目的利用基于荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术的检测PKC激活或PKC-delta激活的报告分子来确定PTH是否可以通过PLC非依赖途径激活PKC和PKC-delta。方法将表达PKC激活报告分子(CKAR)的质粒和表达PKC-d...目的利用基于荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术的检测PKC激活或PKC-delta激活的报告分子来确定PTH是否可以通过PLC非依赖途径激活PKC和PKC-delta。方法将表达PKC激活报告分子(CKAR)的质粒和表达PKC-delta激活报告分子的质粒转染HEK293细胞,培养72h后通过共聚焦显微镜检测FRET的改变,并以此判断佛波酯(TPA)是否激活PKC和PKC-delta。将表达甲状旁腺素1型受体(PTHR1)的质粒与CKAR质粒或PKC-delta质粒共转染HEK293细胞,培养72h后通过共聚焦显微镜检测FRET的改变,并判断PTH(1-34)、G1R19(1-34)和0.1%的三氟乙酸(TFA)对PKC和PKC-delta的作用。结果在转染CKAR质粒或PKC-delta质粒的HEK293细胞,TPA均使青色荧光与黄色荧光的强度之比(C/Y)增加。在共转染PTH1R质粒与CKAR质粒或PKC-delta质粒的HEK293细胞,PTH(1-34)和G1R19(1-34)均增加了C/Y的值,而0.1%TFA未引起C/Y的改变。结论 PTH与PTHR1结合后通过PLC非依赖途径激活PKC/PKC-delta。展开更多
目的:观察T2DM患者钙调激素和骨密度(BMD)的变化,并对其进行相关性分析。方法选取T2DM (T2DM )患者117例和健康体检(NC)者63名。将T2DM患者分别分为病程≤10年组、病程>10年组,HbA1 c≤8%组、HbA1 c>8%组,以及BMD正常组...目的:观察T2DM患者钙调激素和骨密度(BMD)的变化,并对其进行相关性分析。方法选取T2DM (T2DM )患者117例和健康体检(NC)者63名。将T2DM患者分别分为病程≤10年组、病程>10年组,HbA1 c≤8%组、HbA1 c>8%组,以及BMD正常组、骨量减低组、骨质疏松(OP)组。比较各组血清25羟维生素D3[25(O H )D3)]、甲状旁腺激素(PTH)水平和腰椎(L1-L4)、股骨颈、全髋及全身BMD水平。结果(1)与NC组比较,T2DM 组25(OH)D3减低[(44.94±17.40) vs (35.57±12.30) nmol/L](P<0.01);股骨颈、全髋 BMD 下降[(0.927±0.173) vs (0.848±0.136) g/cm2;(0.934±0.140) vs (0.873±0.150) g/cm2](P<0.01或 P<0.05);PTH升高[(5.62±3.93) vs (8.50±4.15) pmol/L](P<0.01)。(2)与病程≤10年组比较,病程>10年组股骨颈和全髋BMD 下降[(0.882±0.111) vs(0.814±0.148)g/cm2;(0.908±0.139) vs (0.840±0.157)g/cm2](P<0.05);PTH 升高[(7.06±3.74) vs (10.55±9.09) pmol/L](P<0.05)。(3)与HbA1c≤8%组比较,HbA1c>8%组股骨颈、全髋 BMD 减低[(0.891±0.130) vs (0.830±0.131)g/cm2;(0.949±0.130) vs (0.832±0.161) g/cm2](P<0.05);PTH增高[(7.21±3.98) vs (9.96±8.80) pmol/L](P<0.05)。(4)T2DM 组OP和骨量减低者比例高于NC组(P<0.05),且OP组病程、HbA1c、PTH较BMD正常组和骨量减低组长或增高(P<0.05)。(5) Logistic回归分析显示,BMD与病程、HbA1c及PTH呈负相关,与25(OH)D3呈正相关。结论 T2DM患者BMD下降及OP发生率升高,以糖尿病病程长和血糖控制差者为著。展开更多
文摘目的利用基于荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术的检测PKC激活或PKC-delta激活的报告分子来确定PTH是否可以通过PLC非依赖途径激活PKC和PKC-delta。方法将表达PKC激活报告分子(CKAR)的质粒和表达PKC-delta激活报告分子的质粒转染HEK293细胞,培养72h后通过共聚焦显微镜检测FRET的改变,并以此判断佛波酯(TPA)是否激活PKC和PKC-delta。将表达甲状旁腺素1型受体(PTHR1)的质粒与CKAR质粒或PKC-delta质粒共转染HEK293细胞,培养72h后通过共聚焦显微镜检测FRET的改变,并判断PTH(1-34)、G1R19(1-34)和0.1%的三氟乙酸(TFA)对PKC和PKC-delta的作用。结果在转染CKAR质粒或PKC-delta质粒的HEK293细胞,TPA均使青色荧光与黄色荧光的强度之比(C/Y)增加。在共转染PTH1R质粒与CKAR质粒或PKC-delta质粒的HEK293细胞,PTH(1-34)和G1R19(1-34)均增加了C/Y的值,而0.1%TFA未引起C/Y的改变。结论 PTH与PTHR1结合后通过PLC非依赖途径激活PKC/PKC-delta。
文摘目的:观察T2DM患者钙调激素和骨密度(BMD)的变化,并对其进行相关性分析。方法选取T2DM (T2DM )患者117例和健康体检(NC)者63名。将T2DM患者分别分为病程≤10年组、病程>10年组,HbA1 c≤8%组、HbA1 c>8%组,以及BMD正常组、骨量减低组、骨质疏松(OP)组。比较各组血清25羟维生素D3[25(O H )D3)]、甲状旁腺激素(PTH)水平和腰椎(L1-L4)、股骨颈、全髋及全身BMD水平。结果(1)与NC组比较,T2DM 组25(OH)D3减低[(44.94±17.40) vs (35.57±12.30) nmol/L](P<0.01);股骨颈、全髋 BMD 下降[(0.927±0.173) vs (0.848±0.136) g/cm2;(0.934±0.140) vs (0.873±0.150) g/cm2](P<0.01或 P<0.05);PTH升高[(5.62±3.93) vs (8.50±4.15) pmol/L](P<0.01)。(2)与病程≤10年组比较,病程>10年组股骨颈和全髋BMD 下降[(0.882±0.111) vs(0.814±0.148)g/cm2;(0.908±0.139) vs (0.840±0.157)g/cm2](P<0.05);PTH 升高[(7.06±3.74) vs (10.55±9.09) pmol/L](P<0.05)。(3)与HbA1c≤8%组比较,HbA1c>8%组股骨颈、全髋 BMD 减低[(0.891±0.130) vs (0.830±0.131)g/cm2;(0.949±0.130) vs (0.832±0.161) g/cm2](P<0.05);PTH增高[(7.21±3.98) vs (9.96±8.80) pmol/L](P<0.05)。(4)T2DM 组OP和骨量减低者比例高于NC组(P<0.05),且OP组病程、HbA1c、PTH较BMD正常组和骨量减低组长或增高(P<0.05)。(5) Logistic回归分析显示,BMD与病程、HbA1c及PTH呈负相关,与25(OH)D3呈正相关。结论 T2DM患者BMD下降及OP发生率升高,以糖尿病病程长和血糖控制差者为著。