编码人分化抗原5C5全长cDNA的克隆及功能初探

目的 编码 5C5分化抗原全长cDNA的克隆及功能探索。方法 构建人活化B细胞株3D5细胞的λgt11cDNA文库 ,以核苷酸杂交法从cDNA文库中筛选阳性克隆 ,作核苷酸序列分析 ,编码蛋白质氨基酸序列的亲疏水分析 ,Northernblot测 5C5mRNA转录本长度 ,用RT PCR检测 5C5mRNA在不同细胞株的表达 ,观察单抗 5C5 G1对 3D5细胞增殖的影响。结果 从人活化B细胞株 3D5的λgt11cDNA文库筛选到长 90 5bp的 5C5 1cDNA及 75 4bp的 5C5 2cDNA。 5C5 1cDNA序列内有 1个开放阅读框架 (19～ 5 37bp) ,编码 179个aa的蛋白质。此蛋白质内有一穿膜螺旋结构 (94～ 114aa) ,其N端在胞内。 5C5 2cDNA从 16 3到 45 9为开放阅读框架 ,编码 99个aa的蛋白质。从Northernblot见0 9kb左右和 0 7kb左右 2条杂交带。由RT PCR见 5C5mRNA在 3D5细胞强表达 ,在Daudi细胞表达次之 ,在Jurkat细胞表达最弱。单抗 5C5 G1有增强cpBCGF诱导 3D5细胞增殖的作用。结论 长90 5bp的 5C5 1cDNA为 1个全长cDNA。编码 1个膜蛋白 ,可能参与 3D5细胞的增殖反应。