重金属(Cd^(2+)、Zn^(2+))胁迫对番茄幼苗抗氧化酶系统的影响

采用温室水培试验 ,研究不同浓度Cd2 + 、Zn2 + 对番茄幼苗抗氧化酶系统的影响。结果表明 ,随着Cd2 + 、Zn2 + 胁迫浓度的增大 ,番茄幼苗生长明显受抑制 ,生物量积累、株高和叶面积下降。番茄根系和叶片中的丙二醛 (MDA)含量增加 ,而可溶性蛋白含量减少。抗氧化酶系统中超氧化物歧化酶 (SOD)、抗坏血酸过氧化物酶 (APX)、过氧化物酶 (POD)和过氧化氢酶 (CAT)活性上升。酶活性高浓度下变化明显。叶片中SOD、CAT活性大于根系 ,但活性变化小于根系 ,而POD则相反 ,且叶片中活性变化高于SOD、APX、CAT。抗氧化酶活性的上升能够提高幼苗适应和抵抗重金属胁迫的能力。

系统性红斑狼疮患者血清及脑脊液中C-反应蛋白的水平及临床意义

目的 探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清和脑脊液 (CSF)中C 反应蛋白 (CRP)的水平及临床意义。方法 对 2 5例SLE患者进行血清和CSF中CRP及抗核抗体 (ANA )的检测 ,分析血清CRP与CSFCRP、血清CRP与血清ANA、CSFCRP与CSFANA的相关性。结果 ①直线相关分析显示 ,血清CRP与CSFCRP水平呈正相关 (r =0 .4465,P =0 .0 42 5) ;②等级相关分析显示 ,血清CRP与血清ANA、CSFCRP与CSFANA均无明显相关性 (rs′分别为-0 .0 2 2、-0 .0 14 8,P均 >0 .0 5)。结论 ①血清CRP水平与SLE活动性无明显关系 ,不能作为SLE活动指标 ;②SLE患者CSF中检出CRP ,其平均水平 2 .0 2± 0 .87mg/L ;③SLE患者CSF出现CRP的基础可能是血脑屏障受损 。

老年急性心肌梗死猝死者心肌细胞凋亡与p53和Bcl-2蛋白表达的相关性研究

目的 探讨 p53和 Bcl- 2蛋白在老年急性心肌梗死 (AMI)猝死者心肌细胞凋亡中的作用。方法 用 TUNEL法检测 1 5例猝死者和1 0例心脏正常的车祸死亡者的心肌细胞凋亡 ,用免疫组化法检测 p53和 Bcl- 2蛋白在心肌中的表达水平 ,并探讨它们之间的相互关系。结果 TUNEL法发现 ,猝死者梗死区的心肌细胞凋亡千分数老年组 (663.0 0± 1 1 7.1 2‰ )明显高于正常对照 (34.30± 2 0 .68‰ ) (P=0 .0 0 ) ;p53蛋白表达阳性千分率 (462 .1 2± 2 37.58‰ )明显高于正常对照者 (39.45± 2 4 .67‰ ) (P=0 .0 0 0 ) ,且与梗死区心肌细胞凋亡数成明显的正相关性 (r为 0 .70 1 ,P<0 .0 0 5) ;Bcl- 2蛋白表达阳性率 (40 .83± 31 .2 9‰ )明显低于正常对照 (1 2 0 .76± 66.67‰ ) (P=0 .0 0 37) ,且与梗死区心肌细胞凋亡数成明显的负相关性 (r为 - 0 .840 ,P<0 .0 0 1 ) ;梗死区心肌细胞内 p53和 Bcl- 2蛋白表达数之间呈明显的负相关性 (r=- 0 .82 9,P<0 .0 0 1 )。结论 AMI猝死者梗死区心肌细胞存在明显的凋亡现象 ,且受 p53蛋白上调、Bcl- 2蛋白下调 ,两者相反调节其凋亡。

p16^(INK4)、p21^(ras)及p185^(C-erbB-2)蛋白在子宫内膜癌的表达及临床病理意义

目的:研究p16 INK4 蛋白在子宫内膜增殖症和子宫内膜癌的表达特征,以探讨其与p2 1ras、p185 C erbB 2 蛋白的相互关系及在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法:应用免疫组化SP法检测6 5例子宫内膜癌及2 0例子宫内膜增殖症组织中p16 INK4 、p2 1ras及p185 C erbB 2 蛋白的表达。结果:子宫内膜增殖症组织p16 INK4 蛋白表达率为85 .0 0 % (17/ 2 0 ) ,子宫内膜癌组织p16 INK4 蛋白表达率为6 0 .0 0 % (39/ 6 5 ) ,其表达与组织分级及p185 C erbB 2 蛋白表达呈负相关。结论:p16 INK4 蛋白失表达与子宫内膜癌分化差有一定关系,与p2 1ras、p185 C erbB 2 蛋白的联合检测可反映肿瘤的分化。

妊高征患者胎盘血管中PKC-α、NF-κB表达的研究

目的 :探讨蛋白激酶C α(PKC α)、NF κB在妊高征 (PIH)胎盘绒毛血管病变中的作用。方法 :用免疫组化、图像分析等方法测定胎盘绒毛细小血管PKC α及NF κB的表达及对绒毛血管病变进行综合评价 ;用RT PCR测定胎盘组织前胶原Ⅰ、Ⅲ含量。结果 :(1 )PIH胎盘细小血管管壁增厚 ,管壁纤维素样坏死、急性粥样硬化发生率显著高于对照组 (P <0 .0 1 ) ;(2 )PIH胎盘绒毛细小动脉PKC α及NF κB显色强度明显高于对照组 ;(3)PIH胎盘绒毛组织前胶原Ⅰ明显高于对照组 (P <0 .0 1 ) ;(4)胎盘绒毛细小动脉管壁PKC α及NF κB的表达与细小动脉中膜平滑肌细胞核密度 (SMC)及胎盘绒毛组织前胶原Ⅰ的表达均呈正相关 (P <0 .0 5)。结论 :PKC α及NF

新型重组纤维蛋白原受体拮抗剂的表达、纯化及活性研究

目的:构建两个预期能够成为纤维蛋白原受体拮抗剂的重组融合蛋白。方法:人工合成北美水蛭素Decorsin的基因序列,利用基因工程的方法构建两个重组蛋白,分别是AnnV D39:AnnexinV加上Decorsin全序列和AnnV- D2 7:AnnexinV加上Decorsin的羧基端2 7个氨基酸序列。在AnnV D39的AnnexinV和Decorsin序列之间加入了由10个氨基酸组成的连接肽GGGGSGGGGS。利用质粒pET -2 8(a +)作为载体,将上述融合蛋白在大肠杆菌E coliBL2 1(DE3)中以包涵体的形式进行高效表达,纯化后,进行抗血小板聚集活性测试。结果:基因表达的产物在变性条件下用DEAE -Cellulose5 2和SepharoseCL -4B层析纯化。随后进行的血小板聚集分析表明,An nV D39具有良好的抗血小板凝集活性,而AnnV D2 7没有显示相似活性。结论:AnnV- D39作为一种新的纤维蛋白原受体抑制剂显示了良好的活性,而Annv- D2 7需要进行进一步的修饰。

急性心肌梗死患者PAI-1、sVCAM-1及hsCRP水平与溶栓抵抗的关系

目的:寻找急性心肌梗死(AMI)患者出现溶栓抵抗的预测因子。方法:将68例急性心肌梗死患者分为溶栓再通组和溶栓未通组,比较两组患者溶栓前的纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)及超敏C-反应蛋白(hsCRP)水平的不同。结果:溶栓未通组PAI-1、sV-CAM-1水平均显著高于再通组,P<0.05;溶栓未通组和再通组hsCRP水平差异无统计学意义,P>0.05。结论:PAI-1、sVCAM-1有可能成为溶栓抵抗的预测指标。

影响酶法回收螯虾加工下脚料中虾青素及蛋白质的因素研究

通过测定螯虾加工下脚料中虾青素和蛋白质在不同保藏条件、预处理条件和酶解条件下的含量变化,研究了这些因素对酶法回收虾青素和蛋白质的影响。结果表明,破碎的下脚料在空气中保藏12d后虾青素残留仅37.5%,在阳光下照射3d虾青素残留18.2%,在真空、冷冻、避光的保藏条件下虾青素损失较少;酶解前预热处理蛋白质回收率可提高5%,但虾青素回收率下降5.6%;破碎后虾青素及蛋白质的回收率大幅提高,超声波处理有助于二者的回收率;酶解反应的最适条件为温度55℃,pH8.5,反应时间2h,酶底比3750U/g蛋白质。

系统性红斑狼疮患者血清抗鸡卵核中42000蛋白抗体的测定及其临床意义

目的:通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清抗鸡卵核4 2 0 0 0蛋白抗体,研究其与SLE有关指标的关系,以探讨该抗体在SLE发病中的作用。方法:收集SLE患者、非SLE结缔组织病患者和正常人群血清。用Dot-ELISA方法测定抗鸡卵核4 2 0 0 0蛋白抗体及其滴度。结果:116例SLE患者血清有78例检出该抗体,其阳性率为6 8.2 % (78 116 ) ;正常对照人群10 0例未见假阳性;皮肌炎和多发性肌炎(DM PM) 76份、硬皮病(PSS) 4 8份和混合性结缔组织病(MCTD) 88份血清均无交叉反应出现。该抗体的几何平均倒数滴度(GMRT)在活动期高于缓解期,与疾病活动指数和ANA滴度呈显著正相关,与C3呈负相关,与抗ds-DNA抗体滴度无明显相关。结论:血清抗鸡卵核4 2 0 0 0蛋白抗体的检测,对SLE诊断和随访可起到一定的临床提示作用。

诱导分化联合热休克处理对K562细胞JWA和热休克蛋白70表达的影响

目的 研究不同诱导分化剂单独或与热休克联合作用下 ,K562细胞JWA蛋白表达的特点和规律 ,探讨JWA与热休克蛋白 70 (Hsp70 )表达的关系以及可能涉及的信号调节机制。方法 建立诱导K562细胞定向分化以及和热休克联合作用的实验模型 ,用Westernblot方法检测JWA、Hsp70、热休克转录因子 1(HSF1)、HSF2等蛋白表达。结果 (1)佛波酯 (TPA ,10 0、2 0 0ng/ml)或阿霉素 (adri amycin ,4× 10 - 8mol/L)处理细胞 48h后 ,再热休克 (42℃ )处理 2h ,JWA和Hsp70蛋白表达均增加 ;而氯化高铁血红素 (hemin ,3× 10 - 5 mol/L ,48h)、阿糖胞苷 (Ara C ,80ng/ml,48h)和三氧化二砷 (As2 O3,1× 10 - 6 mol/L ,48h)处理后再热休克处理细胞 2h ,则JWA和Hsp70蛋白表达均下调 ;全反式维A酸(ATRA ,1× 10 - 6 mol/L ,48h)处理细胞后 ,再热休克处理 ,则JWA和Hsp70蛋白表达无明显变化。 (2 )不同诱导分化剂处理K562细胞后再热休克处理 ,HSF1和HSF2表达变化均不明显。结论 JWA不但参与K562细胞的诱导分化调节 ,也参与细胞对热应激的调节 ,JWA可能是多种化学诱导分化剂和热休克的共同靶基因。诱导K562细胞分化过程中 ,Hsp70的表达不需要热休克转录因子介导 ,JWA可能是一种与Hsp70信号通路平行的新的信号分子。

酪氨酸蛋白激酶抑制剂对成纤维细胞生长因子诱导的卵巢癌细胞增殖的抑制作用

目的 探讨酪氨酸蛋白激酶抑制剂 (genistein)对酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)诱导的人卵巢癌细胞株CAOV3细胞增殖的抑制作用及其信号传导机制。方法 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 2年 1月以不同水平的aFGF和genistein诱导CAOV3细胞 ,通过细胞计数法、MTT比色法、流式细胞术观察genistein对细胞增殖的抑制作用 ;利用 [γ 3 2 P]ATP掺入外源性底物的方法 ,探讨液体闪烁测定酪氨酸蛋白激酶 (TPK )和蛋白激酶C (PKC)活性的变化。结果 aFGF使该细胞株增殖比明显增加 ,由G0 +G1 期进入S和G2 +M期的细胞明显增多 ;genistein使该细胞株增殖比明显下降 ,由G0 +G1 期进入S和G2 +M期的细胞明显减少。随着aFGF水平的增加 ,CAOV 3细胞TPK ,PKC活性随之升高 ,genistein抑制细胞内TPK ,PKC活性 ,与genistein水平呈剂量依赖效应。 结论 aFGF可能通过TPK途径激活PKC来调控CAOV3细胞增殖 。

甲状旁腺激素和甲状旁腺激素相关蛋白在正常及骨性关节炎软骨中作用机制的研究进展

目的综述在正常和骨性关节炎(osteoarthritis,OA)的关节软骨及软骨下骨中,甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)和甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)的作用机制研究进展。方法广泛查阅近年来有关PTH和PTHrP对正常和OA关节软骨作用机制的文献,并进行总结与分析。结果 PTH和PTHrP可抑制OA软骨细胞的肥大分化及凋亡,促进其增殖,从而对OA软骨细胞起到保护作用;OA软骨下骨成骨细胞对PTH的反应下降。结论 PTH、PTHrP可能通过多种信号通路参与软骨降解和软骨下骨重塑,并对OA进展起到延缓和保护作用。