CYP2C19和ABCB1 C3435T基因多态性与氯吡格雷给药后ADP抑制率的关系

目的 分析CYP2C19和ABCB1 C3435T基因多态性与氯吡格雷个体化给药后二磷酸腺酐(ADP)抑制率的关系。方法 选取2017年12月—2021年1月中山大学附属第五医院神经内科和脑血管病科确诊的脑梗死或短暂性脑缺血并服用氯吡格雷抗血小板治疗的住院患者138例,所有患者均给予氯吡格雷75 mg治疗7 d后,检测患者ADP抑制率,同时利用荧光原位杂交法,检测患者CYP2C19和ABCB1 C3435T基因多态性,分析基因多态性与ADP抑制率的关系。结果 男性患者与女性患者对氯吡格雷的反应性存在显著差异(χ^(2)=6.807,P=0.033),男性患者ADP抑制率高于女性患者(t=2.686,P=0.008)。CYP2C19超快代谢型、快代谢型、中间代谢型和慢代谢型的ADP抑制率差异无统计学意义(F=1.129,P=0.340)。CYP2C19*1/*17型、*1/*1型、*1/*2型、*1/*3型、*2/*2型和*2/*3型的ADP抑制率有逐步下降的趋势,但差异无统计学意义(F=1.756,P=0.126),组间两两比较显示,*1/*1型的ADP抑制率高于*2/*2型(t=2.257,P=0.036)。ABCB1 C3435T的CC型、CT型和TT型的ADP抑制率比较差异无统计学意义(F=0.555,P=0.576)。CYP2C19快代谢型、中间代谢型和慢代谢型中ABCB1 C3435T不同基因型(CC型、CT型和TT型)的ADP抑制率比较差异均无统计学意义(F/P=0.192/0.826、0.525/0.594、0.666/0.540)。男性患者与女性患者在CYP2C19各代谢型中的分布无显著差异(U=2 146.50,P=0.608)。结论 在氯吡格雷个体化治疗中,CYP2C19基因多态性与ADP抑制率存在一定的相关性,ABCB1 C3435T基因多态性与ADP抑制率无相关性。

蛋白激酶C相互作用蛋白1基因敲除诱导神经元氧化应激

目的 研究蛋白激酶C相互作用蛋白1(PICK1)敲除对神经元氧化应激反应的影响,从而明确PICK1在神经元氧化应激反应中的作用。方法 剪取小鼠尾巴1 cm,匀浆后提取DNA和蛋白质,利用PCR和Western blot鉴定野生型小鼠和PICK1敲除鼠的基因型。利用ELISA检测试剂盒,检测野生型和PICK1敲除小鼠脑组织中活性氧簇(ROS)和谷胱甘肽(GSH)的水平。硝基酪氨酸(Nitrotyrosine)是氧化损伤标志因子,利用Western blot及免疫荧光染色方法,检测小鼠脑内Nitrotyrosine与神经元的标记物MAP2。结果 成功鉴定出野生型鼠、PICK1基因杂合子小鼠和纯合子小鼠。PICK1敲除小鼠脑内的氧化应激因子ROS (P<0.05)和Nitrotyrosine水平显著升高(P<0.05),而抗氧化应激因子GSH明显下降(P<0.05)。Nitrotyrosine与MAP2免疫荧光共染结果显示,PICK1敲除的小鼠中神经元细胞存在氧化损伤。结论 PICK1基因敲除导致了小鼠神经元的氧化应激反应,提示PICK1可能是抑制神经元氧化应激的一个靶点。

华法林相关基因CYP2C9、VKORC1、CYP4F2的多态性分布

目的研究CYP2C9、VKORC1、CYP4F2基因多态性在陕西省宝鸡地区汉族人群中的分布情况,为华法林个体化用药提供遗传依据。方法选取2022年1月至2023年5月在宝鸡市中医医院心内科接受华法林治疗并进行相关基因检测的住院患者475例,采用飞行时间质谱仪对华法林药物相关基因CYP2C9、VKORC1、CYP4F2分别进行检测,然后对检测结果的基因多态性进行分析。结果华法林药物相关各基因分布频率符合Hardy-Weinberg equilibrium规律,475例患者VKORC1基因型分别是AA型、AG型、GG型,基因频率分别为83.79%,15.58%,0.63%;CYP2C9基因型分别是*1/*1型、*1/*3型、*1/*2型,基因频率分别为95.17%,4.74%,0.11%,未检出*2/*2、*2/*3、*3/*3基因型;CYP4F2基因型分别是*1/*1型、*1/*3型、*3/*3型,基因频率分别为52.40%,39.37%,8.21%。各基因型分布在患者不同性别、年龄之间无统计学差异。结论陕西宝鸡地区汉族人群华法林药物基因VKORC1(c.-1639G>A)以变异型为主,包括纯合变异和杂合变异,而CYP2C9(*1、*2、*3)和CYP4F2(*1,*3)以野生型为主。

肿瘤转移相关基因1、血管内皮生长因子C在肺癌术前评估中的价值分析

目的探讨肿瘤转移相关基因1(MTA1)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)检测在肺癌患者术前分期及淋巴结转移中的评估价值。方法我院收治的203例接受手术治疗的肺癌患者,比较肿瘤组织及癌周正常组织MTA1、VEGF-C表达阳性率,采用Spearman相关性分析MTA1与VEGF-C表达的关系,不同临床资料患者MTA1、VEGF-C阳性表达率,采用Logistics回归分析肺癌患者淋巴结转移影响因素,比较不同淋巴结转移情况肺癌患者肿瘤组织MTA1、VEGF-C表达量,采用ROC曲线获取MTA1、VEGF-C诊断肺癌淋巴结转移表达量截断值并判断诊断价值。结果肿瘤组织MTA1、VEGF-C表达阳性率高于癌周正常组织(P<0.05),MTA1与VEGF-C表达阳性正相关(P<0.05),肿瘤中低分化的MTA1、VEGF-C阳性表达占比均高于肿瘤高分化,术前ⅢA期MTA1、VEGF-C阳性表达占比均高于术前Ⅰ期,淋巴结转移的MTA1、VEGF-C阳性表达占比均淋巴结未转移(P<0.05)。MTA1、VEGF-C表达阳性为肺癌患者淋巴结转移的独立危险因素(P<0.05),淋巴结转移患者肿瘤组织MTA1、VEGF-C表达量高于淋巴结未转移患者(P<0.05)。MTA1、VEGF-C对肺癌淋巴结转移AUC为0.837、0.819,均具有良好诊断效能(P<0.05)。结论MTA1与VEGF-C互相影响,在肺癌组织发生发展过程中发挥重要作用,MTA1、VEGF-C表达阳性提示患者存在较高淋巴结转移风险,通过检测MTA1、VEGF-C表达量有助于判断肺癌患者淋巴结转移。

CACNA1C基因突变儿童2例的临床及分子遗传学研究

本研究选取1例5岁5个月男性患儿,因“间断抽搐1年余”就诊,心电图检查提示QT间期延长,合并房室传导阻滞,可疑长QT综合征;另1例2岁3个月女性患儿,因“无明显诱因的发作性惊恐、抽搐伴发热”就诊,查体:小下颌、双眼内斜,脑电图异常,合并肌张力减低、运动、语言运动发育迟滞;2例患儿均完善了基因检测,例1结果提示CACNA1C基因存在c.1204G>A(p.G402S)新发杂合变异,诊断Timothy综合征,给予普萘洛尔治疗,后自行停药后猝死;例2结果提示CACNA1C基因存在c.1841T>C(p.L614P)新发杂合变异,给予抗癫痫治疗,随访仍有运动与语言发育迟滞。以上2例患儿的特征性表现同一基因引起的不同临床表型,均为罕见疾病,临床诊疗中需多加注意。

TRPC1基因敲除小鼠心肌梗死组织纤维化指标表达变化

目的 观察瞬时受体电位通道C1(TRPC1)敲除的心肌梗死小鼠心肌纤维化指标变化。方法 野生型小鼠与TRPC1基因缺陷(TRPC1^(-/-))小鼠各20只,分为野生对照组、野生实验组、TRPC1^(-/-)对照组、TRPC1^(-/-)实验组,每组10只。野生实验组和TRPC1^(-/-)实验组结扎冠状动脉左前降支并缝合,制作心肌梗死模型;野生对照组和TRPC1^(-/-)对照组只穿线,不结扎。24 h后处死小鼠,获取心脏,对照组小鼠取左心室正常组织,实验组取左心室前壁梗死组织,采用RT-PCR法检测TRPC1 mRNA,采用Western blotting法检测TRPC1蛋白及纤维化指标Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)。结果 野生实验组TRPC1 mRNA表达高于TRPC1^(-/-)实验组,野生对照组TRPC1 mRNA表达高于TRPC1^(-/-)对照组(P均<0.05);野生实验组TRPC1蛋白表达高于野生对照组和TRPC1^(-/-)实验组,TRPC1^(-/-)实验组TRPC1蛋白表达高于TRPC1^(-/-)对照组(P均<0.05)。野生实验组Col-Ⅰ、α-SMA蛋白表达高于野生对照组和TRPC1^(-/-)实验组,野生对照组Col-Ⅰ、α-SMA蛋白表达高于TRPC1^(-/-)对照组,TRPC1^(-/-)实验组Col-Ⅰ、α-SMA表达高于TRPC1^(-/-)对照组(P均<0.05)。结论 敲低TRPC1基因表达可下调心肌梗死小鼠心肌纤维化指标的表达。

小鼠内耳发育过程中C1ql1基因的表达特点

目的 探究C1ql1基因在不同发育阶段小鼠耳蜗细胞中的表达特点及在内耳发育中的作用。方法 选取出生后1 d(P1)、7 d(P7)、14 d(P14)、28 d(P28)、56 d(P56)的KM小鼠各6只进行耳蜗基底膜铺片、耳蜗中轴冷冻切片及免疫荧光染色,采用共聚焦显微镜观察不同发育阶段小鼠耳蜗中C1ql1基因的表达特点,通过逆转录聚合酶链反应、Western blot检测不同发育阶段小鼠耳蜗中C1ql1基因的表达量变化。结果 发育期小鼠耳蜗螺旋神经节细胞、毛细胞中C1ql1基因表达量随年龄增长逐渐增加。P1小鼠耳蜗无C1QL1蛋白条带,P7、P14、P28、P56小鼠耳蜗C1QL1蛋白条带均可清晰显影。P1小鼠C1QL1蛋白未明确表达,P7平均光密度值与P14、P28、P56比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。P14、P28、P56平均光密度值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。C1ql1基因在听觉发育关键期小鼠耳蜗听神经纤维有一过性表达,出生后7 d表达最高,成年后消失。结论 C1ql1基因在小鼠耳发育和听觉功能形成过程中起着重要作用。

GP1BA、PTGS1、LTC4S、ITGB3基因多态性检测指导阿司匹林使用

目的对陕西宝鸡地区阿司匹林药物相关基因的基因型分布进行回顾性分析,明确与阿司匹林药物相关基因的突变率。方法选取2022年1月至2023年5月在宝鸡市中医医院心内科接受阿司匹林治疗并进行相关基因检测的住院患者475例,采用飞行时间质谱仪对阿司匹林药物相关的4个基因[血小板膜糖蛋白Ⅰbα多肽(GP1BA)基因、前列腺素内过氧化物合酶1(PTGS1)基因、白三烯C4合酶(LTC4S)基因、糖蛋白Ⅲa(ITGB3)基因]进行检测,然后进行基因多态性分析。结果各基因分布频率符合Hardy-Weinberg平衡定律,GP1BA c.482C>T基因型分布频率CC>CT>TT,ITGB3 c.176T>C基因型分布频率TT>TC>CC,PTGS1 c.-842A>G基因型分布频率AA>AG>GG,LTC4S c.-444A>C基因分布频率AA>AC>CC;不同性别、年龄的各基因型分布比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对阿司匹林药物治疗患者进行阿司匹林药物相关基因检测,可以为临床医生对患者制订个体化治疗方案提供辅助性的指导,具有重要的临床价值。

HUWE1基因突变合并KDM5C基因突变导致X连锁的智力障碍1例

报道1例HUWE1基因突变合并KDM5C基因突变导致X连锁的智力障碍患者的临床资料,并进行文献复习。

鲤多拷贝基因MRC1的全基因组鉴定及表达分析

甘露糖受体C1型基因(mannose receptor C-type 1,MRC1)是C型凝集素超家族的成员之一,其编码的甘露糖受体是一种模式识别受体,在先天免疫反应中发挥关键作用。MRC1基因在哺乳动物免疫反应中的作用被广泛研究,但在鱼类中的研究较少。近年来,随着高密度集约化养殖模式的发展,由病原微生物引发的疾病频繁暴发,其中,嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是常见的致病菌之一。本研究首次在鲤(Cyprinus carpio)全基因组范围鉴定MRC1基因,共发现11个基因拷贝,并进行了功能域预测、共线性分析、多序列比对和系统进化分析,结果表明,MRC1基因在物种进化过程中保守程度较高。拷贝数比较分析发现,MRC1基因在不同物种中表现出不同程度的多拷贝现象,在多数鱼类中发现2个拷贝,而在鲤中发现多达11个拷贝。同时,比较了各拷贝在健康鲤脑、肌肉、肝脏和脾脏组织中的表达情况,发现在免疫相关组织脾脏中的表达量相对高于其他组织。进一步对感染嗜水气单胞菌4、12、24 h后在鲤脾脏中的表达进行差异比较分析,发现不同拷贝的表达特征各有差异,其中,HHLG13g0734在感染嗜水气单胞菌4 h后表达显著上调,HHLG13g0734在感染24h后表现出极显著上调,HHLG3g0497在整个感染过程中表达显著下调,表明鲤MRC1基因只有部分拷贝保留了免疫相关功能及参与机体的免疫反应。本研究结果有助于进一步了解鲤MRC1基因在抵抗嗜水气单胞菌感染过程中发挥的免疫功能,并为分子选育抗病新品系提供一定的数据基础。

AGTR1 (A1166C)基因多态性与脑梗死预后的相关性分析

目的:探究血管紧张素II-1型受体(AGTR1) (A1166C)基因多态性与脑梗死风险因素及预后相关性,为进一步推动脑梗死的二级预防以及治疗提供依据。方法:选取2021年4月至2021年8月期间就诊于北华大学附属医院神经内科首发症状性脑梗死患者50例(男性39例,女性患者11例),平均年龄(66.6 ± 10.54)岁。以A1166C基因型进行分组:野生型组(AA)、突变组(AC CC),收集患者一般资料、量表评分(NIHSS评分、Barthel指数)及疾病是否复发。结果:1) 单因素分析结果显示在年龄、症状首发年龄、出院时NIHSS评分、AGTR1 (A1166C)基因型比例比较,差异无统计学意义(P > 0.05);2) 单因素分析示AGTR1 (A1166C)基因多态性均与脑梗死患者的严重程度、复发、Barthel指数具有相关性(P < 0.05),差异有统计学意义;3) 多因素分析结果表明AGTR1 (A1166C)基因是脑梗死复发的独立危险因素,AC、CC基因型脑梗死患者的复发率是AA型的8.72倍,即AGTR1 (A1166C)基因突变时,脑梗死的复发率增高。结论:AGTR1 (A1166C)基因多态性与脑梗死的发生有关联,是脑梗死的独立危险因素。

ABCB1基因C3435T多态性对他汀类药物降脂疗效影响的Meta分析

目的系统评价ABCB1基因C3435T多态性对他汀类药物降脂疗效的影响。方法计算机检索PubMed、Web of Science、the Cochrane Library、中国知网和维普网,收集患者使用他汀类药物的队列研究,检索时限为建库至2023年11月1日。筛选文献、提取数据、评价质量后,采用RevMan 5.4软件进行Meta分析。结果共纳入11项文献,共计1575例患者。Meta分析结果显示,显性遗传模型下,CT+TT型患者的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)降低程度[MD=-1.87,95%CI(-3.62,-0.13),P=0.04]、总胆固醇(TC)降低程度[MD=-1.42,95%CI(-2.80,-0.04),P=0.04]均显著高于CC型;CT+TT型患者的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)升高程度[MD=-0.65,95%CI(-2.48,1.18),P=0.49]、甘油三酯(TG)降低程度[MD=-0.05,95%CI(-2.94,2.84),P=0.97]与CC型比较,差异均无统计学意义。隐性遗传模型下,TT型患者的TC降低程度[MD=2.26,95%CI(0.97,3.56),P=0.0006]、HDL-C升高程度[MD=2.38,95%CI(0.42,4.35),P=0.02]均显著高于CC+CT型;CC+CT型患者的LDL-C降低程度[MD=1.53,95%CI(-0.10,3.15),P=0.07]、TG降低程度[MD=0.06,95%CI(-2.98,3.10),P=0.97]与TT型比较,差异均无统计学意义。加性遗传模型下,TT型患者的TC降低程度[MD=2.98,95%CI(1.27,4.69),P=0.0006]、LDL-C降低程度[MD=2.84,95%CI(0.67,5.01),P=0.01]均显著高于CC型;TT型患者的HDL-C升高程度[MD=2.40,95%CI(-0.17,4.97),P=0.07]、TG降低程度[MD=0.97,95%CI(-2.93,4.87),P=0.63]与CC型比较,差异均无统计学意义。结论血脂异常患者接受他汀类药物治疗时,LDL-C、TC降低效果可能与ABCB1基因C3435T杂合和纯合突变有关,即与CC型患者比较,CT或TT型患者的LDL-C、TC降低效果可能更明显;HDL-C升高效果可能与纯合突变有关,即与CC+CT型患者比较,TT型患者的HDL-C升高效果可能更明显;而TG变化可能与ABCB1基因C3435T多态性无关。

急性脑梗死患者CYP2C19、MTHFR、SLCO1B1和APOE基因检测结果分析

目的探讨急性脑梗死患者CYP2C19、MTHFR、SLCO1B1和APOE基因多态性分布,为个体化药物治疗提供理论依据。方法选取2020-2022年该院收治的急性脑梗死患者400例作为研究对象,采用PCR-荧光探针方法对急性脑梗死患者CYP2C19、MTHFR、SLCO1B1和APOE基因多态性进行检测,分析基因多态性分布的情况。结果在急性脑梗死患者中,CYP2C19基因表型中EM型占比为44.25%,PM型占比为9.75%;MTHFR基因C677T位点突变型(CT型+TT型)占比为78.50%,CC型占比为21.50%;SLCO1B1基因型中的78.75%为Ⅰ类野生表型,1.50%为Ⅲ类纯合突变型;APOE基因表型中E2型和E3型占比为84.25%,E4型占比为15.75%。结论对400例急性脑梗死患者CYP2C19、MTHFR、SLCO1B1和APOE基因多态性的分布进行了分析,对指导急性脑梗死患者人群个体化用药提供数据支持,对实现安全用药具有重要意义。

超保守RNA uc.102-uc.106及其宿主基因OLA1在不同组织中的差异表达

目的:本研究旨在探究超保守RNA uc.102-uc.106基因簇及其宿主基因Obg样ATP酶1(OLA1)在C57BL/6J小鼠不同组织器官中的表达差异。方法:选取5只8~10周龄的健康雄性C57BL/6J小鼠,在正常生理条件下采集不同组织器官(包括肝脏、睾丸、骨髓、大脑、肾脏、血液、肺、结肠、胸腺、脾脏、胃、心脏、淋巴结和膀胱)。同时使用磁珠分选技术提取骨髓血细胞,包括B细胞、巨噬细胞、有核红细胞和成熟红细胞。通过RT-qPCR技术,以GAPDH作为内参照,检测uc.102-uc.106和OLA1 mRNA的表达量。结果:OLA1 mRNA在C57BL/6J小鼠大脑、淋巴结、睾丸和胸腺中呈高水平表达,在肝脏、脾脏、肺、结肠和外周血中呈低水平表达(P<0.05)。uc.102-uc.106的表达趋势与OLA1的mRNA表达基本相反,但在睾丸组织中两者均呈高水平表达(P<0.05)。在血细胞中,OLA1和uc.102-uc.106在B细胞中的表达水平最高,在成熟红细胞中的表达水平最低(P<0.05)。结论:OLA1基因和uc.102-uc.106基因簇在C57BL/6J小鼠的不同组织器官及血细胞中均有表达且存在差异。值得注意的是,OLA1基因和uc.102-uc.106基因簇在小鼠睾丸中均呈高水平表达,表明OLA1基因和uc.102-uc.106基因簇可能与雄性小鼠的生殖功能密切相关。

VKORC1和CYP2C9基因多态性对ICU患者华法林抗凝治疗的指导价值

目的探讨重症监护室(ICU)患者中,维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)和细胞色素氧化酶P4502C9(CYP2C9)基因多态性检测对华法林抗凝治疗的指导价值。方法回顾性分析2019-06至2023-06火箭军特色医学中心ICU收治的合并抗凝指征(心房颤动、深静脉血栓、肺栓塞)患者90例。研究组(30例)为进行基因检测并根据检测结果指导华法林用药的患者;对照组(60例)为未进行基因检测执行临床常规华法林用药策略的患者,对两组进行为期6个月的随访。比较两组一般临床资料信息、研究组基因型分布情况、国际标准化比值(INR)达标时间、治疗窗内的时间比例(TTR)、华法林起始及维持剂量、出血事件发生率及INR≥4.0事件发生率。结果研究组INR达标时间(9.56±1.68)d,短于对照组的(11.12±2.03)d;研究组TTR为(72.56±6.90)%,高于对照组的(64.45±7.82)%,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组华法林起始和维持剂量分别为(2.91±0.73)mg/d、(3.17±0.81)mg/d,与对照组相比差异均无统计学意义。研究组中小出血事件发生6例(20.00%),低于对照组的27例(45.00%),差异有统计学意义(P<0.05),两组大出血事件发生率差异无统计学意义。研究组INR≥4.0发生率为16.67%,低于对照组的40.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ICU合并抗凝指征患者进行VKORC1和CYP2C9基因多态性检测指导华法林用药,有利于增强抗凝疗效、减少相关不良反应,进而提高用药安全性。

ABCB1、CYP2C19基因多态性与氯吡格雷治疗急性脑梗死患者临床疗效的关系

目的探究三磷酸腺苷结合盒转运子B亚家族成员1(ABCB1)、细胞色素氧化酶P4502C19(CYP2C19)基因多态性与氯吡格雷治疗急性脑梗死患者临床疗效的关系。方法回顾性分析2018年10月至2020年10月在我院进行基因多态性检测的98例急性脑梗死患者的临床资料,所有患者均在常规治疗的基础上采用氯吡格雷治疗14d,比较不同AB CB1、CYP2C19基因分型患者美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、改良Ranking量表(mRS)评分、临床疗效、血小板抑制率差异,采用单因素分析和logistic回归方程分析ABCB1、CYP2C19基因多态性与临床疗效的关系。结果98例患者中,ABCB1野生型41例(41.84%),突变型57例(58.16%);CYP2C19快速代谢型39例(39.80%),中间代谢型42例(42.86%),慢代谢型17例(17.34%)。治疗14d后,ABCB1、CYP2C19基因多态性患者的NIHSS、mRS评分均降低(P<0.05),且ABCB1野生型NIHSS、mRS评分低于突变型(P<0.05),CYP2C19快速代谢型NIHSS、mRS评分低于中间代谢型和慢代谢型(P<0.05)。治疗14d后,ABCB1、CYP2C19基因多态性患者临床疗效各等级差异均有统计学意义(P<0.05),但临床总有效率差异无统计学意义(P>0.05)。不同ABCB1、CYP2C19基因类型患者血小板抑制率差异有统计学意义(P<0.05)。ABCB1野生型血小板抑制率高于突变型(P<0.05),CYP2C19快速代谢型血小板抑制率高于慢代谢型(P<0.05)。不同ABCB1、CYP2C19基因突变患者性别、年龄、身体质量指数、合并基础疾病、既往史差异无统计学意义(P>0.05)。logistic分析结果显示,ABCB1突变型、CYP2C19中间代谢型和CYP2C19慢代谢型均为急性脑梗死临床疗效的影响因素(P<0.05)。结论ABCB1、CYP2C19基因多态性可能会增加急性脑梗死患者的氯吡格雷抵抗,其中ABCB1突变型、CYP2C19中间代谢型和CYP2C19慢代谢型均为急性脑梗死临床疗效的影响因素。

C. elegans fat-1基因对SGC7901细胞的促凋亡作用

目的通过在人胃癌SGC7901细胞系上转入外源C.elegans fat-1基因观其对细胞增殖或对调亡的影响。方法构建携带有能够编码n-3多聚饱和脂肪酸脱氢酶的小秀丽隐杆线虫fat-1基因的重组质粒,转染人胃癌细胞SGC7901,检测n-6/n-3脂肪酸的比例,观察胃癌细胞的增殖和凋亡情况。结果转染成功后携带有fat-1基因的胃癌细胞,显示了对于n-3脂肪酸饱和酶的高表达。脂类分析表明,n-6PUFAs的比例大幅度降低,n-3PUFAs水平明显提高,n-6/n-3脂肪酸比例,从10.45下降到了0.79,尤其是花生四烯酸和二十碳戊烯酸的比率。相应地,在表达有fat-1基因的胃癌细胞中,来源于n-6PUFAs的类花生酸含量有显著减少。同时,fat-1基因的转移导致大量胃癌细胞的凋亡,抑制胃癌细胞的增殖。结论n-3脂肪酸去饱和酶的基因转移,能够有效调整人肿瘤细胞n-6/n-3脂肪酸的比例,起到抗癌作用,证明在癌症的预防和治疗中,n-6与n-3脂肪酸的比例扮演着一个重要的角色。

肠道病毒ECHO_(13)中国分离株的基因特征

为研究ECHO13病毒中国分离株的分子特征及其与世界其它分离株之间的基因关系,对1998年、2000年从中国福建省分离到2株ECHO13病毒进行基因序列对比分析。2株病毒分别命名为Fujian98-1和Fujian00-1,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出VP1蛋白编码基因全长861个核苷酸片段并进行序列测定,将2株E CHO13病毒的VP1序列与所有已发表的ECHO13病毒VP1基因全长进行同源性比较。结果显示,福建分离株之间核苷酸同源性为79 6%,氨基酸同源性为93 4%;与遗传距离最近的法国CF1089-91(AJ537604)毒株的核苷酸同源性分别为80%和88%,与代表株DelCarmen的核苷酸同源性分别为75 8%和77 9%。通过VP1基因分析,福建2株病毒均属于ECHO13病毒,与血清中和试验鉴定结果一致。下载所有已发表的ECHO13病毒VP1序列并构建进化树,发现福建2株病毒分属不同的分枝,提示这2株病毒来自不同的病毒传播链。进一步分析发现,整个E CHO13病毒可划分为3个不同的基因型:A、B和C基因型。福建Fujian98-1和Fujian00-1分别被划分在基因型B和C中,各基因型之间的核苷酸差异均大于20%。为验证该分型方法,将26株来自不同国家和时间的ECHO13病毒和2株福建分离ECHO13病毒部分VP1基因序列进行对比分析,建立进化树。结果显示,所有ECHO13病毒被分在A。

SLCO1C1基因与鸡绿壳蛋形成的关系

【目的】分析位置候选基因SLCO1C1与绿壳蛋形成的关系,为绿壳蛋鸡提纯提供参考。【方法】以江西东乡绿壳蛋鸡为研究对象,以同群体的褐壳蛋鸡为对照,检测SLCO1C1基因上游6.5kb区域内的序列变异情况;采用Real-time PCR法检测SLCO1C1在蛋鸡脑、肝、脾、蛋壳腺中的表达情况,用3′RACE法克隆SLCO1C1 3′UTR,用PCR-RFLP法检测Ala528Glu错义突变基因型。【结果】在SLCO1C1基因上游6.5kb区域内共发现了33个单核苷酸变异(SNP),这些SNP与绿壳性状显著关联(P<0.05)。表达结果显示,SLCO1C1基因只在蛋鸡脑中表达,且在绿壳蛋鸡(n=5)与褐壳蛋鸡(n=5)间的表达无显著差异(P>0.05)。序列比对结果显示,绿壳蛋鸡与褐壳蛋鸡的SLCO1C1 3′UTR同源性为100%。在SLCO1C1基因11号外显子上发现了一个错义突变Ala528Glu,Glu突变与绿壳性状显著关联(P<0.05),且Glu突变在其他产绿壳蛋的鸟类中也存在。【结论】SLCO1C1可能通过间接途径影响胆绿素的转运,从而影响绿壳蛋的形成。SLCO1C1基因内存在大量的与绿壳性状显著关联的SNP,表明控制绿壳性状的O基因很可能就在SLCO1C1附近。

南林895杨抗旱耐盐基因DREB1C的转化

以美洲黑杨杂种优良无性系南林895杨为转基因受体材料,利用农杆菌介导法转化与逆境胁迫相关的DREB1C基因。经潮霉素筛选,共获得80株抗性植株,经PCR及RT-PCR检测有30株抗性植株呈阳性,初步证明DREB1C基因已整合到南林895杨基因组中。抗性试验结果初步表明,转基因植株的抗旱、耐盐性均有所提高。