C-X-C型趋化因子受体4在散发性恶性外周神经鞘瘤患者中的预后价值

背景与目的最近研究表明C-X-C型趋化因子受体4(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)及其配体C-X-C型趋化因子配体12(C-X-C motif chemokine ligand 12,CXCL12)刺激1型神经纤维瘤相关恶性外周神经鞘瘤(malignant peripheral nerve sheath tumor,MPNST)细胞中细胞周期调控蛋白Cyclin D1的表达,并促进其增殖。在本研究中,我们测定了中国患者的散发性MPNST组织中CXCR4、CXCL12和Cyclin D1蛋白的表达,并探讨了它们的预后价值。方法使用免疫组化染色对58例中国散发性MPNST患者样本中的CXCR4、CXCL12和Cyclin D1蛋白表达水平进行评价。采用Kaplan-Meier分析和log-rank检验评价它们的预后价值。采用多因素Cox回归分析确定独立预后因素。结果分别在19(32.8%)例、32(55.2%)例和16(27.6%)例样本中观察到CXCR4、CXCL12和Cyclin D1的高表达。CXCR4表达与CXCL12表达(r=0.334,P=0.010)和Cyclin D1表达(r=0.309,P=0.018)呈正相关。与CXCR4低表达的患者相比,CXCR4高表达的患者总生存期更长(χ~2=4.642,P=0.031)。结论对于散发性MPNST,CXCR4高表达可能表征着其中一种预后较好的特殊亚型。

C-X-C趋化因子受体4增强Toll样受体2在肺炎衣原体感染促进动脉粥样硬化病变形成中的作用

[目的]探究C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)在肺炎衣原体(C.pn)感染促进动脉粥样硬化(As)病变形成中的作用。[方法]以高脂饮食为基础,建立C.pn感染诱导ApoE^(-/-)、ApoE^(-/-)+Toll样受体2(TLR2)^(-/-)、ApoE^(-/-)+TLR2^(-/-)+AMD3100小鼠As模型,ELISA检测ApoE^(-/-)小鼠血清C.pn IgG、IgM抗体水平,PCR检测肺组织C.pn特异性DNA,油红O染色和HE染色观察主动脉及主动脉根部脂质沉积和As病变面积,比色法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平,ELISA检测血清白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)含量。[结果]ApoE^(-/-)小鼠C.pn感染模型成功建立。与对照组相比,C.pn感染后ApoE^(-/-)小鼠主动脉及主动脉根部脂质沉积量增加89.08%和71.83%,As病变面积增加34.12%(均P<0.05);与C.pn感染组相比,TLR2^(-/-)+C.pn感染组主动脉及主动脉根部脂质沉积量减少46.16%和75.73%,As病变面积减少63.37%(均P<0.05);与TLR2^(-/-)+C.pn感染组相比,TLR2^(-/-)+AMD3100+C.pn感染组主动脉及主动脉根部脂质沉积量减少26.19%和56.94%,As病变面积则减少22.24%(均P<0.05)。与对照组相比,C.pn感染后血清TC、TG和LDLC水平分别升高0.62倍、1.43倍和1.34倍,血清IL-1β和IL-6含量分别增加4.10倍和6.00倍(均P<0.05);与C.pn感染组相比,TLR2^(-/-)+C.pn感染组血清TC、TG和LDLC水平分别降低56.96%、50.41%和66.64%,血清IL-1β和IL-6含量分别减少66.72%和69.54%(均P<0.05);与TLR2^(-/-)+C.pn感染组相比,TLR2^(-/-)+AMD3100+C.pn感染组血清TC、TG和LDLC水平分别降低52.18%、58.56%和60.61%,血清IL-1β和IL-6含量分别减少28.84%和43.18%(均P<0.05)。[结论]CXCR4可增强TLR2在升高血脂水平及炎症因子含量中的作用,进而参与C.pn感染诱导的As病变形成。

基质细胞衍生因子1及C-X-C趋化因子受体4和7信号通路在脉络膜新生血管疾病进展中的作用

脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)是新生血管性年龄相关性黄斑变性(neovascular age-related macular degeneration,NVAMD)患者致盲的重要病理改变。调控血管新生的关键分子血管内皮生长因子A通过与其酪氨酸激酶受体结合不仅介导眼正常发育过程中毛细血管丛的定位和结构的重塑,还促进病理性的血管新生和渗漏。而近来的研究明确了另一重要分子基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)通过与其C-X-C趋化因子受体(C-X-C chemokine receptor type,CXCR)4和CXCR7结合,介导内皮祖细胞、巨噬细胞等免疫细胞的趋化作用,通过直接激活内皮细胞中PI3K/AKT/ERK等信号通路,促进内皮细胞增殖、迁移和成管,进而调控病理性脉络膜新生血管的进展,并诱导内皮细胞发生间质化变促进视网膜下纤维化。

左归丸靶向C-X-C趋化因子受体4对人脐带间充质干细胞体外迁移的影响

目的:探讨左归丸通过靶向调控C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)表达对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)体外迁移的影响。方法:采用组织块法分离培养hUC-MSCs并进行流式鉴定。利用CCK-8检测不同浓度左归丸对hUC-MSCs增殖的影响,细胞划痕和Transwell实验分析左归丸对hUC-MSCs体外迁移的影响,实时聚合酶链反应(PCR)、蛋白印迹法和流式细胞术分析hUC-MSCs中CXCR4表达变化。结果:流式细胞术结果显示,hUC-MSCs表面高表达CD73和CD90,极低表达CD34和CD45。CCK-8结果显示,0.1、0.2 mg/mL左归丸均能明显促进hUC-MSCs增殖(P<0.05)。细胞划痕和Transwell实验结果显示,0.1、0.2 mg/mL左归丸能明显促进hUC-MSCs迁移,最佳浓度为0.2 mg/mL,CXCR4拮抗剂普乐沙福则能抑制其促迁移作用(P<0.05)。实时PCR、蛋白印迹法和流式细胞术结果显示,左归丸能上调hUC-MSCs中CXCR4 mRNA和蛋白表达水平,并促进CXCR4蛋白在细胞膜表达(P<0.05)。结论:左归丸通过上调CXCR4表达促进hUC-MSCs的体外迁移。

活动性结核患者单核来源巨噬细胞中C-X-C型趋化因子受体4的表达研究

目 的 研 究 活 动 性 结 核 患 者 单 核 来 源 巨 噬 细 胞 （ monocyte-derived macrophage ,MDM ） C-X-C 型趋化因子受体 4 （ C-X-Cchemokinereceptor4 , CXCR4 ）的表达水平。方法 收集活动性肺结核患者和健康者抗凝血,分离纯化单核细胞并体外培养使其分化为初始型 （ M0 ）巨噬细胞,然后分别用细菌脂多糖 （lipopolysaccharides , LPS ）/干扰素 -γ （ interferonγ , IFN-γ ）和 IL-4 刺激,使其向促炎症型 （ M1 ）型巨噬细胞和抗炎症型 （ M2 ）巨噬细胞极化,收集细胞并提取总 RNA ,荧光定量聚合酶链反应 （ PCR ）检测 CXCR4mRNA 的表达。 T 检验分析两组数据的差异。结果 活动性结核患者和健康者 M1 型 MDM 中 CXCR4 的表达量分别为 0.026±0.009 和 0.034±0.014 ,与健康者相比,活动性结核患者 M1 型 MDM 中 CXCR4 的表达显著降低 （ t =2.064 , P ＜0.05 ）。活动性结核患者和健康者 M2 型 MDM 中 CXCR4 的相对表达量分别为 0.048±0.013 和 0.064±0.019 ,与健康者相比,活动性结核患者 M2 型 MDM 中 CXCR4 的表达显著降低 （ t =2.823 , P ＜0.01 ）。结论 活动性结核患者极化的 MDM 细胞中 CXCR4 的表达降低,提示巨噬细胞 CXCR4 参与结核病的免疫反应。

体外阻断基质细胞衍生因子1/CXC趋化因子受体4信号通路后人关节软骨组织Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达

背景:基质细胞衍生因子1/CXC趋化因子受体4信号通路在骨关节炎的发病中起关键作用。目的:探讨AMD3100体外阻断基质细胞衍生因子1/CXC趋化因子受体4信号通路后对培养的关节软骨组织Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖mRNA表达及Ⅱ型胶原蛋白表达的影响。方法:将骨关节炎软骨和创伤性截肢患者正常软骨分别分为3个小组即实验组,实验对照组,空白对照组。将其置于含基质细胞衍生因子1和AMD3100,含基质细胞衍生因子1和MAB310,只含基质细胞衍生因子1的培养液培养。结果与结论:实验组软骨组织内的Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖mRNA表达量、Ⅱ型胶原蛋白含量高于实验对照组和空白对照组(P<0.05)。可见基质细胞衍生因子1通过基质细胞衍生因子1/CXC趋化因子受体4信号通路诱导人关节软骨中Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的降解;AMD3100可阻断该信号通路及减少软骨中Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的降解,延缓关节软骨组织的退变;AMD3100不能使已退变的骨关节炎软骨内的Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖含量恢复到正常水平。

趋化因子CXCL12及其受体CXCR4与造釉型颅咽管瘤侵袭、复发的相关性研究

目的探讨趋化因子及其受体(CXCL12/CXCR4)在造釉细胞型颅咽管瘤中的表达并分析其与肿瘤侵袭、复发的相关性。方法应用免疫组化法和western blot方法对20例造釉细胞型颅咽管瘤标本(原发组11例,复发组9例)中CXCL12/CXCR4的表达进行检测。结果 CXCL12/CXCR4在复发组造釉细胞型颅咽管瘤中的阳性表达明显高于原发组(P<0.05)。结论 CXCL12/CXCR4可能在造釉细胞型颅咽管瘤侵袭、复发过程中起重要的作用。CXCL12/CXCR4可能成为评价造釉细胞型颅咽管瘤侵袭性生长和复发的标记物。

加味四君子汤对lewis肺癌小鼠缺氧诱导因子-1α基因CXC型趋化因子受体4基因及D-木糖的影响

目的探讨加味四君子汤对肺癌小鼠可能作用机制及肺癌对小鼠消化系统的影响。方法建立小鼠Lewis肺癌模型,模型成功建立后,加味四君子汤灌胃14 d,第15天脱颈椎处死小鼠,取肿瘤组织采用Realtime PCR方法检测缺氧诱导因子-1α基因(HIF-1α)、CXC型趋化因子受体4基因(CXCR4)的表达;取血清采用间苯三酚法检测D-木糖。结果加味四君子汤干预lewis肺癌小鼠后,肺癌健脾组与肺癌组的HIF-1α、CXCR4mRNA有统计学意义(P<0.01);肺癌组和肺癌健脾组与正常组相比均有统计学意义(P<0.01)。结论加味四君子汤对肺癌有抑制作用,肺癌能降低小鼠消化吸收功能。

分泌型卷曲相关蛋白5、CXC趋化因子受体4、8-异构前列腺素水平与支气管哮喘病儿气道炎症、气道重塑的关系

目的探究支气管哮喘病儿血清分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)、8-异构前列腺素(8-iso PG)水平与气道炎症、气道重塑的关系及联合评估病情程度的价值。方法选取2018年1月至2020年8月攀枝花市中心医院收治的支气管哮喘病儿113例作为研究对象,按照病情程度分为轻度组、中度组、重度组,比较三组一般资料、血清SFRP5、CXCR4、8-iso PG水平、气道炎症指标[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性人基质裂解素2(sST2)、白细胞介素-17(IL-17)]、气道重塑指标[痰液转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、骨桥蛋白(OPN)],分析血清SFRP5、CXCR4、8-iso PG与气道炎症、气道重塑指标及病情程度的关系,评价血清SFRP5、CXCR4、8-iso PG对病情程度的评估价值。结果ACT评分、FEV_(1)占预估值、PEF占预估值、FEV_(1)/FVC:重度组<中度组<轻度组(P<0.05);重度组血清CXCR4、8-iso PG水平分别为(10.69±3.56)μg/L、(37.58±12.14)ng/L,高于中度组[(5.34±1.77)μg/L、(24.19±8.06)ng/L]和轻度组[(2.16±0.72)μg/L、(16.32±5.40)ng/L],且中度组血清CXCR4、8-iso PG高于轻度组(P<0.05);重度组血清SFRP5为(6.05±1.93)μg/L,低于中度组[(8.56±2.05)μg/L]、轻度组[(10.63±2.11)μg/L],且中度组血清SFRP5低于轻度组(P<0.05);血清TNF-α、sST2、IL-17、TGF-β1、MMP-9、OPN:重度组>中度组>轻度组(P<0.05);在调整ACT评分、FEV_(1)占预估值、PEF占预估值、FEV_(1)/FVC、气道炎症、气道重塑指标等其他因素后,血清SFRP5、CXCR4、8-iso PG仍与支气管哮喘病儿病情程度显著关联(P<0.05);ROC分析显示:血清SFRP5、CXCR4、8-iso PG及其联合应用对支气管哮喘病儿病情程度的评估价值,AUC(95%CI)分别为0.72(0.51,0.94)、0.81(0.69,0.93)、0.75(0.51,0.99)、0.87(0.83,0.92)。结论血清SFRP5、CXCR4、8-iso PG可通过调控支气管哮喘气道炎症、气道重塑,影响病情程度,联合检测三者水平有望为病情程度的评估提供一种新的方法。

RON蛋白与CXC趋化因子受体4蛋白的表达与去势抵抗型前列腺癌患者阿比特龙耐药的相关性

目的:研究受体酪氨酸激酶(RON)蛋白与CXC趋化因子受体4(CXCR4)蛋白的表达与去势抵抗型前列腺癌(CRPC)患者阿比特龙耐药的相关性。方法:选取2017年1月至2020年2月我院收治的127例接受阿比特龙治疗的CRPC患者,根据是否耐药分为观察组(n=32,阿比特龙耐药患者)、对照组(n=95,缓解患者)。采用免疫组化与蛋白免疫印迹检测比较两组RON、CXCR4蛋白表达,采用Logistic回归分析进行RON、CXCR4蛋白与耐药的单因素、多因素分析,采用受试者工作特征曲线(ROC)及ROC下面积(AUC)分析RON、CXCR4蛋白预测耐药的价值,并在阿比特龙耐药细胞株中加入RON、CXCR4抑制剂,观察两者对阿比特龙耐药细胞凋亡指标[半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-9、细胞凋亡率]的影响。结果:免疫组化显示,观察组RON阳性表达率(71.88%,23/32)较对照组(27.37%,26/95)高;观察组CXCR4阳性表达率(65.63%,21/32)较对照组(12.63%,12/95)高;蛋白免疫印迹检测显示,观察组RON、CXCR4蛋白较对照组高(P<0.05);RON、CXCR4蛋白与耐药均呈正相关(P<0.05);加入RON、CXCR4抑制剂后,RON、CXCR4表达被成功抑制,且caspase-3、caspase-9、细胞凋亡率均高于阿比特龙耐药细胞株(P<0.05);Transwell实验检测细胞迁移及侵袭显示,抑制RON、CXCR4表达,细胞迁移及侵袭细胞数目均显著降低(P<0.05);RON蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.789,截断值>4.11,敏感度为84.37%,特异度为61.05%(P<0.05);CXCR4蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.825,截断值>3.42,敏感度为75.00%,特异度为80.00%(P<0.05);RON+CXCR4蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.884(95%CI:0.815~0.934),敏感度为87.50%,特异度为83.16%(P<0.05)。结论:CRPC患者RON、CXCR4蛋白表达显著增加,与患者阿比特龙耐药密切相关,有望成为预测耐药的标志物,抑制RON、CXCR4蛋白表达,可促进CRPC阿比特龙耐药细胞的凋亡。

布比他丁促进大鼠骨髓间充质干细胞CXC型趋化因子受体4膜向分布及迁移能力的研究

目的:研究药物布比他丁(Blebbistatin)能否调节大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)表面CXC型趋化因子受体4(CXC chemokine receptor type 4,CXCR4)向胞膜分布,从而促进大鼠BMSCs的迁移。方法:分离培养SD大鼠BMSCs,Blebbistatin处理细胞15、30、45、60min,设置对照组;流式细胞术测定细胞表面CXCR4表达;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;测定成骨诱导前期培养基碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,待诱导完成进行茜素红染色。结果:处理组细胞表面CXCR4表达率明显升高(P<0.01),且呈时间依赖性;15、30和60min组细胞迁移效率升高(P<0.01)。成骨诱导期间各组间ALP活性比较差异无统计学意义,诱导至21d时各组均形成大量钙化结节。结论:Blebbistatin能促进BMSCs表面CXCR4向胞膜分布,并能提高BMSCs的迁移效率。

甲状腺癌组织中CXC趋化因子受体4表达意义及对老年分化型甲状腺癌预后的预测价值

目的探讨甲状腺癌组织中CXC趋化因子受体4(CXCR4)表达意义及对老年分化型甲状腺癌(DTC)预后的预测价值。方法回顾性分析2017年3月-2019年3月上海市浦东医院收治的60例老年DTC患者的临床资料,收集患者在根治术治疗中切除的甲状腺癌组织及配对癌旁组织,采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测组织中CXCR4 mRNA相对表达量情况。随访18个月,统计患者预后情况。依据预后情况分为预后不良组和预后良好组,对比2组的临床资料。采用Logistic回归分析老年DTC患者预后的影响因素;制作受试者工作特征曲线(ROC),分析CXCR4对老年DTC患者预后的预测价值。结果甲状腺癌组织CXCR4 mRNA相对表达量水平高于癌旁组织(P<0.05);老年DTC患者预后不良发生率为13.33%(8/60);预后不良组临床分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移构成比及甲状腺球蛋白、促甲状腺素、CXCR4 mRNA相对表达量水平高于预后良好组(P<0.05)。Logistic多因素分析回归结果显示,甲状腺球蛋白、CXCR4为影响老年DTC患者预后的影响因素(P<0.05);ROC分析显示,CXCR4评估老年DTC患者预后的最佳截断点为1.05,灵敏度为75.00%,特异度为88.46%,曲线下面积(AUC)值为0.815。结论CXCR4在老年DTC患者甲状腺癌组织中异常高表达,对预测老年DTC患者预后有较高临床应用价值。

C-X-C型趋化因子受体7与乳腺癌关系的研究进展

近年来,C-X-C型趋化因子受体7(CXCR7)是乳腺癌靶向治疗领域的研究热点之一,通过与配体结合介导下游信号转导,调控乳腺癌生物学行为。研究发现,CXCR7与乳腺癌的恶性进展密切相关,可能是预测患者不良预后的重要生物标志物。但目前CXCR7影响乳腺癌发生、发展的作用机制仍存在很大争议,深入研究其对肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭、转移的复杂作用有望为乳腺癌的个体化精准治疗提供潜在靶点。本文主要就CXCR7的结构、功能及其与乳腺癌关系的研究进展作一综述,并探讨其作为临床预后指标和抗肿瘤靶点的应用前景。

CXCR4 MFAP2 KLF4在分化型甲状腺癌中的表达及对预后的预测价值研究

目的:研究趋化因子4受体(CXCR4)、微纤维相关蛋白2(MFAP2)、Krüppel样因子4(KLF4)在分化型甲状腺癌(DTC)中的表达及对预后的预测价值。方法:选择我院2019年7月至2020年7月收治的113例DTC患者,术中留取其肿瘤组织及癌旁正常组织。采用蛋白免疫印迹法检测DTC组织及癌旁正常组织中CXCR4、MFAP2、KLF4表达水平,分析CXCR4、MFAP2、KLF4表达水平与DTC临床病理特征的关系。对DTC患者进行3年随访,统计3年总生存情况,比较死亡组与存活组CXCR4、MFAP2、KLF4表达水平,采用ROC曲线分析CXCR4、MFAP2、KLF4对DTC预后的预测价值,采用Cox回归模型进行DTC预后单因素和多因素分析。结果:与癌旁正常组织比较,DTC组织CXCR4、MFAP2蛋白表达量显著升高(P<0.05),KLF4蛋白表达量显著降低(P<0.05)。TNM分期Ⅲ期、发生淋巴结转移、肿瘤低分化者CXCR4、MFAP2蛋白表达量显著高于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、肿瘤中高分化者(P<0.05),TNM分期Ⅲ期、发生淋巴结转移、肿瘤低分化者KLF4蛋白表达量显著低于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、肿瘤中高分化者(P<0.05)。113例DTC患者随访3年期间失访8例,最终获得随访者105例。死亡组患者CXCR4、MFAP2蛋白表达量显著高于存活组(P<0.05),KLF4蛋白表达量显著低于存活组(P<0.05)。绘制ROC曲线发现,CXCR4、MFAP2、KLF4单独或联合预测DTC预后的AUC(95%CI)分别为0.692(0.562~0.823)、0.729(0.590~0.869)、0.766(0.622~0.910)、0.832(0.690~0.975),联合预测的效能显著优于单项检测(P<0.05)。Cox回归分析显示,淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、CXCR4表达升高、MFAP2表达升高、KLF4表达降低是DTC预后的危险因素(P<0.05)。结论:分化型甲状腺癌患者肿瘤组织中CXCR4、MFAP2呈高表达,KLF4呈低表达,其表达水平与淋巴结转移、肿瘤分化程度、TNM分期及3年总生存率相关,三者联合检测有助于预测分化型甲状腺癌预后。

趋化因子受体CXCR4在乳腺癌骨转移患者乳腺组织中的表达水平及其临床意义

目的探讨趋化因子(C-X-C基序)受体4(CXCR4)在乳腺癌骨转移患者乳腺组织中的表达水平及其临床意义。方法收集正常乳腺组织(正常对照组)、乳腺癌无骨转移乳腺组织(乳腺癌无骨转移组)、乳腺癌骨转移乳腺组织(乳腺癌骨转移组)各100例。采用逆转录PCR方法检测乳腺组织的CXCR4 mRNA表达情况,采用免疫组织化学法检测乳腺组织CXCR4的阳性表达情况,比较3组研究对象乳腺组织CXCR4的阳性表达情况和CXCR4 mRNA相对表达量,分析乳腺癌患者乳腺癌组织CXCR4的阳性表达情况与临床病理特征的关系。结果3组研究对象乳腺组织CXCR4的阳性表达情况,差异具有统计学意义(P<0.05),乳腺癌骨转移组患者乳腺组织CXCR4的阳性表达情况最强。乳腺癌患者乳腺癌组织CXCR4的阳性表达情况与糖类抗原153、雌激素受体、孕激素受体、人类表皮生长因子2、肿瘤原发灶大小无关(均P>0.05),而与细胞核相关抗原(Ki-67)、肿瘤分期相关(均P<0.05)。乳腺组织的CXCR4 mRNA的相对表达量由高到低为乳腺癌骨转移组>乳腺癌无骨转移组>正常对照组(均P<0.05)。结论CXCR4在乳腺癌组织中的表达升高,且在乳腺癌骨转移患者乳腺组织中的表达更高,其有可能成为乳腺癌骨转移治疗的新靶点。

紫草素通过上调C-X-C基序趋化因子受体4促进细胞自噬加快糖尿病创面愈合的机制研究

目的:探讨紫草素是否通过上调C-X-C基序趋化因子受体4(CXCR4)的表达调控细胞自噬促进糖尿病大鼠创面愈合。方法:将24只Sprague-Dawley(SD)大鼠按照随机数字表法分成4组:对照组、糖尿病组、糖尿病+紫草素组和糖尿病+紫草素+干扰CXCR4的短发卡RNA(sh-CXCR4)组,每组6只。通过腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病大鼠模型,利用直径为1 cm的皮肤打孔器在大鼠背部建立溃疡模型。分别于创伤后第0、7、14和21天计算创面愈合率。于创伤后第21天,采集皮肤组织,进行HE染色和Masson染色分析创面病理变化,采用CD31免疫组织化学法分析创面微血管密度以及Western blotting法检测创面组织CXCR4和细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1和可溶性p62蛋白的相对表达量,透射电镜观察自噬小体。组间比较采用单因素方差分析。结果:与对照组相比,糖尿病组大鼠创面愈合率(第21天分别为72.44%±6.21%和93.71%±6.76%)、创面组织新生血管和胶原沉积、微血管密度以及创面组织中CXCR4和细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1水平及自噬小体数量降低,而p62水平升高,差异均具有统计学意义( P<0.05)。与糖尿病组比较,糖尿病+紫草素组大鼠创面愈合率(第21天分别为86.74%±4.86%和72.44%±6.21%)、创面组织新生血管、胶原沉积情况、微血管密度、创面组织中CXCR4和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1水平及自噬小体数量升高,而p62水平降低,差异均具有统计学意义( P<0.05)。与糖尿病+紫草素组比较,糖尿病+紫草素+sh-CXCR4组大鼠创面愈合率(第21天分别为76.15%±3.85%和86.74%±4.86%)、创面组织新生血管、胶原沉积情况、微血管密度、创面组织中CXCR4、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1水平及自噬小体数量降低,而p62水平升高,差异具有统计学意义( P<0.05)。 结论:紫草素通过上调CXCR4的表达并激活细胞自噬,促进糖尿病溃疡创面的愈合。

血清FGFR-4、CCL11、CA125检测对分化型甲状腺癌的诊断价值

目的探究血清成纤维生长因子受体4(FGFR-4)、嗜酸性粒细胞趋化因子(CCL11)、糖类抗原(CA125)检测对分化型甲状腺癌的诊断价值。方法选取2019年2月至2023年2月来我院治疗的133例确诊为分化型甲状腺癌的患者为观察组,选同期来我院治疗的108例甲状腺良性病变患者为良性病变组,另选取同期来我院体检的120例健康者为对照组。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清FGFR-4、CCL11水平,采用电化学发光法测定CA125水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清FGFR-4、CCL11、CA125水平对分化型甲状腺癌的诊断价值。结果甲状腺癌组和良性病变组患者血清FGFR-4、CCL11、CA125水平与对照组相比均显著升高,且甲状腺癌组与良性病变组相比均显著升高(P<0.05);甲状腺癌组患者手术后血清FGFR-4、CCL11、CA125水平均显著下降(P<0.05);血清FGFR-4、CCL11、CA125水平在低分化、有淋巴结转移、III+IV期患者中的水平显著升高(P<0.05);血清FGFR-4、CCL11、CA125诊断分化型甲状腺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.793、0.808、0.647,3项联合诊断的AUC为0.867,3项联合诊断优于各个指标单独诊断(Z_(二者联合vs FGFR-4)=2.334、Z_(二者联合vs CCL11)=1.966、Z_(二者联合vs CA125)=5.132,P=0.020、0.048、0.000)。结论分化型甲状腺癌患者血清FGFR-4、CCL11、CA125水平均上调,且血清FGFR-4、CCL11、CA125水平与分化程度、淋巴结转移情况以及TNM分期有关,3项联合诊断分化型甲状腺癌具有更高的诊断价值。

NONHSAT248596.1内源性竞争miR-146a-5p调控骨关节炎软骨退变的机制

背景:目前已有针对lncRNA\miRNA\mRNA的共表达网络对骨关节炎发生发展调控机制的研究,课题组前期研究已通过数据库筛选出符合条件的NONHSAT248596.1和miR-146a-5p,尚缺乏体内实验来验证上述调控机制。目的:探究NONHSAT248596.1在基质细胞衍生因子1/4型趋化因子受体轴介导体内骨关节炎软骨退变进程中对miR-146a-5p发挥的竞争性内源性RNA调控作用。方法:取36只新西兰兔,通过向右侧后肢膝关节注射基质细胞衍生因子1溶液建立骨关节炎模型,采用随机数字表法分4组,lncRNA组、miRNA组、ceRNA组、对照组分别向造模膝关节内注射NONHSAT248596.1过表达的慢病毒载体、miR-146a-5p过表达的慢病毒载体、miR-146a-5p+NONHSAT248596.1过表达的慢病毒载体及空慢病毒载体。造模第4,8,12周,取膝关节软骨组织和软骨下骨组织进行相关检测。结果与结论:①苏木精-伊红与番红O固绿染色显示,4组软骨组织都有不同程度的退变表现,造模第4周时,lncRNA组软骨组织中的软骨细胞肿胀、细胞极性消失,细胞外基质破坏,出现表层糜烂、裂缝形成和软骨组织局部或全层缺失,并随时间延长软骨损伤程度逐渐加重,4组中miRNA组关节软骨炎症进展最缓慢;②qRT-PCR检测显示,相同时间点下,lncRNA组软骨组织中NONHSAT248596.1、4型趋化因子受体、基质金属蛋白酶3,9及13的mRNA表达量高于其他3组(P<0.05),miR-146a-5p、聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的mRNA表达量低于其他3组(P<0.05);造模后第8,12周,miRNA组软骨组织中的NONHSAT248596.1、4型趋化因子受体、基质金属蛋白酶3,9及13的mRNA表达量低于ceRNA组、对照组(P<0.05),miR-146a-5p、聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原的mRNA表达量高于ceRNA组、对照组(P<0.05);③Western Blot检测显示,相同时间点下,lncRNA组软骨组织中的聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原蛋白表达量始终低于其他3组(P<0.05);miRNA组造模后第8,12周软骨组织中的聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原蛋白表达量高于ceRNA组、对照组(P<0.05);④结果表明,miR-146a-5p作为NONHSAT248596.1的作用靶点会受到其竞争性内源性RNA的作用造成活性被抑制,NONHSAT248596.1作用于miR-146a-5p后调控基质细胞衍生因子1/4型趋化因子受体轴,影响骨关节炎软骨组织中基质金属蛋白、Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖的表达,造成细胞外基质的降解及蛋白多糖的丢失。

血清CXCR4水平与颅内动脉粥样硬化性狭窄的相关性研究

目的探讨血清中C-X-C基序趋化因子受体4(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)水平与颅内动脉粥样硬化性狭窄(intracranial atherosclerotic stenosis,ICAS)的关系。方法该研究为病例对照研究。连续性纳入自2022年3月至2023年4月于北京医院神经内科住院治疗的缺血性脑血管病患者。应用颅内动脉检查(MRA、CTA或DSA)评估患者颅内动脉粥样硬化情况,将患者分为ICAS组(颅内动脉狭窄≥50%)和对照组(颅内动脉狭窄<50%),检测两组患者的血清CXCR4水平,通过多因素分析探讨CXCR4水平与ICAS的相关性。根据颅内动脉狭窄程度将ICAS组患者进一步分为中度狭窄组(50%≤颅内动脉狭窄<70%)及重度狭窄组(70%≤颅内动脉狭窄≤100%),比较各组间CXCR4水平的差异。结果共纳入患者264例,其中ICAS组173例〔男125例;年龄(69.05±11.06)岁〕,对照组91例〔男56例;年龄(66.96±11.12)岁〕。ICAS组CXCR4水平高于对照组〔(320.00±46.90)ng/L比(304.00±51.54)ng/L,t=2.472,P=0.014〕。校正相关混杂因素后,Logistic回归分析结果提示CXCR4水平升高〔OR(95%CI):1.007(1.002~1.013),P=0.011〕是ICAS的独立影响因素。ICAS中、重度狭窄组及对照组间CXCR4水平差异有统计学意义(F=5.527,P=0.004),且ICAS重度狭窄组患者血清中CXCR4水平明显高于对照组〔(324.82±45.87)ng/L比(304.00±51.54)ng/L,t=3.132,P=0.002〕及ICAS中度狭窄组〔(324.82±45.87)ng/L比(307.47±47.72)ng/L,t=2.118,P=0.035〕。结论血清CXCR4水平在ICAS患者中升高是ICAS的独立影响因素,有作为评估ICAS潜在生物标志物的潜力。