趋化因子CCL19诱导巨噬细胞M1极化对小鼠慢性胰腺炎的促进作用及其机制

目的:探讨趋化因子C-C基序配体19(CCL19)诱导巨噬细胞M1极化对小鼠慢性胰腺炎的促进作用,并阐明其相关机制。方法:选取10只雄性C57BL/6N小鼠,提取小鼠胰腺腺泡细胞和腹腔巨噬细胞,构建巨噬细胞-腺泡细胞共培养体系,共培养体系细胞分为对照组、模型组和小干扰RNA CCL19(si-CCL19)组,显微镜下观察各组腺泡细胞形态表现。随机选取40只小鼠,分为正常组和慢性胰腺炎组,每组20只。HE染色观察2组小鼠胰腺组织病理形态表现,免疫荧光染色法观察2组小鼠胰腺组织中角质蛋白19(CK19)、淀粉酶、M1型巨噬细胞相关标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和F4/80表达情况及各组共培养体系细胞中腺泡细胞形态表现及CK19和淀粉酶表达情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组小鼠血清和各组共培养体系细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β水平,免疫组织化学法观察2组小鼠胰腺组织中CCL19蛋白表达情况,Western blotting法检测2组小鼠胰腺组织和各组共培养体系细胞中CCL19蛋白和关键蛋白核因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白P65、磷酸化P65(p-P65)、κB抑制物激酶α/β(IKKα/β)、磷酸化IKKα/β(p-IKKα/β)、IκBα和磷酸化IκBα(p-IκBα)表达水平。结果:HE染色,正常组小鼠胰腺组织腺泡细胞的紧密排列;与正常组比较,慢性胰腺炎组小鼠胰腺组织腺泡细胞产生了明显的空泡化,即腺泡细胞导管化,小鼠胰腺炎模型制备成功。免疫荧光染色法,与对照组比较,模型组腺泡细胞严重的空泡化明显,CK19表达明显增加,淀粉酶表达明显减少;与模型组比较,si-CCL19组中腺泡细胞导管化程度降低,CK19表达明显减少,淀粉酶表达明显增加;与正常组比较,慢性胰腺炎组小鼠胰腺组织中淀粉酶表达明显减少,CK19和M1型巨噬细胞标志物iNOS及F4/80表达均明显增加。ELISA法,与正常组比较,慢性胰腺炎组小鼠血清中TNF-α、IL-6和IL-1β水平均明显升高(P<0.05);与对照组比较,模型组细胞中TNF-α、IL-6和IL-1β水平均明显升高(P<0.05);与模型组比较,si-CCL19组细胞中TNF-α、IL-6和IL-1β水平均明显降低(P<0.05)。免疫组织化学法,与正常组比较,慢性胰腺炎组小鼠胰腺组织中CCL19蛋白表达明显增加。Western blotting法,与正常组比较,慢性胰腺炎组小鼠胰腺组织中CCL19蛋白表达水平和NF-κB信号通路相关蛋白p-IKKα/β、p-P65及p-IκBα蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组细胞中CCL19、p-IKKα/β、p-P65和p-IκBα蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与模型组比较,si-CCL19组细胞中CCL19、p-IKKα/β、p-P65和p-IκBα蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:CCL19通过NF-κB信号通路促进巨噬细胞M1型极化,诱导炎症微环境的产生,促进胰腺炎的发生发展。

血清IL-35 CCL19水平与系统性红斑狼疮患儿免疫学指标的相关性研究

目的:观察系统性红斑狼疮(SLE)患儿血清白介素-35(IL-35)、C-C基序趋化因子配体19(CCL19)变化情况,并分析其与患儿免疫学指标的关联性。方法:纳入2022年1月至2024年3月本院收治的SLE患儿97例,并同期选取97例健康儿童进行对照研究,观察患儿血清IL-35、CCL19水平变化,并分析其与免疫学指标(包括抗ds-DNA抗体、免疫球蛋白(Ig)及补体C3、C4)的相关性。结果:与健康儿童相比,SLE患儿血清IL-35水平明显较低,CCL19水平明显较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与非活动期SLE患儿相比,活动期SLE患儿血清IL-35、C3、C4水平明显较低,CCL19、抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平明显较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:SLE患儿血清IL-35水平与抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平成负相关性,与C3、C4水平成正相关,差异均有统计学意义(r=-0.314、-0.203、-0.301、-0.201、0.318、0.383,P<0.05);SLE患儿血清CCL19水平与抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平成正相关性,与C3、C4水平成负相关差异均有统计学意义(r=0.272、0.209、0.362、0.202、-0.219、-0.391,P<0.05)。线性回归显示:SLE患儿抗ds-DNA抗体与IL-35水平存在负向影响关系,差异有统计学意义(P<0.05),C3则与IL-35水平存在正向影响关系,差异有统计学意义(P<0.05);SLE患儿IgG与CCL19水平存在正向影响关系,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SLE患儿血清IL-35、CCL19水平异常变化,与抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平存在一定的相关性,其中抗ds-DNA抗体、C3与IL-35,IgG与CCL19间存在一定的影响关系。

紫癜性肾炎患儿血清LRG1和CCL19水平检测对临床早期诊断及预后的价值研究

目的探究紫癜性肾炎(henoch-schonlein purpura nephritis,HSPN)患儿血清富亮氨酸α2糖蛋白1(leucinerich-alpha-2-glycoprotein1,LRG1)和趋化因子(C-C基序)配体19(CC chemokine ligand 19,CCL19)水平检测对临床早期诊断及预后的价值研究。方法选取2021年5月~2023年5月于邯郸市中心医院就诊治疗的108例HSPN患儿作为研究对象,同时选取72例体检健康儿童作为对照组。检测两组血清LRG1,CCL19,IgM,IgA及IgG水平。利用Logistic回归方法分析HSPN发生的影响因素,ROC曲线评估LRG1,CCL19水平对HSPN患儿早期诊断临床价值。分析处于HSPN急性期、慢性期、康复期患儿血清LRG1,CCL19水平差异,利用Spearman相关性分析探究血清LRG1,CCL19水平与HSPN患儿病程时期的关联。结果HSPN组患儿血清LRG1(184.36±23.64 ng/L),CCL19(463.19±89.46 ng/L)水平均显著高于对照组儿童(149.42±18.29 ng/L,208.83±52.97 ng/L),差异具有统计学意义(t=10.600,21.710,均P<0.05)。Logistic回归结果显示,LRG1[OR(95%CI):1.429(1.057~1.933)],CCL19[OR(95%CI):1.842(1.216~2.791)]均是儿童发生HSPN的影响因素(均P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析可知,血清LRG1,CCL19及二者联合诊断儿童发生HSPN的曲线下面积(AUC)分别为0.868,0.881和0.952,且二者联合应用于临床诊断预测患儿发生HSPN优于血清LRG1,CCL19各自单独诊断(Z=3.147,3.487,均P=0.001)。HSPN急性期、慢性期患儿血清LRG1(203.49±24.89 ng/L,177.56±23.19 ng/L),CCL19(591.13±98.32ng/L,415.61±89.82 ng/L)水平显著高于康复期患儿(158.53±21.96 ng/L,295.17±69.61 ng/L),差异具有统计学意义(t=6.917,12.101;5.320,3.102,均P<0.05),HSPN急性期患儿血清LRG1,CCL19水平明显高于慢性期患儿,差异具有统计学意义(t=5.059,8.750,均P<0.05)。Spearman相关性分析显示,HSPN患儿血清LRG1,CCL19水平与其病程时期均呈正相关(r=0.506,0.689,均P<0.001)。结论HSPN患儿血清LRG1,CCL19水平升高,二者联合检测可提高HSPN的早期临床诊断价值,评估HSPN患儿预后。

微创针刀镜联合DMARDs治疗难治性类风湿关节炎患者的临床效果及对关节液CCL19、 CXCL12、RANKL水平的影响

目的 探讨微创针刀镜联合改善病情抗风湿药物(DMARDs)治疗对难治性类风湿关节炎(RRA)患者的临床效果,以及对患者膝关节关节液C-C基序趋化因子配体19(CCL19)、C-X-C基序趋化因子配体12(CXCL12)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平的影响。方法 将60例RRA患者随机分为对照组(n=30)和观察组(n=30)。对照组接受DMARDs治疗,观察组在DMARDs治疗的基础上接受微创针刀镜治疗。比较两组治疗后的疗效,治疗前后的红细胞沉降率(ESR)、血清C反应蛋白(CRP)水平、Lysholm膝关节功能评定量表评分、疼痛视觉模拟量表(VAS)评分,以及膝关节关节液中CCL19、CXCL12和RANKL水平。结果 观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组的ESR、血清CRP水平、疼痛VAS评分及膝关节关节液CCL19、CXCL12、RANKL水平较治疗前降低,Lysholm膝关节功能评定量表评分较治疗前升高,且观察组的上述指标优于对照组(P<0.05)。结论 微创针刀镜联合DMARDs治疗RRA的临床效果优于单纯DMARDs治疗,可明显缓解患者的临床症状、疾病活动度、炎症反应,这可能与其能够更有效地降低膝关节关节液中的CCL19、CXCL12、RANKL水平有关。