乌头碱调节C-C基序趋化因子配体2/C-C基序趋化因子受体2信号通路对膀胱癌细胞抗肿瘤活性及其作用机制研究

目的 探讨乌头碱调节C-C基序趋化因子配体2(CCL2)/C-C基序趋化因子受体2(CCR2)信号通路对膀胱癌细胞抗肿瘤活性及其作用机制研究。方法 研究起止时间为2021年12月至2022年10月。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测2.5、5.0、10.0、20.0、30.0μmol/L乌头碱处理后的人膀胱癌5637细胞存活率,筛选出合适的乌头碱作用浓度。将5637细胞分为对照组、乌头碱低剂量(10μmol/L)组、乌头碱高剂量(20μmol/L)组、乌头碱高剂量(20μmol/L)+空载组、乌头碱高剂量(20μmol/L)+CCL2过表达组,分组处理后,采用CCK-8法、5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(Edu)染色法及Hoechst 33258染色分别检测各组5637细胞存活率、增殖率、凋亡率;采用Transwell实验及划痕实验分别检测各组5637细胞侵袭数、迁移率;采用免疫荧光染色检测各组5637细胞凋亡相关蛋白BCL2相关X蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达比值(Bax/Bcl-2);采用免疫印迹法检测各组5637细胞CCL2/CCR2信号通路相关蛋白及上皮间质转化标志蛋白[神经钙黏素(N-cadherin)、锌指E盒结合同源盒1(ZEB1)、紧密连接蛋白1(ZO-1)、上皮钙黏素(E-cadherin)]表达。结果 与对照组相比,乌头碱低剂量组、乌头碱高剂量组、乌头碱高剂量+空载组细胞CCL2(0.69±0.09、0.20±0.03、0.19±0.04比1.21±0.13),CCR2(0.78±0.12、0.26±0.06、0.27±0.07比1.33±0.20)、Ncadherin(0.65±0.06、0.12±0.02、0.11±0.03比1.24±0.12)与ZEB1蛋白表达、存活率、增殖率、侵袭数、迁移率均降低(P<0.05),Bax/Bcl-2、细胞ZO-1与E-cadherin蛋白表达均升高(P<0.05);乌头碱高剂量组、乌头碱高剂量+空载组细胞CCL2、CCR2、N-cadherin与ZEB1蛋白表达、存活率、增殖率、侵袭数、迁移率相比乌头碱低剂量组进一步降低(P<0.05),Bax/Bcl-2、细胞ZO-1与Ecadherin蛋白表达进一步升高(P<0.05)。与乌头碱高剂量组相比,乌头碱高剂量+CCL2过表达组细胞CCL2、CCR2、N-cadherin与ZEB1蛋白表达、存活率、增殖率、侵袭数、迁移率升高(P<0.05),Bax/Bcl-2、细胞ZO-1与E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。结论 乌头碱可通过CCL2/CCR2信号通路而抑制膀胱癌细胞存活、增殖及侵袭和迁移,促使其凋亡。

C-C基序趋化因子样受体2、胰岛素样生长因子2在前列腺癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系

目的探讨C-C基序趋化因子样受体2(CCRL2)、胰岛素样生长因子2(IGF2)在前列腺癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法选取101例前列腺癌患者,取其前列腺癌组织及距肿瘤组织3 cm处的癌旁组织,采用免疫组化法检测CCRL2、IGF2的表达情况,并分析不同临床特征前列腺癌患者CCRL2、IGF2的表达情况,前列腺癌患者预后复发的影响因素采用Logistic回归分析。结果前列腺癌组织中CCRL2、IGF2的阳性表达率均明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。分化程度为低分化、临床分期为C~D期、远处转移前列腺癌患者前列腺癌组织中CCRL2、IGF2阳性表达率均高于分化程度为中高分化、临床分期为A~B期、无远处转移患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素Logistic回归模型分析结果显示,分化程度为低分化、临床分期为C~D期、远处转移、CCRL2阳性表达和IGF2阳性表达均为前列腺癌患者预后复发的独立危险因素(P﹤0.01)。结论CCRL2、IGF2在前列腺癌组织中阳性表达率较高,且分化程度为低分化、临床分期为C~D期、远处转移、CCRL2阳性表达和IGF2阳性表达均为前列腺癌患者预后复发的独立危险因素。

COPD患者痰液中性粒细胞氧化吞噬功能及相关受体变化的临床意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中性粒细胞氧化吞噬功能及相关受体[趋化因子C-C基序受体-1(CCR1)和Toll样受体(TLR)2、TLR4]变化的临床意义。方法建立用于检测COPD患者痰液中性粒细胞氧化吞噬功能及相关受体的流式细胞术方法。采用流式细胞术检测30例COPD患者(COPD组)、30例肺炎患者(肺炎组)和30名体检健康者(正常对照组)外周血及痰液(正常对照组除外)中性粒细胞氧化吞噬功能及其表面CCR1、TLR2和TLR4的表达水平。结果肺炎组和COPD组外周血中性粒细胞氧化吞噬功能均显著低于正常对照组(P<0.05),肺炎组与COPD组之间差异无统计学意义(P>0.05)。COPD组、肺炎组及正常对照组之间外周血中性粒细胞表面CCR1表达差异均有统计学意义(P<0.05),而TLR2、TLR4表达3组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。COPD组痰液中性粒细胞氧化吞噬功能显著低于肺炎组(P<0.05),CCR1表达显著高于肺炎组(P<0.05),TLR2和TLR4表达2个组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析结果显示,COPD组痰液中性粒细胞氧化吞噬阳性率与CCR1表达呈负相关(r=-0.548,P<0.01),与TLR2、TLR4表达均无相关性(r值分别为-0.206、-0.219,P>0.05)。结论COPD患者痰液中性粒细胞氧化吞噬功能显著下降,其表面CCR1表达升高。COPD患者气道中性粒细胞的氧化吞噬功能受损可能是COPD发病的机制之一。

血清CCL5、P2X7R水平与大血管闭塞性急性缺血性脑卒中并发恶性脑水肿的关系

目的探讨血清C-C基序趋化因子配体5(CCL5)、嘌呤能2X7受体(P2X7R)水平与大血管闭塞性急性缺血性脑卒中(AIS-LVO)并发恶性脑水肿(MBE)的关系。方法选择AIS-LVO患者162例(观察组),接受静脉溶栓联合机械取栓治疗后72 h并发MBE 43例、未并发MBE 119例,同期另选体检健康的志愿者60例作为对照组。采集所有研究对象外周静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清CCL5、P2X7R。采用多因素Logistic回归模型分析AIS-LVO并发MBE的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CCL5、P2X7R水平对AIS-LVO并发MBE的预测价值。结果观察组血清CCL5、P2X7R水平均高于对照组(P均<0.05)。单因素分析发现,AIS-LVO患者并发MBE者NIHSS评分、ASPECTS评分及血清CCL5、P2X7R水平均高于其未并发MBE者(P均<0.05);多因素Logistic回归分析发现,NIHSS评分增加及血清CCL5、P2X7R水平升高为AIS-LVO并发MBE的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析发现,血清CCL5、P2X7R水平单独和联合预测AIS-LVO并发MBE的曲线下面积(AUC)分别为0.780、0.790、0.880,血清CCL5、P2X7R水平联合预测AIS-LVO并发MBE的AUC大于二者单独(P均<0.05)。结论血清CCL5、P2X7R水平升高是AIS-LVO并发MBE的独立危险因素;血清CCL5、P2X7R水平对AIS-LVO并发MBE均有一定预测价值,二者联合预测价值更高。

G蛋白偶联受体75去孤儿化研究及在疾病中的作用

G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs)是已知人类基因组中最大的一类膜蛋白受体家族,包括A类视紫红质样受体、B类分泌素受体、C类代谢型谷氨酸受体、D类真菌交配信息素受体、E类环腺苷酸受体及F类卷曲受体(Frizzled/Smoothened家族)[1-2]。其中A类视紫红质样受体包含了GPCRs中大部分种类,共含有19个子类(A1~A19)719种.

CCR8在肿瘤免疫抑制微环境中研究与应用进展

C-C基序趋化因子受体8(C-C motif chemokine receptor 8,CCR8)是一种调控免疫细胞趋化迁移的7次跨膜蛋白,在肿瘤微环境中高表达于Treg表面。由于CCR8^(+)Treg能强烈抑制肿瘤免疫,因此CCR8是一种扭转抑制型肿瘤微环境的理想靶点。目前有多种在研的靶向CCR8抗体药物,可在多种肿瘤模型中特异性清除肿瘤浸润CCR8^(+)Treg、扭转免疫抑制,展现出良好的抗肿瘤活性。此文对CCR8^(+)Treg促进肿瘤进展的基础研究和靶向药物应用进行综述,以期为该靶点肿瘤免疫治疗研究提供参考。

微创针刀镜联合DMARDs治疗难治性类风湿关节炎患者的临床效果及对关节液CCL19、 CXCL12、RANKL水平的影响

目的 探讨微创针刀镜联合改善病情抗风湿药物(DMARDs)治疗对难治性类风湿关节炎(RRA)患者的临床效果,以及对患者膝关节关节液C-C基序趋化因子配体19(CCL19)、C-X-C基序趋化因子配体12(CXCL12)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平的影响。方法 将60例RRA患者随机分为对照组(n=30)和观察组(n=30)。对照组接受DMARDs治疗,观察组在DMARDs治疗的基础上接受微创针刀镜治疗。比较两组治疗后的疗效,治疗前后的红细胞沉降率(ESR)、血清C反应蛋白(CRP)水平、Lysholm膝关节功能评定量表评分、疼痛视觉模拟量表(VAS)评分,以及膝关节关节液中CCL19、CXCL12和RANKL水平。结果 观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组的ESR、血清CRP水平、疼痛VAS评分及膝关节关节液CCL19、CXCL12、RANKL水平较治疗前降低,Lysholm膝关节功能评定量表评分较治疗前升高,且观察组的上述指标优于对照组(P<0.05)。结论 微创针刀镜联合DMARDs治疗RRA的临床效果优于单纯DMARDs治疗,可明显缓解患者的临床症状、疾病活动度、炎症反应,这可能与其能够更有效地降低膝关节关节液中的CCL19、CXCL12、RANKL水平有关。

糖尿病患者口腔种植体周围龈沟液中CCL2、CCL4和CXCL8表达及意义

目的探讨糖尿病患者口腔种植体周围龈沟液中趋化因子(C-C基序)配体2(CCL2)、趋化因子(C-C基序)配体4(CCL4)和趋化因子(C-X-C基序)配体8(CXCL8)的表达及其对糖尿病患者种植体的影响。方法选取接受口腔种植体修复手术的糖尿病患者48例(48枚种植体),根据是否发生炎症分为糖尿病健康种植体27枚(A)组和糖尿病炎症种植体21枚(B)组,另纳入健康者健康种植体30枚作为对照(C)组。采用ELISA检测龈沟液中CCL2、CCL4和CXCL8表达,分析B组相关指标之间的相关性和影响糖尿病患者种植体炎症发生的危险因素。结果A组探诊深度、出血指数、CCL2、CCL4和CXCL8表达水平均与C组相仿(P>0.05);但B组上述指标均高于C组(P<0.05)。B组龈沟液中CCL2与CXCL8水平、出血指数均呈正相关(P<0.05),CCL4与CXCL8水平、探诊深度均呈正相关(P<0.05),CXCL8与探诊深度、出血指数均呈正相关(P<0.05)。CCL2和CXCL8高水平是影响糖尿病患者口腔种植体炎症发生的危险因素(P<0.05)。结论糖尿病患者口腔炎症种植体龈沟液中的CCL2、CCL4和CXCL8呈高表达,可能与糖尿病患者口腔种植体炎症的发生有关。

血清CCL17、CXCR4与重度子痫前期患者Th17细胞的相关性分析及对母婴结局的影响

目的:探讨血清C-C基序趋化因子配体17(CCL17)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)与重度子痫前期(SPE)患者辅助性T细胞(Th)17细胞的相关性分析及对母婴结局的影响。方法:选择2018年3月至2021年3月苏州大学附属第二医院妇产科收治的169例SPE患者(SPE组)和77例健康孕产妇(对照组)。检测血清CCL 17、CXCR4水平和外周血Th17细胞及其细胞因子。Pearson分析血清CCL 17、CXCR4水平与外周血Th17细胞及其细胞因子的关系,多因素Logistic回归分析SPE母婴结局不良的相关因素。结果:SPE组血清CCL17、CXCR4水平低于对照组(P<0.05),外周血Th17细胞占比、血清白细胞介素(IL)-17水平高于对照组(P<0.05)。血清CCL17、CXCR4水平与外周血Th17细胞占比、血清IL-17水平呈负相关(P<0.05)。母婴结局不良53例,母婴结局良好116例,母婴结局不良组血清CCL 17、CXCR4水平低于母婴结局良好组(P<0.05)。高Th17细胞占比、年龄大、低水平CCL17、CXCR4是SPE患者母婴结局不良的危险因素(P<0.05)。结论:SPE患者血清CCL17、CXCR4水平降低,且与外周血Th17细胞占比增加,血清IL-17水平增高有关,低水平CCL17、CXCR4是SPE患者母婴结局不良的危险因素。