乌头碱调节C-C基序趋化因子配体2/C-C基序趋化因子受体2信号通路对膀胱癌细胞抗肿瘤活性及其作用机制研究

目的 探讨乌头碱调节C-C基序趋化因子配体2(CCL2)/C-C基序趋化因子受体2(CCR2)信号通路对膀胱癌细胞抗肿瘤活性及其作用机制研究。方法 研究起止时间为2021年12月至2022年10月。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测2.5、5.0、10.0、20.0、30.0μmol/L乌头碱处理后的人膀胱癌5637细胞存活率,筛选出合适的乌头碱作用浓度。将5637细胞分为对照组、乌头碱低剂量(10μmol/L)组、乌头碱高剂量(20μmol/L)组、乌头碱高剂量(20μmol/L)+空载组、乌头碱高剂量(20μmol/L)+CCL2过表达组,分组处理后,采用CCK-8法、5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(Edu)染色法及Hoechst 33258染色分别检测各组5637细胞存活率、增殖率、凋亡率;采用Transwell实验及划痕实验分别检测各组5637细胞侵袭数、迁移率;采用免疫荧光染色检测各组5637细胞凋亡相关蛋白BCL2相关X蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达比值(Bax/Bcl-2);采用免疫印迹法检测各组5637细胞CCL2/CCR2信号通路相关蛋白及上皮间质转化标志蛋白[神经钙黏素(N-cadherin)、锌指E盒结合同源盒1(ZEB1)、紧密连接蛋白1(ZO-1)、上皮钙黏素(E-cadherin)]表达。结果 与对照组相比,乌头碱低剂量组、乌头碱高剂量组、乌头碱高剂量+空载组细胞CCL2(0.69±0.09、0.20±0.03、0.19±0.04比1.21±0.13),CCR2(0.78±0.12、0.26±0.06、0.27±0.07比1.33±0.20)、Ncadherin(0.65±0.06、0.12±0.02、0.11±0.03比1.24±0.12)与ZEB1蛋白表达、存活率、增殖率、侵袭数、迁移率均降低(P<0.05),Bax/Bcl-2、细胞ZO-1与E-cadherin蛋白表达均升高(P<0.05);乌头碱高剂量组、乌头碱高剂量+空载组细胞CCL2、CCR2、N-cadherin与ZEB1蛋白表达、存活率、增殖率、侵袭数、迁移率相比乌头碱低剂量组进一步降低(P<0.05),Bax/Bcl-2、细胞ZO-1与Ecadherin蛋白表达进一步升高(P<0.05)。与乌头碱高剂量组相比,乌头碱高剂量+CCL2过表达组细胞CCL2、CCR2、N-cadherin与ZEB1蛋白表达、存活率、增殖率、侵袭数、迁移率升高(P<0.05),Bax/Bcl-2、细胞ZO-1与E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05)。结论 乌头碱可通过CCL2/CCR2信号通路而抑制膀胱癌细胞存活、增殖及侵袭和迁移,促使其凋亡。

C-C基序趋化因子配体14的研究进展

C-C基序趋化因子配体14(CCL14)是一类趋化细胞定向移动的小分子蛋白质,可能参与多种疾病(包括肿瘤、免疫相关疾病、脓毒症、急性肾损伤)的发生发展。本文对近几年CCL14的研究进展进行了综述。

以C-C基序趋化因子配体2(CCL2)为受体挖掘治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)潜在中药单体化合物

目的:C-C基序趋化因子配体2(CCL2)为受体探索治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的中药单体化合物及作用机制。方法:以“C-C motif chemokine 2”为检索词在中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索作用于CCL2受体的中药单体化合物,并收集其作用靶点。在GeneCards及OMIM数据库中以“fever”“cough”“pneumonia”“coronavirus”为检索词收集相应靶点,并添加“木瓜样蛋白酶(PLP)”“树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子(DC-SIGN)”,合并作为COVID-19相关靶点。UniProt数据库标化靶点基因名,取中药单体化合物靶点与疾病靶点的交集。运行Cytoscape软件构建中药单体化合物-交集靶点网络,用交集靶点通过STRING数据库及Cytoscape软件构建蛋白互作(PPI)网络;借DAVID数据库进行GO功能富集、KEGG通路富集,而预测中药单体化合物治疗COVID-19的作用机制。然后将所有中药单体化合物与CCL2、新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶和血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)进行分子对接。结果:中药单体成分-靶点网络中包含单体成分2个,交集靶点153个,PPI网络分析显示关键靶点涉及AKT1、IL6、VEGFA等。GO功能富集所得GO条目115个,其中涉及CCL2条目有10个,KEGG通路富集所得信号通路97条,其中涉及CCL2有9条。分子对接结果显示槲皮素、汉黄芩素与CCL2、SARS-CoV-23CL水解酶和ACE2的亲和力与推荐化药相近。结论:槲皮素、汉黄芩素可与CCL2结合作用于肿瘤坏死因子信号通路、查加斯病(美国锥虫病)、甲型流感信号通路,从而可能发挥抗COVID-19的作用。

C-X3-C基序趋化因子配体1/C-X3-C基序趋化因子受体1通路参与失血性休克/复苏大鼠记忆功能恢复

目的探讨C-X3-C基序趋化因子配体1(CX3CL1)/C-X3-C基序趋化因子受体1(CX3CR1)通路调控的小胶质细胞活化对失血性休克/复苏大鼠记忆功能的影响。方法实验分为2部分。第1部分,将大鼠随机分为假手术组,模型-0.5 h组,模型-1.5 h组,模型-3 h组,每组10只,模型组之间失血性休克时间存在差异。第2部分,大鼠随机分为对照组与CX3CL1组,每组10只。CX3CL1组大鼠脑室注射CX3CL1蛋白,对照组大鼠注射生理盐水。所有大鼠在模型制作前开展Morris水迷宫训练,模型制作后4 d,开展水迷宫测试。完成后,取全脑组织进行HE染色与免疫组织化学染色,取脑脊液检测炎性细胞因子含量,取脑组织进行Real-time PCR检测与Western blotting检测。结果与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期增加,穿越平台次数与第Ⅲ象限停留时间减少,且HE染色中显示神经元状态受损。此外,与假手术组相比,模型组大鼠脑组织中离子钙结合衔接分子1(Iba1)表达升高,脑脊液中肿瘤细胞坏死因子α(TNF-α)与白细胞介素(IL)-6含量升高,M1型小胶质细胞标记CD16、TNF-α、IL-1β与诱导性一氧化氮合酶(iNOS)mRNA含量升高。与此同时,与假手术组相比,模型组大鼠脑组织中CX3CL1、CX3CR1蛋白表达降低,磷酸化核因子κB(p-NF-κB)与核苷酸结合寡聚结构域(NOD)样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达升高。然而,与模型组相比,CX3CL1组大鼠逃避潜伏期减少,穿越平台次数与第Ⅲ象限停留时间增加,且神经元状态恢复。此外,与对照组相比,CX3CL1组大鼠脑组织中Iba1表达降低,脑脊液中TNF-α与IL-6含量降低,M1型小胶质细胞标记CD16、TNF-α、IL-1β与iNOS mRNA含量降低,M2型小胶质细胞标记CD206、转化生长因子β(TGF-β)、精氨酸酶1(Arg1)、几丁质酶3样蛋白1(Ym1)mRNA含量升高。结论CX3CL1有助于抑制小胶质细胞过度激活,诱导小胶质细胞向M2型极化,抑制M1型极化,降低炎性细胞因子释放,减轻失血性休克/复苏诱发的记忆功能损伤。

血清CX3C基序趋化因子配体1及Ⅰ型纤溶酶原激活抑制物水平与慢性阻塞性肺疾病合并Ⅱ型呼吸衰竭患者病情严重程度及预后的关系研究

目的 研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并Ⅱ型呼吸衰竭患者血清CX3C基序趋化因子配体1(CX3CL1)、Ⅰ型纤溶酶原激活抑制物(PAI-1)水平与病情严重程度及预后的关系。方法 选取2019年1月至2021年1月重庆医科大学附属永川医院收治的COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者96例为研究对象(呼吸衰竭组)、同期诊治的单纯COPD患者60例为单纯COPD组、同期健康体检的健康人群60例为健康对照组。检测受试者血清CX3CL1、PAI-1水平。比较不同健康状况受试者、不同病情严重程度呼吸衰竭组患者血清CX3CL1、PAI-1水平差异。分析影响COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者不良预后的因素以及血清CX3CL1、PAI-1对不良预后的预测价值。结果 呼吸衰竭组、单纯COPD组CX3CL1、PAI-1水平均高于健康对照组[(266±29)、(219±35)ng/L比(156±23)ng/L,(15.2±2.3)、(12.3±2.2)μg/L比(8.2±1.8)μg/L],且呼吸衰竭组高于单纯COPD组(均P<0.05)。呼吸衰竭组中轻度组、中度组、重度组血清CX3CL1、PAI-1水平随疾病严重程度加重呈上升趋势(均P<0.05)。COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者血清CX3CL1、PAI-1水平与第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC比值)呈负相关(均P<0.001)。呼吸衰竭组中预后不良组血清CX3CL1、PAI-1水平均高于预后良好组(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清CX3CL1、PAI-1升高是COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者不良预后的独立危险因素(均P<0.001)。血清CX3CL1、PAI-1联合检测对COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者不良预后预测的曲线下面积大于CX3CL1、PAI-1单独诊断(均P<0.001)。结论 COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者血清CX3CL1、PAI-1水平升高,二者与病情严重程度有关,联合检测有助于评估COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭患者的临床预后。

老年2型糖尿病周围神经病变与血清趋化因子调节激活正常T细胞表达和分泌因子、C-X-C基序趋化因子配体12、C-C基序趋化因子配体2水平的相关性

目的探讨老年2型糖尿病(T2DM)周围神经病变(DPN)与血清趋化因子调节激活正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)、C-X-C基序趋化因子配体12(CXCL12)、C-C基序趋化因子配体2(CCL2)的关系。方法选取2019年3月~2021年10月河北省邯郸市人民医院确诊的老年T2DM患者181例,根据是否并发DPN将其分为单纯T2DM组(89例)和DPN组(92例)。收集所有患者一般临床资料、实验室检查指标、血清趋化因子RANTES、CXCL12、CCL2水平及感觉神经传导速度和运动神经传导速度并分组进行比较。采用Pearson相关分析评估DPN患者血清趋化因子RANTES、CXCL12、CCL2水平与一般临床指标及神经传导速度的相关性;采用多因素logistic回归分析评估DPN发病的影响因素。结果DPN组血清趋化因子RANTES、CXCL12、CCL2、糖化血红蛋白(HbA1c)、总胆固醇(TC)水平及T2DM病程、高血压病、高脂血症、视网膜病变患者比例均显著高于单纯T2DM组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、感觉神经传导速度、运动神经传导速度均显著低于单纯T2DM组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,DPN患者血清趋化因子RANTES、CXCL12、CCL2水平与T2DM病程、高血压病、高脂血症、视网膜病变、HbA1c、TC均呈正相关,与HDL-C、感觉神经传导速度、运动神经传导速度均呈负相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,RANTES、CXCL12、CCL2水平高、T2DM病程长是T2DM患者并发DPN的独立危险因素(P<0.05)。结论DPN患者血清趋化因子RANTES、CXCL12、CCL2水平升高,且与神经传导速度呈负相关。

血清白三烯C4、D4及C-C趋化因子配体21水平与腺样体肥大患儿腺样体肥大程度及预后的相关性

目的:探讨血清白三烯C4(LTC4)、D4(LTC4)及C-C趋化因子配体21(CCL21)水平与腺样体肥大患儿腺样体肥大程度及预后的相关性。方法:选取82例腺样体肥大患儿为研究对象,根据腺体样肥大程度将患儿分为中度组(n=48)和重度组(n=34),根据不同预后分为非增生组(预后良好,n=65)和再增生组(预后不良,n=17)。比较各组患儿血清LTC4、LTC4、CCL21水平;采用受试者特征工作曲线(ROC曲线)评估上述指标对腺样体肥大患儿预后不良的预测价值。结果:重度组患儿血清LTC4、LTD4、CCL21水平高于中度组(P<0.05);再增生组患儿血清LTC4、LTD4、CCL21水平均高于非增生组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,当LTC4≥346.68 ng/L时,预测腺样体肥大患儿预后不良的曲线下面积(AUC)为0.789,敏感度为0.706,特异度为0.738;当LTD4≥270.19 ng/L时,预测腺样体肥大患儿预后不良的AUC为0.665,敏感度为0.765,特异度为0.600;当CCL21≥144.57 ng/mL时,预测腺样体肥大患儿预后不良的AUC为0.738,敏感度为0.706,特异度为0.692;三者联合预测的AUC为0.853,敏感度为0.882,特异度为0.769。结论:血清LTC4、LTD4及CCL21水平与腺样体肥大患儿腺样体肥大程度及预后密切相关,可将三者联合检测用于腺样体肥大患儿预后不良的辅助预测。

C-C趋化因子配体5通过诱导帕金森病模型小鼠外周Th17细胞比例增加、Treg细胞比例减少及促进Th17细胞表达淋巴细胞功能相关抗原1而加重神经炎症的研究

目的探讨帕金森病(PD)中C-C趋化因子配体5(CCL5)对外周CD4^(+)T细胞激活与分化的影响,以及CCL5对Th17细胞与Treg细胞向黑质(SN)迁移介导神经免疫炎症的影响。方法C57B6/J小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)构建PD动物模型,并进行CCL5腹腔注射干预。利用转棒实验和爬杆实验检测小鼠行为能力,利用流式细胞染色检测小鼠外周CD4^(+)T细胞比例及相关表型,利用Western blotting法检测小鼠SN中酪氨酸羟化酶(TH)和α-突触核蛋白的表达,利用免疫荧光染色检测小鼠SN中多巴胺能(DA)神经元数量和Th17/Treg细胞的浸润数量。结果MPTP小鼠与对照组小鼠相比运动功能显著降低,而干预CCL5进一步加重MPTP小鼠的运动功能障碍。MPTP小鼠较对照组小鼠表现为外周Th17细胞比例增加而Treg细胞比例减少;而CCL5干预不仅诱导MPTP小鼠外周Th17细胞比例进一步增加和Treg细胞比例进一步减少,还能够增加淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)在Th17细胞上的表达但不影响其在Treg细胞中的表达。在中枢,MPTP小鼠SN中DA神经元数量减少、Th17细胞浸润数量增加而Treg细胞浸润数量减少;MPTP小鼠经CCL5干预后,SN中DA神经元数量进一步减少、Th17细胞浸润数量显著增加和Treg细胞浸润数量显著减少。结论CCL5能够诱导MPTP小鼠外周Th17细胞比例增加和Treg细胞比例减少以及诱导Th17细胞表达LFA-1,导致MPTP小鼠SN中Th17细胞数量增加而Treg细胞数量减少,从而加重中枢神经炎症和DA神经元损伤。

阿尔茨海默病患者血清C-X-C基序趋化因子配体12和几丁质酶3样蛋白1的表达水平及其临床意义

目的分析阿尔茨海默病(AD)患者血清C-X-C基序趋化因子配体12(CXCL12)、几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)的表达水平及其临床意义。方法选择113例AD患者作为AD组,60例血管性痴呆(VD)患者作为VD组,60例健康体检者作为对照组,根据简易精神状态检查(MMSE)量表评分结果将AD组患者分为轻度组(n=27)、中度组(n=51)、重度组(n=35)。比较AD组、VD组、对照组之间及不同病情严重程度的AD患者之间的血清CXCL12、CHI3L1表达水平。采用Pearson检验分析AD患者血清CXCL12、CHI3L1表达水平与MMSE量表评分的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CXCL12、CHI3L1表达水平对AD的诊断效能。结果与对照组相比,AD组和VD组的血清CXCL12表达水平降低,血清CHI3L1表达水平升高,且AD组的血清CXCL12表达水平低于VD组,血清CHI3L1表达水平高于VD组(P<0.05);不同病情严重程度AD患者血清CXCL12、CHI3L1表达水平差异有统计学意义,其中血清CXCL12表达水平为重度组<中度组<轻度组,血清CHI3L1表达水平为重度组>中度组>轻度组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,AD患者血清CXCL12表达水平与MMSE量表评分呈正相关,血清CHI3L1表达水平与MMSE量表评分呈负相关,血清CXCL12表达水平与血清CHI3L1表达水平呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清CXCL12、CHI3L1表达水平单独及联合诊断AD的曲线下面积分别为0.862、0.831、0.915,二者联合诊断的效能优于单独诊断(P<0.05),且血清CXCL12和CHI3L1表达水平的最佳截断值分别为2.03 ng/mL和211.08 ng/mL。结论AD患者血清中CXCL12表达下调、CHI3L1表达上调,二者表达异常与AD病情严重程度密切相关。二者或可作为辅助诊断AD及判断其病情严重性的生物学标志物。

针刺对慢性偏头痛大鼠趋化因子C-C配体2和C-X-C基序配体1的影响研究

目的:观察针刺对慢性偏头痛大鼠(CM)的足底机械痛阈、三叉神经脊束核尾侧亚核(Sp5C)中趋化因子C-C配体2(CCL2)、C-X-C基序配体1(CXCL1)水平的影响,为临床运用针灸治疗偏头痛提供一定依据。方法:将28只大鼠随机分为对照组、模型组、针刺组、非经非穴组,每组7只。采用隔日颈背部皮下重复注射硝酸甘油(NTG)建立慢性偏头痛大鼠模型。每日对针刺组和非经非穴组进行针刺治疗,20 min/次。采用Von Frey仪器测定大鼠足底机械痛阈,采用酶联免疫吸附测定法检测各组Sp5C中CCL2、CXCL1的水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠足底机械痛阈明显降低(P<0.01);与模型组比较,针刺组大鼠足底机械痛阈明显升高(P<0.01)。与对照组比较,模型组的Sp5C中CCL2、CXCL1的水平升高(P<0.01);针刺组较模型组CCL2、CXCL1的水平降低(P<0.01)。结论:针刺可以通过下调CCL2、CXCL1趋化因子的表达,从而减轻偏头痛的疼痛程度,发挥对偏头痛的治疗作用。

急性脑梗死患者血清趋化因子CXCL12、RANTES、MIP-1α的动态表达及与神经功能缺损程度和预后的相关性分析

目的:探究急性脑梗死(ACI)患者CXC基序趋化因子配体12(CXCL12)、调节激活正常T细胞表达和分泌细胞因子(RANTES)、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)的动态表达及与神经功能缺损程度和预后的相关性。方法:选取2021年7月—2022年7月赣州市第三人民医院收治的80例ACI患者作为ACI组,另选取同期脑神经功能正常的80例志愿者作为对照组。比较ACI组与对照组、不同神经功能缺损程度及预后情况患者的CXCL12、RANTES、MIP-1α水平;分析上述血清指标与神经功能缺损程度的相关性;绘制受试者操作特征(ROC)曲线分析各血清指标对ACI患者预后不良的预测价值。结果:ACI组CXCL12、RANTES、MIP-1α水平均高于对照组(P<0.05)。重度缺损组血清CXCL12、RANTES、MIP-1α水平高于轻、中度缺损组,且中度缺损组均高于轻度缺损组(P<0.05)。预后不良组血清CXCL12、RANTES、MIP-1α水平均高于预后良好组(P<0.05)。Kendall的tau-b相关性分析显示,ACI患者血清CXCL12、RANTES、MIP-1α水平与神经功能缺损程度均呈正相关(τ=0.566、0.678、0.752,P<0.001)。ROC曲线显示,血清CXCL12、RANTES、MIP-1α水平单一及联合检测预测ACI患者预后不良的曲线下面积(AUC)均>0.8,联合检测的价值更高。结论:ACI患者血清CXCL12、RANTES、MIP-1α水平均呈高表达,且水平越高,患者的神经功能缺损越严重、预后不良风险越高。

C-C基序趋化因子样受体2、胰岛素样生长因子2在前列腺癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系

目的探讨C-C基序趋化因子样受体2(CCRL2)、胰岛素样生长因子2(IGF2)在前列腺癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法选取101例前列腺癌患者,取其前列腺癌组织及距肿瘤组织3 cm处的癌旁组织,采用免疫组化法检测CCRL2、IGF2的表达情况,并分析不同临床特征前列腺癌患者CCRL2、IGF2的表达情况,前列腺癌患者预后复发的影响因素采用Logistic回归分析。结果前列腺癌组织中CCRL2、IGF2的阳性表达率均明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。分化程度为低分化、临床分期为C~D期、远处转移前列腺癌患者前列腺癌组织中CCRL2、IGF2阳性表达率均高于分化程度为中高分化、临床分期为A~B期、无远处转移患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素Logistic回归模型分析结果显示,分化程度为低分化、临床分期为C~D期、远处转移、CCRL2阳性表达和IGF2阳性表达均为前列腺癌患者预后复发的独立危险因素(P﹤0.01)。结论CCRL2、IGF2在前列腺癌组织中阳性表达率较高,且分化程度为低分化、临床分期为C~D期、远处转移、CCRL2阳性表达和IGF2阳性表达均为前列腺癌患者预后复发的独立危险因素。

血清趋化因子(C-X-C基序)配体3在结直肠癌早期筛查和预后评估中的应用价值

目的探究血清趋化因子(C-X-C基序)配体3(CXCL3)在结直肠癌早期诊断和预后评估中的价值。方法生物信息学分析鉴定CXCL3在结直肠癌中的诊断效能。采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测200例结直肠癌患者和200名健康人群血清CXCL3浓度。同时,构建测试队列、验证队列和交叉队列来确定趋化因子CXCL3的诊断潜力。单因素和多因素Cox回归分析影响结直肠癌预后的独立危险因素,确定趋化因子CXCL3作为结直肠癌预后指标的可行性,组间差异性分析采用χ2检验。结果生物信息学分析显示CXCL3基因在结直肠癌组织中的表达显著高于正常组织。结直肠癌患者血清CXCL3表达水平显著升高(P<0.01)。CXCL3在测试队列、验证队列及其各自的交叉队列中的曲线下面积(AUC)分别为0.806、0.850、0.834和0.826(P<0.01)。当CXCL3与相关肿瘤抗原CEA、CA125、CA19-9联合诊断时,其AUC高于把CXCL3作为单一诊断指标(0.881比0.829,P<0.01)。肿瘤大小的亚组分析表明CXCL3在肿瘤大小<4 cm时最有效(AUC=0.810,P<0.01)。高CXCL3表达组的总生存期(OS)缩短(P<0.01),血清CXCL3水平(P=0.005)是结直肠患者预后的独立影响因素。结论血清CXCL3对结直肠癌有较好的诊断价值。CXCL3高表达组结直肠癌患者中位生存期较短,提示其预后不良。

苏紫猪血清细胞因子含量对育肥性状的影响

为研究育肥期苏紫猪血清中细胞因子含量对育肥性状的影响,本研究选取18头苏紫猪进行生长育肥测定,然后屠宰采集血样,进行CCL4、IL-6和FGF-2这3种细胞因子的检测,同时统计其日龄、体质量、瘦肉率和皮下脂肪,分析两者之间的关系。结果发现,CCL4、IL-6和FGF-2的标准曲线拟合度分别为0.9963、0.9958、0.9953,均非常接近于1,说明后面检测的结果可信度高。育肥期苏紫猪血清中,IL-6含量最高,其次为CCL4含量,FGF-2含量最低(P<0.05)。IL-6含量与日增质量、瘦肉率呈负相关(相关系数分别为-0.41、-0.21),与皮下脂肪率呈正相关(相关系数为0.08);CCL4含量与瘦肉率呈负相关(相关系数为-0.44);FGF-2含量最高的猪日增质量最快。研究提示,优质猪血清细胞因子含量对育肥性状有较大的影响,其中,育肥期IL-6和CCL4含量可反映出猪瘦肉率的高低,有利于猪高瘦肉率性状的高效选育。

siRNA干扰C-C趋化因子配体5对喉癌细胞生物学特性的影响

目的研究C-C趋化因子配体5(C-C chemokine ligand 5,CCL5)在头颈鳞状细胞癌中的表达,并探讨CCL5对喉癌细胞生物学特性的影响。方法基因表达谱数据动态分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库查找CCL5在头颈鳞状细胞癌中的表达情况。将喉癌细胞TU177转染siRNA(siRNA组),并设对照(NC)组,CCK8法、细胞划痕试验、流式细胞术分别检测各组细胞增殖、迁移、细胞周期及细胞凋亡情况;RT-PCR、Western blot法检测CCL5敲降效率及多药耐药蛋白2(multidrug resistance protein 2,MRP2)、bcl-2相关x蛋白(bcl-2-associated x protein,Bax)mRNA转录及蛋白表达水平。结果CCL5在头颈鳞状细胞癌的表达高于正常组织(P<0.05)。与NC组相比,siRNA组siRNA具有较高的敲降效率(t分别为12.898和22.656,P均<0.01);siRNA敲降CCL5可抑制喉癌细胞增殖、迁移,促进喉癌细胞晚期凋亡及凋亡蛋白Bax的表达(t=2.600~11.667,P均<0.05)。结论CCL5在头颈鳞状细胞癌中高表达,siRNA干扰CCL5通过上调Bax表达抑制喉癌细胞TU177增殖、迁移,促进凋亡,为CCL5可能作为治疗喉癌的新靶点奠定了基础。

血清CX3CL1、CCL17与类风湿关节炎相关间质性肺疾病患者肺功能及预后的关系研究

目的分析血清C-X3-C基序趋化因子配体1(CX3CL1)、C-C基序趋化因子配体17(CCL17)与类风湿关节炎相关间质性肺疾病(RA-ILD)患者肺功能及预后的关系。方法选取2017年1月—2018年1月上海中医药大学附属龙华医院风湿科收治RA患者295例,根据是否合并ILD分为ILD组115例和非ILD组180例,根据预后情况将RA-ILD患者分为预后不良亚组和预后良好亚组。检测血清CX3CL1、CCL17水平及肺功能指标[第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、FEV_(1)/FVC和肺一氧化碳弥散量(DLCO)]。采用Pearson相关性分析RA-ILD患者血清CX3CL1、CCL17水平与肺功能指标的相关性,多因素Logistic回归分析RA-ILD患者预后不良的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CX3CL1、CCL17水平预测RA-ILD患者预后不良的价值。结果与非ILD组比较,ILD组血清CX3CL1、CCL17水平升高,FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC、DLCO降低(t/P=14.359/<0.001、13.855/<0.001、12.015/<0.001、2.732/0.007、14.749/<0.001、14.010/<0.001)。Pearson相关性分析显示,RA-ILD患者血清CX3CL1、CCL17水平与FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC、DLCO呈负相关(r=-0.762、-0.711、-0.577、-0.534、-0.707、-0.692、-0.735、-0.672,P均<0.001)。随访5年,115例RA-ILD患者预后不良发生率为46.96%。多因素Logistic回归分析显示,普通型间质性肺炎和高分辨率电子计算机断层扫描(HRCT)评分、CX3CL1、CCL17升高为RA-ILD患者预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=3.745(1.245~11.264)、1.051(1.008~1.095)、1.008(1.003~1.012)、1.037(1.012~1.062)],FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、DLCO升高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.952(0.896~0.988)、0.892(0.867~0.981)、0.857(0.789~0.949)]。ROC曲线分析显示,血清CX3CL1、CCL17水平联合预测RA-ILD患者预后不良的曲线下面积为0.875,大于CX3CL1、CCL17单独预测的0.783、0.788(Z=2.807、2.698,P=0.005、0.007)。结论RA-ILD患者血清CX3CL1、CCL17水平升高,与肺功能降低和预后不良有关,血清CX3CL1、CCL17水平联合检测对RA-ILD患者预后具有较高的预测价值。

雷公藤多苷降低糖尿病肾病大鼠炎性细胞因子的表达

目的观察雷公藤多苷(TWP)对糖尿病肾病(DN)大鼠核因子κB(NF-κB)、C-C型趋化因子配体5(CCL5)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)等炎性细胞因子表达的影响。方法链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立DN大鼠模型。动物随机分为正常组、模型组、1.8 g/kg/d TWP治疗组。用药8周末,计算肾脏指数(KI)、全自动生化分析仪检测大鼠血糖(BG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)等生化指标。ELISA检测大鼠血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)和肾匀浆IL-6、TNF-α和CCL5的含量;HE染色观察大鼠肾脏病理学改变;免疫组织化学染色检测大鼠肾组织NF-κB的表达。结果与模型组相比,TWP可改善DN大鼠一般状况;明显降低DN大鼠空腹BG、HbA1c、KI、BUN及Scr水平,增加DN大鼠体质量(P<0.01);与模型组比较,TWP明显降低DN大鼠血清hs-CRP水平及肾匀浆中IL-6、TNF-α和CCL5的水平,明显下调DN大鼠肾组织NF-κB的表达(P<0.01),经TWP治疗后DN大鼠肾脏病理变化减轻。结论 TWP可降低糖尿病大鼠血清及肾脏炎性细胞因子表达,减轻肾脏病变。

十溴联苯醚灌胃后小鼠宫颈癌皮下移植瘤组织肿瘤相关成纤维细胞标志基因表达变化及其意义

目的观察十溴联苯醚(BDE-209)灌胃后小鼠宫颈癌皮下移植瘤组织肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)标志基因表达变化,并探讨其参与宫颈癌发生发展的相关机制。方法将40只雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组、BDE-209低剂量组、BDE-209中剂量组、BDE-209高剂量组,每组10只。各组小鼠均采用右前腋下接种宫颈癌U14细胞悬液的方法建立宫颈癌皮下移植瘤模型,BDE-209低剂量组、BDE-209中剂量组、BDE-209高剂量组经口灌胃给予20、100、500 mg/kg BDE-209,对照组给予等体积玉米油,连续21 d。取各组小鼠宫颈癌皮下移植瘤组织,进行转录组测序后筛选差异表达基因,与查阅文献得到的小鼠CAFs标志基因取交集后获得CAFs标志差异表达基因。对CAFs标志差异表达基因进行基因本体论(GO)功能和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,建立蛋白质相互作用网络(PPI)图后采用Betweenness算法确定排名前十的CAFs标志差异表达基因,即为CAFs标志差异核心基因。取BDE-209高剂量组与对照组小鼠部分宫颈癌皮下移植瘤组织,采用实时荧光定量PCR法检测其10个CAFs标志差异核心基因表达。结果共筛选到CAFs标志差异表达基因30个,其中BDE-209干预后上调29个、下调1个。GO功能富集分析结果显示,CAFs标志差异基因主要富集在细胞外基质(ECM)、生殖结构发育、PI3K/Akt信号转导等;KEGG通路富集分析结果显示,CAFs标志差异基因主要富集在补体和凝血级联反应、肿瘤发病途径等信号通路。PPI图和Betweenness算法筛选得到排名前十的CAFs标志差异核心基因分别为核心蛋白聚糖(Dcn)、细胞间黏附分子1(Icam1)、C-X-C基序趋化因子配体12(Cxcl12)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、血小板衍生生长因子受体(Pdgfrb)、Ⅴ型胶原蛋白α2(Col5a2)、补体成分1的子成分1(C1s1)、肝细胞生长因子(Hgf)、补体成分3(C3)、纤溶酶原激活物(Plat)。与对照组比较,BDE-209高剂量组小鼠移植瘤组织Dcn、Icam1、Cxcl12、MMP-2、Pdgfrb、Col5a2、C1s1、Hgf、C3、Plat mRNA相对表达量均升高(P均<0.05),Pdgfrb mRNA相对表达量无明显变化(P>0.05)。结论BDE-209灌胃会导致小鼠宫颈癌皮下移植瘤组织CAFs相关标志基因Dcn、Icam1、Cxcl12、MMP-2、Col5a2、C1s1、Hgf、C3、Plat表达升高,上述基因表达改变可能通过诱导CAFs的ECM变化和激活PI3K/Akt信号通路参与宫颈癌的发生发展。

脓毒症继发急性肺损伤患者血清CCL25和PARK7表达水平及其临床价值研究

目的探讨脓毒症患者血清C-C模体趋化因子配体25(C-C motif chemokine ligand 25,CCL25),人帕金森病蛋白7(Parkinson’s disease protein 7,PARK7)水平与急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的关系及临床意义。方法选取2019年2月~2023年2月合肥京东方医院诊治的138例脓毒症患者为脓毒症组,根据是否继发ALI分为ALI组(n=40)和非ALI组(n=98),以同期体检的70例健康人为对照。酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清CCL25和PARK7水平。Pearson相关分析血清CCL25,PARK7与临床指标的相关性。多因素Logistic回归分析脓毒症继发ALI的危险因素。受试者工作特征曲线分析血清CCL25和PARK7水平对脓毒症继发ALI的预测价值。结果脓毒症组患者血清CCL25(367.52±46.87ng/L),PARK7(54.26±17.45μg/L)水平高于对照组(48.17±5.26ng/L,12.31±4.12μg/L),差异具有统计学意义(t=46.825,19.813,均P<0.05)。ALI组患者血清CCL25(434.65±52.87ng/L vs 340.12±42.64ng/L),PARK7(103.47±22.51μg/L vs 34.18±7.46μg/L),呼吸指数(1.58±0.48 vs 0.88±0.07)、动脉血二氧化碳分压(Pa CO_(2))(50.11±6.27mm Hg vs 40.42±5.20mm Hg)、急性生理学与慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)评分(23.37±3.82分vs 17.15±3.41分)、序贯器官衰竭(SOFA)评分(13.56±2.93分vs 10.18±2.81分)均高于非ALI组,而氧合指数(237.14±23.56分vs341.14±21.37分)、动脉血氧分压(Pa O_(2))(55.87±8.03mm Hg vs 63.11±7.14mm Hg)低于非ALI组,差异具有统计学意义(t=10.998,27.151,14.145,9.342,9.385,6.332,25.172,5.210,均P<0.05)。ALI组患者血清CCL25,PARK7水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分、呼吸指数、Pa CO_(2)呈正相关(r=0.579~0.801,均P<0.05),与氧合指数、Pa O_(2)呈负相关(r=-0.687,-0.643;-0.654,-0.712,均P<0.05)。血清CCL25(OR=1.309,95%CI:1.040~1.646),PARK7(OR=1.288,95%CI:1.016~1.633),APACHEⅡ评分(OR=1.188,95%CI:1.019~1.384),SOFA评分(OR=1.197,95%CI:1.006~1.425)是影响脓毒症患者继发ALI的独立危险因素。血清CCL25,PARK7联合对脓毒症继发ALI预测的曲线下面积(95%CI)[0.833(0.784~0.872)]大于单项指标[0.770(0.725~0.835),0.741(0.691~0.790)],差异具有统计学意义(Z=4.602,4.318,均P<0.05)。结论脓毒症患者血清CCL25和PARK7水平升高,是影响脓毒症继发ALI发生的独立危险因素,两者联合对脓毒症继发ALI具有较高的预测价值。

脑胶质瘤患者血清及脑脊液CA153、CXCL5、miR-145-5p水平的检测意义

目的 探讨脑胶质瘤(GC)患者血清及脑脊液糖类抗原15-3(CA153)、外周趋化因子C-X-C基序配体5(CXCL5)和miR-145-5p水平的检测意义。方法 选取2018年1月至2021年1月我院收治的GC患者120例作为观察组,另选取同期收治的脑部良性肿瘤患者120例,采用化学发光法检测血清和脑脊液神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平和CA153水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清和脑脊液CXCL5水平,实时定量荧光聚合酶链反应(qPCR)方法检测两组血清和脑脊液miR-145-5p水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清和脑脊液NSE和CA153水平对GC的诊断价值。根据世界卫生组织(WHO)指南,将GC患者分组为高级别GC(n=33)和低级别GC(n=87),Spearman相关性分析血清和脑脊液CXCL5、miR-145-5p与GC严重程度的关系。结果 观察组血清和脑脊液NSE、CA153水平高于脑部良性肿瘤组(P<0.05);血清和脑脊液NSE对GC诊断效能的AUC分别为0.743和0.754,血清和脑脊液CA153对GC诊断效能的AUC分别为0.717和0.773(P<0.05),联合检测预测价值更高(AUC=0.905,95%CI为0.865~0.945,P<0.05);高级别GC血清和脑脊液CXCL5表达水平均高于低级别GC(P<0.05),血清和脑脊液miR-145-5p表达水平均低于低级别GC(P<0.05);血清和脑脊液CXCL5水平与GC严重程度呈正相关(r=0.343和0.334,P<0.05),血清和脑脊液miR-145-5p水平与GC严重程度呈负相关(r=-0.345和-0.377,P<0.05)。结论 联合检测NSE和CA153对诊断GC具较高价值,血清和脑脊液CXCL5水平与病情严重程度呈正相关,miR-145-5p水平与病情严重程度呈负相关,临床可通过联合检测CXCL5和miR-145-5p判断疾病进展和预后。