复方双黄连制剂对单核巨噬细胞(RAW264.7)Fc/C3b受体活性和分泌功能的影响

【目的】探究复方双黄连制剂对巨噬细胞吞噬能力和分泌功能的影响,为复方双黄连的深度开发及畜禽用药的合理选择提供科学依据。【方法】将金银花、黄芩、连翘、穿心莲干燥粉碎后分别制备浸膏,按照比例制备双黄连口服液(金银花∶黄芩∶连翘=1∶1∶2)、复方双黄连口服液(金银花∶黄芩∶连翘∶穿心莲=1∶1∶2∶2)及穿心莲口服液,调节pH为7.0,生药浓度为1 g/mL。3种药物作用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,采用CCK-8法检测细胞活力,确定3种药物安全浓度,将药物最大安全浓度以二倍稀释法稀释为3个浓度;采用脂多糖(LPS)和氢化考的松琥珀酸钠(HCSS)作用于RAW264.7细胞模拟机体炎症和免疫抑制状态,3种药物作用于这2种状态的细胞和正常细胞,采用YC、EA玫瑰花环法及中性红吞噬法检测巨噬细胞Fc/C3b受体活性和吞噬能力,采用ELISA法检测巨噬细胞分泌能力。【结果】复方双黄连、双黄连、穿心莲的安全浓度分别为0.625~2.5、3.125~12.5和0.625~2.5 mg/mL。不同浓度复方双黄连、双黄连、穿心莲作用于巨噬细胞,细胞吞噬能力均显著高于空白对照组(P<0.05)。复方双黄连可降低LPS巨噬细胞RAW264.7活跃的吞噬能力,增强HCSS巨噬细胞RAW264.7吞噬能力;不同浓度复方双黄连可使活化的巨噬细胞Fc/C3b受体活性下降,低下的Fc/C3b受体活性增强;不同浓度复方双黄连具有促进巨噬细胞分泌一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)及溶菌酶(LZM)的作用,抑制LPS巨噬细胞NO、TNF-α、IFN-γ及白细胞介素-6(IL-6)的分泌。【结论】复方双黄连可通过活化巨噬细胞Fc/C3b受体活性以增强机体免疫力和抗炎能力,同时对已活化的巨噬细胞分泌功能起到抑制作用,以减少由于免疫功能亢进造成的机体损伤。研究结果为中兽药复方双黄连的深度开发提供了参考依据。

双黄连可溶性粉对S180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞C3b和Fc受体的影响

旨在探究双黄连可溶性粉对S180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞表面C3b受体、Fc受体活性的影响,为扩大双黄连可溶性粉临床使用范围提供科学依据。以双黄连可溶性粉为研究材料,S180荷瘤小鼠为研究对象,YC-花环、EA-花环试验为研究手段,巨噬细胞C3b、Fc受体活性为检测指标,研究双黄连可溶性粉对S180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞C3b、Fc受体活性的影响。结果显示,小鼠接种S180瘤细胞,荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞Fc、C3b受体活性不受影响,免疫抑制剂环磷酰胺具有降低C3b受体活性的作用(对Fc受体活性没有影响),连续给予4 d~14 d不同剂量的双黄连口服液,荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞Fc、C3b受体活性增强,吞噬能力增强,作用优于或相当于黄芪多糖。研究结果为双黄连可溶性粉的临床应用研究提供了科学依据。

氟对人体红细胞膜C3b,IC受体含量及Na^＋—K^＋ATP酶活性的影响

用花环法及酶学比色法检测了氟暴露工人红细胞膜Ｃ３ｂ受体，免疫复合物受体含量及Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶活性。结果表明氟暴露工人红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶活性明显低于对照组，但Ｃ３ｂ受体及免疫复合物受体与对照组比较差异无显著性。提示氟对红细胞具有一定的毒性作用。

实验性癫痫大鼠补体C3b受体的表达

目的建立大鼠的实验性癫痫模型,探讨实验性癫痫大鼠补体C3b受体的表达,进一步揭示癫痫的免疫炎症机制.方法采用皮下注射海仁酸方法建立实验性癫痫大鼠模型;采用免疫组织化学染色方法观察实验性癫痫大鼠补体C3b受体的表达.结果给大鼠皮下注射海仁酸可成功地建立实验性癫痫大鼠模型,其大脑海马锥状细胞层可见到神经元的变性,并可见补体C3b受体的明显表达.结论实验性癫痫大鼠大脑海马硬化发生过程中,存在着补体系统参与的免疫反应发生,并引起炎症反应.

胃癌患者红细胞C3b受体与自然杀伤细胞活性的相关性研究

为研究胃癌患者的红细胞Ｃ３ｂ受体（ＲＢＣＣ３ｂＲ）与自然杀伤（ＮＫ）细胞活性之间的关系，利用酵母菌花环试验及ＭＴＴ比色法对３０例胃癌患者及３８例健康对照者的ＲＢＣＣ３ｂ受体及ＮＫ细胞活性进行了测定。结果表明胃癌患者的这两项免疫指标均比正常对照组显著低下（Ｐ＜０．０１）。经统计学相关性分析显示，这两项免疫指标间呈明显的正相关（ｒ＝０．６０７，Ｐ＜０．００１）。

透脓散对浅部化脓性炎症中性粒细胞FC受体、C3b受体影响的实验研究

目的:研究透脓散对浅部化脓性炎症血中性粒细胞FC受体、C3b受体、C5a与局部愈合情况的影响,探讨透脓散与透托法扶正托毒的作用机理。方法:将Wistar大鼠分为病模对照组、透脓散高、中、低剂量组、头孢拉定组,采用金黄色葡萄球菌局部注射致大鼠背部浅部化脓性炎症模型,分别给予相应药物灌胃,观察脓肿愈合情况,于3、6、9 d取血检测血中性粒细胞FC受体、C3b受体与C5a。结果:透脓散可促进脓肿愈合;给药9 d,透脓散组可降低中性粒细胞比值,恢复至正常水平,且明显优于病模对照组与头孢拉定组;透脓散组能明显升高中性粒细胞C3b受体水平,且给药6 d,明显优于头孢拉定组;给药3 d,透脓散组能明显升高中性粒细胞FC受体水平;并且可以影响血C5a水平,具有双向调节作用,炎症早中期降低C5a水平,炎症中后期升高C5a水平。结论:透脓散可促进脓肿愈合,降低中性粒细胞比值,促进炎症消退;升高中性粒细胞C3b、FC受体水平,促进中性粒细胞黏附与吞噬,双向调节血中C5a水平。

慢性HBV感染者红细胞C3b受体活性与抗病毒治疗应答临床研究

为探讨慢性HBV感染红细胞免疫(RCIA)机制及其与抗病毒治疗应答的关系,应用基因工程α-2bIFN联合天然药物对52例慢性HBV感染患者进行治疗,另以39例未经上述治疗患者作对照。在治疗前后并随访一年观察两组HBVM变化情况,同时应用补体致敏酵母菌花环法测定红细胞C3b受体活性及免疫复合物粘附程度并与正常对照。结果显示:慢性HBV感染有显著异常的RCIA改变,IFN联合疗法可使患者HBVM阴转率明显提高,但对RCIA持续低下者的疗效明显欠佳,一年后重复测定结果相同。研究提示:RCIA功能紊乱参与了慢性HBV感染的免疫病理过程,改善RCIA功能有利于调整患者对抗HBV治疗的免疫应答。

RBC-C3bR、锌指蛋白A20、MIF水平与TRALI的相关性研究

目的探究红细胞C3b受体(RBC-C3bR)、锌指蛋白A20、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)与输血相关性急性肺损伤(TRALI)的相关性。方法前瞻性选取2017年2月至2020年1月在应急总医院进行输血治疗的120例患者作为研究对象,依据美国国家心肺血液研究所公布的TRALI诊断标准,分为TRALI组(60例)和非TRALI组(60例),比较两组患者的RBC-C3bR、锌指蛋白A20、MIF水平之间的差异,分析患者的TRALI与RBC-C3bR、锌指蛋白A20、MIF的相关性,以及RBC-C3bR、锌指蛋白A20、MIF联合检测的诊断效能。结果TRALI组的RBC-C3bR水平明显低于非TRALI组,TRALI组的锌指蛋白A20、MIF水平明显高于非TRALI组(P<0.05)。相关性分析结果显示,患者发生TRALI的风险与RBC-C3bR呈负相关(r=-0.456,P<0.05),与锌指蛋白A20、MIF水平呈正相关(r=0.524、0.855,P<0.05)。RBC-C3bR、锌指蛋白A20、MIF联合检测的灵敏度明显高于各指标单项检测;受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析结果显示,RBC-C3bR、锌指蛋白A20、MIF水平诊断TRALI的临界值分别为9.12、14.11、151.29 ng/mL。通过对TRALI危险因素分析发现,RBC-C3bR、锌指蛋白A20、MIF均是造成患者发生TRALI的影响因素(P<0.05)。结论RBC-C3bR、锌指蛋白A20、MIF与TRALI存在一定相关性,可作为日后判断TRALI的重要参考。

Effect of Asparagus polysaccharide on the number and activity of erythrocyte complement receptor 1 (CD35) of S_(180) mice

Objective To study the effect of Asparagus officinalis polysaccharide on the number and activity of erythrocyte complement receptor 1 in S180 mice.Methods Red blood cells from mice venous blood were labeled by rat anti-mouse CD35 monoclonal antibody and FITC-conjugated goat anti-mouse antibody.Using flow cytometry,we determined the number of ECR1.Using microscope,we studied the adherence between erythrocyte immunity and C3b receptor or tumor-cell by RBC-C3bRR and DTER.Results Comparing the mean value of the number of CR1 on each RBC of high and middle groups with control groups,the mean value of the number of CR1,RBC-C3bRR and DTER of Asparagus officinalis polysaccharide groups are increased significantly.Conclusions Asparagus officinalis polysaccharide can improve the erythrocyte function of S180 mice,which may be one of its most important antitumor mechanisms.

动物红细胞免疫功能的研究

本文应用免疫花环试验测定了黑白花奶牛、水牛、鸡、鸭、小灵猫以及鸡传染性法氏囊病、马立克氏病和霍乱病红细胞上C_3b受体与免疫复合物的变化。检测了它们在红细胞上形成的花环。结果表明,动物因种属不同,红细胞上C_3b受体的数量有着极明显的差异,以鸭为最多,黑白花奶牛最少。动物患病后,红细胞上的C_3b受体可明显地减少。鸡传染性法氏囊病、霍乱病和马立克氏病皆非常明显地低于健康鸡。而红细胞上的免疫复合物,各种动物虽有差异,但差异不显著。患病鸡略低于健康鸡。

肿瘤坏死因子增强巨噬细胞杀伤约氏疟原虫的观察

目的 :观察肿瘤坏死因子 ( TNF)对巨噬细胞 ( MΦ)表面受体表达及吞噬功能的影响 ,探讨 TNF体内杀伤疟原虫机制。方法 :以感染约氏疟原虫的 BAL B/ c小鼠为动物模型 ,将不同浓度的 TNF与小鼠腹腔 MΦ体外培养 5h后 ,加入感染红细胞 ,观察 MΦ对感染红细胞的吞噬率 ,将 TNF作用后的 MΦ用 m PAP超微半定量法测定 Fc受体 ,YC花环法测定 C3b受体。结果 :TNF能够增加 MΦ对感染红细胞的吞噬率 ,其作用与 TNF剂量呈正相关。TNF可增加正常及感染鼠MΦ 表面 Fc受体和 C3b受体的表达。结论 :TNF在感染小鼠体内可能调节 MΦ 表面受体的表达并增加其吞噬疟原虫的功能。

牛膝多糖对小鼠红细胞免疫功能的影响

目的 探讨牛膝多糖 (ABP)对正常及免疫低下小鼠红细胞免疫功能的影响。方法 ABP经腹腔注射给药后 ,测定各组小鼠外周血中红细胞C3b受体及红细胞粘附免疫复合物花环结合率的变化。结果 ABP 6 0mg·kg-1·d-1,10d能显著提高正常及免疫低下小鼠红细胞C3b受体花环结合率和红细胞粘附免疫复合物花环结合率。结论 ABP是一种免疫调节剂 。

11类哺乳类和鸟类动物红细胞免疫功能的对比研究

应用红细胞Ｃ３ｂ受体花环（Ｃ３ｂＲＲ）和免疫复合物花环（ＩＣＲ）试验，证实鸽、鹌鹑、鹅、鹿、瘤牛、牦牛、德宏水牛（沼泽型水牛）、摩拉水牛（江河型水牛）、驴、小耳猪和山羊红细胞表面存在补体Ｃ３ｂ受体（Ｃ３ｂｒｅｃｅｐｔｏｒ，Ｃ３ｂＲ），表明红细胞免疫系统（Ｒｅｄｃｅｌｌｉｍｍｕｎｅｓｙｓｔｅｍ，ＲＣＩＳ）的概念亦适用于这１１类动物。文中对红细胞Ｃ３ｂＲＲ和ＩＣＲ分别代表红细胞表面Ｃ３ｂＲ“空位”和“占位”状态的会意做出了解释。对１１类动物中哺乳类与鸟类动物红细胞Ｃ３ｂＲＲ和ＩＣＲ测试的统计结果进行剖析，可知：总体上讲，３种鸟类红细胞表面补体Ｃ３ｂＲ活性显著小于８类哺乳动物（Ｐ＜０．０５，有少数例外），而红细胞粘附免疫复合物能力则极显著地大于８类哺乳动物（Ｐ＜０．０１）；红细胞粘附免疫复合物能力和其表面Ｃ３ｂＲ活性在不同动物种、型间有相当的差异。

恒河猴红细胞免疫功能的研究

本文应用花环法测定了健康恒河猴红细胞上C_(3b)受体和免疫复合物的数量。恒河猴红细胞上C_(3b)受体花环率的数量为12.83±1.95％,免疫复合物花环率为6.37±1.25％。研究结果表明恒河猴的红细胞,除了具有携氧、运输气体等功能外,还具有重要的免疫功能。

酵母活性物质对断乳仔猪红细胞免疫功能的影响

选取28日龄断奶的[杜×(大×长)]三元杂交仔猪10头,平均初始体重为5.62 kg±1.16 kg,随机分为2组,每组5头。对照组饲喂基础日粮,试验组在相同的基础日粮中添加酵母培养物,剂量为10mL/只,连续服用10 d。应用红细胞C3b受体花环(Erythrocyte C3bR,E-C3bR)试验和红细胞免疫复合物花环(Erythrocyte ICR,E-ICR)试验,探讨酵母活性物质对断乳仔猪红细胞免疫功能的影响。结果发现,试验组红细胞C3b受体花环率(E-C3bRR)和红细胞免疫复合物花环率(E-ICRR)在服药后第1周、第2周与对照组相比,差异均极显著(P<0.01),第3周无明显差异。试验组E-C3bRR和E-ICRR,在服药后第1周、第2周与服药前相比差异亦极显著(P<0.01),第3周差异不显著。结果表明,口服酵母活性物质可增强断乳仔猪红细胞免疫功能,增强机体免疫力。

茶多酚(TP)对家禽免疫功能的研究

选用14日龄健康的海佩科内用仔鸡48羽,随机分成试验(24羽)和对照(24羽)两组.试验组在饲粮中添加0.25％的茶多酚(TP),研究TP对鸡免疫功能的作用.试验结果表明,TP对自然感染法氏囊病鸡,有明显提高(p<0.05)鸡血液中红细胞C_(3b)受体和免疫复合物的含量及保护鸡脾脏正常的免疫功能,同时也发现TP对公母鸡法氏囊的重量有不同影响.本试验表明,TP具有提高家禽免疫功能的作用.

黄芪多糖对P_（388）小鼠红细胞免疫促进作用的机制研究

研究了黄芪多糖（ＡＰＳ）对淋巴白血病Ｐ＿（３８８）小鼠红细胞膜功能的影响。研究结果表明，ＡＰＳ（１０～４０ｍｇ／ｋｇ）可显著增加Ｐ３８８小鼠红细胞免疫功能，显著升高红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＢＣ—Ｃ３ｂＲＲ）、红细胞Ｃ３ｂ受体花环促进率（ＲＦＥＲ），同时可降低红细胞免疫复合物花环率（ＲＢ—ＩＣＲＲ）、红细胞Ｃ３ｂ。受体花环抑制率（ＲＦＩＲ）。研究结果还表明，ＡＰＳ增强淋巴白血病Ｐ３８８。小鼠红细胞免疫功能的机制与ＡＰＳ降低Ｐ３８８小鼠红细胞膜过氧化脂质（工ＰＯ）含量、抑制红细胞膜蛋白与收缩蛋白交联高聚物（ＨＭＰ）的形成、增加红细胞膜封闭度、唾液酸含量、增强红细胞膜超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、钠，钾—三磷酸腺苷酶（Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ）活性有关。

β-地贫患者免疫粘附与体液免疫功能的研究

目的 探讨β-地贫患者与壮族人群补体受体Ⅰ型(CR1)的含量变化。方法 采用酵母菌花环试验法,对4 6例β- 地贫患者红细胞补体受体Ⅰ型(ECR1)进行数量测定,同时测定血清免疫球蛋白等,并作正常对照组比较。结果 β地贫组ECR1数量比对照组明显低下(P <0 .0 1 ) ,体液免疫指标和血常规均有不同的差异。结论 β- 地贫患者免疫粘附功能及体液免疫功能均比正常人低。

高住高练低训对足球运动员红细胞CD_(35)数量及活性变化的影响

目的:通过观察4周模拟海拔3000米高住高练低训(HiHiLo)过程中红细胞CD35数量及红细胞C3bRR、ICR的变化,探讨HiHiLo对机体红细胞CD35数量及活性的影响。方法:将16名足球专项运动员随机分为实验组(高住高练低训)和对照组(低住低训)。实验组每晚入住低氧房(O2浓度14.2%,相当于海拔3000米高度)10小时,每周2次低氧房内72%VO2max蹬功率自行车运动30分钟;对照组每周2次正常条件下80%VO2max蹬功率自行车运动30分钟。两组每周同时进行3次由同一教练执导的专项训练。实验期共4周。分别于实验前、入住低氧房10小时、实验2周末、3周末和4周末清晨抽取受试者肘静脉血,采用流式细胞仪检测红细胞CD35几何平均荧光强度,采用红细胞免疫花环试验检测红细胞C3b受体花环率(RBC-C3bRR)和红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICR)。结果:实验4周后,实验组和对照组CD35数量较实验前分别下降了4.9%和10.5%(P<0.05),红细胞C3b受体花环率较实验前分别下降了16.7%和24.9%(P<0.01),红细胞IC花环率较实验前分别升高了29.9%(P<0.05)和32.4%。结果表明:(1)HiHiLo对人体红细胞CD35数量的影响不如对红细胞CD35活性的影响明显;(2)HiHiLo影响RBC-C3bRR和RBC-ICR较低住低训更明显,HiHiLo3周后实验组运动员出现临床上的继发性免疫低下现象,4周末有所好转。

非特异性免疫复合制剂对德国镜鲤免疫功能的影响

以红细胞C3b受体花环率、白细胞吞噬率及人工感染死亡率为评价指标,研究并比较了非特异免疫复合制剂与单一非特异免疫物质对德国镜鲤免疫效果,结果表明投喂复合免疫制剂试验鱼的白细胞吞噬率均高于单一非特异免疫物质试验组(P<0.05)及对照组(P<0.05),其红细胞C3b受体花环率显著高于对照组(P<0.05);人工感染死亡率则低于单一非特异性免疫物质试验组及对照组。