反相C_(30)柱在HPLC分析类胡萝卜素中的应用

本文介绍了一种最近在类胡萝卜素高压液相色谱分析中非常引人注目的固定相—反相C30柱,并例举了这种柱子在食品—特别在植物食品—的类胡萝卜素分析中的一些应用实例。与反相C18固定相相比,C30固定相分离类胡萝卜素的几何异构体具有明显的优势。因此,可以认为:应用反相C30柱分析生物样品—特别是食品材料—中的类胡萝卜素会具有良好的前景。

C_(30)柱分离万寿菊花中的叶黄素类化合物初探

应用C30-HPLC-PDA,万寿菊花萃取物中的叶黄素类化合物获得了良好的分离,包括:叶黄素酯的分离和单体几何异构体的分离。色谱条件为:WatersYMCCarotenoidS-5(4.6×250mm)柱;乙腈-甲醇(75:25,V/V)为流动相A,甲基叔丁基醚为流动相B,线性梯度洗脱;流速:1.0ml/min;PDA波长范围:300～600nm;进样量:20μl。根据各组分的色谱行为、光谱特征和在碘催化下发生几何异构的产物分析对各组分进行初步鉴定。实验结果显示:C30固定相在分离万寿菊花萃取物中的叶黄素类化合物的应用中有良好的前景。

应用C_(30)色谱柱高效液相色谱法同时分析枇杷叶中三萜酸类同分异构体

建立了一种快速、简便测定中药枇杷叶中4种三萜酸成分的液相色谱分析方法。枇杷叶经甲醇提取并定容后，采用C30色谱柱进行分离，以乙腈-水（95：5，v／v）为流动相进行洗脱，流速为1．0mL／min，于210nnl波长下检测。对不同产地枇杷叶中的山楂酸、科罗索酸、齐墩果酸和熊果酸4种同分异构体进行了测定和比较。结果表明，该方法分离度好（分离度（R）≥2．2），精密度高（RSD≤1．1％），线性关系良好（r≥0．9992），重现性良好（RSD≤4．4％），加标回收率范围为95．4％～101．7％（RSD≤4．8％），满足定量要求。该方法简便、快速，结果可靠，可作为枇杷叶质量评价的方法。

C_(30)-HPLC-PDA分离与鉴定β,β-胡萝卜素几何异构体

在装备了二极管阵列(PDA)检测器的HPLC上,应用C30固定相,β,β-胡萝卜素的几何异构体获得了良好的分离。分离条件为:固定相=YMCCarotenoidS-5(4.6×250mm)柱;流动相A=乙腈:甲醇:三乙胺(75:25:0.05,V/V);流动相B=甲基叔丁基醚(MTBE)-三乙胺(100:0.05,V/V);线性梯度:B在20min内由0%增至80%;流速=1.0ml/min;PDA波长范围=260～700nm;进样量=20μl。根据各组分的色谱行为、光谱特征和在碘催化下发生几何异构的产物分析,13,13’-、11,11’-、9,9’-顺式和全反式异构体被鉴定。本项研究的结果奠定了应用C30-HPLC-PDA定量检测β,β-胡萝卜素的几何异构体的基础。

C_(30)-HPLC-PDA分离与鉴定虾青素类化合物初探

虾青素是一种在食品和药品领域应用广泛的具有预防和治疗疾病的功能因子。由于它在RP-HPLC色谱上难以形成良好的色谱峰形,虾青素及其相关化合物的分离和检测成为一项有难度的工作。本项研究中,应用C30-HPLC-PDA做了一系列工作来分离虾青素类化合物,主要包括:虾青素与其双酯的分离、虾青素几何异构体以及降解产物的分离。实验结果表明:在酸性乙腈-水(流动相A)和MTBE(流动相B)的流动相中,可以获得良好的分离效果。这一结果使应用C30-HPLC-PDA定量分析虾青素类化合物成为可能。

应用C_(30)-HPLC-PDA分离与鉴定番茄红素几何异构体

在装备了二极管阵列检测器(PDA)的高压液相色谱(HPLC)上,应用C30柱,番茄红素几何异构体获得了良好的分离。色谱条件为:WatersYMCCarotenoidS-5(4.6×250mm)柱;乙腈-甲醇-三乙胺(75∶25∶0.05,V/V)为流动相A,甲基叔丁基醚-三乙胺(100∶0.05,V/V)为流动相B,流动相B在8min内由0%线性增至55%,而后维持恒定至35min;流速:1.0mL/min;PDA波长范围:260～700nm;进样量:20μL。根据各组分的色谱行为、光谱特征和在碘催化下发生几何异构的产物分析,13,13'-顺式番茄红素、11,11'-顺式番茄红素、9,9'-顺式番茄红素和全反式番茄红素4个组分被鉴定。本项研究的结果奠定了应用C30-HPLC-PDA定量检测番茄红素几何异构体的基础。

应用C_(30)-HPLC-PDA分离与鉴定食品中全反式叶黄素和玉米黄素

在装备了二极管阵列检测器(PDA)的高压液相色谱(HPLC)上,应用C30柱,食品中的全反式叶黄素和玉米黄素获得了良好的分离。分离的色谱条件为:WatersYMCCarotenoidS-5(4.6×250mm)柱;乙腈-甲醇-三乙胺(75:25:0.05)为流动相A,甲基叔丁基醚-三乙胺(100:0.05,)为流动相B,流动相B在20min内由0%线性增至55%;流速为1.0ml/min;PDA波长范围为260～700nm;进样量为20μl。根据其色谱行为和光谱特征,全反式叶黄素和玉米黄素可被定性。这一结果使二者在C30-HPLC-PDA上的定量成为可能。

姜黄中姜黄素的C_(30)-HPLC-PDA分离

在装备了PDA检测器的HPLC上,应用C30柱,姜黄乙醇萃取物中的类姜黄素(curcuminoids)组分获得了良好的分离。分离条件为:固定相为YMCTMCarotenoidS-5(4.6×250mm)柱;流动相A为乙腈:水(80:20,V/V),用磷酸调至pH2.5;流动相B为乙腈:水(95:5,V/V),用磷酸调至pH2.5;线性梯度:B在15min内由0%增至100%;流速=1.0ml/min;PDA波长范围为300～550nm;检测波长为430nm;进样量为20μl。根据各组分的色谱行为和光谱特征分析,3种类姜黄素同系物——姜黄素(curcumin)、去甲氧基姜黄素(demethoxycurcumin)及去二甲氧基姜黄素(Bisdemethoxycurcumin)被鉴定。本研究的结果奠定了应用C30-HPLC-PDA定量检测类姜黄素同系物的基础。

β-胡萝卜素异构体的定性分析

本研究发展并改进了以C30柱分离检测β-胡萝卜素异构体的高效液相色谱(HPLC)方法。在甲醇-MTBE-水(50:45:5,V/V/V)为流动相、检测波长为455nm、流速为1ml/min的色谱条件下,β-胡萝卜素熔融样品中至少有8种物质在10min内得到显著分离。借助液相色谱-大气压化学电离源质谱联用(HPLC-APCI-MS)法检测这8种物质被认为可能是β-胡萝卜素的异构体,通过比较它们的光谱特征和Q值,这些物质被依次鉴定为:15-顺-、13-顺-、9,15-双顺-、9,13-双顺-、全反式-、13,15-双顺-、9-顺-和9,13'-双顺-β-胡萝卜素。

超高压物理能对胡萝卜汁中类胡萝卜素异构体的影响

本实验研究了超高压处理对胡萝卜汁中类胡萝卜素异构体的作用,为利用超高压技术调控利于人体吸收的类胡萝卜素几何异构体奠定基础。胡萝卜汁分别进行100、300、500、700MPa处理5min,然后用C30柱加之二极管阵列检测器的HPLC分离检测样品中类胡萝卜素几何异构体。根据类胡萝卜素组分的色谱行为、光谱特征及Q值对其异构体进行定性,确定主要的类胡萝卜素有全反式β-胡萝卜素、15-顺-、13-顺-、9,15-顺-、9-顺-β-胡萝卜素和全反式α-胡萝卜素等。结果表明,超高压处理可使能垒较低的9、13、15位等全反式类胡萝卜素发生部分顺式异构化或降解生成小分子片段。

高效液相色谱-串联质谱法分离鉴定类球红细菌红色素

利用反相高效液相色谱/二极管阵列检测器/电喷雾质谱联用技术研究类球红细菌红色素,分离鉴定出一种组分,属于类胡萝卜素。采用C30色谱柱,在甲醇-乙腈-MTBE(3 1 1,V/V/V)为流动相,流速为1 mL·min-1,检测波长为475 nm的色谱条件下,类球红细菌红色素中有11个色谱峰在55 min内得到显著分离。借助反相高效液相色谱-电子喷雾离子源质谱联用(RP-HPLC-ESI-MS/MS)法初步确鉴定出这11个色谱峰中一种主要组分,为Philosamiaxanthin,其相对分子质量为566.5。

反相高效液相色谱法测定饲料及饲料添加剂中阿朴酯的含量

研究旨在建立一种反相高效液相色谱(RP-HPLC)法检测饲料及饲料添加剂中阿朴酯含量的方法。饲料或饲料添加剂样品经水、甲基叔丁基醚-甲醇溶液提取,样液在50℃水浴中经氮气吹干(添加剂样品直接稀释),使用流动相稀释,定容,上机检测。结果显示,采用C30色谱柱、流动相甲基叔丁基醚-甲醇比例为15∶85时,阿朴酯能够与其他类胡萝卜素很好地分离。试验所用方法在0.04~10.00 mg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.999 98。样品中添加阿朴酯的加标回收率为86.0%~99.8%,方法检出限为0.15 mg/kg,方法定量限为0.40 mg/kg。研究表明,试验所用方法操作简单、灵敏度高,能够检测饲料及饲料添加剂中的阿朴酯。

斑蝥黄质分子在大鼠体内代谢中的几何异构体组成变化

目的:观察斑蝥黄质分子在雄性大鼠体内代谢过程中的几何异构体组成变化。方法:选择体重250g±10g的雄性SD大鼠,一次灌胃1mL斑蝥黄质与豆油混合物(1.75mg斑蝥黄质/mL),4h后收集其血清、肝脏及粪便,萃取其中的斑蝥黄质组分,在酸性乙腈-水(流动相A)和MTBE(流动相B)流动相梯度洗脱中,用C30-HPLC-PDA对萃取物进行分离,检测其几何异构体的组成。结果:斑蝥黄质分子几何异构体在本项研究中所采用的C30-HPLC条件下可以获得良好的分离。检测结果表明:在大鼠体内的消化、吸收、血液运输和肝脏代谢中,未发现斑蝥黄质分子几何异构体比例的明显变化。

乳酸菌源共轭亚麻酸的分离制备

乳酸菌发酵产生的共轭亚麻酸(CLNA)在慢性疾病中有重要的生理功能,CLNA由多种异构体组成,各种异构体的生理功能存在差异。建立了分离制备乳酸菌发酵液中游离态CLNA异构体的方法,成功获得了结构单一的CLNA异构体。结果表明:在现有条件下乳酸菌源CLNA单一异构体无法通过薄层色谱法分离;高效液相色谱法可实现乳酸菌源CLNA单一异构体的分离,最优分离制备条件为高效液相色谱柱Ultimate(5XB-C30,4. 6 mm×250 mm)、流动相甲醇-水-甲酸(体积比70∶30∶0. 01)、流速1 m L/min、检测紫外波长205 nm和233 nm。在最优分离制备条件下,保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0. 05%～0. 38%、1. 88%～4. 65%,制备得到的CLNA1纯度为97. 48%,CLNA2的纯度为100%,CLNA3的纯度为65. 30%。该方法重复性好,分离度高,适合分离乳酸菌发酵液中游离形式CLNA。

C30-HPLC-PDA-TOF/MS对鱼肝油中维生素A酯顺反异构体的分离与鉴定

目的:建立高效液相色谱/飞行时间质谱法对鱼肝油中不同维生素A酯的顺反异构体进行分离鉴定。方法:选择YMC C30色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲基叔丁基醚-甲醇-水为流动相梯度洗脱,对鱼肝油中各种维生素A酯进行分离,结合电喷雾正离子化/飞行时间质谱法进行结构推断。并通过对照品比对等方法,对分离得到的顺反异构体做构型鉴定。结果:在本试验研究的2种样品中,鳕鱼肝油胶囊中主要含有全反式与13-顺式维生素A棕榈酸酯,鲨鱼肝油中主要含有全反式与13-顺式维生素A油酸酯、棕榈酸酯与硬脂酸酯,以及全反式花生烯酸酯与十七烷酸酯。结论:本方法能有效地分离鉴定鱼肝油中的多种全反式与13-顺式维生素A酯,可为鱼肝油质量控制提供参考依据。

HPLC-ESI-MS/MS法分离鉴定类球红细菌类胡萝卜素

以氧化铝作层析柱填料,对类球红细菌类胡萝卜素进行分离纯化,采用石油醚-丙酮(9∶1,V/V)、石油醚-丙酮(7∶3,V/V)分别对样品进行洗脱,得到色素提取液Ⅰ和色素提取液Ⅱ。采用高效液相色谱-电子喷雾离子源质谱法(HPLC-ESI-MS/MS)分析类球红细菌类胡萝卜素的组成,其中4个色谱峰得到显著分离,初步鉴定这4个色谱峰对应的组分均属于类胡萝卜素。其中,1号色谱峰和3号色谱峰为同一种组分,即扇贝醇(Pectenol)B,相对分子质量583.4;2号色谱峰和4号色谱峰对应组分依次为葫芦黄素(Cucurbitaxanthin)B,玫红品(Rhodopin),相对分子质量依次为601.3,544.2。

蔬菜中胡萝卜素测定方法的改良

目的为有效分离α-、β-胡萝卜素,对胡萝卜素测定方法进行改良。方法样品均质后,采用乙醇60℃浸提,53℃皂化,石油醚萃取,水洗,干燥,浓缩。采用YMC Carotenoid C_(30)色谱柱(3μm,4.6 mm×150 mm),流动相A(甲醇-乙腈-水,73.5∶24.5∶2)、流动相B(甲基叔丁基醚),进行梯度洗脱。检测波长450 nm,高效液相色谱法测定。结果分离α-、β-胡萝卜素及其顺反异构体。多因素方差分析显示,皂化前采用乙醇加热浸提对α-、β-胡萝卜素的提取效果最佳。α-及全反式-β-胡萝卜素分别在0.495~9.90μg/m L、0.552~10.4μg/m L范围内呈良好的线性关系,r^2均大于0.999;加标回收率为81.6%~93.3%,精密度<10%(n=6);当称样量为5 g时,检出限为0.5μg/100 g,定量限为1.5μg/100 g。结论该法有效提高了胡萝卜素的检测技术,灵敏度和准确度较高,可用于蔬菜中α-及β-胡萝卜素含量的测定。