胃癌组织中CPT1C、SERPINH1表达与卵巢转移的关系研究

目的探讨胃癌组织中肉碱棕榈酰转移酶1C(CPT1C)、Serpin肽酶抑制剂clade H成员1(SERPINH1)表达与卵巢转移的关系。方法选择2021年12月至2023年6月该院收治的286例胃癌患者,其中卵巢转移37例(转移组),无卵巢转移249例(无转移组)。取手术切除的胃癌以及癌旁组织,采用实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CPT1C、SERPINH1表达,采用多因素Logistic回归分析胃癌卵巢转移的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析CPT1C、SERPINH1预测胃癌卵巢转移的价值。结果胃癌组织中CPT1C、SERPINH1表达高于癌旁组织(P<0.05)。低分化、T3~T4分期、N2~N3分期、CA125水平升高的胃癌患者胃癌组织中CPT1C、SERPINH1表达高于中高分化、T1~T2分期、N0~N1分期、无CA125水平升高的胃癌患者(P<0.05)。转移组CPT1C、SERPINH1表达高于无转移组(P<0.05)。印戒细胞癌、N2~N3分期、CPT1C高表达、SERPINH1高表达是胃癌卵巢转移的危险因素(P<0.05)。CPT1C、SERPINH1预测胃癌卵巢转移的曲线下面积(AUC)分别为0.777(95%CI:0.724~0.824)、0.799(95%CI:0.748~0.844),CPT1C与SERPINH1并联预测胃癌卵巢转移的AUC为0.902(95%CI:0.861~0.934),高于CPT1C、SERPINH1单项预测(P<0.05)。结论胃癌组织中CPT1C、SERPINH1表达与卵巢转移有关,CPT1C、SERPINH1联合检测可预测卵巢转移风险。

CPT1C在癌细胞中作用的研究进展

代谢重编程是促进肿瘤进展的重要因素之一。多项研究表明,对于代谢重编程的重要靶点进行干预,可以抑制肿瘤进展和预后。相比糖代谢在肿瘤中的重编程现象,脂肪酸代谢在肿瘤中的重编程现象目前少有报道。肉碱棕榈酰转移酶家族(carnitine palmitoyltransferase fattyacids,CPT)通过介导长链脂肪酸(Long-chain fattyacids,LCFA)穿过线粒体双层膜,进行β-氧化为细胞提供能量,因此它们是脂肪酸分解代谢的“守门员”。其中肉碱棕榈酰转移酶1C(carnitine palmitoyltransferase fattyacids1c,CPT1C)是该家族中最近发现的成员,在脑组织与肿瘤中特异性表达,因此在肿瘤研究领域也备受关注。目前研究揭示CPT1C影响肿瘤的发生和发展,在低糖、低氧、衰老等代谢应激状态下表现出对癌细胞的保护作用。文章主要通过描述CPT1C的分子结构与生物学功能以及在癌细胞中的作用及上游调控机制,探讨其作为抗癌细胞药物新靶点的研究前景。

基于c-ring探讨活血化瘀法经ATP5G1改善心力衰竭的作用机制

基于c-ring的微观结构,通过分析ATP合酶F0复合体C亚基1的作用进一步探讨活血化瘀法改善心力衰竭可能的作用机制,为临床治疗心力衰竭提供理论依据及新思路。

低糖低氧状态下AMPK通路通过PPARα调控CPT1c影响人甲状腺乳头状癌B-CPAP细胞的凋亡

目的:探究在低糖低氧状态下通过磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-dependent/activated protein kinase,AMPK)通路调控肉碱脂酰转移酶1c(carnitine palmitoyltransferase 1c,CPT1c)的表达对甲状腺乳头状癌B-CPAP细胞增殖及凋亡的作用及其机制。方法:对正常条件和低糖低氧条件下培养的人甲状腺乳头状癌细胞B-CPAP,分别给予AMPK抑制剂Compound C处理,使用Western blotting检测AMPK、p-AMPK、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptorα,PPARα)、CPT1c的表达,并利用CCK-8法及FACS检测各组细胞的增殖和凋亡情况。合成的PPARα-siRNA转染B-CPAP细胞以敲低PPARα,分别在正常和低糖低氧环境下培养,同样检测上述指标,以验证PPARα对CPT1c的调控作用。构建人CPT1c基因启动子荧光素酶报告质粒,利用免疫荧光法观察PPARα对CPT1c基因启动子荧光素酶活性的影响。结果:(1)低糖和低氧条件下培养的B-CPAP细胞中,AMPK、p-AMPK、PPARα、CPT1c表达均显著增加(均P<0.05或P<0.01),细胞增殖和凋亡率未有明显改变(均P>0.05);(2)应用AMPK抑制剂Compound C后,低糖低氧组p-AMPK、PPARα、CPT1c明显降低(P<0.05或P<0.01),细胞增殖抑制率及凋亡率显著升高(均P<0.01),但升高幅度仍小于单独加抑制剂后高于正常对照的幅度(P<0.05)。(3)PPARα敲低后,正常条件下培养的肿瘤细胞的AMPK、p-AMPK、PPARα、CPT1c的表达显著减少(P<0.05或P<0.01),细胞增殖抑制率及凋亡率均显著升高(均P<0.05);低糖低氧培养条件下,转染后细胞CPT1c表达显著降低(P<0.05),细胞增殖抑制率及凋亡率有显著升高(均P<0.05),但升高幅度仍低于转染后高于正常对照的幅度(P<0.05)。(4)转染过表达PPARα后,空载组双荧光比值与空白组无差异(P>0.05),PPARα过表达组双荧光比显著增高(P<0.05)。结论:甲状腺乳头状癌B-CPAP细胞在低糖低氧状态下,AMPK通路能够通过上调PP ARα促进CPT1c的表达,从而抑制细胞凋亡和维持细胞增殖能力。

生物标志物ADH1C、PCK1、MARCO在急性阑尾炎诊断中的作用

目的探讨急性阑尾炎的潜在生物标志物酒精脱氢酶1C(ADH1C)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)、胶原结构巨噬细胞受体(MARCO)在急性阑尾炎的诊断中的作用。方法采用GSE9579阵列用于差异化鉴定急性阑尾炎相关标志物,选取2020年1月至2021年6月在泌阳白云山中西医结合医院急诊科住院的80例腹痛患者作为研究对象。其中最终确诊为急性阑尾炎的患者46例为阑尾组,其他原因腹痛的患者34例为对照组。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测不同组患者的血清ADH1C、PCK1、MARCO水平,比较两组患者血清ADH1C、PCK1、MARCO水平异常率及血清学水平。利用曲线下面积(AUC)值检验ADH1C、PCK1、MARCO的诊断性能。结果从GSE25765数据集中,进行阑尾组与对照组的差异性基因表达,发现ADH1C、PCK1显著下调,而MARCO显著上调。KEGG富集分析发现这些差异基因参与P450-药物代谢、酪氨酸代谢、丙酮酸代谢、类固醇激素生物合成及PPAR信号通路等生物学功能。与对照组相比,阑尾组患者血清中ADH1C、PCK1含量显著均较低,MARCO含量显著升高(P<0.05)。血清ADH1C、PCK1、MARCO水平对急性阑尾炎分别具有良好的诊断效能(AUC值>0.07)。结论ADH1C、PCK1、MARCO在急性阑尾炎患者中变化显著,对阑尾炎的临床诊断具有一定指导意义。

赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)纤维素酶的初步研究

将赤子爱胜蚓整体组织匀浆的抽提液,经Sephadex G-75凝胶过滤、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换及在FPLC仪上用Mono Q柱分离,可以纯化到多种组分的纤维素酶,研究了它们的酶学性质,证明均为C_X酶。

日本沼虾几丁质酶1C（MnCht1C）基因的克隆及表达分析

本研究从日本沼虾精巢均一化cDNA文库中筛选到一条MnCht1C表达序列片段（expressed sequence tags,EST）,该序列具有完整的基因编码区,编码区长度为1 473 bp,编码490个氨基酸。MnCht1C编码的蛋白质具有完整的几丁质酶结构,N端的前23个氨基酸为信号肽,第24-406位氨基酸序列为几丁质酶催化结构域（catalytic domain）,第407-433位氨基酸序列为Ser/Thr富含区（S/T-rich linker）,其作用在于连接催化结构域与几丁质结合结构域。qPCR分析MnCht1C在日本沼虾各组织和各发育阶段表达情况,研究发现其主要在肝胰腺、肠、眼柄、表皮、精巢5种组织中表达;幼体发育时期不表达,而直至变态时期才开始表达。MnCht1C在日本沼虾整个蜕壳周期的表达呈波动性,蜕壳中期表达水平最高,随着蜕壳这一生理过程的完成,其表达水平也相应地下降直至蜕壳间期无表达水平检出,随着新一轮蜕壳的进行,其表达水平又开始逐渐升高。本研究结果为研究几丁质酶基因在日本沼虾和其他甲壳动物蜕壳及生殖发育中的作用提供参考。

肉毒碱棕榈酰转移酶1c与肿瘤关系研究进展

肉毒碱棕榈酰转移酶1(Carnitine palmitoyltransferase 1,CPT1)是一种脂肪酸β氧化限速酶。CPT1c作为CPT家族最后被发现的成员,其序列包含必要的酶催化活性结构域,但体外没有显示明显的肉毒碱棕榈酰转移酶的活性。功能研究提示CPT1c影响肿瘤的发生发展,其作用与低氧等代谢胁迫下的调控应答有关。本文主要介绍CPT1c的生物学特性及在肿瘤中的作用,探讨其在肿瘤的诊疗方面的应用前景。

乙醇脱氢酶1C 基因多态性与中国北方汉族男性酒精依赖的关联

目的：分析中国北方汉族男性乙醇脱氢酶1C（ADH1C）基因多态性与酒精依赖的关联。方法选取60例符合DSM －Ⅳ诊断标准的中国北方汉族男性酒精依赖患者及60名与之匹配的健康志愿者，测定其ADH1C基因上rs698位点的多态性，对酒精依赖组及健康对照组间各基因型和等位基因频率分布的差异进行比较。结果酒精依赖组患者的基因型分别为AA型32例，AG型27例，GG型1例，健康对照组AA型27人，AG型30人，GG型3人，两组间基因型和等位基因频率分布的差异无统计学意义（P＞0．05）。结论中国北方汉族男性ADH1C基因rs698位点多态性与酒精依赖无关联。

HCV核心蛋白调控SREBP-1c表达水平的机制研究

目的探讨HCV核心蛋白调控SREBP-1c的分子生物学机制。方法构建HCV核心蛋白真核表达载体pc DNA3.1/myc-His(-)-Core(1b,3a),转染Hep G2细胞系,48 h后提取细胞总RNA和总蛋白,采用real-time PCR、Western blot等方法检测脂代谢相关基因Sirt1和SREBP-1c的mRNA和蛋白表达水平;构建Sirt1启动子报告基因表达载体p GL4.10-Sirt1,与pc DNA3.1/myc-His(-)-Core(1b,3a)共转染Hep G2细胞系24 h后检测核心蛋白对Sirt1启动子活性的影响;构建pmir GLO-SREBP-1c-3'-UTR报告基因表达载体,与pc DNA3.1/myc-His(-)-Core(3a)共转染Hep G2细胞系48 h后检测SREBP-1c-3'-UTR相对luciferase活性。结果与对照组相比,1b型和3a型HCV核心蛋白表达组SREBP-1c的mRNA表达上调(分别上调1.358倍和1.337倍,P=0.043、0.008)SREBP-1c蛋白表达水平上调(分别上调1.608倍和1.926倍,P=0.042、0.008);与对照组相比,1b型和3a型HCV核心蛋白表达组Sirt1 mRNA表达上调(分别上调1.566倍和1.71倍,P=0.037、0.006),Sirt1蛋白表达水平上调(分别上调1.436倍和1.588倍,P=0.026、0.009);与对照组相比,HCV核心蛋白表达组Sirt1的启动子活性无显著变化;与对照组相比,HCV核心蛋白表达组SREBP-1c-3'-UTR相对luciferase活性下调(相对值为0.667,P=0.008)。结论 HCV核心蛋白上调SREBP-1c与Sirt1的表达,可能是HCV相关性肝脂肪变的发病机制之一。micro RNA参与HCV核心蛋白对SREBP-1c的表达调控,而是否有micro RNA对HCV调控Sirt1表达发挥作用尚待于进一步的研究证实。

康氏木霉诱变前后纤维素酶组分的分离提纯

康氏木霉NN-15B_7株是康氏木霉854-B_2株经多次理化因素诱变,最后搭载卫星在太空条件作用下筛选出来的变异株.为比较诱变前后两个菌株所产纤维素酶的异同,本实验采用系列分离的方法,首先对其酶组分进行了分离提纯.粗酶粉经Scphadex G75凝胶过滤、DEAE-Scphadex A50离子交换层析和SP-Scphadex C50离子交换层析,分离得到了纯的C_1酶和Cx酶.经鉴定,C_1酶中含有微量Cx酶活力,PAG圆盘电泳只显示1条区带;Cx酶中均测不出C_1酶和β—葡萄糖苷酶活力,PAG圆盘电泳显示4条区带.诱变前后两株纤维素酶的组分分布未见差异.