人C-反应蛋白磁微粒化学发光酶免疫测定法的建立

人C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是炎症以及各种相关疾病如病毒感染、心血管疾病等诊断、治疗和预后的临床检测指标。为了建立一种快速、准确的CRP定量免疫测定方法,将表达纯化的重组CRP作为抗原免疫小鼠,获得了5株稳定分泌抗体的单克隆抗体细胞株,采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)初步鉴定筛选的抗人CRP单克隆抗体,并分别选择mAb 9D6和mAb 9G4作为捕获抗体与检测抗体,建立用于人CRP检测的化学发光酶免疫测定法(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA),最后通过测定分析临床血清CRP样本,评价CLEIA的性能。结果显示,基于9D6/9G4-AP单克隆抗体对的CLEIA测定范围为0.1767~500μg/L(可扩展至100 mg/L);所建立的CLEIA与医院采用的免疫散射比浊法(R^(2):0.9496,P<0.0001)表现出良好的相关性,且Bland-Altman分析中96.36%(106/110)的点在95%一致性界限范围内显示两种检测方法具有较好的一致性。结果初步表明,建立的分析方法在临床诊断中具有较好的应用前景。

定量测定C-反应蛋白(CRP)在急性感染症中的应用

血清CRP的检测已广泛应用于临床感染疾病的辅助诊断。但受测定方法和抗血清质量的限制，以致CRP测定灵敏义和准确性欠佳。本文采用速率散射比浊法定量测定了常见感染症治疗前后的血清CRP水平，并与其他感染指标进行了比较分析。

肺炎患儿C-反应蛋白快速定量与中性粒细胞碱性磷酸酶积分的相关性分析及意义

目的 了解C 反应蛋白 (CRP)快速定量与中性粒细胞碱性磷酸酶 (NAP)的相关性 ,探讨定量CRP测定对判断小儿肺炎病原类别的意义。方法 对 5 0例肺炎患儿行CRP定量测定 ,同时检查NAP ,分析CRP定量与NAP积分的相关性。结果 快速定量CRP与NAP积分呈正相关 (r =0 .883 2 ,P <0 .0 0 1) ;两者异常升高率亦存在相关关系 (χ2 =16.81,P <0 .0 0 5 )。结论 肺炎患儿CRP≤ 8mg·L-1可认为是病毒感染 ,CRP >8mg·L-1可认为是细菌感染 ,而且CRP越高则越支持细菌感染。快速定量CRP测定方便、快捷 ,可以作为判断小儿肺炎病原类别的可靠指标。

血清降钙素原(PCT)及C-反应蛋白(CRP)、血液中白细胞(WBC)测定对感染性疾病诊治的临床意义

目的:探讨血清降钙素原(PCT)及C-反应蛋白(CRP)、血液中白细胞(WBC)联合检测在重症感染性疾病中的特殊临床意义。方法(1)采用南京基蛋生物科技有限公司FIA8100免疫定量分析仪检测血清降钙素原(PCT)及C-反应蛋白(CRP)。(2)采用美国Beckman5diff细胞计数仪检测血液中白细胞(WBC)。并将检测数据做统计学比较。结果观察各组感染性疾病的血清降钙素原(PCT)及C-反应蛋白(CRP)、血液中白细胞(WBC)检测值均显著高于健康对照组(P<0.01)血清降钙素原(PCT)在重症感染性疾病脓毒血症患者异常检出率远远高于C-反应蛋白(CRP)、血液中白细胞(WBC)。结论血清降钙素原(PCT)的检测对重症感染性疾病患者早期的诊断和治疗有更重要的临床意义。

定量检测人超敏C-反应蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立及初步临床应用

目的：建立定量检测人超敏C-反应蛋白（CRP）双抗体夹心EUSA方法。方法：采用Protein A亲和层析法纯化本室制备的抗CRP单克隆抗体（mAbs），并行SDS—PAGE和Western blotting对纯化抗体特性进行鉴定；利用简易过碘酸钠法对抗CRPmAbs进行标记HRP后行抗体配对实验；通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度；以纯化的CRP抗原为标准品建立标准曲线；以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法。初步对人血浆中的超敏CRP水平进行检测。结果：最佳配对组合为抗CRP mAb 1C10和HRP标记的抗CRP mAb2 C11，最适工作浓度分别为10μg／mL和l：2000，该方法的批内、批间变异系数分别为3．1％～9．7％和3．6％～13．6％，灵敏度达8．3ng／mL，回收率为90％～109％。用ELISA法测定左右冠无明显狭窄者68例，狭窄小于50％者59例和狭窄大于50％患者67例的血浆hs．CRP水平，冠脉狭窄小于50％组（3．7±1．2）mg／L与冠脉无狭窄组（1．8±0．7）mg／L比较明显升高（P〈0．05）；狭窄大于50％组（8．9±3．3）mg／L与狭窄小于50％组比较明显升高（P〈0．05）。结论：建立了一种可用于检测人超敏CRP的双抗体夹心ELISA方法。

C-反应蛋白定量检测对腰椎间盘术后炎症转归的监测价值

腰椎间盘摘除术后椎间隙感染可能与纤维环内层和髓核缺乏血运有关。感染后,患者体温多正常或稍高,白细胞计数正常或稍高,三四周后X线平片才显示感染间隙变窄。由于缺乏特异性的监测手段,众多学者曾将血沉作为椎间隙感染的筛选和监测指标。因为引起血沉加快的临床因素较多,血沉在感染中的诊断作用已受到质疑。通过对C-反应蛋白(CRP)进行监测,证实CRP是急性相蛋白中最有代表性的指标。

犬C-反应蛋白荧光定量免疫层析检测方法的建立与应用

试验开展了犬C-反应蛋白(C-CRP)荧光微球免疫层析定量方法的研究,旨在研制一种操作简易、灵敏度高,用于快速定量检测C-CRP荧光免疫层析试纸条。采用双抗体夹心法和荧光免疫层析技术,以羧基荧光微球标记的抗C-CRP单克隆抗体及羊抗鸡IgY为标记抗体,抗C-CRP单克隆抗体和鸡IgY分别作为检测线和质控线制备荧光免疫层析试纸条。结果显示,所制备C-CRP检测试纸条的检测范围为0.5～250mg/L,检测限为0.5mg/L,批内和批间变异系数(CV)分别为0.68%～6.94%和0.89%～8.79%,平均回收率为98.15%～101.19%,试剂与9种干扰物质无交叉反应。加速破坏稳定性试验表明试纸条可以常温放置24个月。临床样本测试发现,其与I-CHROMA试剂盒检测结果相关性良好(R2=0.995)。综上所述,该荧光免疫层析试纸条灵敏度、特异度较高,且操作简单、快速,可用于宠物犬临床检测。

前白蛋白(PA)、C-反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)联合检测在老年细菌性肺炎诊断中的应用价值研究

目的研究前白蛋白(PA)、C-反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)联合检测在老年细菌性肺炎诊断中的应用价值。方法从佛山市南海区红卫医院和广东省人民医院南海医院2015年4月至2016年11月收治的老年肺炎患者中选取82例(46例为细菌性肺炎患者、36例为非细菌性肺炎患者)和82名正常老年人进行研究分析,分别通过免疫比色法、比浊法和免疫发光法测定不同组别老年人的前白蛋白(PA)、C-反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT),并通过诊断性试验比较单一指标与联合检测的诊断效能。结果细菌性肺炎组的前白蛋白(PA)、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)检测阳性率分别为95.7%、80.4%、91.3%,均显著高于非细菌性肺炎和常规老年人的,差异有统计学意义(P<0.05)。前白蛋白(PA)、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)诊断细菌性肺炎的敏感性和特异性分别为95.7%和83.3%、80.4%和75.0、91.3%和94.4%,三项指标联合检测的敏感性和特异性分别为97.8%和97.2%,均高于上述三项单一指标,具有较好的诊断效能。结论在诊断老年细菌性肺炎疾病时前白蛋白(PA)、C-反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)检测方法为常规指标,且这三种指标联合检测能有效避免漏诊、提高疾病诊断灵敏度,为正确诊断疾病提供科学依据。

人C-反应蛋白(CRP)基因的克隆及表达研究

人C-反应蛋白（C-reactive protein,CRP）参与人体炎症反应,是临床诊断中的重要检测指标。利用家蚕杆状病毒表达系统构建重组人CRP病毒vBmHis-CRP,接种家蚕五龄幼虫表达重组人CRP蛋白。利用自制抗CRP血清Western Blot检测重组蛋白得到目的条带,纯化后BCA法测定蛋白含量为30μg/mL,质谱检测进一步确定该蛋白为目的蛋白。这为家蚕生物反应器规模化制备重组人CRP蛋白打下了基础,为解决临床CRP相关炎症反应快速诊断试剂盒中标准抗原的来源问题提供了依据。

C-反应蛋白快速定量检测系统性能评价

目的评价C-反应蛋白(CRP)快速定量检测系统检测C反应蛋白的性能。方法对金标法定量检测CRP进行了性能评价,内容包括批内重复性、线性、准确度。结果该法重复测定高、低值样本,CV<10%;线性回归方程Y=1.021X+3.237,r=0.991;与免疫速率散射比浊法的相关性分析,r=0.986。结论C-反应蛋白快速定量检测系统具有良好的重复性、线性和方法学的相关性,符合试验设计要求。

CA724、CEA和C-反应蛋白定量联合检测对诊断胃肠道恶性肿瘤的临床价值

目的探讨血清CA724、癌胚抗原(CEA)和C-反应蛋白定量(CRP)联合检测在胃肠道恶性肿瘤诊断的价值。方法采用电化学发光技术检测在恶性肿瘤组30例和正常对照组15例患者血清中的CA724和CEA的含量,同时使用放射比浊法检测CRP的含量。结果CA724、CEA和CRP定量单个指标诊断消化道恶性肿瘤的敏感性分别为60.0%(18/30)、40.0%(12/30)和63.3%(19/30),特异性分别为100%(15/15)、93.3%(14/15)和86.7%(13/15);三个指标联合检测的敏感性为86.6%(26/30)和特异性为86.7%(13/15)。其中三者联合检测敏感性显著高于单一指标检测(p<0.05)。结论血清CA724、CEA和CRP定量联合检测有助于提高胃肠道恶性肿瘤诊断的敏感性和有效性。

检测急性传染病患者血清中C-反应蛋白(CRP)的临床意义

本文采用单向免疫扩散法检测76例急性传染病患者血清中C-反应蛋白,其中伤寒38例,流行性腮腺炎20例,猩红热14例,百日咳2例,流行性乙型脑炎2例。结果发现,伤寒患者CRP阳性检出率34例占89.5％,猩红热13例阳性检出率占92.8％,流腮CRP阳性检出率占35％,伤寒与流腮相比较有明显差异(P<0.001)。健康人对照组全部阴性,由此表明CRP的检测,临床上用来判断炎症的存在及程度,有助于细菌性疾病与病毒性疾病的鉴别诊断。CRP也是观察治疗的客观指标,CRP持续升高,表明治疗反应不佳。

定量检测C-反应蛋白在肺炎诊断中的意义

C-反应蛋白（C-reactive protein,CRP）于1930年首次发现,是一种能与肺炎球菌C多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白,其浓度的变化作为细菌性肺炎、支原体肺炎的诊断敏感标志和治疗反映标志,愈来愈受到临床广泛重视。

C-反应蛋白定量检查在小儿急性呼吸道感染中的诊断价值

C反应蛋白属于急性时相反应蛋白,是炎症反应的标志性蛋白.在正常健康人体内的C反应蛋白水平较低,当机体组织发生感染或者组织损伤后,其水平在6-8 h后开始升高,在24-48 h内水平达到最高[1-4].本文选择我院急性呼吸道感染患儿,观察C反应蛋白水平检测在此类患儿中的临床意义,现报告如下.

藏汉族健康成人C-反应蛋白(CRP)含量调查及临床观察

本文采用单相免疫扩散法检测了海拔3600采地区136例藏汉族健康成人血清内C一反应蛋白（CRP）含量，同时对48例不同疾病患者血清CRP含量变化作了初步观察。结果表明，136例藏汉族健康成人血清内CRP含量与平原地区结果基本一致；同海拔地区男性高于女性，但差异无显著性（P＞0．05）；世居组与移居组比较差异无显著性（P＞0．05）。48例不同疾病患者除乙型肝炎外，血清内CRP含量均有不同程度的升高，细菌性痢疾非常显著地高于乙型肝炎（P＜0．001），因此测定血清CRP可能有助于细菌性与非细菌性感染的鉴别诊断。

PCT（降钙素原）与超敏C-反应蛋白（Hs—CRP）检测的临床比较

以临床诊断结果作为金标准，对临床受试者的血清样本分别检测超敏C-反应蛋白（Hs—CKP）7LPCT（降钙素原），以此评价入组样本Hs—CRP及PCT血清水平的比较研究结果，并初步评价荧光免疫方法定量检测PCT试剂的批内精密度、批间精密度、灵敏度和特异性等，满足临床使用要求。

高敏C-反应蛋白与2型糖尿病肾病

目的 :前瞻性探讨 2型糖尿病 (DM )患者高敏C 反应蛋白 (hs CRP)与糖尿病肾病 (DN)及其发生风险的关系。方法 :应用ELISA法测定 5 5例正常对照组、6 6例不伴DN和 6 8例伴DN的 2型糖尿病患者的hs CRP水平 ,比较 3组间的差异 ;对 5 8例入组时无DN的 2型糖尿病患者进行降糖、降压等措施综合干预 ,追踪观察 5年 ,观察干预前后尿白蛋白排泄率 (UAE)、hs CRP及肾功能的动态变化。结果 :入组时 ,2型糖尿病组的血清hs CRP水平高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ;在年龄 ,BMI,糖尿病病程 ,平均动脉压 ,空腹血糖 ,糖化血红蛋白及血肌酐都匹配的条件下 ,入组时DN组的hs CRP水平高于无DN的DM组和正常对照组 (P <0 .0 5 ) ;2 8例在随访终点发生DN的DM患者与 30例在随访终点未发生DN患者比较 ,前者入组时和随访结束时的血清hs CRP水平高于后者 (P <0 .0 5 ) ;经降糖、降压等综合治疗 5年后 ,终点时未发生DN的DM1组血清hs CRP水平低于入组时 (P <0 .0 5 ) ,而发生了DN的DM2组终点的血清hs CRP水平虽较入组时略低 ,但差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :高敏C 反应蛋白水平在DM组和DN组逐渐增高 ,表明其可能是 2型DM和DN发生的危险因素 ;终点发生DN的DM患者有高水平的hs CRP基线值 ,在一定程度上能够预测 2型糖尿病患者发?