CDC25C表达下调的黑色素瘤细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡情况观察

目的探讨细胞分裂周期蛋白25C(CDC25C)对黑色素瘤B16细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡的影响。方法取黑色素瘤B16细胞进行培养,将细胞随机分为转染组、转染对照组、空白对照组。转染组转染CDC25C低表达慢病毒质粒,转染对照组转染慢病毒空质粒,空白对照组正常培养。利用Rhod-2/AM与MitoSOX荧光探针检测细胞线粒体内Ca^(2+)浓度及线粒体活性氧(ROS),RT-qPCR法和Western blotting法分别检测细胞线粒体应激反应相关分子ClpP、LONP1及线粒体途径凋亡相关分子Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达。结果与转染对照组和空白对照组相比,转染组细胞线粒体Ca^(2+)及ROS含量增加,ClpP、LONP1、Caspase-9、Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05或<0.01)。结论CDC25C表达下调激活黑色素瘤B16细胞发生线粒体应激反应,并诱导线粒体途径的细胞凋亡。

C25自密实混凝土在隧道工程中的应用探究

本文依托湖南高速公路隧道工程应用C25自密实混凝土的施工实践,采用现场实验、检测等方法,对其工作性能、早期强度、硬化强度等进行了分析研究。本文所提出的C25自密实混凝土的坍落扩展度(SF)、扩展时间(T500)等控制性指标满足规范和施工要求;24h强度大于规定拆模强度;28d抗压强度符合设计要求。同时进一步对比研究了C25自密实混凝土的技术效益,表明C25自密实混凝土在隧道工程中的应用更符合“技术先进、低碳环保”理念,且直接材料成本降低了0.3%。

串行A/D转换器TLC2543与TMS320C25的接口及编程

以 TI公司的 DSP芯片 TMS3 2 0 C2 5与串行模 /数转换芯片 TLC2 5 43为例 ,介绍了该类 ADC与 DSP的接口及编程 ,这种方法对其它具有 SPI串行接口的 A/D转换器一样适用。

人GST-Cdc25C融合蛋白的原核表达、纯化及功能初步检测

目的:构建人Cdc25C基因原核表达载体,获得纯化的GST-Cdc25C融合蛋白,并对其功能进行初步检测。方法:用PCR方法从乳腺文库中扩增Cdc25C基因编码序列,将其正确插入pGEX-KG载体,重组质粒转化大肠杆菌Ros-sate表达后,用GST-Sepharose 4B珠子纯化融合蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot方法检测融合蛋白表达,通过GSTpull-down技术检测纯化蛋白与已知结合蛋白Chk2的相互作用。结果:构建得到Cdc25C基因的原核表达载体,双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源基因插入片段,经测序与目的序列完全一致;在Rossate菌中诱导表达出相对分子质量(Mr)约为80 000的目的蛋白,经SDS-PAGE和Western blot检测,融合蛋白成功表达,并纯化得到GST-Cdc25C融合蛋白,GST pull-down检测证实GST-Cdc25C蛋白可以和已知相互作用蛋白Chk2相互作用。结论:成功克隆Cdc25C基因,并获得了活性良好的GST-Cdc25C蛋白,为进一步研究细胞周期蛋白调控机制奠定了实验基础。

Cdc25 Ccyclin B1在二烯丙基二硫化物诱导人胃癌BGC823细胞G_2/M期阻滞中的作用

目的:研究二烯丙基二硫化物(DADS)对人胃癌BGC823细胞的增殖及细胞周期的影响以及Cdc25C、cyclin B1的作用。方法:采用MTT法检测BGC823细胞的生长活性;流式细胞术分析DADS对细胞周期分布的影响;Western blot观察DADS对Cdc25C蛋白、cyclin B1蛋白表达的影响。结果:MTT比色实验结果显示,DADS对人胃癌细胞具有明显的生长抑制作用,且呈显著的剂量-效应依赖关系(P<0.05)。流式细胞分析发现,DADS作用12h时,G2/M期细胞增加到30.1%;24h时增加到58.1%;36h达50.2%(P<0.05)。Western blot结果表明,DADS呈时间依赖性抑制人胃癌BGC823细胞周期Cdc25C磷酸酶的表达,cyclinB1表达在DADS处理24h后开始下降(P<0.05)。结论:DADS可抑制人胃癌BGC823细胞增殖,其增殖抑制与细胞周期G2/M期阻滞有关;DADS可能是通过抑制Cdc25C、cyclinB1表达使部分BGC823细胞停滞在G2/M期。

CDC25C基因在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)基因在肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的表达水平及其临床意义。方法选取手术切除并经病理证实的肾透明细胞癌及相应的癌旁标本45对,通过荧光定量PCR方法对45对ccRCC患者癌组织和癌旁正常组织的CDC25C mR-NA进行分析;运用免疫组化法对45对配对的癌组织和癌旁正常组织切片进行染色,检测CDC25C蛋白的表达;运用统计学方法分析CDC25C的表达量和患者的临床特点之间的关系。结果荧光定量PCR结果显示肾癌组织中CDC25C表达水平高于癌旁正常组织(P<0.01);对癌组织及癌旁正常组织切片免疫组化显示,癌组织CDC25C蛋白表达水平高于癌旁正常组织(P<0.01);同时发现CDC25C的表达水平与性别、年龄、肿瘤直径、TNM分期无关,与病理分级有关。结论 CDC25C可能参与了肾透明细胞癌的发生过程,CDC25C可能是肾透明细胞癌一个潜在的基因治疗靶点。

基于TMS320C25的频谱分析仪

介绍了旋转机械振动信号分析仪的原理及硬件结构和软件设计。该仪器使用专用数字信号处理芯片TMS32 0C2 5完成FFT运算 ,并由主机PC机完成结果显示。由于充分利用PC机强大灵活的数据处理及编程能力 ,使系统具有功能扩展能力强、人机界面友好、便于操作的特点。

人Cdc25C基因克隆及其原核表达载体的构建与表达

目的:构建人Cdc25C基因的克隆载体和原核表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达.方法:从人肝癌细胞株Bel-7404中提取总R N A,经RT-P C R法扩增人C d c25C c D N A后,将其正确插入克隆载体pMD18-T和表达载体pET-32a(+),并转化至BL21(DE3)、BL21(DE3)pLysS和Transetta(DE3)三种感受态大肠杆菌中,分别采用0.25 mmol/L IPTG和ArtMediaTM Protein Expression自动诱导表达培养基诱导表达,并对纯化的融合蛋白进行考马斯亮蓝染色和质谱分析鉴定.结果:成功扩增了Cdc25C基因,并获得p M D18-T-C d c25C克隆载体和p E T-32a(+)Cdc25C表达载体;重组质粒在BL21(DE3)、BL21(DE3)pLysS和Transetta(DE3)三种感受态大肠杆菌中均诱导表达出TRx-His-Cdc25C融合蛋白;考马斯亮蓝染色和蛋白质谱分析结果显示基因重组蛋白与目的蛋白相符.结论:获得肿瘤相关抗原Cdc25C重组蛋白,为后续研究奠定基础.

下调PAR基因表达对前列腺癌PC3细胞周期及Cdc25C蛋白表达的影响

背景与目的:前列腺雄激素调节基因(prostate androgen regulated gene,PAR)在雄激素非依赖性前列腺癌中特异性高表达,可能与细胞恶性转化相关。本研究用RNA干扰技术下调PAR基因表达,并探讨其对前列腺癌PC3细胞细胞周期及调节因子Cdc25C表达的影响。方法:针对PAR基因的siRNA转染PC3细胞,以RT-PCR验证其对PAR基因表达抑制的有效性,用流式细胞术检测细胞周期,Western blot检测Cdc25C表达水平。结果:siRNA转染可抑制PC3细胞PAR基因表达,同时G2/M期细胞及凋亡细胞比例分别由(23.79±3.16)%及(1.49±0.13)%增加至(29.95±3.25)%和(20.61±2.73)%,Cdc25C蛋白表达水平明显下降。结论:PAR基因表达下调可诱导细胞G2/M期阻滞和凋亡,抑制细胞周期调节因子Cdc25C的表达。

Cdc25C在放疗敏感的食管鳞状细胞癌中高表达

目的研究食管鳞状细胞癌组织中Cdc25C的表达与放疗敏感性的关系。方法回顾性分析62例根治性放疗的局部晚期食管鳞状细胞癌患者,根据放疗近期疗效分为放疗敏感组和放疗不敏感组,采用免疫组织化学检测放疗前食管癌组织中Cdc25C表达,分析Cdc25C的表达与放疗敏感性之间的关系。结果食管鳞状细胞癌组织中Cdc25C表达率显著高于癌旁正常上皮组织,放疗敏感组Cdc25C表达率显著高于放疗不敏感组。结论食管鳞状细胞癌组织中Cdc25C高表达与放疗敏感性密切相关,Cdc25C的高表达可能有助于预测肿瘤细胞对放射治疗的敏感性,对于指导食管鳞状细胞癌临床治疗具有重要的参考意义。

TMS320C25静止图象传输系统

本文以两台TMS320 C25图象处理机为编码和通信处理机,并配以适当的信道接口电路和设备,构成了一个可用于普通电话线的静止图象传输系统.该系统以其运算速度快(10MIPS)可编程、可适应多种传输速率(0～5Mbits/s)、价格低廉等特点,为静止图象传输的广泛应用提供了又一有效途径。

DADS通过Chk1/Cdc25C/CyclinB1/CDK1通路诱导白血病HL-60细胞G2/M期阻滞

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞周期阻滞及其分子机制。方法采用细胞计数、软琼脂克隆形成实验及流式细胞术观察DADS对HL-60细胞生长抑制与周期阻滞效应。Western blot检测DADS对HL-60细胞Chk1/2以及下游分子的影响。结果细胞计数显示,60、120μmol·L-1DADS处理后,其群体倍增时间从19.14 h增加到35.03、71.82 h(P<0.05)。软琼脂克隆形成实验表明,30、60、90、120μmol·L-1DADS对HL-60细胞克隆形成率的抑制率分别为35.06%、62.10%、93.79%、99.35%(P<0.05)。流式细胞术检测显示,60和120μmol·L-1DADS分别作用HL-60细胞24 h后,DADS可呈时间与浓度依赖性诱导HL-60细胞G2/M期阻滞(P<0.05)。60μmol·L-1DADS处理HL-60细胞后,p-Chk1可呈时间依赖性上调(P<0.05),而Chk1与Chk2总蛋白和pChk2无改变(P>0.05)。并且,Cdc25C、CyclinB 1和CDK1分别呈时间依赖性下调(P<0.05),但14-3-3蛋白表达没有改变(P>0.05)。结论 DADS能够抑制HL-60细胞增殖,并通过Chk1/Cdc25C/CyclinB 1/CDK1通路阻滞HL-60细胞于G2/M期。

小鼠受精卵早期发育过程中PKC对cdc2和cdc25C活性的影响

为研究小鼠受精卵细胞早期发育过程中PKC对cdc2和cdc2 5C活性的影响 ,采用免疫印迹和电泳迁移率差异分析的方法 ,观察PKC的激活剂TPA及其抑制剂星形孢子素对小鼠受精卵一细胞期cdc2和cdc2 5C活性的影响 .10nmol L的TPA作用 10min后 ,小鼠受精卵一细胞期卵裂率明显大于对照组 (P <0 0 5 ) ,而星形孢子素作用后卵裂率显著下降 (P <0 0 1) .TPA处理后 ,受精卵中呈去磷酸化状态的活性cdc2明显增加 ,没有活性呈磷酸化状态的cdc2 5C明显减少 ;而星形孢子素处理的受精卵中没有活性的cdc2明显增加 ,有活性的cdc2 5C明显减少 .结果表明 ,TPA短时间作用可以促进小鼠一细胞期受精卵分裂 ,星形孢子素抑制受精卵的分裂 ;TPA可以促进cdc2的去磷酸化以及cdc2 5C的磷酸化 ,从而促进G2 M转换 ,星形孢子素则抑制cdc2和cdc2 5C的活性 ,阻止受精卵由G2

大掺量矿物掺合料C25自密实混凝土的配制与应用

采用大掺量粉煤灰和石灰石粉配制C25自密实混凝土,对混凝土的性能进行研究,并将配制的C25自密实混凝土应用于实际工程。结果表明,采用450 kg/m3的胶凝材料,并掺入50%的粉煤灰和石灰石粉,能够配制性能良好的C25自密实混凝土;掺入适量粉煤灰能够提高自密实混凝土的流动性,同时可以减少硬化混凝土的干燥收缩;石灰石粉可提高混凝土拌合物的粘聚性,但是不利于混凝土后期强度增长,且会增加混凝土的干燥收缩;在实际工程中,应加强混凝土的早期养护并适当延长养护时间,并以60 d抗压强度作为混凝土强度评定及验收依据。

人源Cdc25C蛋白的融合表达及纯化

目的:表达并纯化有活性的GST-Cdc25C融合蛋白,以用于Cdc25C功能研究。方法:利用RT-PCR克隆MCF-7细胞的cdc25c全长基因;在大肠杆菌中表达GST-Cdc25C融合蛋白;利用GSH交联的琼脂糖珠纯化GST-Cdc25C融合蛋白;通过体外磷酸酶活性分析检测GST-Cdc25C融合蛋白的磷酸酶活性。结果:克隆获得1465 bp的人源cdc25c全长基因,并克隆至pGEX-4T-1原核表达载体;在原核系统中可溶性表达了相对分子质量约87×103的GST-Cdc25C融合蛋白;通过亲和纯化获得的GST-Cdc25C融合蛋白具有较好的磷酸酶活性。结论:得到了有磷酸酶活性的GST-Cdc25C融合蛋白,可用于后续的Cdc25C功能研究。

《TMS320C25教学实验系统》的开发

《TMS32 0C2 5教学实验系统》是由DSP(数字信号处理 )硬件平台及软件平台两部分组成 ,通过对系统软、硬件平台的开发过程的解析 ,实践证明本系统具有可靠的硬件和非常友好的Windows95调试环境的特点。

用TMS320C25高速信号处理器实现混响背景下的动目标检测

本文对混响和噪声干扰下动目标检测的高速信号处理器实现进行了研究。依据水下信号处理任务的特点,结合流水线处理和并行处理,采用模块化设计方法,实现了一个由1片8086微处理器和7片高速数字信号处理器TMS320C25构成的高速信号处理系统。该系统成功地实时实现了混响背景下的动目标检测,同时也能实现复杂的信号处理算法。

C25P肽对小鼠的急性毒性及体外致癌作用

目的研究C25P肽对小鼠的急性毒性作用以及体外致癌性,为临床应用提供依据。方法采用最大耐受剂量法(MTD)进行对小鼠的急性毒性试验。对照组小鼠尾静脉注射生理盐水(40ml/kg);用药组小鼠尾静脉注射C25P多肽(3.64g/kg)。给药后连续观察14d。14d处死小鼠,测定血常规及血液生化学指标,并解剖小鼠进行病理组织学检查。并采用染色体畸变试验、细胞转化试验、非锚定依赖性生长试验对C25P多肽进行体外的致癌性评价。结果未出现小鼠死亡,用药组有3只小鼠发生轻微毒性反应;每组小鼠体质量均有增长,各组间的平均增长率无显著差异;所测血液生化指标中,用药组GPT(谷丙转氨酶)值比对照组呈显著性升高(P<0.05);用药组ALP(碱性磷酸酶)值比对照组呈显著性降低(P<0.05);大部分小鼠器官正常,发生毒性反应的3只小鼠的肺、脾、肝脏出现病变。C25P多肽的染色体畸变试验、细胞转化试验、非锚定依赖性生长试验均呈阴性。结论 C25P肽对受试动物无明显急性毒性作用以及无明显致癌性作用,属于低毒类药物。

面向C25的多处理器调试系统研究

多处理器环境下的动态调试是诊断并行算法效果的关键步骤。在缺少并行操作系统的条件下,动态调试系统也是支持并行算法运行的有力工具。本文以TMS320C25数字信号处理器构成的多处理机系统为研究对象,提出了动态调试中的软件接口设计方法,以及断点的外部记录法,确保了系统资源的最少占有。同时,讨论了并行调试中的若干问题。本文所提的所有方法都可以扩展到基于其它处理器的动态调试器设计中去。

一种PC机与TMS 320C25信息交换的方法

TMS 320系列是超大规模数字信号处理器,中国科学院声学所为开发其应用曾分别制成了与PC机兼容的各种开发系统。这些产品都是由PC机与TMS 320数字信号处理板(DSPB)构成的主从式系统。PC机作为主系统,负责对DSPB进行数据加载,控制启停,监视执行,以及进行数据通讯等。DSPB作为从系统,具有自己的处理器(320)和存储器等资源。我们在工作中采用的是TMS 320 C 25 A型开发板(以下简称为320板),它有16 K字的程序存储器和32K字的数据存储器。这些存储器又分别分为片内、片外存储器。