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PPARγ低表达对Ang Ⅱ诱导H9c2心肌细胞肥大的影响
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作者 赖玲 缪林煜 廖伟 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期1637-1641,共5页
目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ低表达对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的H9c2心肌细胞肥大(MCR)的作用及可能机制。方法 采用H9c2心肌细胞,拟高糖培养基与药物AngⅡ构建MCR模型。采用AD-PPARγRNAi重组腺病毒载体,感染到H9c2心... 目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ低表达对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的H9c2心肌细胞肥大(MCR)的作用及可能机制。方法 采用H9c2心肌细胞,拟高糖培养基与药物AngⅡ构建MCR模型。采用AD-PPARγRNAi重组腺病毒载体,感染到H9c2心肌细胞中,将实验分为对照组、Vehicle组、AD-PPARγRNAi组、MCR组、MCR+Vehicle组、MCR+AD-PPARγRNAi组。形态学上采用苏木素-伊红(HE)染色法观察MCR时形态大小的变化。通过Western印迹法检测PPARγ、肌球蛋白重链(MYH)7B、心钠肽(ANP)蛋白表达情况。结果 HE染色结果显示,MCR组与对照组比较、MCR+Vehicle组与Vehicle组比较、MCR+AD-PPARγRNAi组与AD-PPARγRNAi组比较,H9c2细胞核形态大小均变大。Western印迹结果显示:与对照组比较,MCR组MYH7B、ANP表达明显增加(P<0.05)。AD-PPARγRNAi重组腺病毒感染H9c2心肌细胞后,AD-PPARγRNAi组与对照组和Vehicle组比较,PPARγ表达明显降低,MYH7B、ANP表达明显增加(P<0.05);MCR+AD-PPARγRNAi组与MCR组和MCR+Vehicle组比较,PPARγ表达明显降低,MYH7B、ANP表达明显增加(P<0.05)。结论 经AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞MYH7B、ANP表达增加,AD-PPARγRNAi重组腺病毒感染H9c2心肌细胞后PPARγ表达下降且MYH7B、ANP表达增加。推测由AngⅡ诱导MCR后PPARγ低表达干预可能影响心肌细胞进一步增厚,且PPARγ高表达可能逆转心肌肥厚。 展开更多
关键词 h9c2心肌细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 心肌肥厚
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Protective effect of camellia oil on H_(2)O_(2)-induced oxidative stress injury in H9C2 cardiomyocytes of rats
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作者 YAN Qing GUO Zhen +3 位作者 SUN Sai-nan LI Jing TAN Ji-yong LI Jing 《Journal of Hainan Medical University》 CAS 2024年第1期1-7,共7页
Objective: To explore the protective effect of camellia oil against H2O2-induced oxidative stress injury in rat H9C2 cardiomyocytes. Methods: CCK8 method was used to detect the cell survival rate of H9C2 cardiomyocyte... Objective: To explore the protective effect of camellia oil against H2O2-induced oxidative stress injury in rat H9C2 cardiomyocytes. Methods: CCK8 method was used to detect the cell survival rate of H9C2 cardiomyocytes treated with different concentrations of H2O2. Normal cultured cells were used as the blank control group, and the cells were treated with 200 μmol/L H2O2 for 24 h. An oxidative stress injury model was constructed as the model group. The cells were pretreated with 1%, 0.1% and 0.01% camellia oil for 24 h, and then H2O2 was added for 24 h as the experimental group. The β-galactosidase senescence staining assay, mitochondrial membrane potential assay, EdU cell proliferation staining assay and scratch assay were used to observe the changes of cell senescence, mitochondrial membrane potential, proliferation, apoptosis and migration in each group. The superoxide dismutase (SOD) activity, lactate dehydrogenase (LDH) activity, and malondialdehyde (MDA) content of the cells in each group were detected by using the kit. Results: The cell viability of H9C2 cardiomyocytes treated with different concentrations of H2O2 was inhibited and positively correlated with the concentration of H2O2 (P<0.01). Compared with the blank control group, the positive rate of cell senescence, MDA content and LDH activity increased in the H2O2 model group (P<0.01);mitochondrial membrane potential, cellular value-added rate, migration rate and SOD activity decreased (P<0.01). Compared with the H2O2 model group, the positive rate of cellular senescence (P<0.01 or P<0.05), MDA content and LDH activity decreased (P< 0.01 or P<0.05);mitochondrial membrane potential increased, cell proliferation rate and migration rate increased (P<0.01 or P<0.05) in the experimental group. Conclusion: Camellia oil can significantly inhibit oxidative stress injury in H9C2 cells and exert cardiomyocyte protective effects. 展开更多
关键词 camellia oil h_(2)O_(2) h9c2 Oxidative stress Protective
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IGF-1介导MAPKs通路在C3H10T1/2细胞成骨分化中的作用
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作者 李冬 董晓俊 徐成栋 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期668-672,共5页
目的探究胰岛素样生长因子1(IGF-1)介导丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路在C3H10T1/2细胞成骨分化中的调控作用及机制。方法不同浓度IGF-1(0、5、10、20 ng/mL)培养C3H10T1/2细胞,碱性磷酸酶(ALP)与茜素红(ARS)染色检测ALP活性、钙盐... 目的探究胰岛素样生长因子1(IGF-1)介导丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路在C3H10T1/2细胞成骨分化中的调控作用及机制。方法不同浓度IGF-1(0、5、10、20 ng/mL)培养C3H10T1/2细胞,碱性磷酸酶(ALP)与茜素红(ARS)染色检测ALP活性、钙盐沉积情况,qRT-PCR法检测成骨特性因子核心结合因子α-1(RUNX2)、成骨分化特异性因子骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)mRNA表达水平,Western Blot法检测MAPK通路蛋白磷酸化表达水平。对数期细胞分为空白组、IGF-1组、ERK通路抑制剂(PD98059)组、PD+IGF-1组、p38通路抑制剂(SB202192)组、SB+IGF-1组,qRT-PCR法检测成骨特性因子RUNX2、成骨分化特异性因子骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)mRNA表达水平。结果不同浓度IGF-1组ALP显色加深,ALP活性升高,钙盐结节形成增多,RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平升高,磷酸化ERK、p38、JNK蛋白表达增加,具有剂量效应(P<0.05)。与空白组比较,PD组、SB组C3H10T1/2细胞RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平明显降低(P<0.05),PD+IGF-1组、SB+IGF-1组C3H10T1/2细胞RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平明显升高(P<0.05);但与IGF-1组比较,PD+IGF-1组、SB+IGF-1组C3H10T1/2细胞RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论IGF-1促进C3H10T1/2细胞成骨分化,其作用机制可能与激活ERK信号通路和p38 MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子1 丝裂原活化蛋白激酶信号通路 c3h10T1/2细胞 成骨分化
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基于AMPK/mTOR通路探讨注射用益气复脉对TBHP诱导H9c2细胞损伤的保护作用
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作者 王瑜 苗婷 马胜男 《中国中医药科技》 CAS 2024年第4期602-606,共5页
目的:探讨注射用益气复脉(YQFM)通过AMPK/mTOR信号通路调控自噬减轻叔丁基过氧化氢(TBHP)所致H9c2心肌细胞损伤的机制。方法:体外培养H9c2心肌细胞,分为正常对照组、TBHP组、TBHP+YQFM组。CCK-8法检测各组H9c2心肌细胞存活率;免疫荧光... 目的:探讨注射用益气复脉(YQFM)通过AMPK/mTOR信号通路调控自噬减轻叔丁基过氧化氢(TBHP)所致H9c2心肌细胞损伤的机制。方法:体外培养H9c2心肌细胞,分为正常对照组、TBHP组、TBHP+YQFM组。CCK-8法检测各组H9c2心肌细胞存活率;免疫荧光检测细胞自噬情况;免疫印迹法检测各组细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及AMPK/mTOR通路相关蛋白表达。结果:用2、4、8、16 g/L的YQFM预处理后,可显著恢复TBHP诱导的H9c2细胞损伤;免疫荧光染色结果显示,与正常对照组相比,TBHP组细胞LC3荧光强度显著升高(P<0.01);与TBHP组相比,TBHP+YQFM组LC3荧光强度降低,其中2 g/L YQFM组具有显著性(P<0.05)。Western blot检测结果显示:TBHP组p-AMPK/AMPK、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达显著增加,p-mTOR/mTOR比率显著降低;YQFM预处理使自噬相关蛋白p-AMPK/AMPK、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率明显降低,4 g/L YQFM组p-mTOR/mTOR比率明显升高。结论:注射用益气复脉能有效拮抗TBHP引起的H9c2细胞损伤,其机制与通过AMPK/mTOR信号通路调控自噬途径有关。 展开更多
关键词 注射用益气复脉 叔丁基过氧化氢 h9c2心肌细胞 AMPK/mTOR信号通路 自噬 体外实验
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山茶油对H_(2)O_(2)诱导大鼠H9C2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用
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作者 晏庆 郭蓁 +3 位作者 孙赛男 黎婧 谭机永 黎静 《海南医学院学报》 北大核心 2024年第1期1-7,共7页
目的:探讨山茶油对H_(2)O_(2)诱导大鼠H9C2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:CCK8法检测不同浓度H_(2)O_(2)处理H9C2心肌细胞后细胞存活率,以正常培养的细胞为空白对照组,以200μmol/L H_(2)O_(2)处理细胞24 h,构建氧化应激损伤模... 目的:探讨山茶油对H_(2)O_(2)诱导大鼠H9C2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:CCK8法检测不同浓度H_(2)O_(2)处理H9C2心肌细胞后细胞存活率,以正常培养的细胞为空白对照组,以200μmol/L H_(2)O_(2)处理细胞24 h,构建氧化应激损伤模型作为模型组。分别用1%,0.1%,0.01%浓度的山茶油预处理细胞24 h后,加入H_(2)O_(2)作用24 h作为实验组。利用β-半乳糖苷酶衰老染色实验,线粒体膜电位实验,EdU细胞增殖染色实验及划痕实验来观察各组细胞衰老,线粒体膜电位,增殖凋亡,迁移的变化。利用试剂盒检测各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量。结果:不同浓度H_(2)O_(2)处理H9C2心肌细胞后,细胞活力均受到抑制,且与H_(2)O_(2)浓度正相关(P<0.01)。与空白对照组相比,H_(2)O_(2)模型组细胞衰老阳性率、MDA含量和LDH活性增加(P<0.01);线粒体膜电位、细胞增殖率、迁移率、SOD活性下降(P<0.01)。与H_(2)O_(2)模型组相比,实验组细胞衰老阳性率(P<0.05)、MDA含量和LDH活性降低(P<0.05);线粒体膜电位增加、细胞增殖率和迁移率增加(P<0.05)。结论:山茶油可显著抑制H9C2细胞的氧化应激损伤,发挥心肌细胞保护作用。 展开更多
关键词 山茶油 h_(2)O_(2) h9c2 氧化应激 保护
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海藻糖激活核因子E2相关因子2改善缺氧复氧诱导的H9C2心肌细胞损伤的研究
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作者 卢衍羽 张丽娟 +1 位作者 毛艺锟 李瑜 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期954-959,共6页
目的通过建立氧糖剥夺-缺氧复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤模型模拟心肌缺血再灌注损伤,探讨海藻糖对OGD/R大鼠H9C2心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法H9C2细胞分为对照组、OGD/R组、海藻糖组(OGD/R+海藻... 目的通过建立氧糖剥夺-缺氧复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤模型模拟心肌缺血再灌注损伤,探讨海藻糖对OGD/R大鼠H9C2心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法H9C2细胞分为对照组、OGD/R组、海藻糖组(OGD/R+海藻糖)、联合组(OGD/R+海藻糖+ML385)。四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖能力,并通过检测乳酸脱氢酶及Hoechst/丙啶碘化物染色检测细胞膜受损情况。Western blot检测核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)及其下游相关蛋白表达;活性氧、线粒体膜电位检测氧化应激水平;Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果与对照组比较,OGD/R组细胞活力明显降低。与OGD/R组比较,不同浓度海藻糖干预能显著提升细胞活力,与海藻糖浓度呈正相关(P<0.01);与OGD/R组比较,海藻糖组线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、Nrf2、血红素加氧酶1和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸醌氧化还原酶1、Bcl-2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)表达明显增高,活性氧、丙二醛、应答元素结合蛋白1、Bax、Bax/Bcl-2、裂解型Caspase-3表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与海藻糖组比较,联合组活性氧、丙二醛及肿瘤坏死因子α、白细胞介素(interleukin,IL)1βmRNA、IL-6 mRNA表达明显增高,MMP、GSH水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);联合组Bax、Bax/Bcl-2、裂解型Caspase-3表达明显高于海藻糖组(1.77±0.08 vs 1.20±0.20,3.41±1.45 vs 0.99±0.15,4.10±1.05 vs 1.79±0.52,P<0.01),Bcl-2、Caspase-3表达明显低于海藻糖组(0.58±0.21 vs 1.23±0.25,0.87±0.25 vs 1.45±0.31,P<0.01)。结论海藻糖可以被视为一种Nrf2激活剂,通过激活Nrf2抑制氧化应激和凋亡,改善OGD/R诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 海藻糖 NF-E2相关因子2 低氧 氧化性应激 细胞凋亡 大鼠h9c2心肌细胞
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YTHDF1对缺氧复氧损伤后H9c2心肌细胞凋亡及氧化应激的影响
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作者 涅鲁排尔·热依木江 金颖 +4 位作者 罗荔 张雅玲 刘刚 李雪 罗梅 《国际老年医学杂志》 2024年第1期46-52,共7页
目的探讨含YTH域家族蛋白1(YTHDF1)对缺氧复氧(H/R)条件下H9c2细胞凋亡和氧化应激的影响。方法用H9c2细胞构建H/R模型,并用YTHDF1小干扰RNA(siRNA)和过表达质粒转染细胞,采用MTT比色法测定细胞活力,并用赫斯特染色及流式细胞术测定细胞... 目的探讨含YTH域家族蛋白1(YTHDF1)对缺氧复氧(H/R)条件下H9c2细胞凋亡和氧化应激的影响。方法用H9c2细胞构建H/R模型,并用YTHDF1小干扰RNA(siRNA)和过表达质粒转染细胞,采用MTT比色法测定细胞活力,并用赫斯特染色及流式细胞术测定细胞凋亡及细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和细胞培养基上清中乳酸脱氢酶(LDH)活性,Western blot法测定细胞中YTHDF1、cleaved caspase-3、Bax和FasL的蛋白水平,比较对照组(control组)、H/R组、YTHDF1基因干扰和过表达组H9c2细胞凋亡和氧化损伤情况。结果H/R损伤后LDH活性和MDA含量明显升高(P<0.05),SOD活性和细胞活力显著降低(P<0.05),H/R处理后H9c2细胞中YTHDF1的蛋白水平均显著升高(P<0.05);YTHDF1干扰减轻了H/R损伤引起的形态学变化,YTHDF1过表达增加了H/R损伤引起的细胞形态变化;H/R损伤处理后cleaved caspase-3、Bax和FasL蛋白表达显著高于control组(P<0.05);H/R+YTHDF1-siRNA组cleaved caspase-3、Bax和FasL的蛋白水平显著低于H/R组(P<0.05),H/R+pcDNA3.1-YTHDF1组cleaved caspase-3、Bax和FasL蛋白水平显著高于H/R组(P<0.05)。结论下调YTHDF1可以抑制H/R处理的H9c2细胞cleaved caspase-3、Bax和FasL蛋白水平的上调并降低H/R处理的心肌细胞氧化损伤。 展开更多
关键词 YTh域家族蛋白1 缺氧复氧 h9c2细胞 凋亡 氧化应激
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马里苷减轻高糖诱导的大鼠心肌细胞系H9c2损伤
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作者 祖力皮亚·阿布拉 赵强 +1 位作者 张泰民 李甜 《基础医学与临床》 CAS 2024年第9期1269-1273,共5页
目的研究马里苷对高糖所致大鼠心肌细胞系(H9c2)损伤的影响。方法将H9c2细胞分为对照组(Ctrl)、高糖(30 mmol/L)损伤模型组和马里苷(25、50、100μmol/L)干预模型组。MTT法检测H9c2细胞的活性;Western blot检测细胞LC-3Ⅱ/Ⅰ、p62、mTO... 目的研究马里苷对高糖所致大鼠心肌细胞系(H9c2)损伤的影响。方法将H9c2细胞分为对照组(Ctrl)、高糖(30 mmol/L)损伤模型组和马里苷(25、50、100μmol/L)干预模型组。MTT法检测H9c2细胞的活性;Western blot检测细胞LC-3Ⅱ/Ⅰ、p62、mTOR蛋白表达。结果与对照组相比,模型组细胞活性下降(P<0.01),马里苷组H9c2细胞活性显著增强(P<0.01);模型组LC-3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平降低(P<0.05),p62及mTOR水平升高(P<0.01),马里苷组LC-3Ⅱ/Ⅰ水平增加,p62及mTOR降低(P<0.01),且随着浓度的增加蛋白质表达量更加明显。结论马里苷能够影响高糖诱导的心肌细胞损伤的自噬相关蛋白质的表达。 展开更多
关键词 马里苷 h9c2细胞 高糖损伤 自噬
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黄芩苷通过调节Nrf2/HO-1信号通路减轻阿霉素诱导的H9c2细胞毒性
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作者 李登科 张伟 黄从新 《心血管病学进展》 CAS 2024年第5期457-465,共9页
目的探讨黄芩苷对阿霉素(Dox)诱导的H9c2细胞毒性的影响及内在机制。方法采用50μmol/L黄芩苷预处理H9c2细胞24 h,然后1μmol/L Dox处理H9c2细胞24 h,建立体外Dox心肌毒性模型。采用CCK8法检测细胞活力;收集细胞上清检测各组心肌损伤标... 目的探讨黄芩苷对阿霉素(Dox)诱导的H9c2细胞毒性的影响及内在机制。方法采用50μmol/L黄芩苷预处理H9c2细胞24 h,然后1μmol/L Dox处理H9c2细胞24 h,建立体外Dox心肌毒性模型。采用CCK8法检测细胞活力;收集细胞上清检测各组心肌损伤标志物乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的水平以及氧化应激相关指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)的水平;使用DHE试剂盒检测各组活性氧(ROS)的含量;使用TUNEL染色检测各组细胞凋亡水平,RT-qPCR和Western blot实验用于检测氧化应激和凋亡相关分子的表达水平。结果与Dox组相比,黄芩苷能提高H9c2细胞活力,降低LDH、cTnI、CK-MB水平;DHE染色显示黄芩苷能减少ROS的生成,增加SOD、GSH-Px的活性,降低MDA的含量;TUNEL染色结果显示黄芩苷能减少阳性细胞数量;RT-qPCR和Western blot检测显示黄芩苷能上调Nrf2、HO-1、SOD2、Bcl-2的表达,降低Cleaved-caspase 3和Bax的表达。然而,Nrf2的特异性抑制剂ML385可逆转黄芩苷引起的上述变化。结论黄芩苷通过上调Nrf2/HO-1信号通路减轻氧化应激和凋亡,减轻Dox诱导的H9c2细胞毒性。 展开更多
关键词 阿霉素 h9c2细胞 黄芩苷 氧化应激 凋亡
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交趾黄檀新黄酮类成分及其抗H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤活性研究
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作者 任佳慧 郑启万 +3 位作者 孟晓伟 庞妍 陈兰英 刘荣华 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期126-132,共7页
目的研究交趾黄檀Dalbergia cochinchinensis Pierre ex Laness的新黄酮类成分及其抗H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤活性。方法交趾黄檀70%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、反相制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得... 目的研究交趾黄檀Dalbergia cochinchinensis Pierre ex Laness的新黄酮类成分及其抗H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤活性。方法交趾黄檀70%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、反相制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用CCK-8法检测其对H9c2心肌细胞的活性及对H9c2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用,并分析其构效关系。结果从中分离得到12个化合物,分别鉴定为阔叶黄檀酚(1)、5-O-methyllatifolin(2)、mimosifoliol(3)、5-O-methydalbergiphenol(4)、dalbergiphenol(5)、cearoin(6)、2,4-dihydroxy-5-methoxy-benzophenone(7)、2-hydroxy-4,5-dimethoxybenzophenone(8)、melannoin(9)、2,2′,5-trihydroxy-4-methoxybenzophenone(10)、黄檀素(11)、4-甲氧基黄檀醌(12)。黄檀酚及黄檀内酯类化合物对H9c2细胞毒性较小,黄檀酚类化合物抗H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤活性较强。结论化合物8为新天然产物,化合物4、9为首次从该植物中分离得到。黄檀酚类化合物可能是抗H9c2细胞缺氧/复氧损伤的主要新黄酮类成分。 展开更多
关键词 交趾黄檀 新黄酮 分离鉴定 h9c2心肌细胞 缺氧/复氧损伤 构效关系
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清营生脉汤激活Akt信号通路保护H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的作用研究
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作者 谢蝶 付殷 +2 位作者 赵东 张璐艳 张洋 《中国中医急症》 2024年第5期804-808,共5页
目的研究清营生脉汤含药血清对缺氧复氧诱导H9c2心肌细胞损伤的保护机制。方法本研究采用H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)方法模拟心肌缺血再灌注损伤(MIRI)细胞模型,细胞实验分组为:空白血清对照组、模型组、含药血清低剂量组、含药血清中... 目的研究清营生脉汤含药血清对缺氧复氧诱导H9c2心肌细胞损伤的保护机制。方法本研究采用H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)方法模拟心肌缺血再灌注损伤(MIRI)细胞模型,细胞实验分组为:空白血清对照组、模型组、含药血清低剂量组、含药血清中剂量组、含药血清高剂量组。应用CCK-8法测定心肌细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,ELISA法检测超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,Western blotting法检测细胞内磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)及p-Akt的蛋白表达。结果与对照组相比,模型组细胞存活率显著降低、凋亡率显著升高、细胞内SOD水平显著降低,LDH、MDA、CK-MB水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,含药血清低、中、高剂量组细胞的存活率显著升高、凋亡率显著降低、细胞内SOD水平显著升高,LDH、MDA、CK-MB水平显著降低(P<0.01);与对照组相比,模型组细胞中p-Akt蛋白表达水平显著降低(P<0.01),p-Akt/Akt比值降低(P<0.05);与模型组相比,含药血清高剂量组细胞内p-Akt蛋白表达量显著升高(P<0.01),p-Akt/Akt比值明显升高(P<0.05)。结论清营生脉汤含药血清能够提高缺氧复氧心肌细胞的活性,降低细胞凋亡率,升高SOD水平,降低LDH、MDA、CK-MB水平,提高细胞抗氧化能力,且可能通过促进Akt磷酸化降低缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤程度。 展开更多
关键词 心肌缺血再灌注损伤 清营生脉汤 含药血清 h9c2 大鼠
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HBA2:c.2T>C和HBA2:c.2delT两例罕见突变引起血红蛋白H病家系分析
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作者 王秋华 陈杏园 +4 位作者 唐宁 严提珍 黄钧 钟青燕 罗世强 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期520-524,共5页
目的:分别对HBA2:c.2T>C和HBA2:c.2delT两种罕见HBA2基因起始密码子突变复合东南亚型α-地贫的血红蛋白H病病例及其家系成员进行致病基因分析,了解HBA2:c.2T>C和HBA2:c.2delT突变与临床表型的关系。方法:采集家系成员外周血进行... 目的:分别对HBA2:c.2T>C和HBA2:c.2delT两种罕见HBA2基因起始密码子突变复合东南亚型α-地贫的血红蛋白H病病例及其家系成员进行致病基因分析,了解HBA2:c.2T>C和HBA2:c.2delT突变与临床表型的关系。方法:采集家系成员外周血进行血细胞分析及毛细管电泳血红蛋白分析,缺口PCR(Gap-PCR)、反向点杂交法(RDB)检测ɑ-地贫基因常见类型突变,Sanger测序法对HBA1和HBA2基因序列进行分析。结果:检测出两个先证者基因型分别为--SEA/αα复合HBA2:c.2T>C和--SEA/αα复合HBA2:c.2delT,家系成员中检出HBA2:c.2T>C/WT和HBA2:c.2delT/WT,均表现为小细胞低色素性贫血。结论:HBA2:c.2T>C和HBA2:c.2delT为杂合突变时机体可出现静止型α-地贫的表型,当其复合轻型α-地贫时可使机体出现血红蛋白H病的临床表现,本研究为遗传咨询提供依据。 展开更多
关键词 α-珠蛋白基因 hBA2:c.2T>c hBA2:c.2delT 血红蛋白h
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滇龙胆C2H2基因家族鉴定及响应茉莉酸甲酯诱导表达分析
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作者 谷云霞 王梦琦 +2 位作者 张婷 单李铭 刘小莉 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第9期51-57,共7页
滇龙胆(Gentiana rigescens)是龙胆药材的基源植物之一,C2H2锌指蛋白是锌指蛋白家族中的一个大家族,其成员在1年生滇龙胆转录中最为丰富,本研究拟在对滇龙胆转录组中C2H2基因家族进行鉴定并分析响应茉莉酸甲酯(MeJA)诱导表达模式,为滇龙... 滇龙胆(Gentiana rigescens)是龙胆药材的基源植物之一,C2H2锌指蛋白是锌指蛋白家族中的一个大家族,其成员在1年生滇龙胆转录中最为丰富,本研究拟在对滇龙胆转录组中C2H2基因家族进行鉴定并分析响应茉莉酸甲酯(MeJA)诱导表达模式,为滇龙胆C2H2转录因子功能研究提供参考。基于滇龙胆转录组数据,利用NCBI、MAFFT、MEME、STRING等在线网站及TBtools软件对其基因信息、进化关系、表达模式等进行分析。结果表明,从滇龙胆转录组中共鉴定出31个含有C2H2保守结构域的序列(GrC2H2 1~GrC2H2 31),编码的氨基酸数量在53(GrC2H2 14)~604个(GrC2H2 31)之间,等电点介于4.23~9.92之间,且31个家族成员都定位在细胞核中,其家族分为10个亚家族,GrC2H2 5、GrC2H2 6、GrC2H2 8、GrC2H2 11、GrC2H2 17、GrC2H2 18、GrC2H2 19、GrC2H2 22、GrC2H2 23和GrC2H2 31共10个转录因子为滇龙胆C2H2转录因子的正调控因子。2种浓度MeJA诱导后C2H2表达模式显示,MeJA浓度越高,GrC2H2基因表达量越高。本研究首次鉴定了滇龙胆C2H2基因家族并分析了其响应MeJA表达模式,可为后续深入研究C2H2基因家族功能及滇龙胆优质品种的选育提供理论参考。 展开更多
关键词 滇龙胆 生物信息学 c2h2转录因子 基因表达 茉莉酸甲酯诱导
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单宁酸抑制细胞焦亡减轻H9c2心肌细胞缺氧损伤的研究
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作者 郑涛 马龙 张龙江 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期811-816,共6页
目的 探究单宁酸对缺氧诱导的H9c2心肌细胞的保护作用及机制。方法 体外培养大鼠H9c2细胞,利用条件培养基和缺氧小室建立缺氧诱导的H9c2细胞损伤模型,分为对照组、缺氧1组、低剂量单宁酸组(0.2μmol单宁酸)和高剂量单宁酸组(0.8μmol单... 目的 探究单宁酸对缺氧诱导的H9c2心肌细胞的保护作用及机制。方法 体外培养大鼠H9c2细胞,利用条件培养基和缺氧小室建立缺氧诱导的H9c2细胞损伤模型,分为对照组、缺氧1组、低剂量单宁酸组(0.2μmol单宁酸)和高剂量单宁酸组(0.8μmol单宁酸)。利用鱼藤酮进行功能回复实验,分为缺氧2组、缺氧+鱼藤酮抑制剂组(50 nmol鱼藤酮)、缺氧+鱼藤酮抑制剂+高剂量单宁酸组(50 nmol鱼藤酮+0.8μmol单宁酸)、缺氧+高剂量单宁酸组(0.8μmol单宁酸)。细胞计数试剂盒8法和乳酸脱氢酶(LDH)评估细胞损伤;化学荧光法检测细胞内活性氧(ROS)、线粒体ROS;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)和白细胞介素1β(IL-1β)蛋白表达;酶联免疫吸附测定IL-1β分泌。结果 与对照组比较,缺氧1组H9c2细胞密度降低,贴壁不牢,细胞存活率显著降低,LDH活性、细胞凋亡率、NLRP3、裂解的(Cleaved)Caspases-1、Cleaved-GSDMD和Cleaved-IL-1β蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与缺氧组1比较,低剂量单宁酸组、高剂量单宁酸组细胞存活率显著升高,LDH活性、细胞凋亡率、NLRP3、Cleaved-Caspases-1、Cleaved-GSDMD和Cleaved-IL-1β蛋白表达水平、分泌的IL-1β水平显著降低(P<0.05)。与缺氧2组比较,缺氧+鱼藤酮抑制剂组线粒体ROS、NLRP3、Cleaved-IL-1β蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与缺氧+高剂量单宁酸组比较,缺氧+鱼藤酮抑制剂+高剂量单宁酸组的线粒体ROS(0.85±0.02 vs 0.40±0.03)、NLRP3(0.61±0.03 vs 0.47±0.05)、Cleaved-IL-1β蛋白表达水平(0.70±0.06 vs 0.48±0.09)显著升高(P<0.05)。结论 单宁酸可通过抑制ROS/NLRP3通路介导的焦亡,减轻缺氧诱导的H9c2细胞损伤。 展开更多
关键词 细胞焦亡 缺氧 线粒体 大鼠h9c2心肌细胞 单宁酸
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Simulation of nanoparticle coagulation in radio-frequency C_2H_2/Ar microdischarges
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作者 刘相梅 李奇楠 李瑞 《Chinese Physics B》 SCIE EI CAS CSCD 2016年第6期305-311,共7页
The nanoparticle coagulation is investigated by using a couple of fluid models and aerosol dynamics model in argon with a 5% molecular acetylene admixture rf microdischarges,with the total input gas flow rate of 400 s... The nanoparticle coagulation is investigated by using a couple of fluid models and aerosol dynamics model in argon with a 5% molecular acetylene admixture rf microdischarges,with the total input gas flow rate of 400 sccm.It co-exists with a homogeneous,secondary electron-dominated low temperature γ-mode glow discharges.The heat transfer equation and flow equation for neutral gas are taken into account.We mainly focused on investigations of the nanoparticle properties in atmospheric pressure microdischarges,and discussed the influences of pressure,electrode spacing,and applied voltage on the plasma density and nanoparticle density profiles.The results show that the characteristics of microdischarges are quite different from those of low pressure radio-frequency discharges.First,the nanoparticle density in the bulk plasma in microdischarges is much larger than that of low pressure discharges.Second,the nanoparticle density of 10 nm experiences an exponential increase as soon as the applied voltage increases,especially in the presheath.Finally,as the electrode spacing increases,the nanoparticle density decreased instead of increasing. 展开更多
关键词 nanoparticle coagulation c2h2/ar discharges MIcROdischarges
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丙泊酚后处理在高糖环境下改善H9c2心肌细胞缺氧/复氧诱导的凋亡和自噬
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作者 曹炜炜 张欢 +1 位作者 张月梅 刘建军 《中国心血管病研究》 CAS 2024年第2期185-192,共8页
目的探讨丙泊酚后处理(propofol postconditioning,P-Post C)在高糖环境下对H9c2心肌细胞缺血/复氧诱导的凋亡和自噬的改善作用。方法2023年4月于上海市奉贤区中心医院开展实验,将大鼠心脏来源的H9c2细胞暴露于高糖48 h,然后在不存在或... 目的探讨丙泊酚后处理(propofol postconditioning,P-Post C)在高糖环境下对H9c2心肌细胞缺血/复氧诱导的凋亡和自噬的改善作用。方法2023年4月于上海市奉贤区中心医院开展实验,将大鼠心脏来源的H9c2细胞暴露于高糖48 h,然后在不存在或存在不同浓度的P-Post C后处理的情况下,在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)。细胞分组:NC组、HG组、NC+H/R组、HG+H/R组、HG+H/R+P12.5组、HG+H/R+P25组、HG+H/R+P50组、HG+H/R+P100组和HG+H/R+P25+Brusatol组。确定丙泊酚的浓度后,在使用或不使用Nrf2/HO-1通路抑制剂的情况下,对H9c2细胞进行H/R和P-Post C处理,以探索它们在P-Post C介导的高糖下对凋亡和自噬细胞死亡的保护中的作用。结果结果显示,含或不含H/R的高糖降低了H9c2细胞的活力,增加了乳酸脱氢酶的释放和活性氧的产生,所有这些都被P-Post C显著逆转,尤其是在25μmol/L(P25)浓度下(P<0.05)。此外,发现丙泊酚(P25)降低H9c2细胞的凋亡和自噬,同时增加Nrf2和HO-1的表达(P<0.05)。丙泊酚(P25)对H/R损伤的保护作用通过使用Nrf2/HO-1通路抑制剂而逆转(P<0.05)。结论P-Post C通过上调高糖状态下的Nrf2/HO-1通路活性,减轻了H/R损伤诱导的H9c2心脏细胞凋亡和自噬。 展开更多
关键词 丙泊酚后处理 h9c2心肌细胞 缺氧/复氧 凋亡 自噬 Nrf2/hO-1通路
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东紫苏精油对间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化的影响及机制
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作者 张梦媛 徐芳 +3 位作者 柏桦 邹伟 刘晓颖 王琦 《食品研究与开发》 CAS 2024年第9期67-74,共8页
为探讨东紫苏精油对小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化的作用及降脂机制,利用噻唑蓝[the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]法检测细胞成活率,以界定浓度的适宜范围;用油红O染色法对东紫苏精油... 为探讨东紫苏精油对小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化的作用及降脂机制,利用噻唑蓝[the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]法检测细胞成活率,以界定浓度的适宜范围;用油红O染色法对东紫苏精油作用后的细胞成脂分化作用进行分析;甘油磷酸氧化酶—过氧化物酶(glycerol phosphate oxidase-p-aminophenazone,GPO-PAP)法、胆固醇氧化酶、过氧化物酶和4-氨基安替比林苯酚(cholesterol oxidase,peroxidase and 4-aminoantipyrine phenol,COD-PAP)酶法检测东紫苏精油处理后细胞内甘油三酯、胆固醇含量的变化;荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和蛋白质印迹(western blot)分别检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxide proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer-binding proteinsα,C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(fatty acid-binding protein4,FABP4)mRNA和相关蛋白在成脂分化中的表达水平。结果表明:与空白对照组相比,高脂模型组的总胆固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triacylglyceride,TG)含量显著增加(P<0.05),小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2中PPARγ、C/EBPα、FABP4 mRNA和蛋白表达明显增加。与高脂模型组相比,中剂量(50μg/mL)和高剂量(100μg/mL)精油组TC和TG含量明显下降,小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2中PPARγ、C/EBPα、FABP4 mRNA和蛋白表达明显下降。试验结果表明,东紫苏精油可能通过调控PPARγ/C/EBPα/FABP4信号通路发挥对C3H10T1/2细胞成脂分化的抑制作用,达到减脂目的。 展开更多
关键词 东紫苏精油 间充质干细胞c3h10T1/2 成脂分化 降脂机制 信号通路
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金银花提取物对脂多糖诱导H9c2心肌细胞的炎症、氧化损伤和凋亡的作用机制
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作者 代宁 初毅 +2 位作者 郭靖 燕虹 刘继朋 《中文科技期刊数据库(文摘版)医药卫生》 2024年第3期0184-0188,共5页
本研究旨在探究金银花提取物对脂多糖诱导下H9c2心肌细胞炎症、氧化损伤和凋亡的作用机制。方法 使用H9c2心肌细胞作为研究对象,分为对照组、脂多糖诱导组和金银花提取物处理组。然后通过对炎症相关因子表达水平、氧化损伤标志物和凋亡... 本研究旨在探究金银花提取物对脂多糖诱导下H9c2心肌细胞炎症、氧化损伤和凋亡的作用机制。方法 使用H9c2心肌细胞作为研究对象,分为对照组、脂多糖诱导组和金银花提取物处理组。然后通过对炎症相关因子表达水平、氧化损伤标志物和凋亡相关因子表达水平的检测结果对细胞的炎症反应、氧化损伤和凋亡情况进行进一步的评估。结果 与脂多糖诱导组相比,金银花提取物处理组显示出明显的抑制炎症反应、减轻氧化损伤和凋亡的作用。金银花提取物处理组中炎症相关因子表达水平显著降低,氧化损伤标志物水平较低,并且凋亡相关因子表达水平明显减少。结论 金银花提取物对脂多糖诱导的H9c2心肌细胞具有抗炎、抗氧化和抗凋亡的作用。通过研究结果可以得出,金银花提取物可能成为预防和治疗心肌细胞炎症、氧化损伤以及凋亡相关疾病的潜在药物。 展开更多
关键词 金银花提取物 脂多糖诱导 h9c2心肌细胞 炎症 氧化损伤 凋亡
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Influence of dielectric materials on uniformity of large-area capacitively coupled plasmas for N_2/Ar discharges
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作者 梁英爽 张钰如 王友年 《Chinese Physics B》 SCIE EI CAS CSCD 2016年第10期244-251,共8页
The effect of the dielectric ring on the plasma radial uniformity is numerically investigated in the practical 450-mm capacitively coupled plasma reactor by a two-dimensional self-consistent fluid model. The simulatio... The effect of the dielectric ring on the plasma radial uniformity is numerically investigated in the practical 450-mm capacitively coupled plasma reactor by a two-dimensional self-consistent fluid model. The simulations were performed for N2/Ar discharges at the pressure of 300 Pa, and the frequency of 13.56 MHz. In the practical plasma treatment process,the wafer is always surrounded by a dielectric ring, which is less studied. In this paper, the plasma characteristics are systematically investigated by changing the properties of the dielectric ring, i.e., the relative permittivity, the thickness and the length. The results indicate that the plasma parameters strongly depend on the properties of the dielectric ring. As the ratio of the thickness to the relative permittivity of the dielectric ring increases, the electric field at the wafer edge becomes weaker due to the stronger surface charging effect. This gives rise to the lower N~+ ion density, flux and N atom density at the wafer edge. Thus the homogeneous plasma density is obtained by selecting optimal dielectric ring relative permittivity and thickness. In addition, we also find that the length of the dielectric ring should be as short as possible to avoid the discontinuity of the dielectric materials, and thus obtain the large area uniform plasma. 展开更多
关键词 capacitive N_2/ar discharge fluid simulation dielectric materials plasma radial uniformity
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葛根素对缺氧复氧损伤H9C2心肌细胞的保护作用及其与miR-195表达、Parthanatos死亡的相关性
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作者 李佳寅 潘海华 姚琪 《中国中医药科技》 CAS 2023年第1期42-44,138,共4页
目的:研究葛根素对于心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及其与miR-195表达及与PARP-1依赖性细胞死亡(Parthanatos)的相关性。方法:培养H9C2心肌细胞,分4组,分别为:正常对照组(Control)、缺氧复氧组(Hypoxia Reoxygenation,HR)、转染组(Tra... 目的:研究葛根素对于心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及其与miR-195表达及与PARP-1依赖性细胞死亡(Parthanatos)的相关性。方法:培养H9C2心肌细胞,分4组,分别为:正常对照组(Control)、缺氧复氧组(Hypoxia Reoxygenation,HR)、转染组(Transfection Group,TG)、葛根素组(Puerarin Group,PG),其中HR组、TG组、GP组均构建心肌细胞缺氧复氧模型,转染组预先转染沉默miR-195表达,葛根素组预先给药,浓度为50μmol/L,检测心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)的释放,细胞活力检测,通过qPCR法检测Parthanatos主要基因凋亡诱导因子(AIF)与多聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)的表达。结果:相较于HR组,TG组与PG组细胞活力均提高,LDH含量均下降(均P<0.05);相较于正常组,HR组miR-195、AIF、PARP-1的表达显著上升(均P<0.05),TG组、PG组相较于HR组,miR-195、AIF、PARP-1的表达均显著降低(均P<0.05)。结论:H9C2心肌细胞H/R损伤过程中主要发生Parthanatos死亡,葛根素可能通过抑制miR-195的表达降低Parthanatos死亡。 展开更多
关键词 葛根素 h9c2心肌细胞 缺氧复氧损伤 miR-195 Parthanatos死亡 体外实验
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