C-C趋化因子配体5通过诱导帕金森病模型小鼠外周Th17细胞比例增加、Treg细胞比例减少及促进Th17细胞表达淋巴细胞功能相关抗原1而加重神经炎症的研究

目的探讨帕金森病(PD)中C-C趋化因子配体5(CCL5)对外周CD4^(+)T细胞激活与分化的影响,以及CCL5对Th17细胞与Treg细胞向黑质(SN)迁移介导神经免疫炎症的影响。方法C57B6/J小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)构建PD动物模型,并进行CCL5腹腔注射干预。利用转棒实验和爬杆实验检测小鼠行为能力,利用流式细胞染色检测小鼠外周CD4^(+)T细胞比例及相关表型,利用Western blotting法检测小鼠SN中酪氨酸羟化酶(TH)和α-突触核蛋白的表达,利用免疫荧光染色检测小鼠SN中多巴胺能(DA)神经元数量和Th17/Treg细胞的浸润数量。结果MPTP小鼠与对照组小鼠相比运动功能显著降低,而干预CCL5进一步加重MPTP小鼠的运动功能障碍。MPTP小鼠较对照组小鼠表现为外周Th17细胞比例增加而Treg细胞比例减少;而CCL5干预不仅诱导MPTP小鼠外周Th17细胞比例进一步增加和Treg细胞比例进一步减少,还能够增加淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)在Th17细胞上的表达但不影响其在Treg细胞中的表达。在中枢,MPTP小鼠SN中DA神经元数量减少、Th17细胞浸润数量增加而Treg细胞浸润数量减少;MPTP小鼠经CCL5干预后,SN中DA神经元数量进一步减少、Th17细胞浸润数量显著增加和Treg细胞浸润数量显著减少。结论CCL5能够诱导MPTP小鼠外周Th17细胞比例增加和Treg细胞比例减少以及诱导Th17细胞表达LFA-1,导致MPTP小鼠SN中Th17细胞数量增加而Treg细胞数量减少,从而加重中枢神经炎症和DA神经元损伤。

趋化因子配体5基因多态性与2型糖尿病患者颈动脉内膜中层厚度的相关性研究

目的研究趋化因子配体5(CXCL5)基因启动子-156位点G/C多态性分布与2型糖尿病(T2DM)患者颈动脉内膜中层厚度(CIMT)的关系。方法采用多聚酶链式反应限制性片段长度多态性技术检测210例2型糖尿病患者(按CIMT分为T2DM-CIMT增厚组和单纯T2DM组)和171例健康体检者(正常对照组)趋化因子CXCL5基因启动子-156位点G/C多态性。测量身高、体重、并计算体重指数(BMI)、检测血脂、C反应蛋白(CRP),空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FIN),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果 CXCL5基因启动子-156位点G/C多态性在对照组和2型糖尿病组中的分布差异无显著性(P>0.05)。T2DM-CIMT增厚组与单纯T2DM组基因型分布、等位基因频率比较差异有显著性(X^2=22.793,P<0.01;X^2=25.076,P<0.01)。将CXCL5基因启动子-156位点G/C+C/C基因频率与G/G相比,T2DM-CIMT增厚组与单纯T2DM组比较差异有显著性(X^2=15.125,P<0.01)。T2DM-CIMT增厚组年龄、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、In(FIN)、In(HOMA-IR)、收缩压(SBP)、CRP高于单纯T2DM组(P<0.05)。2型糖尿病患者中携带C等位基因(G/C+C/C)者与携带G/G基因型者年龄、性别、TG、HDL-C比较,差异无显著性(P>0.05)。携带C等位基因(G/C+C/C)者空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素自然对数[In(FIN)]、胰岛素抵抗指数自然对数=[In(HOMA-IR)]、BMI、TC、LDL-C、CRP、SBP、舒张压(DBP)均高于携带G/G基因型者,差异有显著性(P<0.05)。多元逐步回归分析显示C等位基因[OR=0.976,95%CI(0.919～1.038)]、年龄[OR=0.579,95%CI(0.418～0.801)]、SBP[OR=1.079,95%CI(1.014～1.149)]、In(HOMA-IR)[OR=1.432,95%CI(0.919～1.038)、LDL-C[OR=0.976,95%CI(1.09～1.83)]、CRP[OR=3.465,95%CI(3.067～11.250)]是CIMT的危险因素。结论 CXCL5基因启动子-156位点G/C多态性与2型糖尿患者CIMT增厚有关。

CC类趋化因子配体5水平与慢性乙型病毒性肝炎患者肝脏炎症程度的关系──附64例检测分析

目的：探讨慢性乙型病毒性肝炎（慢乙肝）患者肝组织CC类趋化因子配体5（CCehemokine ligand5，CCL5）水平与肝脏炎症程度的关系。方法：64例慢乙肝患者和10名正常人的肝组织标本按照炎症（G）分级标准分为G0-G4，用免疫组织化学染色定性厦图像分析系统定量检测肝组织趋化因子CCL5的表达情况，并用Spearman等级相关分析进行相关性分析。结果：10名正常人的肝组织炎症分级均为G0，慢乙肝组则分别为G115例、G220例、G217例、G412例。慢乙肝组肝组织CCL5的表达明显高于正常对照组（P=0.000）；G0-G4者肝组织CCL5的表达阳性单位（positive unit，PU）分剐为（3．7±1．5），（15．0±5．7），（21．6±5．9），（30．3±8．2）和（40．9±12．3），慢乙肝患者的肝组织CCL5的表达程度与肝组织炎症分级之间呈显著的正相关（r=0．865，P=0．000）。结论：CCL5在慢乙肝肝脏炎症的发生中具有重要作用。

siRNA干扰C-C趋化因子配体5对喉癌细胞生物学特性的影响

目的研究C-C趋化因子配体5(C-C chemokine ligand 5,CCL5)在头颈鳞状细胞癌中的表达,并探讨CCL5对喉癌细胞生物学特性的影响。方法基因表达谱数据动态分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库查找CCL5在头颈鳞状细胞癌中的表达情况。将喉癌细胞TU177转染siRNA(siRNA组),并设对照(NC)组,CCK8法、细胞划痕试验、流式细胞术分别检测各组细胞增殖、迁移、细胞周期及细胞凋亡情况;RT-PCR、Western blot法检测CCL5敲降效率及多药耐药蛋白2(multidrug resistance protein 2,MRP2)、bcl-2相关x蛋白(bcl-2-associated x protein,Bax)mRNA转录及蛋白表达水平。结果CCL5在头颈鳞状细胞癌的表达高于正常组织(P<0.05)。与NC组相比,siRNA组siRNA具有较高的敲降效率(t分别为12.898和22.656,P均<0.01);siRNA敲降CCL5可抑制喉癌细胞增殖、迁移,促进喉癌细胞晚期凋亡及凋亡蛋白Bax的表达(t=2.600~11.667,P均<0.05)。结论CCL5在头颈鳞状细胞癌中高表达,siRNA干扰CCL5通过上调Bax表达抑制喉癌细胞TU177增殖、迁移,促进凋亡,为CCL5可能作为治疗喉癌的新靶点奠定了基础。

老年2型糖尿病周围神经病变与血清趋化因子调节激活正常T细胞表达和分泌因子、C-X-C基序趋化因子配体12、C-C基序趋化因子配体2水平的相关性

目的探讨老年2型糖尿病(T2DM)周围神经病变(DPN)与血清趋化因子调节激活正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)、C-X-C基序趋化因子配体12(CXCL12)、C-C基序趋化因子配体2(CCL2)的关系。方法选取2019年3月~2021年10月河北省邯郸市人民医院确诊的老年T2DM患者181例,根据是否并发DPN将其分为单纯T2DM组(89例)和DPN组(92例)。收集所有患者一般临床资料、实验室检查指标、血清趋化因子RANTES、CXCL12、CCL2水平及感觉神经传导速度和运动神经传导速度并分组进行比较。采用Pearson相关分析评估DPN患者血清趋化因子RANTES、CXCL12、CCL2水平与一般临床指标及神经传导速度的相关性;采用多因素logistic回归分析评估DPN发病的影响因素。结果DPN组血清趋化因子RANTES、CXCL12、CCL2、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)水平及T2DM病程、高血压病、高脂血症、视网膜病变患者比例均显著高于单纯T2DM组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、感觉神经传导速度、运动神经传导速度均显著低于单纯T2DM组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,DPN患者血清趋化因子RANTES、CXCL12、CCL2水平与T2DM病程、高血压病、高脂血症、视网膜病变、HbA1c、TC均呈正相关,与HDL-C、感觉神经传导速度、运动神经传导速度均呈负相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,RANTES、CXCL12、CCL2水平高、T2DM病程长是T2DM患者并发DPN的独立危险因素(P<0.05)。结论DPN患者血清趋化因子RANTES、CXCL12、CCL2水平升高,且与神经传导速度呈负相关。

不同中医证型腰椎间盘突出症患者CCL5水平及其与疼痛的相关性研究

目的研究不同中医证型腰椎间盘突出症(LDH)患者趋化因子配体5(CCL5)水平,探究CLL5与LDH患者疼痛程度的相关性。方法选取2019年4月-2021年7月在广州中医药大学第三附属医院脊柱科住院并确诊为LDH的患者160名作为试验组,按照中医证型、椎间盘病理特点分型、疼痛程度的不同分不同的亚组。同时选取40例健康体检者作为对照组。对比试验组与对照组间血清CCL5水平的差异;探究不同中医证型、不同病理特点分型、不同疼痛程度LDH患者CCL5水平的差异。应用相关性分析,明确CCL5与疼痛的相关性。结果试验组最终纳入160例LDH患者,其中男性患者64例,女性患者96例,平均年龄(56.2±10.3)岁。血瘀型、寒湿型、湿热型和肝肾亏虚型患者例数各为40例;膨出型、突出型、脱出型、游离型患者例数分别为15例、45例、68例和32例;轻度疼痛、中度疼痛、重度疼痛患者例数分别为31例、65例和64例。对照组40例,其中男性18例、女性22例,平均年龄(55.3±9.8)岁。试验组与对照组的性别、年龄分布差异无统计学意义(P>0.05)。不同中医证型、不同病理特点分型LDH患者的CCL5水平差异无统计学意义(P>0.05),不同疼痛程度LDH患者的CCL5水平差异有统计学意义(P<0.01),重度疼痛患者的CCL5水平最高,中度疼痛患者的CCL5水平次之,轻度疼痛患者的CCL5水平最低。Pearson相关性分析结果提示,血清CCL5浓度与疼痛程度存在正相关关系(r=0.321,P=0.002)。结论不同中医证型LDH患者的CCL5水平未见明显差异,血清CCL5水平与中医证型、LDH的病理分型无关,与疼痛分级均有正相关关系。CCL5可能是通过疼痛相关机制影响LDH,CCL5有可能成为治疗LDH患者疼痛的靶点。

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并2型糖尿病患者CXCL13,KIM-1,CTRP5,Klotho表达水平及其临床意义

目的:探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)合并2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者的肾损伤因子-1(kidney injury molecule 1,KIM-1)、趋化因子配体13(chemokine ligand 13,CXCL13)、补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白5(C1q/tnf-associated protein 5,CTRP5)及Klotho表达水平及临床意义。方法:选择2017年3月至2019年1月武汉大学人民医院收治的OSAHS合并T2DM者(合并组)50例、单独OSAHS者(OSAHS组)46例、单独T2DM者(T2DM组)52例,并以同期来我院正常体检的健康人50例作为对照组。比较各组受试者呼吸参数、血脂、血糖、尿KIM-1及血清CXCL13,CTRP5,Klotho水平变化,采用Pearson法对空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、呼吸紊乱指数(apnea hypopnea index,AHI)与尿KIM-1及血清CXCL13,CTRP5,Klotho指标相关性进行分析,并通过受试者工作特征曲线(ROC)分析KIM-1,CXCL13,CTRP5及Klotho对OSAHS合并T2DM患者的诊断价值。结果:与对照组比较,合并组、OSAHS组以及T2DM组尿KIM-1及血清CXCL13,CTRP5升高,血清Klotho水平降低(均P<0.001);与OSAHS组以及T2DM组比较,合并组患者上述指标改变明显(P<0.05)。与T2DM组比较,合并组和OSAHS组患者M-SaO2,L-SaO2明显降低,SIT90,AHI明显升高(P<0.001);与OSAHS组比较,合并组患者FBG和HbA1c水平明显升高(均P<0.001)。OSAHS合并T2DM患者FBG,AHI均与尿KIM-1及血清CXCL13,CTRP5水平呈现正相关,与Klotho水平呈现负相关(P<0.001)。结论:尿KIM-1及血清CXCL13,CTRP5,Klotho指标与OSAHS和T2DM患者发生发展关系密切,对OSAHS合并T2DM均具有一定的诊断价值,但联合诊断价值更高。

宫颈高危型人乳头瘤病毒感染患者阴道微环境中趋化因子配体水平变化及意义

目的探讨宫颈高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染患者阴道微环境CC趋化因子配体(CCL)2、CCL5、CXC趋化因子配体(CXCL)10、CXCL12的变化及意义,为宫颈癌的早期预防提供可靠的理论依据。方法选取2019年4月—2020年8月丽水市人民医院收治的198例HR-HPV感染患者为研究对象,根据病理检查结果将其分为CINⅠ级组76例、CINⅡ-Ⅲ级组64例和宫颈癌组58例;同期选取75例健康体检女性作为对照组,行宫颈癌筛查后(经液基薄层细胞检测)宫颈无异常。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测阴道微环境CCL2、CCL5、CXCL10及CXCL12水平;采用Spearman法分析HR-HPV感染患者阴道微环境CCL2、CCL5、CXCL10及CXCL12与HR-HPV负荷量的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析阴道微环境CCL2、CCL5、CXCL10及CXCL12对宫颈HR-HPV感染的预测价值;采用多因素Logistic回归分析影响宫颈HR-HPV感染的因素。结果CINⅠ级组、CINⅡ~Ⅲ级组和宫颈癌组HR-HPV负荷量比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中CINⅠ级组HR-HPV负荷量<100 copies/ml患者比例最高,宫颈癌组HR-HPV负荷量>1000 copies/ml患者比例最高。宫颈癌组阴道微环境CCL2、CCL5、CXCL10及CXCL12水平高于对照组、CINⅠ级组及CINⅡ~Ⅲ级组,且随宫颈病变程度增加,阴道灌洗液中CCL2、CCL5、CXCL10及CXCL12水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。CCL2、CCL5、CXCL10及CXCL12水平与HR-HPV负荷量均呈正相关(P<0.05)。阴道微环境CCL2、CCL5、CXCL10及CXCL12及4项联合预测HR-HPV感染的曲线下面积(AUC)分别为0.892、0.891、0.908、0.869及0.991,特异度分别为76.0%、82.7%、96.0%、86.7%及93.3%,灵敏度分别为93.4%、84.2%、72.4%、72.4%及97.4%。CXCL12是影响宫颈感染HR-HPV的独立危险因素(P<0.05)。结论宫颈HR-HPV感染患者阴道微环境中CCL2、CCL5、CXCL10及CXCL12水平增加,且均与宫颈病变程度有关,4项指标联合检测可预测宫颈HR-HPV感染。

2型糖尿病伴慢性牙周炎患者血清ICAM-1、CCL2表达与牙周病变程度的关系

目的 探讨趋化因子c-c配体2 (CCL2)、细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)在2型糖尿病(T2DM)伴慢性牙周炎(CP)患者血清中的表达及其与牙周病变程度的相关性。方法 选取2021年1月至2022年6月铜川市妇幼保健院和榆林市星元医院收治的80例T2DM伴CP患者为研究对象(T2DM+CP组),选取上述医院收治的80例单纯T2DM患者为单纯T2DM组,80例单纯CP患者为单纯CP组。收集三组患者的一般资料,采用酶联免疫吸附法检测并比较三组患者的血清CCL2、ICAM-1表达水平,采用Pearson法分析CCL2、ICAM-1与临床指标的相关性,Spearman法分析CCL2、ICAM-1与牙周病变程度的相关性。结果 T2DM+CP组患者的血清CCL2、ICAM-1水平分别为(57.30±10.48) pg/mL、(649.83±65.51) ng/mL,明显高于单纯CP组[(20.95±6.87) pg/mL、(462.23±50.80) ng/mL]和单纯T2DM组[(42.89±8.91) pg/mL、(519.92±56.22) ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05);CCL2、ICAM-1表达水平随着牙周病变程度的加重逐渐升高,差异具有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性分析结果显示,T2DM伴CP患者血清中CCL2、ICAM-1表达与牙周病变程度呈显著正相关(r=0.717,r=0.853,P<0.05);经Pearson相关性分析结果显示,T2DM+CP组患者血清中CCL2、ICAM-1表达与附着丧失(AL)、牙周袋探针深度(PD)、牙龈沟出血指数(SBI)、空腹血糖(FPG)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白介素-6 (IL-6)呈显著正相关(P<0.05)。结论 CCL2、ICAM-1在T2DM伴CP患者血清中高表达,两者与患者牙周病变程度密切相关。

肺泡灌洗液中miR-30a-5p、CCL16表达与肺结核患者结核杆菌耐药性的关系

目的 探讨耐药肺结核患者支气管肺泡灌洗液中微小RNA-30a-5p(microRNA-30a-5p, miR-30a-5p)和C-C基序趋化因子配体16(C-C motif chemokine ligand 16, CCL16)表达水平变化,为结核病防治提供理论基础。方法 选取2018年2月1日-2021年6月30日在我院治疗的活动性肺结核患者182例作为研究对象(观察组),并根据是否对结核杆菌耐药情况将其分为耐药组和非耐药组,选择同期90例非肺结核的健康人(因胸痛经纤维支气管镜检查排除肺结核)作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测支气管肺泡灌洗液中miR-30a-5p表达水平,采用ELISA法检测CCL16水平,采用流式细胞分析法检测外周血T细胞亚群分布,采用Pearson分析法分析耐药肺结核患者支气管肺泡灌洗液中miR-30a-5p与CCL16表达水平相关性,采用Logistic逐步回归分析法分析肺结核患者结核杆菌耐药性的影响因素。结果 非耐药组与耐药组CD3^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞水平及CD4/CD8比值均显著低于对照组,CD8^(+)T细胞水平显著高于对照组(P均<0.05);耐药组CD3^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞水平及CD4/CD8比值均显著低于非耐药组,CD8^(+)T细胞水平显著高于非耐药组(P均<0.05)。非耐药组与耐药组支气管肺泡灌洗液中miR-30a-5p表达水平均显著低于对照组,CCL16水平均显著高于对照组(P均<0.05);耐药组肺泡灌洗液中miR-30a-5p表达水平显著低于非耐药组,CCL16水平显著高于非耐药组(P均<0.05)。有吸烟史、广泛耐药的肺结核患者肺泡灌洗液中miR-30a-5p表达水平显著低于无吸烟史、耐多药的肺结核患者,CCL16水平显著高于无吸烟史、耐多药的肺结核患者(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,耐药肺结核患者肺泡灌洗液中miR-30a-5p与CCL16表达水平呈显著负相关(r=-0.556,P <0.001);Logistics多因素回归分析显示,有吸烟史、肺部空洞、miR-30a-5p <0.72、CCL16≥5.34 pg/ml为影响肺结核患者耐药性的危险因素(P均<0.05)。结论 耐药肺结核患者支气管肺泡灌洗液中miR-30a-5p表达水平降低,CCL16水平升高,检测miR-30a-5p、CCL16水平可反映机体感染结核杆菌后机体发生的免疫应答情况,为耐药肺结核的治疗提供参考。

雷公藤多苷降低糖尿病肾病大鼠炎性细胞因子的表达

目的观察雷公藤多苷(TWP)对糖尿病肾病(DN)大鼠核因子κB(NF-κB)、C-C型趋化因子配体5(CCL5)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)等炎性细胞因子表达的影响。方法链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立DN大鼠模型。动物随机分为正常组、模型组、1.8 g/kg/d TWP治疗组。用药8周末,计算肾脏指数(KI)、全自动生化分析仪检测大鼠血糖(BG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)等生化指标。ELISA检测大鼠血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)和肾匀浆IL-6、TNF-α和CCL5的含量;HE染色观察大鼠肾脏病理学改变;免疫组织化学染色检测大鼠肾组织NF-κB的表达。结果与模型组相比,TWP可改善DN大鼠一般状况;明显降低DN大鼠空腹BG、HbA1c、KI、BUN及Scr水平,增加DN大鼠体质量(P<0.01);与模型组比较,TWP明显降低DN大鼠血清hs-CRP水平及肾匀浆中IL-6、TNF-α和CCL5的水平,明显下调DN大鼠肾组织NF-κB的表达(P<0.01),经TWP治疗后DN大鼠肾脏病理变化减轻。结论 TWP可降低糖尿病大鼠血清及肾脏炎性细胞因子表达,减轻肾脏病变。

上调HBO1基因对亚溶解型C5b-9刺激大鼠GMCs生成CCL5的作用机制研究

目的研究上调乙酰基转移酶(HBO1)基因对亚溶解型C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)生成趋化因子CCL5的作用机制。方法构建外源性真核表达重组质粒pIRES2-HBO1,利用NeonTM电转仪将重组质粒转染至体外培养的GMCs中,免疫印迹(WB)实验鉴定外源性过表达HBO1的结果。再进行分组实验(MEM组、pIRES2组、亚溶解型C5b-9组,以及pIRES2-HBO1+亚溶解型C5b-9组)。分别用实时PCR和ELISA法检查不同分组处理后CCL5的mRNA和蛋白水平,并用荧光素酶报告实验检测CCL5的启动子活性情况。结果WB实验表明,真核表达重组质粒pIRES2-HBO1构建成功。用pIRES2-HBO1转染GMCs后,GMCs在亚溶解型C5b-9复合物的刺激下生成CCL5基因的水平及其启动子活性均显著升高。结论成功构建了pIRES2-HBO1真核表达重组质粒,并初步证实HBO1基因表达能够正向调控亚溶解型C5b-9诱导大鼠GMCs生成趋化因子CCL5。

circSMARCA5通过CCL5富集Treg细胞促进非小细胞肺癌细胞的增殖

目的:检测circSMRCA5在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和细胞中的表达,以及其在NSCLC发生发展中的潜在功能和机制。方法:用qPCR法检测circSMARCA5在NSCLC组织中的表达。使用慢病毒转染法将circSMARCA5过表达质粒和对照质粒pLC5分别转染人肺癌A549和H1975细胞。采用qPCR法检测稳定转染细胞中circSMARCA5的表达水平。通过CCK-8、克隆形成、细胞周期和异种移植瘤实验检测circSMARCA5过表达对A549和H1975细胞生物学行为的影响。通过转录组测序、KEGG和GO富集分析,确定circSMARCA5可能的靶基因。分别构建circSMARCA5过表达A549、Lewis细胞BABL/c裸鼠和免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤模型,观察circSMARCA5对裸鼠皮下移植瘤生长的影响,流式细胞术检测对Lewis细胞移植瘤组织中Treg细胞水平的影响。结果:circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达(P<0.01)。过表达circSMARCA5可以在体外促进NSCLC细胞的增殖(P<0.05,P<0.01)。体内实验中,circSMARCA5可以促进裸鼠皮下移植瘤的生长(P<0.01)。机制上,经KEGG和GO富集分析,确定C-C趋化因子配体5(CCL5)为circSMARCA5的下游靶基因。过表达circSMARCA5组A549和H1975细胞中CCL5的表达量增加(均P<0.05)。circSMARCA5介导的CCL5上调促进了免疫正常的C57小鼠皮下移植瘤的生长。C57小鼠皮下移植瘤制备成的单细胞悬液行流式细胞术检测显示,circSMARCA5过表达组的Treg细胞比例高于对照组[(3.1±0.5)%vs(1.0±0.1)%,P<0.05]。结论:circSMARCA5在NSCLC组织中呈高表达,其可能通过CCL5将Treg细胞招募到肿瘤中,导致肿瘤的免疫逃逸,促进NSCLC的进展。

G蛋白偶联受体75去孤儿化研究及在疾病中的作用

G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs)是已知人类基因组中最大的一类膜蛋白受体家族,包括A类视紫红质样受体、B类分泌素受体、C类代谢型谷氨酸受体、D类真菌交配信息素受体、E类环腺苷酸受体及F类卷曲受体(Frizzled/Smoothened家族)[1-2]。其中A类视紫红质样受体包含了GPCRs中大部分种类,共含有19个子类(A1~A19)719种.

C-C趋化因子配体5对代谢相关脂肪性肝纤维化的诊断价值

目的探究血清C-C趋化因子配体5(CCL5)评估代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)患者肝纤维化程度的诊断价值。方法诊断性试验。选择2021年10月至2023年6月就诊于河北医科大学第三医院中西医结合肝病科行肝穿刺活组织病理学检查的MAFLD患者71例,同期该院体检中心71例健康体检者为对照组,采用酶联免疫吸附法检测血清CCL5水平;常规检测血常规及肝肾功能等,分析CCL5的表达水平及其与上述指标的相关性,计算天冬氨酸转氨酶/血小板比值指数(APRI)、基于4因子的纤维化指数(FIB-4)。采用SPSS 26.0软件进行统计学分析,应用受试者操作特征曲线下面积(AUC)评估CCL5对MAFLD纤维化程度的诊断效能,并进一步分析其与APRI及FIB-4联合诊断MAFLD纤维化程度的效能。结果在MAFLD患者中,血清CCL5的表达水平随着肝纤维化分期的升高,其水平逐渐升高,且差异有统计学意义(P<0.05)。血清CCL5诊断MAFLD患者显著肝纤维化的AUC值为0.775,敏感度为65.7%,特异度为80.6%,最佳截断值为49.845 ng/ml;CCL5与FIB-4联合应用时,对MAFLD患者显著肝纤维化的诊断价值最高,AUC为0.802,敏感度为91.4%,特异度为61.1%。结论CCL5对MAFLD患者显著肝纤维化有较高的诊断价值,有望成为评估MAFLD患者肝纤维化程度的无创诊断标志物。

不同程度活动期溃疡性结肠炎患者血清IFABP、MUC1、CCL11水平变化及对预后的影响

目的探讨不同程度活动期溃疡性结肠炎(UC)患者血清肠型脂肪酸结合蛋白(IFABP)、黏蛋白1(MUC1)、C-C基序趋化因子配体11(CCL11)水平变化及对预后的影响。方法选择2018年6月至2020年1月陕西省西安市高陵区医院收治的活动期UC患者80例作为UC组,根据病情严重程度将UC患者分为轻度组(36例)、中度组(28例)和重度组(16例),根据患者随访2年预后情况分为预后不良组(29例)和预后良好组(51例);另选择同期在陕西省西安市高陵区医院健康体检者60例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测各组研究对象血清IFABP、MUC1、CCL11水平,分析活动期UC患者预后不良的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IFABP、MUC1、CCL11水平对活动期UC患者预后不良的预测价值。结果UC组患者血清IFABP、MUC1、CCL11水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组患者血清IFABP、MUC1、CCL11水平依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。80例活动期UC患者预后不良发生率为36.25%(29/80)。病情为重度、IFABP≥161.43 pg/mL、MUC1≥17.62 U/mL、CCL11≥161.13 pg/mL为活动期UC患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。血清IFABP、MUC1、CCL11水平联合检测预测活动期UC患者预后不良的ROC曲线下面积大于各项指标单独检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论活动期UC患者血清IFABP、MUC1、CCL11水平升高与病情加重和预后不良有关,可作为活动期UC患者预后辅助预测指标。

利用转录组测序生物信息学初步探讨热射病预后关键基因

目的分析热射病患者外周血单个核细胞转录组测序生物信息学结果,寻找影响热射病预后的关键基因。方法选取2019-06-01~2020-08-30空军军医大学附属西京医院急诊科收治的热射病患者,按照预后分为生存组和死亡组。随机数字法在两组中分别选取患者进行外周血单个核细胞转录组测序,生物信息学分析寻找差异基因;RT-PCR验证筛选出的差异基因在生存组和死亡组中的表达。结果29例诊断为热射病患者入选,按照预后分为生存组和死亡组,其中生存组18例,死亡组11例。随机数字法选取6例生存患者和4例死亡患者,外周血单个核细胞进行转录组测序,两组患者有693个基因表达有明显差异,通过生物信息学分析筛选出趋化因子(C-C基元)配体5(CCL5)、基质金属蛋白酶8(MMP8)、MMP9基因可能与预后相关。将两组外周血单个核细胞的目标基因表达情况通过RT-PCR法表达检测,与生存组比较,死亡组MMP8基因(P=0.8955)和MMP9基因(P=0.0597)表达无明显变化,CCL5基因表达明显上升(t=7.056,P<0.05)。结论CCL5基因可能是影响热射病预后的关键基因,需要进一步深入研究。

骨搬移手术治疗胫骨慢性骨髓炎的临床研究

目的探究骨搬移手术对胫骨慢性骨髓炎患者患肢功能及血清C-C型趋化因子配体11(CCL11)、C-反应蛋白(CRP)水平的影响。方法选择2017年5月至2020年1月阳江市第三人民医院收治的42例胫骨慢性骨髓炎患者,按照随机数字表法分为对照组(21例)和研究组(21例)。对照组患者采用病灶清除术联合负压引流术治疗,研究组患者在对照组治疗的基础上于治疗后3周实施骨搬移手术,两组患者均于术后随访1年。比较两组患者术前、术后1年患肢功能,术前、术后30 d血清学指标,术前、术后1年生活质量评分,以及术后并发症发生情况。结果术后1年患者两组患者疼痛、膝关节活动度、膝关节肿胀、肌力、日常生活、生理、社会、心理、满意度评分均较术前上升,且研究组高于对照组,疾病评分均较术前下降,且研究组低于对照组;术后30 d两组患者血清CCL11,CRP水平均较术前下降,且研究组低于对照组;研究组患者并发症总发生率较对照组下降(均P<0.05)。结论骨搬移手术应用于胫骨慢性骨髓炎中效果显著,可通过降低血清CCL11,CRP水平,改善患者患肢功能,提升其生活质量,且术后并发症少,预后较好。

急性期肺炎支原体肺炎患儿血清miR-146和CCL5的表达水平及临床意义

目的检测急性期肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清miR-146和趋化因子(C-C基元)配体5(CCL5)表达水平,分析其临床意义。方法选取2018年7月—2019年7月绍兴第二医院医共体总院收治的120例MPP患儿为研究组,其中59例急性期患儿采用临床肺部感染评分(CPIS)对病情严重程度进行评估,CPIS>6分者为重症组(22例),CPIS≤6分者为轻症组(37例)。选取同期健康体检的53例儿童为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清miR-146相对表达量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患儿血清CCL5、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达水平,采用Pearson法分析急性期MMP患儿血清miR-146、CCL5水平与IL-6、IL-10、IL-1β水平及CPIS评分的相关性。结果对照组血清miR-146、CCL5、IL-6、IL-10及IL-1β水平分别为(0.58±0.19)、(1.95±0.67)ng/L、(12.09±4.98)ng/L、(13.26±1.52)ng/L及(12.27±2.03)ng/L,恢复期组血清miR-146、CCL5、IL-6、IL-10及IL-1β水平分别为(1.41±0.37)、(2.98±0.73)ng/L、(32.63±5.12)ng/L、(11.35±1.45)ng/L及(14.06±2.14)ng/L,急性期组血清miR-146、CCL5、IL-6、IL-10及IL-1β水平分别为(2.53±0.51)、(4.63±0.82)ng/L、(72.18±5.62)ng/L、(9.67±1.47)ng/L及(17.89±2.09)ng/L,3组比较差异均有统计学意义(F=363.608,185.911,1913.721,82.306,107.157,均P<0.05)。轻症组MMP患儿血清miR-146、CCL5水平分别为(1.94±0.59)和(3.24±0.46)ng/L,重症组MMP患儿血清miR-146、CCL5水平分别为(4.17±0.94)和(5.99±0.87)ng/L,差异均有统计学意义(t=12.431,15.904,均P<0.05)。与轻症组比较,重症组MMP患儿血清IL-6及IL-1β水平均显著升高,IL-10水平显著降低(均P<0.05)。急性期MMP患儿血清miR-146水平与IL-6、IL-1β水平均呈正相关(r=0.383,0.437,均P<0.05),与IL-10水平呈负相关(r=-0.496,P<0.05);急性期MMP患儿血清CCL5水平与IL-6、IL-1β水平均呈正相关(r=0.419,0.425,均P<0.05),与IL-10水平呈负相关(r=-0.514,P<0.05)。急性期MMP患儿血清CCL5、miR-146水平与CPIS评分均呈正相关(r=0.503,0.563,均P<0.05)。结论miR-146和CCL5在MPP患儿血清中表达均上调,与急性期患儿炎症反应程度及病变严重程度有关,有望成为评估MPP严重程度的血清指标。