反相C18固相萃取小柱用于蛋白质组分析中少量样品预处理

针对少量且复杂蛋白质组样品,开发一种耗时短、操作简便的分离方法。以人的脑海马组织蛋白样品为研究对象,采用反相C18固相萃取小柱,采用不同乙腈浓度对酶切后样品进行梯度洗脱,与反相高效液相色谱法对比分离效果。通过比较不同乙腈梯度洗脱方案所鉴定到的谱图数、非冗余多肽数、蛋白数和各洗脱组分间重复率分析,确定一种样品量少、简单易行、分离效果好的实验方案。虽然反相C18固相萃取小柱法鉴定蛋白总数占高效液相色谱法的85.5%,但其操作简单,耗时少。通过4种不同乙腈浓度方案比较,确定乙腈洗脱浓度优化为5%、15%、20%和90%时,分离30μg人的海马多肽混合物可以得到较优的分离效果。其蛋白鉴定数为反相液相色谱法的67.0%,且重复性良好。该结果证实反相C18固相萃取小柱分离效果比反相高效液相色谱法稍差,但此方法可以分离少量复杂蛋白质组样品。该方法分离样品充分,操作易行,耗时短,是进行蛋白质组学分析中少量样品的一个简便预处理方法。

水产品中河鲀毒素的高效液相紫外测定法

以鲀科鱼类为研究材料,采用超声波法提取,C18-WCX联用固相萃取纯化,使用高效液相色谱紫外检测方法测定水产品中河鲀毒素含量,通过探索提取方法和色谱条件对检测结果的影响,并确定和优化色谱分离和紫外检测条件,建立了一种高效液相紫外检测测定水产品中河鲀毒素的方法。该检测方法稳定性好,可操作性强,加标回收率在75%～82%之间,相对标准偏差小于15%,检出限达到0.02mg/kg。与现行河鲀毒素检测方法相比,该方法具有对仪器要求低、操作简便的特点,易于推广应用。

离子色谱法快速测定牛奶中硝酸盐的研究

目的:建立用离子色谱法测定牛奶中硝酸盐含量的方法。方法:样品用3 %乙酸和1mol/LKOH溶液脱去蛋白质和脂肪等有机物,再通过Sep PakC18小柱预处理后,进行离子色谱法测定,色谱柱为DIONEXIonpacAS14-4mm ,以3.5mMNa2 CO3/ 1.0mMNaHCO3为淋洗液,流速为1 2ml/min ,抑制电流:5 0mA ,电导检测。结果:该方法硝酸盐在2 μs量程档线性范围是0.1～1.0mg/L在10 μs量程档线性范围是1.0～15.0mg/L ,相关系数均大于0 999。最低检出限为0.0 0 13mg/L ;回收率在98%～10.6 %之间;样品测定相对标准偏差为3.3 7%。结论:该方法操作方便,准确,重现性好。

皮革和毛皮六价铬检测过程中脱色技术研究

采用基于聚酰胺层析柱及C18小柱的固相萃取技术,对皮革和毛皮六价铬检测过程中萃取液中颜色的脱除效果进行试验。考察了现行的双空白法、固相萃取脱色法,在测定不同颜色的萃取液中六价铬含量的准确性。结果表明:萃取液颜色对检测过程干扰明显,双空白法不适用于有颜色萃取液。萃取液中的颜色经聚酰胺或C18小柱萃取脱色后,样液的本底吸光度大幅度降低,使方法的灵敏度和准确性有效提高。实际样品试验表明,在六价铬加标浓度为0.08μg/mL时,聚酰胺脱色法的回收率在91.9%～105.0%之间,C18小柱脱色法的回收率在99.4%～105.0%之间。

枣仁安神液质量控制方法研究

目的:建立用HPLC测定枣仁安神液中酸枣仁皂苷A含量的方法。方法:采用Kromasil C18柱为分析柱,乙腈-水(32:68 v/v)为流动相,流速1.0 mL.min-1,检测波长204nm。结果:酸枣仁皂苷A在0.51μg^3.06μg范围内呈良好的线性关系。结论:该法准确,稳定性好,可以作为枣仁安神液的质量控制方法。

井冈霉素在大米及稻壳中的残留研究

研究并建立了井冈霉素A在大米和稻壳中的残留分析方法。样品经溶剂提取,C18固相萃取小柱净化后,用液相色谱检测。样品前处理过程简单,方法准确可靠,灵敏度和准确度达到了农药残留检测的要求。井冈霉素A标准曲线的线性范围为0.8～80 mg/L,线性相关系数为0.999 9。井冈霉素A在上述样品中的平均添加回收率(0.2～2 mg/kg)在80.08%～87.66%之间,变异系数最大为13.58%。