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红球菌g26中C_(17)位脱氢酶的克隆表达及生物转化
1
作者
顾飞飞
张诗雯
田威
《沈阳药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期197-202,共6页
目的对红球菌g26中的短链脱氢酶基因进行克隆表达并考察其能否将甾体化合物雄甾-4-烯-3.17-二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD) C17位羰基还原为羟基。方法通过检索数据库获得红球菌g26中的两个短链脱氢酶基因,应用PCR、重组表达载体的...
目的对红球菌g26中的短链脱氢酶基因进行克隆表达并考察其能否将甾体化合物雄甾-4-烯-3.17-二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD) C17位羰基还原为羟基。方法通过检索数据库获得红球菌g26中的两个短链脱氢酶基因,应用PCR、重组表达载体的构建等生物技术在大肠杆菌中进行外源表达,破碎细胞后应用SDS-PAGE对可溶性蛋白进行分析,筛选出合适的目的蛋白诱导条件,进而进行酶的体外转化反应,应用薄层色谱分析、高效液相分析和质谱法鉴定产物结构。结果与结论红球菌g26中的短链脱氢酶可以转化甾体化合物AD为睾丸酮(TS)。红球菌g26内的短链脱氢酶参与了甾体化合物C17位羰基到羟基的还原反应。
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关键词
红球菌属
生物转化
甾体化合物
c17位还原
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题名
红球菌g26中C_(17)位脱氢酶的克隆表达及生物转化
1
作者
顾飞飞
张诗雯
田威
机构
沈阳药科大学生命科学与生物制药学院
出处
《沈阳药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期197-202,共6页
基金
省自然科学基金指导计划(项目编号201602714)。
文摘
目的对红球菌g26中的短链脱氢酶基因进行克隆表达并考察其能否将甾体化合物雄甾-4-烯-3.17-二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD) C17位羰基还原为羟基。方法通过检索数据库获得红球菌g26中的两个短链脱氢酶基因,应用PCR、重组表达载体的构建等生物技术在大肠杆菌中进行外源表达,破碎细胞后应用SDS-PAGE对可溶性蛋白进行分析,筛选出合适的目的蛋白诱导条件,进而进行酶的体外转化反应,应用薄层色谱分析、高效液相分析和质谱法鉴定产物结构。结果与结论红球菌g26中的短链脱氢酶可以转化甾体化合物AD为睾丸酮(TS)。红球菌g26内的短链脱氢酶参与了甾体化合物C17位羰基到羟基的还原反应。
关键词
红球菌属
生物转化
甾体化合物
c17位还原
Keywords
rhodo
c
o
c
c
us
biotransformation
steroidal
c
ompound
dehydrogenase at
c
17
分类号
Q812 [生物学—生物工程]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
红球菌g26中C_(17)位脱氢酶的克隆表达及生物转化
顾飞飞
张诗雯
田威
《沈阳药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
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