 8、GrC2H2 11、GrC2H2 17、GrC2H2 18、GrC2H2 19、GrC2H2 22、GrC2H2 23和GrC2H2 31共10个转录因子为滇龙胆C2H2转录因子的正调控因子。2种浓度MeJA诱导后C2H2表达模式显示,MeJA浓度越高,GrC2H2基因表达量越高。本研究首次鉴定了滇龙胆C2H2基因家族并分析了其响应MeJA表达模式,可为后续深入研究C2H2基因家族功能及滇龙胆优质品种的选育提供理论参考。 展开更多
关键词 滇龙胆 生物信息学 c2H2转录因子 基因表达 茉莉酸甲酯诱导
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免疫组化法检测CD73和转录因子叉头框C2对上皮性卵巢肿瘤检测的价值 被引量:2
9
作者 赖广华 杨晓婷 +1 位作者 赖名溪 卓李圆 《中国医学工程》 2020年第1期65-69,共5页
目的分析上皮性卵巢肿瘤组织中CD73和转录因子叉头框C2(FOXC2)的表达情况及与临床病理特征及肿瘤生物学行为的关系。方法选取该院2017年6月至2018年10月手术切除的卵巢组织标本130例,其中良性上皮性肿瘤30例,交界性上皮性肿瘤35例,恶性... 目的分析上皮性卵巢肿瘤组织中CD73和转录因子叉头框C2(FOXC2)的表达情况及与临床病理特征及肿瘤生物学行为的关系。方法选取该院2017年6月至2018年10月手术切除的卵巢组织标本130例,其中良性上皮性肿瘤30例,交界性上皮性肿瘤35例,恶性上皮性肿瘤45例,正常卵巢组织20例。采用免疫组化法染色,比较不同卵巢组织中CD73、FOXC2表达水平,并分析其与年龄、组织学分型等临床特征及肿瘤生物学行为的关系。结果 CD73和FOXC2在恶性上皮性卵巢肿瘤中呈高强度表达,在良性及交界性上皮性卵巢肿瘤中表达强度显著降低,在正常卵巢组织中为低强度表达,差异有统计学意义(P<0.05)。CD73和FOXC2的表达与年龄及组织学分型无关(P>0.05),而与组织学分级、临床分期及有无淋巴结转移有关(P<0.05),组织学级别高、临床中晚期、淋巴结有转移的肿瘤组织中CD73与FOXC2表达强度高。上皮性卵巢肿瘤CD73与FOXC2表达呈线性正相关关系(r=0.833, P=0.004)。结论 CD73、FOXC2在上皮性卵巢肿瘤细胞中呈现高强度表达,并与肿瘤的转移和侵袭密切相关,可作为上皮性卵巢肿瘤早期诊断和预后评估的免疫分子标志物。 展开更多
关键词 免疫组化 上皮性卵巢肿瘤 生物学行为 cD73 转录因子叉头框c2
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IL-38对类风湿关节炎患者辅助性T细胞17转录因子的影响 被引量:4
10
作者 张继云 王梅 +1 位作者 赵旌 李文艳 《广东医学》 CAS 2021年第2期226-228,233,共4页
目的研究类风湿关节炎(RA)患者白细胞介素-38(IL-38)的表达水平,并探讨IL-38对辅助性T细胞17(Th17)细胞转录因子(RORC、STAT3)的影响。方法收集RA患者30例,为RA组,30例体检中心的健康人群作为正常对照组。采用实时荧光定量PCR检测IL-38... 目的研究类风湿关节炎(RA)患者白细胞介素-38(IL-38)的表达水平,并探讨IL-38对辅助性T细胞17(Th17)细胞转录因子(RORC、STAT3)的影响。方法收集RA患者30例,为RA组,30例体检中心的健康人群作为正常对照组。采用实时荧光定量PCR检测IL-38、RORC、STAT3mRNA水平;ELISA法检测血清IL-38蛋白水平;采用t检验或Mann-Whitney秩和检验。结果(1)实时荧光定量PCR结果显示RA患者IL-38基因表达水平(2.92±1.96)显著低于正常对照组(5.79±3.55),差异有统计学意义(Z=-1.28,P<0.05);RA患者IL-38蛋白表达水平(0.44±0.03)显著低于正常对照组(0.72±0.58),差异有统计学意义(Z=-1.59,P<0.05);(2)RA患者RORC、STAT3基因表达水平(6.29±3.98)、(2.72±2.11)显著高于正常对照组(1.6±0.95)、(0.69±0.67),差异有统计学意义(Z=-1.36,P<0.05;Z=-1.24,P<0.05);且RORC、STAT3基因表达水平分别与IL-38水平呈负相关(r=-0.31,P<0.05;r=-0.25,P<0.05);(3)在体外实验中,RA患者外周血中加入IL-38后,RORC、STAT3基因表达水平(1.87±1.59)、(0.58±0.13)较RA患者(6.29±3.98)、(2.72±2.11)明显下降,差异有统计学意义(Z=-1.48,P<0.05;Z=-1.37,P<0.05)。结论在RA患者体内IL-38浓度下降,使得Th17细胞转录因子RORC、STAT3表达增加,可诱导经典JAK/STAT3信号传导通路活化,促进Th17细胞大量分化,导致关节滑膜增殖、软骨侵蚀和全身性的炎症反应,从而引发RA的发病。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 白细胞介素-38 辅助性T细胞17 信号转录和转导因子3 转录因子维甲酸相关孤儿受体c
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果生刺盘孢致病关键转录因子CfCrzA的功能
11
作者 卢一鸣 刘广利 +3 位作者 杨文睿 梁晓飞 孙广宇 张荣 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期45-57,共13页
由果生刺盘孢Colletotrichumfructicola引起的苹果炭疽叶枯病是我国苹果上的一种新病害。前期通过组学分析发现一个在侵染早期表达的转录因子CfCrzA,本研究拟明确其在果生刺盘孢生长发育和致病中的作用。生物信息学分析显示,CfCrzA为刺... 由果生刺盘孢Colletotrichumfructicola引起的苹果炭疽叶枯病是我国苹果上的一种新病害。前期通过组学分析发现一个在侵染早期表达的转录因子CfCrzA,本研究拟明确其在果生刺盘孢生长发育和致病中的作用。生物信息学分析显示,CfCrzA为刺盘孢属保守基因。采用同源重组方法获得2个敲除突变体。表型分析显示,突变体ΔCfCrzA与野生型WT生长速率无明显差别;致病性测定显示,ΔCfCrzA对苹果叶片和果实致病力显著下降。玻璃纸接种试验显示ΔCfCrzA孢子萌发率降低26%±3%,附着胞形成率降低43%±1%;叶片组织学观察发现ΔCfCrzA附着胞形成率降低60%±1%,但侵染泡囊和初生菌丝形成不受影响。培养发现ΔCfCrzA对细胞壁胁迫相关SDS的敏感性显著提升。这些结果表明转录因子CfCrzA为果生刺盘孢的关键致病因子,主要通过影响分生孢子萌发、附着胞形成等影响其致病力。 展开更多
关键词 果生刺盘孢 苹果 转录因子c2H2 炭疽叶枯病
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叉头框转录因子C1在结肠癌中表达情况及临床意义
12
作者 张永国 刘婕 +2 位作者 邵晓冬 高艳红 邹德莉 《临床军医杂志》 CAS 2024年第4期430-432,436,共4页
目的探讨叉头框转录因子C1(FOXC1)在结肠癌中的表达情况及临床意义。方法收集北部战区总医院自2009年1月至2010年6月收治的150例确诊结肠癌患者的病理组织切片。采用免疫组化染色的方法观察FOXC1的表达情况;分析FOXC1表达水平与临床参... 目的探讨叉头框转录因子C1(FOXC1)在结肠癌中的表达情况及临床意义。方法收集北部战区总医院自2009年1月至2010年6月收治的150例确诊结肠癌患者的病理组织切片。采用免疫组化染色的方法观察FOXC1的表达情况;分析FOXC1表达水平与临床参数之间的相关性,以及其与结肠癌患者生存预后之间的相关性。结果FOXC1在结肠癌组织中的表达阳性率高于相应癌旁组织(74.7%比22.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。FOXC1表达水平与TNM分期、组织学分化程度、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。FOXC1表达水平越高的结肠癌患者,病死率越高,总体存活率越低,生存期越短(P<0.05)。FOXC1在结肠癌患者中的表达水平与存活率密切相关(危险比2.84,95%可信区间1.61~4.59,P<0.05)。结论FOXC1在结肠癌中高表达且与患者的生存预后密切相关,其可作为预测结肠癌生存预后的潜在分子标志物。 展开更多
关键词 叉头框转录因子c1 结肠癌 预后
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乙肝病毒截短型表面抗原中蛋白与X蛋白对肾小管上皮细胞核转录因子的影响 被引量:2
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作者 洪柳 张静 +5 位作者 李青 闵婕 陆建荣 李烦繁 李航 郭双平 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期135-141,共7页
目的:目的研究167例乙肝病毒截短型表面抗原中蛋白(C-terminally truncated middle size surface proteins,MHBst167)和X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)对肾小管上皮细胞核转录因子κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)活化的影... 目的:目的研究167例乙肝病毒截短型表面抗原中蛋白(C-terminally truncated middle size surface proteins,MHBst167)和X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)对肾小管上皮细胞核转录因子κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)活化的影响及其相关机制探讨。方法:肾小管上皮细胞系(HK-2)转染mhbst167或(和)hbx后,蛋白印迹法检测NF-κB核易位及其抑制蛋白(inhibitor of nuclear factor-kappa B,IκBα)磷酸化水平的变化,凝胶电泳迁移率和双萤光素酶报告基因分析进一步检测NF-κB活性;通过对蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)活性和细胞外调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)磷酸化水平检测探讨NF-κB活化的机制。结果:HK-2细胞转染mhbst167或(和)hbx基因后,NF-κB核易位、磷酸化IκBα、κB结合活性及κB基因转录均增加(P<0.05);且PKC激酶活性和磷酸化ERK水平也增加(P<0.05),而Raf蛋白均无表达。结论:在肾小管上皮细胞中,MHBst167/HBx可能通过PKC/ERK通路(非Raf依赖性)活化NF-κB。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞截短型表面抗原中蛋白X蛋白 转录因子-κB蛋白激酶c/c—Raf/细胞外调节激酶
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转录因子激活蛋白2C对小鼠磨牙胚发育的影响
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作者 刘力维 韩雪 +1 位作者 朱辙文 王佐林 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期706-714,共9页
目的探究转录因子激活蛋白2家族的成员转录因子激活蛋白2C(TFAP2C)在小鼠磨牙胚发育过程中的表达及其影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析胚胎14.5(E14.5)天小鼠胚胎各器官及E12.5~E18.5天和出生后0~7(P0~P7)天的小鼠磨牙胚内Tfap2... 目的探究转录因子激活蛋白2家族的成员转录因子激活蛋白2C(TFAP2C)在小鼠磨牙胚发育过程中的表达及其影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析胚胎14.5(E14.5)天小鼠胚胎各器官及E12.5~E18.5天和出生后0~7(P0~P7)天的小鼠磨牙胚内Tfap2c的相对表达水平,冰冻切片免疫荧光染色显示Tfap2c在小鼠磨牙胚内的表达位置。采用牙胚体外培养的方法,探究敲降Tfap2c对小鼠磨牙胚发育的影响,RT-qPCR检测成牙本质细胞表达相关基因的相对表达水平。分离并提取小鼠牙胚间充质细胞进行培养,探究敲降Tfap2c对小鼠牙胚间充质细胞的影响,划痕愈合实验检测细胞迁移,细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖。结果Tfap2c基因在小鼠磨牙胚发育早期相对表达水平较高。E13.5天,Tfap2c在小鼠磨牙胚上皮组织与间充质组织内均有表达,二者的相对表达水平差异无统计学意义(t=1.06,P=0.472)。E14.5天,Tfap2c在小鼠磨牙胚初级釉结附近的间充质组织内表达,小鼠磨牙胚间充质组织内Tfap2c的相对表达水平(1.000±0.036)显著高于上皮组织(0.199±0.008)(t=37.29,P<0.001)。体外培养小鼠磨牙胚并敲降Tfap2c后,小鼠磨牙胚牙尖相对高度(0.708±0.171)及牙尖高度与牙冠高度的比值(0.321±0.068)均显著低于对照组(分别为1.000±0.287和0.483±0.166)(t=2.79,P=0.012;t=2.85,P=0.015);对照组的牙冠相对高度(1.078±0.206)及相对宽度(1.000±0.116)与敲降组的差异均无统计学意义(分别为0.993±0.254和0.999±0.122)(t=0.83,P=0.419;t=0.01,P=0.992)。体外培养小鼠磨牙胚内敲降Tfap2c,成牙本质细胞表达相关基因Dspp和Dmp1相对表达水平均显著降低(t=15.33,P<0.001;t=13.81,P<0.001)。在小鼠牙胚间充质细胞内敲降Tfap2c,划痕愈合实验显示,对照组细胞48 h划痕宽度显著小于敲降组(t=29.86,P=0.001);CCK-8法检测显示两组细胞间各时间点吸光度值的差异均无统计学意义(P>0.05);Tfap2c敲降组牙胚间充质细胞内成牙本质细胞表达相关基因Dspp和Dmp1相对表达水平显著低于对照组(t=3.86,P=0.031;t=4.36,P=0.022)。结论Tfap2c在小鼠磨牙胚发育早期表达,主要表达于小鼠磨牙胚间充质组织内,敲降Tfap2c影响小鼠磨牙胚牙尖形成,影响牙胚间充质细胞迁移。 展开更多
关键词 转录因子 牙发育 转录因子激活蛋白2c 器官培养 成牙本质细胞分化
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MEF2C调控成釉细胞MMP-20基因启动子转录活性的研究 被引量:1
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作者 刘珩 李伯翰 +5 位作者 韩婷婷 李东亮 王玉敏 孙岩 曲政 高玉光 《牙体牙髓牙周病学杂志》 北大核心 2013年第4期214-217,230,共5页
目的:通过研究MEF2C转录因子对小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(matrix metalloprotei-nase-20,MMP-20)基因表达的调控作用,明确MEF2C的功能,为研究MEF2C在釉质形成中的作用奠定基础。方法:用RT-PCR的方法扩增小鼠MEF2C基因,并构建真核... 目的:通过研究MEF2C转录因子对小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(matrix metalloprotei-nase-20,MMP-20)基因表达的调控作用,明确MEF2C的功能,为研究MEF2C在釉质形成中的作用奠定基础。方法:用RT-PCR的方法扩增小鼠MEF2C基因,并构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-MEF2C;对MMP-20基因启动子区域(-1197~+23)中MEF2C潜在的结合位点进行定点突变,并构建至荧光报告载体pGL3-Basic中;利用双荧光素酶基因报告系统分析MEF2C对MMP-20基因启动子转录活性的影响。结果:在成釉细胞中过量表达MEF2C能够明显提高MMP-20基因启动子的转录活性,而对定点突变后的MMP-20基因启动子转录调控作用减弱。结论:小鼠成釉细胞核中MEF2C可通过MMP-20启动子上MEF2C潜在的结合位点,上调MMP-20基因表达水平。 展开更多
关键词 转录因子MEF2c 基质金属蛋白酶-20 成釉细胞 定点突变
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DREB1C-GFP融合基因植物表达载体的构建 被引量:2
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作者 王涌鑫 李聪 《分子植物育种》 CAS CSCD 2008年第3期603-607,共5页
为了便于转基因植株的分子检测,利用重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension PCR,SOE PCR)方法克隆来自于水母的绿色荧光蛋白基因(GFP)和来自于拟南芥的目的基因DREB1C转录因子,并对其进行改造获得融合基因。通过酶切和连接,... 为了便于转基因植株的分子检测,利用重叠延伸PCR(gene splicing by overlap extension PCR,SOE PCR)方法克隆来自于水母的绿色荧光蛋白基因(GFP)和来自于拟南芥的目的基因DREB1C转录因子,并对其进行改造获得融合基因。通过酶切和连接,将融合基因构建到表达载体pCAMBIA1301上,获得了具有DERB1C和GFP基因的重组表达载体pDR1-GFP,酶切和测序结果表明,该融合基因与设计相符。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白基因(GFP) DREB1c转录因子 SOE PcR 载体构建
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低酚棉胚性愈伤组织农杆菌转化体系建立及转DREB1C植株的获得
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作者 孙京燕 李伟明 +3 位作者 张寒霜 赵俊莉 王永强 王立安 《河北农业科学》 2009年第6期53-56,103,共5页
利用农杆菌介导法对低酚棉胚性愈伤组织转化转录因子DREB1C基因,探讨了低酚棉胚性愈伤组织对潮霉素的敏感性和胚性愈伤组织状态对转化效率的影响。结果表明:胚性愈伤组织对潮霉素较为敏感,适宜的筛选浓度为25mg/L,可明显抑制非转... 利用农杆菌介导法对低酚棉胚性愈伤组织转化转录因子DREB1C基因,探讨了低酚棉胚性愈伤组织对潮霉素的敏感性和胚性愈伤组织状态对转化效率的影响。结果表明:胚性愈伤组织对潮霉素较为敏感,适宜的筛选浓度为25mg/L,可明显抑制非转化组织生长。以继代培养7~14d的胚性愈伤组织作为转化受体,转化率高达56.3%。将转化后获得的抗性愈伤组织转入分化培养基中分化成苗,经过PCR检测得到5株阳性植株。 展开更多
关键词 低酚棉 胚性愈伤组织 农杆菌介导 DREB1c转录因子
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香菇转录因子LeZNF143响应高温胁迫的功能分析
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作者 王梅 宋婷婷 +4 位作者 蔡为明 曲英敏 范丽军 胡心柔 金群力 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期83-95,共13页
高温胁迫是影响香菇生长发育的非生物胁迫之一,转录因子在调节香菇对高温胁迫的防御反应中起着至关重要的作用。本研究测定了15个香菇品种高温胁迫后菌丝恢复生长的速度,从中筛选出了高温耐受型菌株NKY-5和敏感型菌株NKY-11。定量结果显... 高温胁迫是影响香菇生长发育的非生物胁迫之一,转录因子在调节香菇对高温胁迫的防御反应中起着至关重要的作用。本研究测定了15个香菇品种高温胁迫后菌丝恢复生长的速度,从中筛选出了高温耐受型菌株NKY-5和敏感型菌株NKY-11。定量结果显示,C2H2型转录因子LeZNF143在菌丝体中高表达,高温胁迫下,菌株NKY-5中LeZNF143基因诱导表达显著高于NKY-11;亚细胞定位显示LeZNF143定位在细胞核中;将香菇转录因子LeZNF143在酵母中过表达,显著提高了酵母对高温胁迫的耐受性,推测转录因子LeZNF143参与调控香菇响应高温胁迫。通过JASPAR数据库预测LeZNF143的下游靶基因为漆酶基因(Lcc4/Lcc7/Lcc11),高温胁迫下,香菇体内漆酶活性显著增高,耐受型菌株NKY-5的漆酶活性显著高于敏感型菌株NKY-11。综上所述,转录因子LeZNF143可能通过调控下游漆酶的活性提高香菇对热胁迫介导的氧化应激的耐受性。 展开更多
关键词 香菇 高温胁迫 c2H2型转录因子 酵母表型 漆酶活性
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辣椒溶杆菌X2-3 GntR家族中一个Hut C基因功能分析
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作者 李志远 赵丹 +2 位作者 韩胜男 韩超 刘爱新 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2022年第3期626-635,共10页
GntR是原核生物中一类重要的转录因子。本研究分析了辣椒溶杆菌Lysobacter capsici X2-3 GntR家族中一个Hut C基因的生物学功能,结果显示LC_HutC缺失突变体MT4090的生长速率、运动能力、对小麦根系分泌物的趋向性及对小麦根系的定殖能... GntR是原核生物中一类重要的转录因子。本研究分析了辣椒溶杆菌Lysobacter capsici X2-3 GntR家族中一个Hut C基因的生物学功能,结果显示LC_HutC缺失突变体MT4090的生长速率、运动能力、对小麦根系分泌物的趋向性及对小麦根系的定殖能力较野生型菌株明显减弱,生物膜产量则明显增加,互补菌株MS4090与野生型水平相当。但突变体对病原真菌和卵菌的抑菌活性没有明显变化。上述结果表明,LC_HutC对X2-3生长、运动、趋化性以及根际定殖等有广泛的调控作用,本研究结果对深入了解辣椒溶杆菌的调控机制有重要参考。 展开更多
关键词 辣椒溶杆菌 Hut c转录因子 生物膜 定殖 抑菌活性
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酸性环境抑制高磷诱导大鼠VSMCs钙化的机制研究 被引量:2
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作者 耿同会 徐金升 +4 位作者 韩迎迎 白亚玲 张俊霞 崔立文 张胜雷 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第17期1-5,共5页
目的探讨酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及其机制。方法体外分离培养大鼠VSMCs,采用免疫细胞化学法鉴定。将VSMCs按随机数字表法分为正常对照组、高磷+p H 7.4组、高磷+p H 7.1组。刺激4 d后,采用逆转录聚合... 目的探讨酸性环境对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及其机制。方法体外分离培养大鼠VSMCs,采用免疫细胞化学法鉴定。将VSMCs按随机数字表法分为正常对照组、高磷+p H 7.4组、高磷+p H 7.1组。刺激4 d后,采用逆转录聚合酶链反应和Western blot检测活化T细胞核因子c1(NFATc1)、Runt相关转录因子2(Runx2)基因和蛋白的表达。刺激14 d后,对各组细胞进行钙化染色、钙含量和碱性磷酸酶(ALP)活性测定。结果与正常对照组比较,高磷+p H 7.4组的钙含量、ALP活性、Runx2和NFATc1表达升高(P<0.05);与高磷+p H 7.4组比较,高磷+p H 7.1组的钙含量、ALP活性、Runx2和NFATc1表达降低(P<0.05)。相关性分析发现,NFATc1蛋白表达水平与ALP活性、Runx2蛋白表达水平呈正相关(P<0.05)。结论酸性环境可以抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化,其机制可能是通过降低NFATc1表达,抑制VSMCs表型转化来实现的。 展开更多
关键词 血管钙化 血管平滑肌细胞 活化T细胞转录因子c1 Runt相关转录因子2 慢性肾衰竭
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