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抑制miRNA-376c-3p对肾透明细胞癌生长的影响 被引量:1
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作者 镡云辉 赵蓉 +2 位作者 刘志明 卓奥 刘唐兴 《河北医药》 CAS 2024年第8期1132-1137,共6页
目的探究miRNA-376c-3对肾透明细胞癌(ccRCC)中肿瘤细胞生长的影响。方法以实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测人ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN及正常人近段肾小管上皮细胞系HKC中miRNA-376c-3p的表达。体外培养786-O细胞,随机分... 目的探究miRNA-376c-3对肾透明细胞癌(ccRCC)中肿瘤细胞生长的影响。方法以实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测人ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN及正常人近段肾小管上皮细胞系HKC中miRNA-376c-3p的表达。体外培养786-O细胞,随机分为对照组、miR-376c-3p inhibitor组(转染miR-376c-3p inhibitor)、miR-376c-3p mimics组(转染miR-376c-3p mimics)、阴性对照组(转染miR-376c-3p阴性对照),分组转染后以RT-PCR检测4组细胞miRNA-376c-3p表达;以Ki67免疫荧光染色、集落生成实验检测4组786-O细胞增殖;以TUNEL染色检测4组786-O细胞凋亡;以免疫荧光染色检测4组786-O细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达并比较其Bax/Bcl-2。于右腋窝皮下接种上述4组786-O细胞建立其裸鼠移植瘤模型,3周后测定其肿瘤体积与质量;以Ki67免疫荧光染色、TUNEL染色分别检测4组裸鼠肿瘤细胞增殖与凋亡。结果与HKC细胞比较,ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN中miR-376c-3p表达降低(P<0.05)。与对照组比较,miR-376c-3p inhibitor组细胞增殖率与集落形成率、肿瘤体积与质量、裸鼠肿瘤组织Ki67阳性比升高(P<0.05),细胞miR-376c-3p相对表达、Bax/Bcl-2与凋亡率、裸鼠肿瘤组织TUNEL阳性比降低(P<0.05);miR-376c-3p mimics组细胞增殖率与集落形成率、肿瘤体积与质量、裸鼠肿瘤组织Ki67阳性比降低(P<0.05),细胞miR-376c-3p相对表达、Bax/Bcl-2与凋亡率、裸鼠肿瘤组织TUNEL阳性比升高(P<0.05);阴性对照组各指标无明显变化(P>0.05)。结论抑制miRNA-376c-3p可削弱ccRCC细胞增殖及集落生成活性,促进其凋亡,并在裸鼠体内抑制其移植瘤生长。 展开更多
关键词 miRNA-376c-3p 肾透明细胞癌 肾细胞 肿瘤细胞 生长
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miR-29c-3p调控ERLIN2抑制肺腺癌发展的作用
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作者 卞婷婷 姜岱山 +2 位作者 张雅莉 王斯楚 刘益飞 《交通医学》 2024年第2期116-120,125,共6页
目的:探讨miR-29c-3p在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)发生发展中的作用。方法:利用公共数据库分析miR-29c-3p和ERLIN2在肺腺癌中的表达及其与临床病理参数的相关性。采用qRT-PCR检测miR-29c-3p在LUAD细胞系和正常支气管上皮细胞系... 目的:探讨miR-29c-3p在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)发生发展中的作用。方法:利用公共数据库分析miR-29c-3p和ERLIN2在肺腺癌中的表达及其与临床病理参数的相关性。采用qRT-PCR检测miR-29c-3p在LUAD细胞系和正常支气管上皮细胞系中的表达,CCK8、细胞克隆形成、Transwell和伤口愈合实验评估miR-29c-3p在细胞增殖、迁移和侵袭中的作用,利用生物信息学工具预测miR-29c-3p下游靶基因,并通过双荧光素酶报告基因分析验证靶向关系。结果:miR-29c-3p在肺腺癌组织和细胞中低表达。miR-29c-3p低表达患者的预后较差,miR-29c-3p是肺腺癌患者的独立预后因素,并与淋巴结转移状态和临床分期密切相关。细胞实验表明,抑制miR-29c-3p可促进A549细胞的增殖、迁移和侵袭。生物信息学分析表明,ERLIN2是miR-29c-3p的靶基因,二者表达呈负相关。通过双荧光素酶报告基因测定验证了上述靶向关系。在UALCAN数据库中,ERLIN2在肺腺癌组织中高表达,并与患者年龄、性别、吸烟、肿瘤分期、淋巴结转移和TP53突变状态密切相关,ERLIN2高表达患者总生存率低于低表达患者。结论:miR-29c-3p通过靶向ERLIN2抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,是肺腺癌患者的独立预后因素。 展开更多
关键词 肺腺癌 miR-29c-3p ERLIN2 增殖 侵袭 迁移
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LncRNA FEZF1-AS1靶向调控miR-200c-3p对人肺成纤维细胞生物学行为的影响
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作者 满君 高艳艳 +1 位作者 宋龙飞 高福生 《天津医药》 CAS 2024年第3期231-236,共6页
目的探讨FEZ家族锌指1-反义RNA1(LncRNA FEZF1-AS1)靶向调控miR-200c-3p对人肺成纤维细胞HLF生物学行为的影响。方法采用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导HLF向肌成纤维细胞转化,分为空白对照组(Blank组)和造模组(HLF+TGF-β1组),另根据转... 目的探讨FEZ家族锌指1-反义RNA1(LncRNA FEZF1-AS1)靶向调控miR-200c-3p对人肺成纤维细胞HLF生物学行为的影响。方法采用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导HLF向肌成纤维细胞转化,分为空白对照组(Blank组)和造模组(HLF+TGF-β1组),另根据转染质粒不同将细胞分为Blank组、TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组和TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组。采用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和波形蛋白(Vimentin)蛋白的表达。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p的表达。采用CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测迁移能力,Transwell实验检测侵袭能力;采用双萤光素酶实验检测FEZF1-AS1与miR-200c-3p的靶向作用关系。结果与Blank组比较,HLF+TGF-β1组α-SMA、CollagenⅠ、Vimentin蛋白表达及LncRNA FEZF1-AS1表达水平升高,miR-200c-3p表达水平降低(P<0.05);与TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭能力下降,LncRNA FEZF1-AS1表达及α-SMA、CollagenⅠ、Vimentin蛋白表达水平降低,miR-200c-3p表达水平升高(P<0.05);FEZF1-AS1与miR-200c-3p基因序列上存在结合位点。结论LncRNA FEZF1-AS1通过抑制miR-200c-3p促进特发性肺间质纤维化的发生、发展。 展开更多
关键词 特发性肺间质纤维化 肺成纤维细胞 肌成纤维细胞 FEZ家族锌指1-反义RNA1 微小RNA-200c-3p
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Differential roles of C-3 and C-6 phosphate monoesters in affecting potato starch properties
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作者 Li Ding Andreas Blennow Yuyue Zhong 《Grain & Oil Science and Technology》 CAS 2024年第2期79-86,共8页
The effects of starch phosphate monoester content(SPC),namely C-3(C3P)and C-6 phosphate monoesters(C6P),on the starch properties were investigated using four potato starches with varied SPC/C3P/C6P and two nonphosphor... The effects of starch phosphate monoester content(SPC),namely C-3(C3P)and C-6 phosphate monoesters(C6P),on the starch properties were investigated using four potato starches with varied SPC/C3P/C6P and two nonphosphorylated maize starches with a similar range of amylose content(AC)as controls.The starch property results showed that a higher SPC is associated with lower turbidity,storage and loss modulus after storage,and water solubility,but higher swelling power(SP)and pasting viscosities.These findings suggested that SPC inhibited molecular rearrangement during storage and starch leaching during heating,and enhanced swelling and viscosities due to increased hydration and water uptake caused by the repulsion effect of phosphate groups and a less ordered crystalline structure.Increased SPC also resulted in lower resistant starch(RS)content in a native granular state but higher RS after retrogradation.Pearson correlations further indicated that SPC/C3P/C6P were positively correlated with peak(r^(2)=0.925,0.873 and 0.930,respectively),trough(r^(2)=0.994,0.968 and 0.988,respectively),and final viscosities(r^(2)=0.981,0.968 and 0.971,respectively).Notably,SPC,mainly C3P,exhibited a significantly positive correlation with SP(r^(2)=0.859)and setback viscosity(r^(2)=0.867),whereas SPC,mainly C6P,showed a weak positive correlation with RS after retrogradation(r^(2)=0.746).However,SPC had no significant correlations with water solubility,turbidity and rheology properties,which were more correlated with AC.These findings are helpful for the food industry to select potato starches with desired properties based on their contents of SPC,C3P,or C6P. 展开更多
关键词 Starch phosphate monoesters c-3 phosphate monoesters c-6 phosphate monoesters Physicochemical properties In vitro digestibility
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LncRNA LOC103694972 promotes fibrosis of NRK-49F cells by regulating STAT3-dependent Smad/CTGF pathway via targeting miR-29c-3p
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作者 YAN LI HUZHI CAI +4 位作者 XIAOLING PENG YOUHUI LIU QINGYANG CHEN XIANGDONG LIN XINYU CHEN 《BIOCELL》 SCIE 2024年第3期501-511,共11页
Background:Renalfibrosis is an important process in the development of chronic kidney disease.Understanding the pathogenesis andfinding effective treatments for renalfibrosis is crucial.This study aims to investigate whe... Background:Renalfibrosis is an important process in the development of chronic kidney disease.Understanding the pathogenesis andfinding effective treatments for renalfibrosis is crucial.This study aims to investigate whether a newly discovered long non-coding RNA(lncRNA)called LOC103694972 could be a potential target for treatingfibrosis of NRK-49F cells.Methods:LncRNA Chip was used to identify differentially expressed lncRNAs between TGF-β1-induced NRK-49F cells and normal cells.The dual-luciferase assay confirmed the binding between miR-29c-3p and signal transducer and activator of transcription(STAT3),as well as between miR-29c-3p and lncRNA LOC103694972.Si-LOC103694972 and miR-29c-3p mimic were then transfected into TGF-β1-induced NRK-49F cells.Results:The study found that LOC103694972 was highly expressed in TGF-β1-induced NRK-49F cells.These cells exhibited increased cell length and activity compared to the control group.The expression levels of Collagen I,α-Smooth muscle actin(α-SMA),and tissue inhibitor of metalloproteinase(TIMP-1)were increased,while matrix Metalloproteinase 2(MMP2)and matrix Metalloproteinase 9(MMP9)expression was decreased.However,transfection with si-LOC103694972 and miR-29c-3p mimics restored cell morphology and reduced cell viability.This led to a decrease in the levels of Collagen I,α-SMA,and TIMP-1,as well as an increase in MMP2 and MMP9 expression.Additionally,TGF-β1-induced NRK-49F cells transfected with miR-29c-3p mimics activated the STAT3-Smad3/CTGF pathway.Conclusion:Based on thesefindings,lncRNA LOC103694972 shows promise as a target for treating renalfibrosis.It negatively regulates miR-29c-3p and activates the STAT3-Smad3/CTGF pathway. 展开更多
关键词 Renal fibrosis lncRNA LOC103694972 lncRNA Chip miR-29c-3p STAT3-Smad3/CTGF
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支气管扩张合并感染患者血清降钙素原、C-反应蛋白和25-羟维生素D_(3)变化及其临床检测价值研究
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作者 梁建峰 程玉峰 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第5期688-691,共4页
目的:探讨支气管扩张合并感染患者血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)以及25-羟维生素D_(3)[25-(OH)D_(3)]变化及临床检测价值。方法:选取支气管扩张合并感染患者49例为感染组,根据临床肺部感染评分(CPIS)将患者分为轻度组(18例)、中度... 目的:探讨支气管扩张合并感染患者血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)以及25-羟维生素D_(3)[25-(OH)D_(3)]变化及临床检测价值。方法:选取支气管扩张合并感染患者49例为感染组,根据临床肺部感染评分(CPIS)将患者分为轻度组(18例)、中度组(19例)和重度组(12例)。另选择同期体检健康者50例为健康对照组。比较感染组和健康对照组以及不同感染严重程度患者血清PCT、CRP及25-(OH)D_(3)水平。采用Spearman法分析血清25-(OH)D_(3)、PCT、CRP与支气管扩张患者感染严重程度的相关性。绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血清PCT、CRP及25-(OH)D_(3)对支气管扩张合并重度感染的诊断价值。结果:感染组PCT、CRP水平高于健康对照组,25-(OH)D_(3)水平低于健康对照组(均P<0.05)。随着感染程度加重,PCT、CRP水平逐渐升高,25-(OH)D_(3)水平逐渐降低(均P<0.05)。血清PCT、CRP水平与患者感染严重程度呈正相关(均P<0.05)。血清25-(OH)D_(3)水平与患者感染严重程度呈负相关(P<0.05)。三项指标联合诊断支气管扩张合并重度感染的曲线下面积(AUC)高于单独PCT、CRP及25-(OH)D_(3)的AUC(均P<0.05)。结论:支气管扩张合并感染患者血清PCT和CRP水平升高,25-(OH)D_(3)水平降低,且与感染严重程度有关,三者联合对支气管扩张合并重度感染诊断价值较高。 展开更多
关键词 支气管扩张 感染 25-羟维生素D_(3) 降钙素原 c-反应蛋白 诊断价值
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New C-13 Norisoprenoids and Flavonoids from Lannea kerstingii
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作者 Jean-Michel Kouamé Koffi Philomène Akoua Yao-Kouassi +3 位作者 Chardin Seri Seri Abdulmagid Alabdul Magid Zachée Louis Evariste Akissi Laurence Voutquenne-Nazabadioko 《Journal of Materials Science and Chemical Engineering》 CAS 2022年第10期10-19,共10页
Lannea kerstingii is known for its multiple therapeutic and biological activities. Despite of many traditional uses of this plant, scientific research on the content of its chemical compounds is still limited. This st... Lannea kerstingii is known for its multiple therapeutic and biological activities. Despite of many traditional uses of this plant, scientific research on the content of its chemical compounds is still limited. This study aims to isolate the chemical compounds contained in the n-butanol fraction of Lannea kerstingii leaves. The chemical investigation of the leaves of Lannea kerstingii led to isolation of three undescribed C-13 norisoprenoids, lankerstinol A-C (1-3), together with six (4-9) known flavonoid glycosides. The structures of these compounds were established by spectroscopic analyses. 展开更多
关键词 Lannea kerstingii ANACARDIACEAE flavonoids c-13 Norisoprenoids Structure Elucidation
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妊娠期糖尿病视网膜病变患者血清miR-200c-3p、 miR-20b-5p表达水平及检测临床意义
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作者 李威威 杨倩 +6 位作者 常瑚 宋森 李世强 程亚辉 岳钟 冯丽 肖博文 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第8期1076-1080,共5页
目的:探讨妊娠期糖尿病视网膜病变(DR)患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平变化及检测临床意义。方法:选择妊娠期糖尿病孕妇80例(GDM组)和DR孕妇75例(DR组),正常妊娠期女性95例(对照组)。采用qRT-PCR法对受试者血清miR-200c-3p、miR-20... 目的:探讨妊娠期糖尿病视网膜病变(DR)患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平变化及检测临床意义。方法:选择妊娠期糖尿病孕妇80例(GDM组)和DR孕妇75例(DR组),正常妊娠期女性95例(对照组)。采用qRT-PCR法对受试者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平进行测定,采用全自动生化分析仪对受试者低密度脂胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)进行测定,采用血糖检测仪对受试者空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)进行测定。结果:GDM组、DR组患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于对照组(均P<0.05);DR组患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于GDM组(均P<0.05);随着病情严重程度的增加,DR组患者miR-200c-3p、miR-20b-5p水平显著升高(均P<0.05);预后不良组DR患者FPG、2 hPG、LDL-C、TG、TC、miR-200c-3p、miR-20b-5p值显著高于预后良好组(均P<0.05);多因素Logistic回归分析显示血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平升高为DR患者发生预后不良的危险因素;ROC曲线结果显示,血清miR-200c-3p、miR-20b-5p、两者联合诊断DR患者不良预后曲线下面积(AUC)为0.927(95%CI:0.843~0.974)、0.848(95%CI:0.746~0.920)、0.985(95%CI:0.924~0.999)。结论:DR患者血清miR-200c-3p、miR-20b-5p水平升高,对DR不良预后具有一定的预测价值。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病视网膜病变 miR-200c-3p miR-20b-5p 表达水平 预后 诊断
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耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染患者NLRP3、CRP/ALB、IL-6表达水平及其预后相关影响因素
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作者 唐萍 史梦 +1 位作者 陈宗耀 曾海玲 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第10期2000-2004,共5页
目的分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染患者核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、C-反应蛋白/白蛋白(CRP/ALB)、白介素-6(IL-6)表达水平及其预后相关影响因素。方法2022年1月至2023年6月中江县人民医院、成都市第二人民医院、德... 目的分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染患者核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、C-反应蛋白/白蛋白(CRP/ALB)、白介素-6(IL-6)表达水平及其预后相关影响因素。方法2022年1月至2023年6月中江县人民医院、成都市第二人民医院、德阳市人民医院收治的294例耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染患者进行研究,根据预后情况分为预后不良组51例、预后良好组243例。通过单因素、多因素分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染患者预后的影响因素,比较不同预后患者NLRP3、CRP/ALB、IL-6表达水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析NLRP3、CRP/ALB、IL-6单独及联合检测对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染患者预后的预测价值。结果预后不良组患者年龄、病情危重程度为重度、深静脉置管、糖尿病、多器官功能衰竭、使用血管活性药物、使用镇静药、使用强心类药物比例高于预后良好组(P<0.05)。多因素Logistic分析结果显示病情危重程度为重度、深静脉置管、多器官功能衰竭、使用血管活性药物为耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染患者预后不良的危险因素(P<0.05)。与预后良好组比较,预后不良组血清NLRP3、CRP/ALB、IL-6水平更高(P<0.05)。绘制ROC曲线分析NLRP3、CRP/ALB、IL-6指标联合检测对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染预后不良的预测价值最高,曲线下面积(AUC)为0.910,敏感性86.27%,特异性为87.24%。结论耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染患者存在预后不良风险,危险因素较多,联合检测NLRP3、CRP/ALB、IL-6对其预测价值较高。 展开更多
关键词 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 c-反应蛋白/白蛋白 白介素-6
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寿胎丸抑制滋养细胞miR-29c-3p/Caspase-8/GSDME焦亡信号轴治疗URSA的作用与机制研究 被引量:1
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作者 许珂 张振 +8 位作者 魏然 褚楚 李莉华 刘泳琳 高淑凤 范楠楠 周苗苗 石飞飞 李霞(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期750-758,共9页
目的:探讨寿胎丸通过靶向miR-29c-3p/Caspase-8/GSDME信号通路减轻滋养细胞焦亡治疗不明原因复发性自然流产(URSA)的作用与关键机制。方法:全转录组高通量测序分析正常早孕妇女(NP组)和URSA患者绒毛组织中的差异mRNAs;Western blot检测C... 目的:探讨寿胎丸通过靶向miR-29c-3p/Caspase-8/GSDME信号通路减轻滋养细胞焦亡治疗不明原因复发性自然流产(URSA)的作用与关键机制。方法:全转录组高通量测序分析正常早孕妇女(NP组)和URSA患者绒毛组织中的差异mRNAs;Western blot检测Caspase-8、Caspase-3和GSDME表达及活化水平;qRT-PCR检测miR-29c-3p和CASP8 mRNA表达。体外调控HTR-8/SVneo细胞miR-29c-3p表达,分析其对Caspase-8和细胞焦亡相关分子表达及细胞培养上清中IL-1β、IL-18蛋白水平的影响。补肾固冲经典方剂寿胎丸含药血清作用于HTR-8/SVneo细胞后,观察miR-29c-3p、CASP8 mRNA表达和Caspase-8、Caspase-3及GSDME蛋白表达及活性,并检测培养上清中IL-1β与IL-18蛋白水平。CBA/J雌鼠和DBA/2雄鼠交配构建URSA小鼠模型,随机分为溶剂对照组、寿胎丸组、寿胎丸+INC组及寿胎丸+miR-29c-3p inhibitor组,观察各组胚胎吸收情况;检测各组胎盘组织中miR-29c-3p、Caspase-8、Caspase-3和GSDME表达及血清中IL-1β、IL-18蛋白水平。结果:与NP组比较,URSA患者绒毛组织Caspase-8、Caspase-3及GSDME表达及活化水平显著升高,而miR-29c-3p表达显著降低,且与CASP8 mRNA表达呈显著负相关。上调HTR-8/SVneo细胞miR-29c-3p表达后,CASP8 mRNA表达显著降低,Caspase-8、Cleaved Caspase-8、Cleaved Caspase-3、GSDME-N及细胞培养上清中IL-1β、IL-18蛋白水平明显下降,而抑制miR-29c-3p表达作用相反。双荧光素酶报告基因系统显示,miR-29c-3p能够与CASP8 mRNA 3’UTR直接结合。与对照组血清相比,寿胎丸含药血清能够上调HTR-8/SVneo细胞miR-29c-3p表达,而Caspase-8、Caspase-3、GSDME活性及IL-1β、IL-18表达均显著下调。与溶剂对照组相比,寿胎丸治疗组小鼠胚胎吸收减少,胚胎吸收率显著降低,小鼠胎盘组织中miR-29c-3p显著升高,Caspase-8、Caspase-3、GSDME活性及血清中IL-1β、IL-18表达显著下降;而miR-29c-3p inhibitor能够抑制寿胎丸的妊娠保护作用。结论:miR-29c-3p低表达促进Caspase-8/GSDME介导的滋养细胞焦亡,参与URSA发生;寿胎丸靶向miR-29c-3p/Caspase-8/GSDME信号通路,减轻滋养细胞焦亡,进而保护妊娠,治疗URSA。 展开更多
关键词 原因不明复发性自然流产 miR-29c-3p 寿胎丸 滋养细胞 细胞焦亡
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日本落叶松LkF3H2基因克隆及调控类黄酮代谢功能研究 被引量:1
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作者 李灿 蒋湘宁 盖颖 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期245-252,共8页
【目的】日本落叶松黄烷酮3-羟化酶(flavanone 3-hydroxylase 2,LkF3H2)基因在类黄酮生物合成过程中发挥着重要的调控功能。探究LkF3H2基因在日本落叶松中发挥的具体功能和植物类黄酮生物代谢过程。【方法】根据实验室前期转录组数据克... 【目的】日本落叶松黄烷酮3-羟化酶(flavanone 3-hydroxylase 2,LkF3H2)基因在类黄酮生物合成过程中发挥着重要的调控功能。探究LkF3H2基因在日本落叶松中发挥的具体功能和植物类黄酮生物代谢过程。【方法】根据实验室前期转录组数据克隆日本落叶松LkF3H2基因并进行生物信息学分析及组织表达分析。随后将该基因转化烟草进行转基因烟草组织表达分析及类黄酮含量测定,以探究基因表达量与类黄酮含量之间的关系。【结果】LkF3H2基因cDNA序列长度为1074 bp,其蛋白编码358个氨基酸,分子式C_(1785)H_(2807)N_(481)O_(541)S_(18),分子量为40.24 kD,该蛋白是不稳定的亲水性蛋白且不含信号肽;同时系统进化分析得出日本落叶松LkF3H2与火炬松、辐射松、白云杉和欧洲云杉F3H亲缘关系较近并且该蛋白含有保守结构域2OG-Fe(Ⅱ)oxygenase superfamily,属于2-酮戊二酸依赖性双加氧家族。另外组织表达分析显示LkF3H2基因在一月龄日本落叶松幼苗叶中表达量最高,在一年生日本落叶松幼苗茎中表达量最高,并且在转基因烟草叶中也显示了最高的表达量。值得一提的是,转基因烟草叶中的类黄酮含量也是最高的,其次为茎和根,转基因烟草中类黄酮含量与LkF3H2基因表达量呈正相关关系。【结论】日本落叶松LkF3H2基因属于2-酮戊二酸依赖性双加氧家族并且在类黄酮生物合成过程中发挥着重要功能。 展开更多
关键词 黄烷酮3-羟化酶基因 转基因烟草 组织表达 类黄酮
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温阳振衰颗粒通过调节lncRNA LOC103694972/miR-29c-3p减轻TGF-β1诱导NRK-49F细胞的纤维化
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作者 李琰 刘佑晖 +2 位作者 蔡虎志 林湘东 陈新宇 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第9期1553-1560,共8页
目的探讨温阳振衰颗粒通过lncRNA LOC103694972/miR-29c-3p对TGF-β1诱导的大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)的纤维化的影响。方法采用TGF-β1(10 ng·mL^(-1))处理NRK-49F细胞24 h,构建纤维化细胞模型。造模结束后给予空白血清、温... 目的探讨温阳振衰颗粒通过lncRNA LOC103694972/miR-29c-3p对TGF-β1诱导的大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)的纤维化的影响。方法采用TGF-β1(10 ng·mL^(-1))处理NRK-49F细胞24 h,构建纤维化细胞模型。造模结束后给予空白血清、温阳振衰颗粒含药血清和缬沙坦胶囊含药血清干预。CCK-8法检测温阳振衰颗粒对NRK-49F增殖的影响。实时荧光定量PCR检测LOC103694972和miR-29c-3p表达。Western blot法检测纤维化相关因子Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。同时研究过表达或沉默LOC103694972,温阳振衰颗粒含药血清对TGF-β1干预的NRK-49F细胞的影响。双荧光素酶报告实验检测LOC103694972与miR-29c-3p之间的调控作用。结果温阳振衰颗粒明显减弱TGF-β1诱导的细胞增殖和LOC103694972的表达(P<0.05),促进miR-29c-3p的表达(P<0.05),其干预效果与缬沙坦胶囊含药血清效果一致。双荧光素酶实验证实LOC103694972靶向调控miR-29c-3p。过表达LOC103694972促进温阳振衰颗粒含药血清干预下TGF-β1诱导NRK-49F细胞的活力,以及α-SMA蛋白、CollagenⅠ蛋白的表达(P<0.05)。而沉默LOC103694972具有相反的效果(P<0.05)。结论温阳振衰颗粒通过下调LOC103694972促进miR-29c-3p的表达,进而抑制TGF-β1诱导的NRK-49F细胞纤维化。 展开更多
关键词 温阳振衰颗粒 转化生长因子Β1 LOC103694972 miR-29c-3p 纤维化 NRK-49F细胞
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子痫前期患者血浆载脂蛋白C-3表达水平及临床意义
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作者 王文蓉 张崇媛 李飞 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第10期1251-1254,共4页
目的 分析子痫前期(PE)患者血浆载脂蛋白C-3(ApoC-3)表达水平及临床意义。方法 将2017年1月至2020年12月在荆州市第三人民医院接受常规产检并分娩的104例PE患者分为轻度子痫前期组(mPE组,54例)、重度子痫前期组(sPE组,50例),另将同期年... 目的 分析子痫前期(PE)患者血浆载脂蛋白C-3(ApoC-3)表达水平及临床意义。方法 将2017年1月至2020年12月在荆州市第三人民医院接受常规产检并分娩的104例PE患者分为轻度子痫前期组(mPE组,54例)、重度子痫前期组(sPE组,50例),另将同期年龄和孕周匹配的30例健康孕妇作为对照组。比较3组血浆ApoC-3及其他血生化指标水平。采用多因素线性回归分析ApoC-3等指标对PE患者病情的影响,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析ApoC-3水平对PE发生和发展的预测价值。结果 sPE组、mPE组血浆ApoC-3水平显著高于对照组,sPE组血浆ApoC-3水平显著高于mPE组,差异均有统计学意义(P<0.001);3组血肌酐(SCr)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、C反应蛋白(CRP)、血小板计数(PLT)、凝血酶时间(TT)、活化的部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib)、D-二聚体(D-D)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素线性回归分析显示,ApoC-3与Scr、CRP、PLT、PT、Fib、D-D均是PE患者病情的影响因素(P<0.05);ApoC-3预测PE发生和发展的曲线下面积(AUC)分别为0.981、0.784。结论 PE患者血浆ApoC-3水平较高,其水平与PE患者病情严重程度密切相关,可作为PE发生、发展的预测指标。 展开更多
关键词 子痫前期 载脂蛋白c-3 血浆 生化指标
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miR-29c-3p/IGF1分子轴对肝星状细胞活化,增殖和凋亡的作用机制
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作者 张梁 王保全 +3 位作者 雷喜锋 王旭 柯阳 张玮 《昆明医科大学学报》 CAS 2023年第9期7-14,共8页
目的探讨miR-29c-3p通过IGF-1对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化,增殖和凋亡的影响。方法原代培养小鼠HSCs,并通过免疫荧光检测HSCs标志物ɑ-SMA表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-29c-3p和IGF-1的靶向关系。TGF-β激活... 目的探讨miR-29c-3p通过IGF-1对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化,增殖和凋亡的影响。方法原代培养小鼠HSCs,并通过免疫荧光检测HSCs标志物ɑ-SMA表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-29c-3p和IGF-1的靶向关系。TGF-β激活HSCs,并且外源性调控miR-29c-3p和IGF-1的表达水平后,分别采用Westernbolt,CCK-8,克隆形成实验和流式细胞术检测活化HSCs中活化相关蛋白(ɑ-SMA,DDR2,FN1,ITGB1和GFAP)的表达,增殖,克隆形成数和凋亡。结果ɑ-SMA阳性表达表明成功分离小鼠HSCs。miR-29c-3p mimic可降低野生型IGF-1的荧光素酶活性,但是对突变型IGF-1没有影响。过表达miR-29c-3p和低表达IGF-1能减少ɑ-SMA,DDR2,FN1和ITGB1表达,增加GFAP的表达,并且降低HSCs的增殖活力和克隆形成数,上调其凋亡比例。结论miR-29c-3p通过靶向抑制IGF-1表达,进而抑制HSCs活化和增殖,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 酒精性肝病 肝星状细胞 活化 增殖 凋亡 miR-29c-3p IGF-1
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lncRNA CTD-2182N23.1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其对癌细胞恶性生物学行为的影响 被引量:1
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作者 黎思毅 肖雄升 +3 位作者 陈卓婷 杨雪 郑昌蔚 张智 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第1期1-7,共7页
目的:分析长链非编码(long non-coding RNA,lncRNA)CTD-2182N23.1在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平与患者临床病理特征的关系,探究CTD-2182N23.1通过靶向miR-200c-3p对甲状腺乳头状癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:采用TCGA数据库分... 目的:分析长链非编码(long non-coding RNA,lncRNA)CTD-2182N23.1在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平与患者临床病理特征的关系,探究CTD-2182N23.1通过靶向miR-200c-3p对甲状腺乳头状癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:采用TCGA数据库分析CTD-2182N23.1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其与患者临床分期、预后的关系。收集2019年05月至2022年03月本院手术切除的50例甲状腺乳头状癌患者癌组织和癌旁组织,采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测甲状腺乳头状癌组织中CTD-2182N23.1的表达,分析其与甲状腺乳头状癌患者临床病理特征的关系。qPCR检测人正常甲状腺滤泡上皮细胞Nthy-ori3-1和人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1、MDA-T32、TT、SW579、B-CPAP中CTD-2182N23.1的表达。体外培养MDA-T32细胞,实验分为NC组和CTD-2182N23.1组。细胞克隆形成实验和Transwell实验分别检测转染后MDA-T32细胞增殖能力和侵袭能力。双荧光素酶基因报告实验验证CTD-2182N23.1与miR-200c-3p之间的靶向关系。qPCR检测转染后MDA-T32细胞中miR-200c-3p和ATP2A2 mRNA的表达。采用TCGA数据库分析CTD-2182N23.1与ATP2A2 mRNA表达的相关性。Western blot法分别检测ATP2A2、CDK1、Cyclin B、Twist、Slug蛋白水平。结果:TCGA数据库显示甲状腺乳头状癌组织中CTD-2182N23.1呈低表达(P<0.01),其与患者临床分期、无病生存期均呈正相关(均P<0.05)。qPCR显示甲状腺乳头状癌组织和细胞系中CTD-2182N23.1均呈低表达(均P<0.05)。CTD-2182N23.1表达水平与肿瘤分期、淋巴结转移有关联(均P<0.01)。上调CTD-2182N23.1后MDA-T32细胞克隆形成数目和细胞侵袭数目均明显减少(均P<0.01)。CTD-2182N23.1能够靶向且负调控miR-200c-3p的表达(P<0.01)。上调CTD-2182N23.1后MDA-T32细胞中ATP2A2基因表达显著升高(P<0.01)。CTD-2182N23.1与ATP2A2 mRNA表达呈正相关。上调CTD-2182N23.1后MDA-T32细胞中CDK1、Cyclin B、Twist、Slug蛋白水平均显著降低(均P<0.01)。结论:CTD-2182N23.1在甲状腺乳头状癌组织和细胞系中呈低表达,上调CTD-2182N23.1通过调控miR-200c-3p/ATP2A2表达显著抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖、侵袭,CTD-2182N23.1可能是甲状腺乳头状癌治疗的潜在分子靶标。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 甲状腺乳头状癌 miR-200c-3p ATP2A2 增殖 侵袭
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Effects of flavonoids derived from Taxus yunnanensis on p-glycoprotein and cytochrome P450 3A4 被引量:2
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作者 Jifu Li Dake Cai +2 位作者 Huichang Bi Jing Jin Min Huang 《Asian Journal of Pharmaceutical Sciences》 SCIE CAS 2013年第3期168-173,共6页
The intestinal uptake of paclitaxel is hampered by trans-membrane efflux transporters such as P-glycoprotein(P-gp),and paclitaxel is mainly metabolized by cytochrome P4503A4(CYP3A4)presented in the liver.Our previous ... The intestinal uptake of paclitaxel is hampered by trans-membrane efflux transporters such as P-glycoprotein(P-gp),and paclitaxel is mainly metabolized by cytochrome P4503A4(CYP3A4)presented in the liver.Our previous results demonstrated that flavonoids extracted from Taxus yunnanensis could improve the oral absorption of paclitaxel.The current study was purposed to investigate the effects of the flavonoid extracts on P-gp and CYP3A4 in vitro.The expression and activity of P-gp were detected by western blotting and intracellular rhodamine 123 accumulation assay in Caco-2 cells treated with the flavonoids extract.The expression of CYP3A4 was investigated by western blotting in mouse primary hepatocytes and the activity of CYP3A4 was detected by LC-MS/MS method using rat liver microsomes.Our results showed that the flavonoid extracts from T.yunnanensis could inhibit P-gp activity and concurrently decrease the expression and activity of CYP3A4.In conclusion,activity of P-gp and CYP3A4 could be inhibited by flavonoids extracted from T.yunnanensis which might be potential candidates for development of oral formulation of paclitaxel. 展开更多
关键词 Taxus yunnanensis flavonoid P-GLYCOPROTEIN CYP3A4 Pregnane X receptor
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三种花色黄芩中F3′5′H基因的克隆及表达分析
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作者 郭凤丹 尹鑫 +6 位作者 张翠翠 刘梦钰 赵秋晨 孙新茹 王淑 管仁伟 林慧彬 《山东农业科学》 北大核心 2024年第10期1-9,共9页
类黄酮3′,5′-羟化酶(flavonoid 3′,5′-hydroxylase,F3′5′H)是花青素合成途径中催化形成蓝色飞燕草素的关键酶。本研究通过RT-PCR方法,从蓝紫花、玫红花、白花黄芩中克隆得到F3′5′H基因的全长序列,分别命名为SbF3′5′H-b、SbF3... 类黄酮3′,5′-羟化酶(flavonoid 3′,5′-hydroxylase,F3′5′H)是花青素合成途径中催化形成蓝色飞燕草素的关键酶。本研究通过RT-PCR方法,从蓝紫花、玫红花、白花黄芩中克隆得到F3′5′H基因的全长序列,分别命名为SbF3′5′H-b、SbF3′5′H-r、SbF3′5′H-w。经序列比对,SbF3′5′H-r基因较SbF3′5′H-b/w缺失7 bp,导致蛋白翻译提前终止。生物信息学分析显示,三个SbF3′5′H蛋白均属于细胞色素P450家族,定位在内质网。SbF3′5′H-B/W蛋白具有典型的CYP450保守序列,包括富含脯氨酸基序“LPPGP”、底物识别位点SRS1~6、折叠锁定基序“E××R”、血红素结合基序“PFGAGRRICAG”及预测的羟化活性位点CR1和CR2。而SbF3′5′H-R蛋白由于序列缺失影响二级、三级结构,并导致CYP450结构域不完整,C端缺少多个维持酶活性的保守基序。基于F3′5′H蛋白序列的系统进化分析结果显示,黄芩与同为唇形科的丹参、一串红等亲缘关系最近,聚在一个分支,与单子叶植物亲缘关系较远。基因表达分析结果显示,SbF3′5′H在白花中整体表达最高,其次是蓝紫花,玫红花中整体表达最低;不同花发育阶段比较,SbF3′5′H基因均呈现出先升高后降低的趋势,在中蕾期表达量最高,其次是幼蕾期,盛花期表达量最低,蓝紫和白花黄芩不同花发育阶段间差异显著或极显著。本研究结果可为进一步研究不同花色黄芩中SbF3′5′H基因的功能差异、揭示黄芩花色变异的分子机理奠定理论基础。 展开更多
关键词 黄芩 花色 类黄酮3 5′-羟化酶 基因克隆 生物信息学分析 表达分析
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hsa_circ_0000069通过靶向miR-548c-3p调控胃癌细胞增殖、细胞周期和凋亡
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作者 王贵军 于天宇 邓蓓蓓 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第19期4837-4842,共6页
目的 研究hsa_circ_0000069靶向miR-548c-3p在胃癌进展中的功能。方法 RT-qPCR检测胃癌组织、癌旁组织、胃癌细胞(SNU-1、AGS、HS-746T)、人正常胃黏膜上皮细胞GES1中hsa_circ_0000069、miR-548c-3p表达情况。将SNU-1细胞分为对照(NC)组... 目的 研究hsa_circ_0000069靶向miR-548c-3p在胃癌进展中的功能。方法 RT-qPCR检测胃癌组织、癌旁组织、胃癌细胞(SNU-1、AGS、HS-746T)、人正常胃黏膜上皮细胞GES1中hsa_circ_0000069、miR-548c-3p表达情况。将SNU-1细胞分为对照(NC)组、si-NC组、si-hsa_circ_0000069组、miR-NC组、miR-548c-3p组、pcDNA组、pcDNA-hsa_circ_0000069组、si-hsa_circ_0000069+anti-miR-NC组、si-hsa_circ_0000069+anti-miR-548c-3p组。流式细胞术检测细胞凋亡和周期分布;CCK-8法分析细胞活力。hsa_circ_0000069和miR-548c-3p的靶向关系通过双荧光素酶报告实验来验证。结果 胃癌组织中hsa_circ_0000069表达水平显著高于癌旁组织,miR-548c-3p表达水平显著低于癌旁组织(均P<0.05)。SNU-1、AGS、HS-746T细胞中hsa_circ_0000069表达水平显著高于GES1细胞,miR-548c-3p表达水平显著低于GES1细胞(均P<0.05)。与NC组比较,si-hsa_circ_0000069组SNU-1细胞miR-548c-3p表达水平、凋亡率、G0/G1期比例显著升高,细胞活力、S期比例显著降低(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-548c-3p组SNU-1细胞凋亡率、G0/G1期比例显著升高,细胞活力、S期比例显著降低(P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-hsa_circ_0000069组SNU-1细胞miR-548c-3p表达水平显著降低(均P<0.05)。与si-hsa_circ_0000069+anti-miR-NC组比较,si-hsa_circ_0000069+anti-miR-548c-3p组SNU-1细胞凋亡率、G0/G1期比例显著降低,细胞活力、S期比例显著升高(均P<0.05)。结论 干扰hsa_circ_0000069通过靶向miR-548c-3p诱导胃癌细胞凋亡,抑制细胞增殖和周期进展。 展开更多
关键词 胃癌 hsa_circ_0000069 miR-548c-3p 细胞增殖 周期分布 凋亡
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一个类黄酮3'-羟化酶参与多星韭花色素生物合成的功能解析
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作者 孔德静 梁进丽 +4 位作者 宫秋玲 俞沙沙 梁琳 孙威 鞠志刚 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2024年第4期581-587,共7页
类黄酮3'-羟化酶(F3'H)在花色素苷生物合成过程中起关键作用。明确多星韭F3'H在花色素苷生物合成中的功能,将为多星韭花色形成及改良研究提供基因资源。基于转录组数据从多星韭花朵中克隆获得AwF3'H,并对其进行生物信... 类黄酮3'-羟化酶(F3'H)在花色素苷生物合成过程中起关键作用。明确多星韭F3'H在花色素苷生物合成中的功能,将为多星韭花色形成及改良研究提供基因资源。基于转录组数据从多星韭花朵中克隆获得AwF3'H,并对其进行生物信息学分析,利用Real time PCR对AwF3'H1的表达模式进行分析,并利用蘸花法将AwF3'H转入拟南芥中,同时对转基因植株进行表型观察及花色素苷检测分析。结果表明,Aw F3'H的ORF全长为1545 bp,编码514个氨基酸,属于细胞色素P450家族成员,与洋葱AcF3'H的亲缘关系最近;在所检测组织均有表达,但在雄蕊中表达最高,根中表达最低;与野生型拟南芥相比,转AwF3'H拟南芥T2代幼苗子叶及下胚轴颜色明显加深,矢车菊素与天竺葵素类花色苷积累量显著增加。表明AwF3'H具有类黄酮3'-羟化酶的功能。 展开更多
关键词 多星韭 基因功能验证 类黄酮3'-羟化酶 表达分析 花青素
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3D-QSAR Study on the Inhibitory Activity of Flavonoids on PIM-1 Kinase 被引量:1
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作者 邬旸 王甫洋 +2 位作者 于红霞 王遵尧 王连生 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2010年第8期1147-1154,共8页
20 Typical flavonoids were selected for study on the interaction between them and PIM-1 kinase with the comparative molecular field analysis method(CoMFA) as well as the comparative molecular similarity index analys... 20 Typical flavonoids were selected for study on the interaction between them and PIM-1 kinase with the comparative molecular field analysis method(CoMFA) as well as the comparative molecular similarity index analysis method(CoMSIA) based on molecule docking.3D-QSAR models between these flavonoids and receptor PIM-1 kinase were established.The obtained optimal cross-validation correlation coefficient Q2 for CoMFA model was 0.582,and the non-cross-validation correlation coefficient R2 was 0.955;the corresponding values for CoMSIA model were 0.790 and 0.974,respectively.These two models showed fairly fine stability and predictive ability.In addition,molecule docking results revealed the key residues in the receptor cavity and their specific action ways with flavonoids. 展开更多
关键词 flavonoids PIM-1 kinase receptor-ligand docking three-dimensional quantitative structure-activity relationship(3D-QSAR) COMFA COMSIA
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