胰腺部分切除诱导胰岛细胞再生小鼠模型的建立及研究

目的探讨小鼠部分胰腺切除手术诱导的糖尿病以及对胰岛细胞再生的影响,以建立研究胰岛细胞再生的动物模型。方法对3月龄近交品系C57B6小鼠胰腺切除65%～70%,通过代谢方法、糖耐量和免疫组织化学的方法,研究该方法对血糖和胰岛细胞的再生影响,以确定该模型是否能用于糖尿病的研究。结果小鼠胰腺部分切除,术后一周内小鼠糖耐量受损。术后第14天和第28天的糖耐量实验结果表明3月龄小鼠的糖耐量随着时间的推移而逐渐恢复。免疫组化结果显示3月龄小鼠术后1周胰岛β细胞再生率为(15.1±10.0)%,2周为(25.4±8.1)%,4周为(45.7±14.6)%。结论胰腺部分切除手术能够一定程度上诱导小鼠产生糖尿病,并且诱导胰岛β细胞的再生,从而可用于研究胰岛β细胞再生的基础研究。

小鼠正畸牙移动中牙周组织自噬相关基因表达的初步研究

目的研究小鼠正畸牙移动模型中移动牙牙周组织自噬相关基因的表达,探讨自噬在正畸牙移动骨塑建中的作用。方法 30只11周龄雄性C57B/6小鼠随机分为3组,每组10只。A组构建小鼠正畸牙移动模型,安放镍钛拉簧并施加矫治力;B组放置拉簧但不加矫治力;C组空白组。加力装置均安放于上颌左侧第一磨牙与左侧切牙之间,加力至第12 d处死小鼠。取左侧上颌骨标本,制作左侧上颌第一磨牙牙周组织标本切片,采用微计算机断层扫描技术测量牙移动距离,使用苏木精-伊红(HE)染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和实时荧光定量聚合酶联式反应(RT-qPCR)观察牙移动情况,检测牙周组织中骨塑建相关基因[骨保护因子(OPG)和破骨细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)]和自噬相关基因(包括Atg5、Atg7和Beclin-1)的表达。结果 A组平均牙移动距离0.09 mm,HE染色显示A组牙根张力侧与压力侧的牙周膜间隙不均等,压力侧细胞受到挤压、张力侧细胞受到拉伸。TRAP染色显示A组第一磨牙牙根近中侧见到阳性破骨细胞且A组压力侧破骨细胞数大于张力侧,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-qPCR显示A组牙周组织OPG信使RNA(mRNA)表达显著降低,RANKL、Atg5、Atg7及Beclin-1 mRNA表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 正畸力作用下牙周组织自噬相关基因表达水平升高,自噬可能通过影响牙周组织中破骨水平参与了正畸牙移动骨塑建过程。

麻黄附子细辛汤配合电针介导TGF-β1/Smad通路调控钙通道改善窦房结纤维化

目的 探讨麻黄附子细辛汤配合电针对窦房结纤维化小鼠钙离子通道的影响及可能机制。方法 C57B6小鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(Model组)、麻黄附子细辛汤配合电针治疗组(MFXE组);其中Model组、MFXE组饲养至18月龄进行实验,MFXE组灌胃麻黄附子细辛汤配合电针处理,持续21天。电生理仪监测各组小鼠心率;取心脏窦房结,分别进行HE、Masson染色,观察窦房结病理损伤及纤维化程度;Western blot检测Klotho、Trpv3、Trpv6蛋白的表达;Western blot与qRT-PCR方法检测TGF-β1/Smad通路相关TGF-β1、Smad2、Smad3和Smad7蛋白和mRNA的表达。结果 麻黄附子细辛汤配合电针治疗能够提高窦房结纤维化小鼠的心率,从而改善窦房结纤维化损伤,同时上调Klotho蛋白的表达,增加钙通道调节蛋白Trpv3、Trpv6蛋白的表达,抑制TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达。结论 麻黄附子细辛汤配合电针通过调控TGF-β1/Smad通路降低窦房结纤维化损伤,促进窦房结纤维化小鼠的钙离子转运。