2种小反刍兽疫病毒C-ELISA抗体检测试剂盒的比较分析

小反刍兽疫YN PPRV C-ELISA抗体检测试剂盒由云南省出入境检验检疫技术中心自主研发,采用这一试剂盒与法国IDVET研制的小反刍兽疫病毒C-ELISA抗体检测试剂盒,分别对田间牛羊的661份血清样本进行对比检测试验,并使用YNPPRV C-ELISA抗体检测试剂盒对15份检出的已知背景血清进行批内和批间可重复性试验。结果显示自行研制试剂盒相对国际通用试剂盒ID VET PPRV C-ELISA的特异性、敏感性、符合率分别达到97.96%、97.82%和98.34%,两者一致性用Kappa值表示,Kappa=0.97。批内试验强阳性、弱阳性变异系数为0%～0.05%。结果表明,YN PPRV C-ELISA抗体检测试剂盒的敏感性、特异性、批内和批间重复性均较高,具有高度的可靠性,在小反刍兽疫的诊断检测中具有良好的实用价值。

四种猪瘟抗体ELISA检测试剂盒的比对

随着我国生物技术的发展,市场上猪瘟试剂盒种类越来越多,淮安市动物疫病预防控制中心实验室从本市辖区内现场采样甲、乙、丙3家各30份血样总计90份生猪全血,离心得到血清样本,以市售A、B、C、D四款试剂盒在同等环境下检测上述90份样本,试验数据的处理使用Excel软件,统计学Kappa一致性分析采用SPSS软件。以A试剂盒作为参照,最终结果显示,试剂盒A和B一致性较好,试剂盒A和D两者之间Kappa一致性为中度,A和C两种试剂盒一致性较差。数据结果显示,在实验室进行猪瘟免疫抗体检测时,还是需要做好甄别,选择有资质有批文的合格试剂盒,以保证数据结果的准确性。本次比对为实验室更加科学有效地进行猪瘟免疫抗体监测提供些许数据支持。

三种口蹄疫病毒O型、A型抗体ELISA检测试剂盒的比较分析

目的:比较不同的口蹄疫病毒O型、A型抗体ELISA检测试剂盒的性能差异,为基层兽医实验室选择合适的试剂盒提供参考。方法:采集174份已免疫的猪、羊血清样品,选用3个不同厂家的口蹄疫病毒O型、A型抗体ELISA检测试剂盒进行抗体检测,比较各试剂盒的抗体阳性率、符合率和便捷性。结果:3种试剂盒的口蹄疫病毒O型抗体检测阳性率均在90%以上,符合率为89.66%;3种试剂盒的口蹄疫病毒A型抗体检测阳性率为56.90%95.98%,差别较大,符合率仅52.87%。结论:3种口蹄疫病毒O型、A型抗体ELISA检测试剂盒的检测结果存在一定差异,且差异具有统计学意义(P<0.05);3种试剂盒均适用于口蹄疫病毒O型抗体的定性测定,不全适用于口蹄疫病毒A型抗体的定性测定。

三种不同猪伪狂犬病gB抗体试剂盒检测对比分析

宁化县动物疫控中心为了在猪伪狂犬病监测及猪场疫病净化工作中选用合适的检测试剂盒,选取三种不同市场主流品牌猪伪狂犬病g B抗体ELISA检测试剂盒对宁化县13家生猪规模养殖场采集的血样进行抗体检测。对三种试剂盒检测猪伪狂犬病gB抗体阳性率、符合率及便捷性进行对比分析。结果显示:三个厂家试剂盒的猪伪狂犬病gB抗体总符合率分别为96.63%、98.50%、98.16%,Kappa值分别为0.917、0.932和0.928。结论:三种不同厂家猪伪狂犬病gB抗体ELISA检测试剂盒检测结果相互间的符合度极强,三种试剂盒均适用于猪伪狂犬病gB抗体的定性测定。

微间隙抗体芯片检测试剂盒及生物仪器研发与应用研究

本研究聚焦于微间隙抗体芯片检测试剂盒及其生物仪器的研发与应用,探讨了微间隙抗体芯片的基本原理、工作机制及其制备工艺。通过对该试剂盒的组成、制备工艺、性能检测及质量控制等方面的分析,对其应用效果进行了评价。详细讨论了该系统的设计原理,硬件结构,软件设计和集成优化。实例分析表明,微隙型抗体芯片及其相关仪器对疾病早期诊断具有较高的敏感性与准确性,极大地提高了临床诊断的效率与可靠性。

猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的研制及应用

利用纯化的重组杆状病毒表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白作为检测抗原,建立一种间接ELISA方法用于血清抗体检测。昆虫细胞株(Sf-21)接种重组杆状病毒,对蛋白表达参数及纯化工艺进行了优化,制备了5批重组蛋白抗原,表达量占总蛋白的18.7%左右;Ni2+亲和层析柱纯化获得重组蛋白纯度为90.1%;重组蛋白可被特异性抗体识别,具有良好的免疫活性。用建立的ELISA法对30份已知阴性血清样本检测临界OD405nm值为0.343;ELISA与IPMA对150份血清进行平行检测符合率为95.3%,特异性为91.2%,敏感性为96.5%;与其他几种常见猪病毒参考血清无交叉反应。组装的试剂盒批内和批间变异系数分别为4.0%～4.8%和8.9%～9.9%;置-20℃保存12个月稳定。试剂盒对人工感染猪血清检测结果,接种后第5周抗体阳转,第8周～9周抗体水平达到高峰;对来自黑龙江、吉林、河北、上海等地猪场1085份血清抗体检测,阳性率为73.6%。研制的ELISA试剂盒为临床PCV2血清抗体检测及疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。

猪圆环病毒2型免疫过氧化物酶单层细胞试验抗体检测试剂盒的研制及应用

本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验(Immunoperoxidase monolayer assay,IPMA),用于猪圆环病毒2型血清抗体检测,通过对IPMA反应条件的优化,组装了诊断试剂盒。研究结果表明,用IPMA检测猪圆环病毒2型人工感染猪血清,于感染后3周抗体阳转,第3周～10周抗体阳性检出率为92.8%(52/56),对照组猪血清抗体检测均为阴性(33/33)。试剂盒在-20℃稳定保存18个月与其他几种猪病毒参考血清无交叉反应,与用重组蛋白抗原建立的rcELISA符合率为89.2%。对来自黑龙江、吉林、河北、上海、内蒙古、云南、江西等地猪场健康成年猪血清480份和发病猪血清424份进行了检测,抗体检出率分别为91.7%和79.2%,表明我国猪群中猪圆环病毒2型污染相当严重。该试剂盒的研制为我国PCV2流行病学调查和疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。

PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及其应用

建立了一种检测猪生殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）血清抗体的免疫过氧化物酶单层细胞试验法（IPMA），并组装成PRRSV-IPMA抗体检测试剂盒。对该试剂盒的敏感性、特异性、重复性及保存期等进行了试验，并与国外IDEXX ELISA试剂盒进行了比较。结果显示，用该试剂盒检测PRRSV人工接种猪血清样品，第1周抗体阳性检出率为50％，从第2周起抗体阳性检出率均为100％，而对照组猪血清抗体检测均为阴性。该试剂盒重复性好，-20℃保存18个月稳定，与其他病毒参考血清无交叉反应，与国外IDEXX ELISA试剂盒的符合率为83．3%。用该试剂盒对采自黑龙江、吉林、辽宁、河北、上海等地13个猪场的520份正常猪血清样品进行了抗体检测，结果，4个猪场阳性率高达90％以上，仅有2个猪场为阴性，其余猪场阳性率为10％～57%。

猪瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的研制和应用

对猪瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的稳定性及保存条件等进行了摸索,确定该试剂盒具有良好的稳定性,并可在2℃～8℃环境中的保存9个月。同时,测定了本试剂盒与荧光抗体病毒中和试验的符合率为92.62%;并将该试剂盒应用于免疫动物抗体的动态监测。

破伤风抗体IgG酶联检测试剂盒的研制

目的 研制检测破伤风IgG的酶联检测试剂盒。方法 以精制破伤风类毒素进一步纯化后作为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗人IgG作为抗体制备ELISA试剂盒,并进行敏感性、特异性及重复性检测。结果 试剂盒敏感性可达0.003 9 IU/ml,特异性达95％以上,重复性好,CV<7％,试剂盒置于37℃、7 d敏感性无明显改变。结论 成功地制备了破伤风抗体IgG酶联检测试剂盒。

猪圆环病毒2型几种ELISA抗体检测试剂盒的比较与应用

为了比较猪圆环病毒2型（PCV2）5种ELISA抗体检测试剂盒的使用效果，本研究采用IPMA法标定不同PCV2抗体效价的阳性血清50份和阴性血清30份，对这些试剂盒的敏感性、特异性及符合率进行比较。结果显示，这5种试剂盒的敏感性为74．0％～96．0％，特异性为83．3％～96．7％，符合率为77．5％～96.3％，其中以国产阻断ELISA试剂盒和Ingenasa公司的试剂盒效果最好。此外，本研究采用国产阻断ELISA试剂盒对PCV2疫苗免疫猪血清抗体检测表明，疫苗免疫21d后抗体阳性率达50％，免疫28d抗体阳性率达100％；对PCV2人工感染猪血清抗体检测显示，病毒接种后第28d抗体阳性率为30．0％，第42d阳性率为100％；对临床送检猪血清抗体检测表明，PCV2抗体阳性率介于45.0％～76．5％。本研究通过对PCV25种抗体检测试剂盒的比较及应用显示，国产阻断ELISA试剂盒可以作为检测PCV2疫苗免疫及临床感染猪血清抗体的有效方法。

猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用

以大肠杆菌原核表达系统表达的猪圆环病毒2型Cap蛋白为抗原,建立猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法,优化ELISA反应条件,研制猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒。与商品化试剂盒相比,该检测试剂盒敏感性、特异性和符合率分别为95.12%、92.86%和94.55%;同时与猪圆环病毒1型(PCV1)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)等多种病毒阳性血清无交叉反应。试剂盒具有较好的重复性,在-20℃至少可保存1年以上,将其应用于临床血清样品的检测,结果安徽、广东、广西采样猪场的PCV2阳性率分别为100%、48.39%、100%。

4种商品化试剂盒检测猪瘟病毒抗体的比较分析

猪瘟（CSF）是由猪瘟病毒感染引起的猪的急性、热性、高度致死性传染病,是严重影响养猪业发展的主要疫病之一。世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类l6种传染病之一,我国亦将其列为一类传染病,是发生最多、危害最大、流行最广的动物传染病之一。

三种伪狂犬病病毒gE抗体ELISA检测试剂盒的比较

为比较3种品牌(A、B、C)伪狂犬病病毒(PRV)g E抗体ELISA检测试剂盒的临床使用效果,应用中和试验来标定伪狂犬病非免疫猪场的180份临床血清样品,同时用3种试剂盒进行检测,并对试剂盒的重复性、敏感性、特异性以及与中和试验结果的符合度等指标进行测定与分析。结果显示:3种试剂盒的批内稳定性均较好,变异系数均小于10%;批间重复性差异较大,变异系数最小者为8.09%,最大者高达21.31%;3种试剂盒的诊断特性良好,敏感性为95.56%~97.78%,特异性为94.44%~100%;各试剂盒检测结果与中和试验结果均完全相符(Kappa值为0.91~0.96)。比较结果表明,3种试剂盒均适用于临床样品的PRV g E抗体检测,其中稳定性及敏感性俱佳的试剂盒C更适用于PRV的持续监测、早期发现、引种检疫及净化效果评估,而特异性与准确性最高的试剂盒B更适用于贵重病畜的诊断淘汰。因此,生产实践中应根据诊断目的合理选择最适试剂盒。

甲肝IgM抗体诊断试剂盒在甲肝病毒抗原检测中的应用

将HAVIgM -Ab诊断试剂盒用HAV -Ag标准品调控灵敏度后 ,用于检测HAV -Ag ,并比较快速检测法和常规过夜法两种检测方法的测定效果 ,以选择在甲肝疫苗生产中 ,抗原检测的合适方法。经过调控灵敏度后 ,抗HAVIgM诊断试剂盒完全可以用来检测HAV -Ag。并可以正确评价HAV -Ag滴度 ,HAV感染性滴度。适用于甲肝疫苗的检定工作。

传染性法氏囊病病毒抗体检测诊断试剂盒的研制与应用

本文用提纯的ＩＢＤＶ细胞毒为抗原，抗鸡Ｉｇ单抗１Ｂ７ＨＲＰ酶结合物为第二抗体建立了检测ＩＢＤＶ抗体的间接ＥＬＩＳＡ。在此基础上研制出ＩＢＤＶ抗体检测诊断试剂盒。经对１２００份血清进行检测，结果表明：本试剂盒特异性强，灵敏度高，重复性好，快速稳定，易于操作，为雏鸡ＩＢＤＶ母原抗体和疫苗注射后特异性抗体检测提供了可靠的诊断工具。

猪瘟病毒5种ELISA抗体检测试剂盒的比较

[目的 ]比较猪瘟病毒(CSFV)5种ELISA抗体检测试剂盒的使用效果。[方法 ]利用细胞中和试验制备的标准质控血清,制备不同猪瘟抗体效价的阳性血清70份和阴性血清20份,对5种试剂盒的敏感性、特异性和符合率进行比较。利用该5种试剂盒对不同年龄段猪群血清中猪瘟抗体水平进行检测。[结果 ]5种试剂盒的敏感性为85.7%-100%,特异性均达到100%,符合率为88.9%-100%。不同年龄段猪血清样品中,5种试剂盒检测结果不尽相同。[结论 ]猪瘟抗体效价的高低对5种试剂盒检测结果的一致性有一定影响,尤其是针对弱阳性样品时,IDEXX猪瘟抗体试剂盒和荷兰赛迪公司的猪瘟抗体试剂盒检测效果相对较好,为猪瘟免疫检测工作提供了一定依据。

PRV-IPMA抗体检测试剂盒的研制及其应用

本研究建立了一种免疫过氧化物酶单层细胞试验法(IPMA),用于猪伪狂犬病病毒(PRV)血清抗体检测。通过对IPMA反应条件的优化,组装成PRV-IPMA诊断试剂盒,并对该试剂盒检测的敏感性、特异性、重复性及保存期等进行了试验。结果表明,IPMA检测相对于SN的敏感性为96.2%,特异性为97.7%,两者的总符合率为96.9%;该试剂盒检测的重复性好,与其它病毒参考血清无交叉反应;试剂盒可在-20℃保存12个月,用该试剂盒检测PRV人工感染猪血清,于感染后2周抗体全部阳转,健康对照组猪血清抗体检测均为阴性结果。对来自黑龙江、吉林、上海、内蒙古、河北等地采集的5个猪场后备母猪150份血清样本进行检测,PRV血清抗体阳性检出率为16.7%～50%。检测结果表明这些猪场后备猪群仍需加强疫苗免疫。该试剂盒的研制为我国PRV流行病学调查和疫苗免疫效果的评价提供了技术手段。