慢性酒精刺激对大鼠海马胶质源性神经营养因子及其功能性受体c-ret mRNA表达的影响

采用原位分子杂交方法观察了慢性酒精刺激对大鼠海马胶质源性神经营养因子 (GDNF)及其功能性受体 c-ret m RNA表达的影响。结果发现 :慢性酒精刺激 3 0 d时 ,GDNF与 c-retm RNA在海马的表达与对照组相比明显增加 ;慢性酒精刺激 60 d时 GDNF与 c-ret m RNA的表达与 3 0 d时相比显著下降。此结果提示 ,GDNF及其功能性受体

兔坐骨神经损伤修复后骶交感神经节内c-ret mRNA表达的变化

目的 探讨兔坐骨神经损伤修复后骶交感神经节内c-retmRNA表达的变化。方法 用组织原位杂交方法观察兔坐骨神经损伤修复 1 ,3,7,1 4 ,30 ,6 0d后c -retmRNA在骶交感神经节内的表达。结果 兔坐骨神经损伤修复 3d后 ,在损伤侧骶交感神经节内c -retmRNA表达明显上调 ,在损伤后 7d达高峰 ,损伤后 1 4d与 30d仍维持较高水平 ,损伤后 6 0d基本恢复到正常水平。结论 C -retmRNA在兔坐骨神经损伤修复后骶交感神经节内表达的变化 ,提示在坐骨神经损伤修复后给予外源性胶质源性神经营养因子 (GDNF)可能有利于交感神经纤维的再生。

大鼠局造脑缺血预处理后c-Ret的表达

目的观察对比胶质细胞源性神经营养因子受体c-Ret在大鼠局造脑缺血预处理后和脑缺血后的表达。方法实验采用c-Ret原位杂交技术,观察胶质细胞源性神经营养因子受体c-Ret在成年大鼠脑皮质的表达。结果缺血周边区可见c-RetmRNA阳性表达的神经元,MCAO3h,缺血周边区阳性表达开始增多,与正常对照组相比差异具有显著性,P<0.05,PC+MCAO组与MCAO组无差异,P>0.05,PC+MCAO和MCAO组随时间延长,c-RetmRNA在缺血周边区表达增强,并在1d时出现高峰,随后表达减低。在6h、12h、1d时与MCAO组比较有显著性差异,P<0.05,在3d和7dIPC+MCAO组无差异性。反应产物在细胞内呈棕褐色,清晰可辨,对照组只有极少量表达。结论c-Ret在脑缺血预处理后表达增高,可能对缺血引起的神经损伤起到重要的保护作用。

RET基因甲基化在先天性巨结肠发生机制中的作用

目的研究原癌基因RET的甲基化与先天性巨结肠(HD)之间的关系,了解其在肠壁神经节细胞发生发展中的意义。方法选取天津市儿童医院诊治的HD手术切除病变组织标本21例为试验组,均为扩张段;同期非HD患儿正常结肠组织标本5例,为对照组。应用亚硫酸氢盐测序法(BSP)直接检测方法检测RET的Cp G岛甲基化状态,用免疫组织化学方法检测试验组和对照组中RET蛋白的表达情况。结果试验组RET的Cp G岛有12例(57.14%)发现甲基化,对照组标本均未发现甲基化。12例甲基化RET的蛋白表达的平均光密度为0.201±0.015,低于9例非甲基化RET的蛋白表达的平均光密度,为0.364±0.023,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RET基因甲基化可能通过影响RET蛋白的表达水平,影响神经节细胞的发育,从而参与HD的发生。

甲状腺髓样癌的研究进展

甲状腺髓样癌属恶性神经内分泌肿瘤的一种,其细胞学病变基础是甲状腺滤泡旁(C细胞)恶性增殖异常分化,RET原癌基因突变作为甲状腺髓样癌基因病因,microR NA近年也被证明与甲状腺髓样癌有密切的相关性。甲状腺髓样癌缺乏特定的临床特点,病程进展速度较快,属中度恶性癌,预后相对较差、目前推荐的治疗首选"甲状腺全切术+颈淋巴结清扫术"为主的手术治疗。笔者就甲状腺髓样癌临床特征、诊疗方法、治疗手段等方面进行归纳总结,为临床工作提供帮助。

GDNF、GFRα1和RET在先天性直肠肛门畸形中的表达及意义

目的探讨神经胶质细胞源性的神经营养因子(GDNF)、其受体GFRα1和原癌基因RET在先天性直肠肛门畸形肠壁组织中的表达及意义。方法收集经手术治疗的直肠肛门畸形患者12例,男8例,女4例,年龄3 d^2岁,高位无肛2例,中位无肛4例,低位无肛6例。采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测12例患儿肠壁盲端组织和距离盲端3 cm处的组织标本中RET、GDNF和GFRα1的表达。结果高、中、低位无肛患儿盲端标本中均缺乏神经节细胞,且RET、GDNF和GFRα1在盲端中均未见表达;距离盲端3 cm处,高、中、低位无肛组织中有神经节细胞,存在RET、GDNF和GFRα1的表达,中、低位无肛组织中呈棕褐色为强阳性,而高位无肛呈淡黄色和棕黄色为弱阳性或者阳性;术后功能随访,高位无肛中1例出现污粪,1例出现稀便不能控制,无肛门失禁情况。中、低位无肛中有1例出现直肠黏膜脱出,经坐浴肛门护理好转,1例出现排气时偶有污便,其余8例术后排便功能未见异常。结论先天性直肠肛门畸形患儿的直肠末端中神经营养因子GDNF、GFRα1和RET的低表达可能与直肠肛门畸形术后排便功能不良关系密切。

RET与VEGF—C在甲状腺乳头状癌中表达的研究

目的探讨RET和VEGF—C在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用，以及RET和VEGF—C之间相互作用的关系。方法应用免疫组化二步法检测60例甲状腺乳头状癌和10例正常甲状腺组织中RET蛋白和VEGF—C蛋白的表达情况，分析RET和VEGF—C的蛋白表达率与临床病理学特征之间的关系以及二者表达之间的相关性。结果RET和VEGF—C在甲状腺乳头状癌与甲状腺正常组织中的阳性表达率之间均具有显著性差异（P〈0．05）。RET和VEGF—C与患者的性别、年龄、肿瘤大小无显著差异（P〉0．05）。RET和VEGF—C与患者的颈部淋巴结转移、临床分期有显著差异（P〈0．05）。RET和VEGF—C之间呈正相关（P〈0．05）。结论RET表达在甲状腺乳头状癌淋巴结转移方面具有非常重要作用，其有可能通过调节VEGF—C的表达来促进淋巴结的转移。RET和VEGF—C可作为判断甲状腺乳头状癌淋巴结转移的可能指标。

视黄醇结合蛋白与胱抑素C水平对2型糖尿病肾病的早期诊断价值

目的探讨血清视黄醇结合蛋白(retion binding protein,RBP)和胱抑素C(cystatin C,CysC)水平在2型糖尿病肾病早期诊断中的应用价值。方法该研究方便选取2016年1—12月对收治的2型糖尿病肾病患者62例,采用免疫速率散射比浊法检测血清视黄醇结合蛋白与胱抑素C水平,并与同期接受健康体检的正常对照组进行对比分析。结果研究组患者的血清CysC、RBP水平均明显高于对照组,且差异有统计学意义(t=6.19、5.83,P<0.05)。CysC和RBP两种检测项目对糖尿病肾病诊断的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为95.16%、94.00%、95.16%、94.00%。结论血清视黄醇结合蛋白与胱抑素C水平可以作为2型糖尿病肾病的早期诊断指标。

RET基因突变导致的多发性内分泌腺瘤病2B型患者的临床特点及诊治经验

目的对1例多发性内分泌腺瘤病2B型患者的临床特点、酪氨酸抑制剂治疗反应和致病基因进行探讨，以提高对此疾病的认识和治疗水平。方法收集患者长期诊治的临床资料、生化检查及影像学资料进行临床特点和药物治疗反应分析。抽取患者及其父母的外周静脉血，提取基因组DNA，通过聚合酶链反应（PCR）方法，对RET原癌基因第10-16个外显子及相邻内含子进行测序，明确RET基因突变状态。结果（1）患者以甲状腺髓样癌（MTC）、双侧肾上腺嗜铬细胞瘤和多发黏膜神经纤维瘤为主要临床表现。（2）MTC，肺、肝和骨多处转移。病程中试用酪氨酸酶抑制剂——索拉非尼治疗MTC2个月，水样腹泻和咳嗽减少。因不能耐受脱发、疼痛性皮疹不良反应而停药。（3）即使已发生肿瘤多处转移，但患者长期接受静脉营养支持治疗，存活时间超过14年。（4）基因检测示RET原癌基因存在激活突变，918位蛋氨酸被苏氨酸取代（Met918Thr）。结论尽管手术是MTC主要治疗方式，但酪氨酸激酶抑制剂可能为晚期患者改善症状提供一个新选择。对已出现多处转移的患者，长期营养支持可能有助于延长生存时间。

80例山西汉族先天性巨结肠症患儿RET基因单核苷酸多态性分析

目的研究80例山西汉族先天性巨结肠症(Hirschsprung disease,HSCR)患儿RET基因7、12、13、15号外显子的单核苷酸多态性(single nucleotides polymorphisms,SNPs)与HSCR发病的关系。方法通过测序及序列比对的方法,对山西省80例汉族散发性HSCR患者和80例汉族健康儿童进行RET基因外显子序列分析,比较基因多态性位点等位基因频率在两组的差异。结果 RET基因7号外显子A432A(GCA→GCG)位点存在多态性,病例组和对照组中该位点的等位基因分布频率存在显著性差异(χ2=5.668,P<0.05),风险等位基因为G等位基因,OR=3.05,95%可信区间为1.218～7.639;RET基因13号外显子L769L(CCT→CTA)位点存在多态性,病例组和对照组中该位点的等位基因分布频率存在显著差异(χ2=37.458,P<0.01),风险等位基因为G等位基因,OR=4.632,95%可信区间为2.832～7.577。7号外显子D489N(GAC→AAC),15号外显子S904S(TCC→TCG)存在多态位点,病例组与对照组中P>0.05,该位点与疾病无显著相关性。其余已报道多态位点本次试验未发现。结论 RET密码子A432A、L769L的基因多态性与80例山西汉族HSCR患儿的发生密切相关。

分化型甲状腺癌相关基因的研究进展

近年来,随着高分辨率超声和甲状腺细针抽吸细胞学检查技术的应用,甲状腺癌的检出率逐渐升高。虽然分化型甲状腺癌(DTC)患者多数预后较好,但也有部分患者易发生颈部淋巴结转移或肺、骨、脑等远处转移,甚至出现病灶的失分化,从而导致预后不良。目前,国内外许多研究结果表明,基因突变在DTC的发生、发展以及预后等方面发挥着重要的作用,且相关基因的抑制剂可以为一些病灶失分化的患者带来新希望,对临床医师的决策具有重大指导意义。笔者对目前DTC中常见的基因突变的机制及其临床意义进行综述。