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C57BL/6N小鼠早期视网膜变性及小胶质细胞活化状态研究
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作者 孟欢 邓婷婷 +4 位作者 刘自强 侯小玉 马传政 苑维 金明 《国际眼科杂志》 CAS 2024年第10期1536-1541,共6页
目的:观察C57BL/6N(Crb1 rd8/rd8)小鼠早期视网膜变性以及小胶质细胞的活化情况。方法:取雄性SPF级C57BL/6N小鼠15只、C57BL/6J小鼠15只,正常饲养。分别在入组时,入组4、8、12 wk,使用Micron-Ⅲ小动物视网膜影像系统进行双眼彩色眼底照... 目的:观察C57BL/6N(Crb1 rd8/rd8)小鼠早期视网膜变性以及小胶质细胞的活化情况。方法:取雄性SPF级C57BL/6N小鼠15只、C57BL/6J小鼠15只,正常饲养。分别在入组时,入组4、8、12 wk,使用Micron-Ⅲ小动物视网膜影像系统进行双眼彩色眼底照相检查计算病变数量、病变面积。观察结束后处死小鼠,摘取右侧眼球制备视网膜组织切片,进行HE染色后光镜下观察视网膜组织形态;采用免疫组织化学染色分析两组小鼠视网膜CX3CR1的表达水平及位置。摘取左侧眼球分离视网膜,使用Western-Blot检测CD86、CD206的表达情况,使用电化学发光法测定视网膜中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10炎性因子含量水平。结果:眼底彩照结果显示在入组4、8、12 wk,C57BL/6N组眼底病变数量均较入组时显著增加,与C57BL/6J组同时间点变化量比较均有差异(均P<0.05);眼底病变面积变化量两组间入组12 wk有差异(P<0.05),各组内变化量比较均无差异(均P>0.05);视网膜组织HE染色示:C57BL/6N组视网膜结构异常,细胞排列疏松、紊乱,光感受器层向视网膜内侧明显的玻璃膜疣样凸起,C57BL/6J组视网膜结构清晰,细胞排列有序,无明显异常;免疫组化结果示:C57BL/6N组视网膜中CX3CR1高表达于神经节细胞层、内外丛状层、感光细胞层及病灶处位置,平均光密度为0.285±0.056,C57BL/6J组为0.189±0.084(P<0.05);Western-Blot结果显示:与C57BL/6J组相比,C57BL/6N组视网膜CD86、CD206蛋白有不同程度升高,两组CD86蛋白表达有差异(P<0.05);细胞因子检测结果显示:C57BL/6N组IL-1β、TNF-α水平显著高于C57BL/6J组,而IL-10含量则明显较低(均P<0.05)。结论:C57BL/6N(Crb1 rd8/rd8)小鼠视网膜变性进展缓慢,随年龄呈进行性加重,病灶部位视网膜结构紊乱,伴有以M1型极化为主的小胶质细胞浸润。 展开更多
关键词 c57bl/6n 视网膜变性 年龄相关性黄斑变性 小胶质细胞 极化
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长期皮质酮注射对C57BL/6N小鼠海马胶质纤维酸性蛋白水平的影响
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作者 赵玉男 戴建国 +2 位作者 王中立 陈琳 黄玉芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2046-2046,共1页
关键词 皮质酮 c57bl/6n 海马组织 星形胶质细胞 阳性细胞 神经元存活 免疫活性 周和 皮质激素 免疫荧光技术
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基于慢性轻度不可预知性温和型应激的C57BL/6N小鼠抑郁模型的建立与评价 被引量:7
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作者 约日古丽·麦海提 任小巧 +3 位作者 范佳佳 李鑫 刘媛媛 毛萌 《世界中医药》 CAS 2022年第13期1895-1901,共7页
目的:探索慢性轻度不可预知性温和型应激(CUMS)法建立抑郁症C57BL/6N小鼠模型的条件,观察不同时点该模型行为学变化,对该模型进行评价和优化。方法:对C57BL/6N小鼠进行连续8周的CUMS应激来诱导其抑郁状态。分别在造模3、5、8周时通过糖... 目的:探索慢性轻度不可预知性温和型应激(CUMS)法建立抑郁症C57BL/6N小鼠模型的条件,观察不同时点该模型行为学变化,对该模型进行评价和优化。方法:对C57BL/6N小鼠进行连续8周的CUMS应激来诱导其抑郁状态。分别在造模3、5、8周时通过糖水偏好实验(SPT)、旷场实验(OFT)、强迫游泳实验(FST)、悬尾实验(TST)等行为学实验,观察小鼠抑郁样行为的改变。结果:与对照组相比,发现各时点CUMS组小鼠一般状态均较差,出现毛发脱落、体型瘦小、活动减少等;造模3、5、8周时均出现糖水偏好率下降,FST和TST不动时间的延长,OFT垂直运动次数减少等,提示CUMS组小鼠出现快感缺失、绝望感及探索能力下降;造模8周时出现OFT水平运动总路程缩短、运动速度减慢,提示CUMS组小鼠出现了自发运动能力下降。结论:CUMS应激可以成功建立C57BL/6N小鼠抑郁模型,并且随着应激时间的延长,C57BL/6N小鼠的抑郁表现逐渐加重。 展开更多
关键词 抑郁症 cUMS应激 c57bl/6n小鼠 行为学
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利用CRISPR-Cas9敲除Tyr基因制作白化C57BL/6N小鼠 被引量:2
4
作者 常秋荣 刘丽丽 +5 位作者 王会阳 付丽 邢凤英 李垚 陈学进 李善刚 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期493-500,共8页
目的 为了获得白化的C57BL/6N小鼠,扩大其在皮肤移植和胚胎干细胞方面研究中的应用。方法 通过体外设计合成Cas9 mRNA和系列sgRNA(single guide RNAs),注射到小鼠的受精卵内,破坏合成C57BL/6N小鼠黑色素生成必须的酪氨酸酶(tyrosinase,T... 目的 为了获得白化的C57BL/6N小鼠,扩大其在皮肤移植和胚胎干细胞方面研究中的应用。方法 通过体外设计合成Cas9 mRNA和系列sgRNA(single guide RNAs),注射到小鼠的受精卵内,破坏合成C57BL/6N小鼠黑色素生成必须的酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)基因序列的第1和第2外显子,产生基因突变,获得F0代白化的C57BL/6N小鼠,然后经过重复回交和自交,形成白化C57BL/6N小鼠近交系。结果 经过注射两对sgRNA,成功的获得了F0代的白化小鼠,在Tyr基因的第1和第2外显子中均发生了缺失突变,小鼠可以将突变基因传递给后代,并在其后代中产生了纯合的白色C57BL/6N小鼠,最后对白化小鼠突变类型进行了分析。结论 通过CRISPR-Cas9技术破坏了小鼠Tyr基因,成功地建立了白化C57BL/6N小鼠近交系,为将来的嵌合体制作、组织移植提供了新的研究工具。 展开更多
关键词 白化 Tyr 基因敲除 cRISPR-cas9 c57bl/6n 小鼠
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C57bl/6n小鼠CLP模型的建立和评价 被引量:3
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作者 文康 姚一帆 +2 位作者 吴春艳 李霞 贾彩云 《河南大学学报(医学版)》 CAS 2022年第3期175-179,共5页
目的:通过小鼠脓毒症模型的建立和评价,为研究脓毒症的发病机制和治疗措施提供可稳定重复的模型动物。方法:CLP法建立小鼠脓毒症模型;从术后小鼠体质量、生存状况,血常规、血生化,血液及腹腔灌洗液载菌量,血清IL-6和TNF-α水平,组织HE... 目的:通过小鼠脓毒症模型的建立和评价,为研究脓毒症的发病机制和治疗措施提供可稳定重复的模型动物。方法:CLP法建立小鼠脓毒症模型;从术后小鼠体质量、生存状况,血常规、血生化,血液及腹腔灌洗液载菌量,血清IL-6和TNF-α水平,组织HE染色等指标对模型进行评价。结果:60%的小鼠术后72h内死亡,体质量明显下降(P<0.05);CLP术后,小鼠的血液和腹腔洗液载菌量呈阳性,血清IL-6、TNF-α水平显著上调(P<0.05),血常规、血生化明显改变,肝、肾、肺和脾等组织出现了明显病理损伤。结论:本研究成功建立CLP脓毒症模型。 展开更多
关键词 脓毒症 c57bl/6n小鼠 cLP模型 cLP模型评价
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C57BL/6N小鼠全身照射后脾细胞凋亡的放射反应
6
作者 丁凌云 《国外医学(放射医学核医学分册)》 2002年第3期141-141,共1页
关键词 放射适应性 脾细胞 放射反应 c57bl/6n 全身照射 细胞凋亡
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C_(57)BL/6N、BALB/C近交系小鼠的染色体组型研究及y染色体的识别
7
作者 姜云垒 赵翰文 陈虹 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 1991年第2期58-61,共4页
本文采用骨髓细胞直接制片方法,并结合C分带技术,对C_(57)BL/6N和BALB/C近交系小鼠的染色体组型特征及Y染色体在染色体组中的位置进行了比较研究。结果表明:小鼠品系间组型无明显差异;C_(57)BL/6N的第19号染色体为该品系的标志染色体;Y... 本文采用骨髓细胞直接制片方法,并结合C分带技术,对C_(57)BL/6N和BALB/C近交系小鼠的染色体组型特征及Y染色体在染色体组中的位置进行了比较研究。结果表明:小鼠品系间组型无明显差异;C_(57)BL/6N的第19号染色体为该品系的标志染色体;Y染色体在两个不同品系中的相对位置不同。 展开更多
关键词 小鼠 近交系 染色体 c57bl/6n 识别
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Establishment of a C57BL/6N mouse model of giardiasis 被引量:1
8
作者 卢思奇 罗晓冰 +1 位作者 陈小宁 王凤云 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第10期13-16,142-143,共6页
To establish a C57BL/6N mouse model infected with Giardia lamblia ( G lamblia ) isolates from human origin Method Two groups of C57BL/6N mouse were inoculated with purified cysts of two G lamblia isola... To establish a C57BL/6N mouse model infected with Giardia lamblia ( G lamblia ) isolates from human origin Method Two groups of C57BL/6N mouse were inoculated with purified cysts of two G lamblia isolates (CD and XZ) by gavage separately Patterns and curves of cyst excretion of the infected mice were observed and summarized Histopathological changes of the small intestines of the infected mice were observed Results Thirty six mice receiving 1×10 4 cysts each were all infected The C57BL/6N mouse showed high susceptibility to G lamblia infection There was no notable distinction between the two groups of the mice infected by the cysts of CD and XZ isolates Cyst excretion occurred with intermittence Of 36 infected mice, 32 (89%) passed cysts intermittently and 4 (11%) others persistently The latent period of cyst excretion was 0-3 days p i (post inoculation) The interruption of cyst excretion ranged from 12 to 20 days p i The fastigium of the cyst excretion was on day 6 p i The peak count of the cysts passed during a 2 h collection period was 2 3×10 7 /g fecal specimen Edema, inflammation, cell infiltration, small blood vessels congestion, mitotic figures and mucosa necrosis appeared in sections of intestines Conclusion C57Bl/6N mouse is a suitable animal model of G lamblia 展开更多
关键词 Giardia lamblia · c57bl/6n mouse · Animal model
全文增补中
实验感染C57 BL/6N小鼠粪内蓝氏贾第鞭毛虫tim基因检测
9
作者 罗晓冰 陈小宁 +1 位作者 卢思奇 王凤云 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2004年第1期1-4,共4页
建立蓝氏贾第鞭毛虫感染动物模型 ,用PCR技术对感染动物粪内该虫tim基因进行检测 ,探讨蓝氏贾第鞭毛虫基因检测方法。用人源蓝氏贾第鞭毛虫河北株 (CD)和江苏株 (XZ)的包囊分别接种两组C5 7BL 6N小鼠 ,于接种后第 6天、1 0天和 1 4天收... 建立蓝氏贾第鞭毛虫感染动物模型 ,用PCR技术对感染动物粪内该虫tim基因进行检测 ,探讨蓝氏贾第鞭毛虫基因检测方法。用人源蓝氏贾第鞭毛虫河北株 (CD)和江苏株 (XZ)的包囊分别接种两组C5 7BL 6N小鼠 ,于接种后第 6天、1 0天和 1 4天收集粪便标本 ,采用酚 氯仿法提取总DNA。将提取液分别按 1 0 0 、 1 0 - 1 、 1 0 - 2 和 1 0 - 3稀释并纯化。根据该虫磷酸丙糖异构酶 (Triosephosphateisomerase,tim)基因合成 1对特异性引物 ,采用PCR技术分别扩增各个稀释度的样本。结果贾第虫阳性样本均被扩增出相应基因的 1条 683bp长的片段 ,纯化后的各个稀释度样本的PCR检测阳性率随稀释倍数的增加而增高。本研究结果为贾第虫感染基因检测方法的进一步研究提供了实验资料。 展开更多
关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 小鼠 磷酸丙糖异构酶基因 动物模型
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人参皂苷Rg1对MPTP所致亚急性帕金森病模型小鼠中脑黒质p-c-Jun与COX-2表达的影响 被引量:7
10
作者 王永生 李会 +3 位作者 张宇新 韦淑萍 张作风 田青友 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期432-436,共5页
本文研究了人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1,Rg1)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetra-hydropyridine,MPTP)所致亚急性Parkinson病(PD)模型小鼠中脑黒质磷酸化c-Jun(p-c-Jun)与环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,... 本文研究了人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1,Rg1)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetra-hydropyridine,MPTP)所致亚急性Parkinson病(PD)模型小鼠中脑黒质磷酸化c-Jun(p-c-Jun)与环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响,以期探讨Rg1保护PD中脑黑质多巴胺(DA)能神经元可能的分子机制。实验采用MPTP制备亚急性PD小鼠模型。通过行为学观察,免疫组织化学SP法和免疫蛋白印迹法,观察PD模型小鼠行为学变化,中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)、COX-2和p-c-Jun表达水平的变化,并观察给予人参皂苷Rg1对上述变化的影响。结果显示,模型小鼠出现典型PD样症状。与对照组小鼠相比,黑质区TH阳性神经元数下降约65%(P<0.001),TH表达水平显著降低约75%;黑质区COX-2阳性细胞明显增多,p-c-Jun特异性表达于黑质区细胞核内,且COX-2与p-c-Jun表达水平均明显升高。经Rg1(10mg/kg)处理后,模型小鼠PD样症状减轻,与对照组比较,在MPTP第5次注射后7d,TH阳性细胞数和TH表达水平仅下降约15%和20%;与模型组比较,黑质区COX-2阳性细胞明显减少,p-c-Jun主要表达于细胞浆,部分表达于细胞核,表达水平也明显降低。以上实验结果表明,人参皂苷Rg1对MPTP诱导的亚急性Parkinson病小鼠中脑黑质细胞的神经保护作用可能是通过阻抑p-c-Jun核内表达,从而减弱COX-2表达及其介导的黒质区炎症反应。 展开更多
关键词 PARKInSOn 人参皂苷RG1 炎症 环氧合酶-2 磷酸化c—Jun c57bl/6n小鼠
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C57BL/6不同亚型对阿霉素肾毒性的易感性
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作者 叶秋萍 陈思慧 +3 位作者 熊云峰 陈巧玲 刘丽芳 魏立新 《中华高血压杂志(中英文)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期941-947,共7页
目的 探讨C57BL/6不同亚型对阿霉素肾毒性的易感性差异,为C57BL/6菌株阿霉素肾病模型的构建提供相应的理论数据。方法 24只雄性C57BL/6J、24只雄性C57BL/6N小鼠均随机分组成模型组(阿霉素15 mg/kg,一次性尾静脉注射)和对照组,24只雄性BA... 目的 探讨C57BL/6不同亚型对阿霉素肾毒性的易感性差异,为C57BL/6菌株阿霉素肾病模型的构建提供相应的理论数据。方法 24只雄性C57BL/6J、24只雄性C57BL/6N小鼠均随机分组成模型组(阿霉素15 mg/kg,一次性尾静脉注射)和对照组,24只雄性BALB/c小鼠随机分组成模型组(阿霉素10 mg/kg,一次性尾静脉注射)和对照组,对照组均一次性尾静脉注射等量生理盐水。在造模后0、2、4、6周留取24 h尿液检测各组尿蛋白/肌酐比;2周及6周时收获各组小鼠,检测血白蛋白、总胆固醇、尿素及肌酐;观察各组肾组织病理形态。结果 C57BL/6J、C57BL/6N模型组不同时间段的尿蛋白/肌酐比与对照组差异无统计学意义(均P>0.05),且两种亚型小鼠造模2周及6周时的肾功能、血白蛋白及总胆固醇水平与对照组比较差异亦无统计学意义(P>0.05),而BALB/c小鼠2周时模型组尿蛋白/肌酐比和血白蛋白水平与对照组比较,差异有统计学意义[尿蛋白肌酐比:24.00±1.35比5.95±1.18,P<0.01;血白蛋白:(19.85±3.16)比(27.32±2.07)g/L,t=3.43,P=0.02]。病理形态学上,C57BL/6J和C57BL/6N模型组小鼠2周及6周时的肾小球、肾小管及间质形态基本正常,模型组肾小球硬化指数及小管间质损伤评分与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而BALB/c小鼠模型组2周时可见肾小球局灶节段性硬化、肾小球系膜基质增多、蛋白管型可见,肾间质散在炎症细胞浸润,6周时病理损伤加重。结论 一次性尾静脉注射阿霉素15 mg/kg时,C57BL/6J和C57BL/6N两种亚型小鼠对阿霉素肾毒性无明显易感性。 展开更多
关键词 c57bl/6J c57bl/6n 阿霉素肾病模型 易感性
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JNK信号通路对亚急性帕金森病MPTP模型小鼠黑质iNOS表达的影响 被引量:2
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作者 王永生 张宇新 +4 位作者 李会 王素娟 周洪霞 司道文 张作凤 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期348-351,共4页
目的:研究JNK在1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢毗啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中对诱导型一氧化氮合酶(iNOs)表达的调控作用,探讨PD黑质多巴胺(DA)能神经元变性失活的可能机制。方法:采用神经毒素MPTP制备亚急性PD小鼠... 目的:研究JNK在1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢毗啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(PD)模型中对诱导型一氧化氮合酶(iNOs)表达的调控作用,探讨PD黑质多巴胺(DA)能神经元变性失活的可能机制。方法:采用神经毒素MPTP制备亚急性PD小鼠模型,健康雄性C57BL/6N小鼠随机分为模型组、JNK抑制剂组和对照组,采用行为学观察、免疫组织化学和免疫印迹法,观察模型小鼠行为学变化及中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)、iNOS和磷酸化cJun(p-c-Jun)的表达变化;观察给予JNK通路特异性抑制剂SP600125对上述变化的影响。结果:与对照组相比,模型小鼠出现典型PD样症状。中脑黑质区TH阳性神经元下降约65%,中脑黑质TH表达水平显著降低约75%;黑质区iNOS和p-c-Jun阳性细胞明显增加,且矿pJun特异性表达于细胞核,中脑黑质iNOS与p-c-Jun表达水平明显升高。经SP600125处理后,模型小鼠PD样症状减轻,与对照组比较,TH阳性细胞数和TH表达水平仅下降约15%和25%,与模型组比较,黑质区iNOS与p-c-Jun阳性细胞减少,且p-c-Jun仅表达于胞质,中脑黑质iNOS与p-c-Jun表达水平明显下降。结论:JNK通路在MPTP诱导的亚急性PD小鼠黑质iNOS表达中可能起重要的调控作用;JNK通路特异性抑制剂SP600125可能对帕金森病小鼠具有一定的神经保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 诱导型一氧化氮合酶 JnK通路 酪氨酸羟化酶 c57bl/6n小鼠 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢 吡啶
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家兔人工感染人源贾第虫的实验研究 被引量:1
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作者 肖少玉 谭苹 +1 位作者 张国华 张洁 《公共卫生与预防医学》 2007年第4期80-81,共2页
关键词 人工感染 贾第虫病 实验研究 人源 家兔 蓝氏贾第鞭毛虫 c57bl/6n 人群感染率
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己糖胺途径与胰岛素抵抗的实验研究
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作者 李江 叶菲 《中国药理通讯》 2005年第3期24-25,共2页
目的:观察胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)形成过程中,己糖胺途陉(hexosamine biosynthesis pathway,HBP)的变化;初步探讨HBP过度活跃对胰岛素信号传导系统的影响。方法:以谷氨酸脱氢酶(GDH)法测定HBP限速酶-GFAT(Gluta... 目的:观察胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)形成过程中,己糖胺途陉(hexosamine biosynthesis pathway,HBP)的变化;初步探讨HBP过度活跃对胰岛素信号传导系统的影响。方法:以谷氨酸脱氢酶(GDH)法测定HBP限速酶-GFAT(Glutamine:fructose-6-phosphate amidotransferase)活性。以高脂高糖饲料诱导C57BL/6N小鼠形成IR动物模型。以高浓度的中效胰岛素诱导HIRc细胞建立IR—HIRc细胞模型。用western blot方法检测胰岛素信号系统之蛋白表达及其磷酸化水平的变化。结果:以高脂高糖饲料喂养8周后,C57BL/6N小鼠可产生明显的IR; 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 己糖胺 实验研究 c57bl/6n western 信号传导系统 谷氨酸脱氢酶 高脂高糖 中效胰岛素
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高脂饮食对雄性小鼠骨密度、骨微结构及分形维数的影响
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作者 刘盼 章雨帆 +7 位作者 高蕊 路迪迪 张平 王金娣 周文斌 杨涛 徐晶晶 何畏 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2023年第3期259-265,共7页
目的研究高脂饮食(high fat diet,HFD)雄性小鼠股骨骨密度、骨微结构及分形维数的改变。方法将3周龄雄性C57BL/6N小鼠按不同饮食分为正常饮食组(normal diet,ND)组和HFD组,在饲养过程中不同时间点采集样本。采血检测生化指标和糖代谢相... 目的研究高脂饮食(high fat diet,HFD)雄性小鼠股骨骨密度、骨微结构及分形维数的改变。方法将3周龄雄性C57BL/6N小鼠按不同饮食分为正常饮食组(normal diet,ND)组和HFD组,在饲养过程中不同时间点采集样本。采血检测生化指标和糖代谢相关指标,对小鼠股骨进行骨小梁CT扫描,获得骨微结构及分形维数相关参数。结果与ND组比较,HFD组小鼠体质量(40.61±5.36 vs.54.69±2.28,P<0.05)、胆固醇(3.10±0.48 vs.5.33±0.80,P<0.05)、高密度脂蛋白(1.71±0.20 vs.2.15±0.14,P<0.05)和低密度脂蛋白(0.48±0.20 vs.1.10±0.21,P<0.05)在第24周后显著增加(P<0.05);股骨骨密度更低(0.15±0.02 vs.0.14±0.01,P<0.01)。骨微结构检测显示,HFD组小鼠股骨体积分数下降、骨小梁数量减少及厚度变薄,骨小梁分离度及模式结构指数增大,分形维数值下降。结论HFD雄性小鼠股骨骨量减少,骨微结构及FD下降。 展开更多
关键词 高脂饮食 骨质疏松 股骨微结构 分形维数 雄性c57bl/6n小鼠
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SARS-CoV-2细菌样颗粒对小鼠的免疫原性及攻毒保护效果评价
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作者 苏日娜 石壮壮 +7 位作者 任娟 罗敏 王铁成 冯娜 王建忠 夏咸柱 孙伟洋 高玉伟 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第7期745-749,758,共6页
目的本研究以C57BL/6N小鼠为模型,评价SARS-CoV-2细菌样颗粒(Bacterium-Like Particles,BLPs)的免疫原性和攻毒保护效果,为新型冠状病毒感染(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)疫苗研发提供新思路。方法使用SARS-CoV-2细菌样颗粒Trim... 目的本研究以C57BL/6N小鼠为模型,评价SARS-CoV-2细菌样颗粒(Bacterium-Like Particles,BLPs)的免疫原性和攻毒保护效果,为新型冠状病毒感染(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)疫苗研发提供新思路。方法使用SARS-CoV-2细菌样颗粒Trim-RBD-GEM分别在第0、21 d滴鼻免疫C57BL/6N小鼠,在第7、14、21、28、35 d采小鼠血,分离血清,采用ELISA检测特异性IgG、IgG1和IgG2a抗体水平。在免疫后第35 d使用50 LD50的C57MA14毒株对C57BL/6N小鼠进行攻毒,记录攻毒后14 d内小鼠体重变化及存活情况;在攻毒后第3 d取小鼠的鼻甲骨和肺脏组织,测定鼻甲骨和肺脏组织中的病毒滴度和病毒载量。另取肺脏组织,使用4%多聚甲醛固定后制作病理切片并染色,观察肺脏组织病理变化,免疫组化法检测病毒蛋白的表达。结果Trim-RBD-GEM滴鼻免疫小鼠后诱导产生特异性抗体,IgG、IgG1和IgG2a抗体水平均显著升高。从攻毒后第1 d开始Trim-RBD-GEM组小鼠体重出现下降,第4 d体重逐步回升,观察期小鼠均存活,存活率为100%;Mock组小鼠在攻毒后第7 d体重均下降至75%以下,且所有小鼠均死亡,存活率为0。攻毒后Trim-RBD-GEM组小鼠肺脏组织中病毒滴度显著低于mock组(P<0.05)。攻毒后第3 d取各组小鼠肺脏做组织病理学检查,Trim-RBD-GEM组小鼠局部支气管管腔内可见少量巨噬细胞浸润,mock组小鼠肺脏切片中多处支气管管腔内可见坏死细胞碎片;免疫组化试验显示mock组小鼠肺脏切片检测到SARS-CoV-2的N蛋白。结论Trim-RBD-GEM滴鼻免疫小鼠可诱导产生特异性IgG抗体,可为COVID-19疫苗的研发提供参考。 展开更多
关键词 SARS-coV-2细菌样颗粒 c57bl/6n小鼠 滴鼻免疫 免疫原性 攻毒保护
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不同半夏炮制品抗肺纤维化作用的体外筛选及体内评价 被引量:7
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作者 贺双双 李彧 +8 位作者 张彬彬 魏树全 申萌萌 林家伊 万熙 张澜 李天罡 史渊源 李亚东 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期275-283,共9页
目的探讨不同半夏炮制品体外抗肺纤维化的作用及筛选出的半夏制品对肺纤维化小鼠的干预作用。方法用10μg/L转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人胚肺成纤维细胞系(MRC-5)建立肺纤维化体外模型,经水提生半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)、清半... 目的探讨不同半夏炮制品体外抗肺纤维化的作用及筛选出的半夏制品对肺纤维化小鼠的干预作用。方法用10μg/L转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人胚肺成纤维细胞系(MRC-5)建立肺纤维化体外模型,经水提生半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)、清半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)、法半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)和姜半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)分别处理48 h后,通过CCK-8法检测细胞活性、天狼星红染色法测定胶原含量进行抗纤维化筛选。用Western blot分析筛选出的生半夏干预MRC-5细胞表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的情况。C57BL/6N小鼠经口腔进行气管滴注博来霉素(2 mg/kg)建立肺纤维化模型,第14天开始灌胃生半夏水提液(2.5、5.0、10.0 g/kg),第28天取肺组织经HE和Masson染色观察,并测定羟脯氨酸(HYP)含量。结果与对照组比较,TGF-β1诱导后的MRC-5细胞对生半夏(8.4 g/L)的细胞活性抑制作用更敏感(P<0.05),而未经TGF-β1诱导的MRC-5细胞则需要更高浓度的生半夏或清半夏(16.7 g/L)抑制细胞活性(P<0.05)。与模型对照组比较,生半夏(8.4、16.7 g/L)能够抑制TGF-β1诱导的胶原合成(P<0.05),清半夏、法半夏、姜半夏各组未见抑制效应。与模型对照组比较,生半夏(2.1、4.2、8.4 g/L)能够抑制TGF-β1诱导的MRC-5细胞中α-SMA蛋白的表达(P<0.05)。生半夏(10 g/kg)能够缓解肺纤维化模型小鼠肺间质中的炎性浸润,恢复肺泡结构,减少胶原沉积,降低肺组织中的HYP含量(P<0.05)。结论生半夏对TGF-β1诱导后的病理性肌成纤维细胞具有活性抑制作用,并能阻止成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,抑制其胶原合成,缓解模型小鼠的肺纤维化进展,为临床应用半夏治疗肺纤维化提供新的思路。 展开更多
关键词 肺纤维化 半夏 肌成纤维细胞 胶原 MRc-5细胞系 c57bl/6n小鼠
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肾脏特异性高表达支架蛋白JLP转基因小鼠的构建
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作者 袁小涵 宋远 +5 位作者 朱凯 田茂青 张璐 陈朝威 颜奇 王惠明 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2020年第1期10-14,共5页
目的:构建肾脏特异性高表达支架蛋白JLP的转基因小鼠模型。方法:将遗传背景为C57BL/6N的loxp-stop-loxp-mSpag9阳性小鼠与KSP-CreERT2阳性小鼠进行饲养和繁殖,提取其子鼠脚趾DNA,采用PCR方法鉴定基因型,获取基因型为loxp-stop-loxp-mSpa... 目的:构建肾脏特异性高表达支架蛋白JLP的转基因小鼠模型。方法:将遗传背景为C57BL/6N的loxp-stop-loxp-mSpag9阳性小鼠与KSP-CreERT2阳性小鼠进行饲养和繁殖,提取其子鼠脚趾DNA,采用PCR方法鉴定基因型,获取基因型为loxp-stop-loxp-mSpag9+/KSP-CreERT2+小鼠,待其长至4~6周龄时予以他莫昔芬诱导Cre重组酶表达。选择同窝C57BL/6N野生型小鼠作为对照,并通过Western Blot及组织免疫荧光检测小鼠各脏器中JLP的表达量,进一步验证肾脏特异性高表达mSpag9转基因小鼠的准确性及特异性。结果:Western Blot及组织免疫荧光结果显示:经他莫昔芬诱导的loxp-stop-loxp-mSpag9+/KSP-CreERT2+小鼠肾脏中JLP表达量显著高于同窝野生型小鼠,心脏、脾、肺、睾丸等组织中表达量无差异。结论:成功构建肾脏特异性高表达支架蛋白JLP的转基因小鼠,为进一步研究JLP在肾脏疾病中的作用及其机制提供了动物模型。 展开更多
关键词 JLP c57bl/6n转基因小鼠 KSP-creERT2 cre-Loxp系统
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