血清c5ar1、ALP及25(OH)D3的表达规律对股骨颈骨折术后骨折愈合情况的预测价值

目的:探讨血清补体成分5a受体1(Complement component 5a receptor,c5ar1)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)及25羟基维生素D(Vitamin D325-hydroxy monohydrate,25(OH)D3)的表达规律对股骨颈骨折术后骨折愈合情况的预测价值.方法:选取2019年1月至2022年12月本院治疗的股骨颈发生骨折且实施全髋关节置换术的98例患者作为研究对象.依据其术后6 m的影像学方面检查结果评估患者的骨折愈合情况,并将患者分成骨折愈合组(77例)和未愈合组(21例).于入院及术后42 d分别对两组的血清c5ar1、ALP、25(OH)D3水平进行测定,采用Pearson相关性分析c5ar1、ALP、25(OH)D3的相关性.采用受试者工作(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清c5ar1、ALP及25(OH)D3对股骨颈骨折术后骨折的愈合情况的预测价值.结果:骨折愈合组术后血清c5ar1、ALP及25(OH)D3的表达水平均高于术前(P<0.05),未愈合组术后血清c5ar1、ALP及25(OH)D3的表达水平均低于术前(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,c5ar1与25(OH)D3呈正相关关系(P<0.05);c5ar1、ALP、25(OH)D3诊断股骨颈骨折术后骨折愈合情况的敏感度分别为92.20%、62.30%、76.60%,特异度分别为90.50%、47.60%、52.40%,ROC曲线分析显示,c5ar1、ALP、25(OH)D3诊断股骨颈骨折术后骨折愈合情况的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.953、0.515、0.765.结论:血清c5ar1、ALP及25(OH)D3的表达水平升高可促进股骨颈骨折术后骨折愈合,c5ar1与25(OH)D3呈正相关关系,c5ar1、25(OH)D3诊断股骨颈骨折术后骨折愈合情况具有较高的准确性,而ALP预测股骨颈骨折术后骨折愈合情况的准确性较低.

P因子介导的C5a/C5aR轴活化在IgA肾病肾脏足细胞损伤中的作用

目的:研究P因子介导的C5a/C5aR轴活化在IgA肾病肾脏足细胞损伤中的作用。方法:选取在郑州大学第一附属医院肾内科住院的少量、中量、大量蛋白尿IgA肾病患者各20例,收集其血液、尿液和肾组织标本;肾脏肿瘤切除术患者(20例)的远离肿瘤组织5 cm以上、病理诊断为正常的肾组织为对照1组,20例体检健康的成人血液、尿液标本为对照2组。电镜观察肾脏足细胞损伤程度,行Tunel和Nephrin共染色观察足细胞凋亡情况;免疫荧光法观察肾组织中足细胞P因子或C5aR、C5b-9与Nephrin共表达的情况;采用ELISA法检测IgA肾病组和对照2组血清及尿液中的P因子水平。结果:(1)大量蛋白尿IgA肾病患者肾组织足细胞足突弥漫融合、足细胞凋亡明显增加,Nephrin表达降低。(2)大量蛋白尿IgA肾病组患者足细胞上的P因子、C5aR和C5b-9表达明显增强、Nephrin表达减弱。(3)大量蛋白尿IgA肾病组患者较对照2组血清、尿液P因子水平升高。结论:P因子介导的C5a/C5aR轴过度活化可能参与了IgA肾病肾脏足细胞损伤的发生。

补体C5a/C5aR在肿瘤发生中作用的研究进展

补体系统是免疫系统的重要组成部分,补体能够有效清除体内的异物,维持身体内环境的稳定,补体系统在一定程度上能够有效抑制肿瘤的发生。但近年来随着研究的不断深入,发现补体系统过度激活也能促进肿瘤的发展。C5a/C5aR作为补体的重要组成部分,在肿瘤中的作用也逐渐受到关注,补体C5a/C5aR激活后可以诱导慢性炎症、免疫抑制微环境、血管生成和癌症相关的信号通路等,从而影响肿瘤的发生发展。提示C5a/C5aR可能成为抗肿瘤免疫治疗潜在的新靶点。文章就近年来国内外关于补体成分C5a/C5aR在肿瘤中相关研究进行综述。

C5a受体C5AR1在肿瘤发生发展及免疫治疗中的研究进展

C5AR1是补体激活片段C5a的受体,主要在粒细胞、单核细胞、树突状细胞和髓源性抑制细胞(MDSC)以及肿瘤细胞上表达。C5a可以刺激中性粒细胞产生炎性介质,也可以募集MDSC等免疫抑制细胞形成免疫抑制微环境,促进肿瘤的生长和转移,从而在肿瘤的发生发展中起到重要的作用。C5AR1已成为肿瘤治疗的新靶点,C5AR1靶向药与免疫检查点抑制剂联用能够起到协同抑制肿瘤的作用。就C5AR1的基本信息,促进肿瘤发生、生长和转移的机制,以及以C5AR1为靶点的抗肿瘤药的开发现状进行综述,以期为后续的机制研究、药物开发提供参考。

C5a-C5aR在脓毒症中的作用

脓毒症中补体系统的过度激活导致大量C5a的产生,并诱导其受体(C5aR)在细胞上的表达异常,C5a-C5aR相互作用调节炎症介质的表达、干扰凝血通路和诱导中性粒细胞功能障碍,最终导致器官功能损伤。

PD-1/PD-L1/C5ar1基因人源化小鼠模型的构建及其在免疫治疗中的应用

目的构建一种验证C5AR1靶点抑制剂或与免疫检查点抑制剂联用治疗肿瘤的药效及毒性的人源化小鼠模型,以加快人C5AR1靶点药的开发。方法首先通过基因编辑技术构建PD-1/PD-L1/C5AR1人源化(hPD-1/hPD-L1/hC5AR1)小鼠模型。接下来,分析hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠人源化基因的表达及人源化对免疫系统的影响。最后基于hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠建立肿瘤模型来评价抗人C5AR1抗体的药效。结果在hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠中只检测到人源PD-1、PD-L1、C5AR1蛋白,且各免疫细胞比例与野生鼠相比无明显差异。在小鼠肿瘤模型中发现,与单药相比,联合使用抗人PD-1抗体和抗人C5AR1抗体能更有效地抑制肿瘤的生长。结论hPD-1/hPD-L1/hC5AR1小鼠模型可以用于抗人C5AR1抗体和抗人PD-1抗体的临床前药效验证研究。

C5a-C5aR轴在鸭疫里氏杆菌感染致鸭肝损伤中的作用

本试验旨在阐明C5a-C5aR轴在鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer)感染致雏鸭肝损伤中的作用。将保存的鸭疫里氏杆菌复苏培养,同时制备鸭抗凝血,将鸭疫里氏杆菌与鸭抗凝血混匀,分别与抗C5a抗体和抗C5aR抗体孵育后进行全血试验,利用ELISA检测C5a及各炎性因子表达水平;利用鸭疫里氏杆菌感染雏鸭,同时分别用抗C5a抗体和抗C5aR抗体处理进行动物试验,采集主要组织进行病理组织学检查;采集雏鸭外周血和肝组织进行细菌计数;采集外周血分离血清后,进行血清酶活性检测,应用ELISA检测血清C5a及炎性因子水平;采集肝组织,利用荧光定量PCR检测主要炎性因子mRNA转录水平。结果显示,在全血试验和动物试验中,与R.anatipestifer组相比,R.anatipestifer+anti-C5a组和R.anatipestifer+anti-C5aR组C5a、TNF-α、IL-6和IL-1β表达水平显著降低(P<0.05);阻断C5a-C5aR轴可显著降低鸭疫里氏杆菌感染雏鸭的发病率和死亡率,同时减轻雏鸭心、肝和脾组织损伤;阻断C5a-C5aR轴能显著降低鸭疫里氏杆菌感染雏鸭外周血和肝细菌数及谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平;荧光定量PCR检测发现,与R.anatipestifer组相比,R.anatipestifer+anti-C5a和R.anatipestifer+anti-C5aR组C5aR、Sphk1、FGL2、TNF-α和IL-1βmRNA转录水平显著降低(P<0.05)。本研究成功证实C5a-C5aR轴激活有助于鸭疫里氏杆菌感染雏鸭,阻断C5a-C5aR轴可显著减轻雏鸭组织损伤和炎症反应,为进一步研究抗鸭疫里氏杆菌感染药物提供新思路。

环状RNA circLRP6介导的miR-5590-5p改善肝衰竭机制研究

目的探究环状RNA circLRP6、miR-5590-5p和C5aR1在肝衰竭中的保护作用及调控机制。方法通过D-半乳糖胺和脂多糖(D-galactosamine and LPS,D-GalN/LPS)诱导来构建体外肝衰竭细胞模型,流式细胞术检测L02细胞凋亡率,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测circLRP6和miR-5590-5p的表达,Western blot法检测C5aR1蛋白的表达,RNA免疫共沉淀和双荧光素酶报告基因实验检测circLRP6和miR-5590-5p之间的结合作用,同时利用双荧光素酶报告基因实验检测C5aR1和miR-5590-5p的结合作用。结果与对照组比较,D-GalN/LPS诱导L02细胞凋亡率上升(P<0.05),circLRP6和C5aR1表达上调,miR-5590-5p表达下调(P<0.05)。同时,与D-GalN/LPS+miRNA-NC组比较,D-GalN/LPS+miR-5590-5p模拟物组的L02细胞凋亡率显著下降(P<0.05)。另外,双荧光素酶报告基因实验显示,circLRP6能够直接与miR-5590-5p结合,并且miR-5590-5p直接调控C5aR1。检测结果还发现,与D-GalN/LPS+shRNA组比较,D-GalN/LPS+sh-circLRP6组circLRP6基因和C5aR1蛋白表达下调。然而,与D-GalN/LPS+shRNA组比较,D-GalN/LPS+sh-circLRP6组L02细胞凋亡率显著下降。结论环状RNA circLRP6介导的miR-5590-5p具有改善肝衰竭的作用,其作用机制可能是通过靶向C5aR1来实现的。

人C5aR(CD88)序列结构分析及其B细胞表位预测

采用ＫｙｔｅＤｏｏｌｉｔｔｌｅ氨基酸亲水性标准及Ｂａｉｒｏｃｈ的ＧＧＢＳＭ方案对人Ｃ５ａＲ分子的亲水性基序、Ｂ细胞表位及二级结构进行了预测，并用吴氏建立的Ｂ细胞表位预测方法进行评述。结果显示，不同的预测方案所得结果一致，人Ｃ５ａＲ分子中，构成螺旋结构，伸展构象及无规卷曲的氨基酸残基数比例分别为３３．７％，３４．６％，３１．７％。三个高亲水性区域为第１５～１８位的ＤＤＫＤ，第１９５～２００位的ＤＫＲＲＥＲ和第３３０～３３３位的ＲＥＳＫ，其Ａｈ值分别为３．０、３．０、２．３２。其平均抗原性指数ＡＩ值分别为０．０６４、０．０９１、０．０７０。Ｎ－端第９～３０氨基酸序列的ＡＩ＝０．０４２，是Ｂ细胞优势表位区，以此制作短肽单克隆抗体是可行的。

复合物C_6H_5CH_3…Ar分子间的外部振动频率

利用双光子共振电离光谱和飞行时间质谱技术在超声分子束中观察到 C6H5CH3 …Ar的振动光谱 .借助同位素光谱效应、内转动能级和分子间振动能级的理论计算 ,合理地归属了涉及 CH3 转动和 Ar原子振动的光谱 ,并由此获得复合物分子间各种模式的振动频率 .

C5aR与C5L2在脓毒症中的作用

脓毒症时补体系统过度激活产生大量过敏毒素C5a,C5a与其受体相互作用在脓毒症的发生过程中十分重要,成为研究脓毒症发生机制中的一个新热点.

针灸调节miR-221-3p/CCR5轴对缺血性脑卒中大鼠神经炎症的影响

目的:观察针灸调节miR-221-3p/CCR5轴对缺血性脑卒中大鼠神经炎症的影响。方法:采用改良线栓法构建缺血性脑卒中大鼠模型,随机分为模型组、针灸组、miR-221-3p antagomir(拮抗剂)组、miR-221-3p antagomir阴性对照组、针灸+miR-221-3p antagomir组,每组12只;另取12只SD大鼠只分离颈动脉,不结扎、不插线,作为假手术组。大鼠分组以针灸疗法及miR-221-3p antagomir、miR-221-3p antagomir阴性对照处理后,采用Y迷宫实验及跳台实验测定各组大鼠学习记忆能力;对各组大鼠进行神经功能缺损评分并采用苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠海马神经元形态;采用三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测各组大鼠脑梗死情况;采用酶标仪检测各组大鼠脑组织促炎因子白细胞介素(IL)-17、IL-18及抑炎因子IL-10水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组大鼠脑组织miR-221-3p、CCR5 mRNA表达;采用双荧光素酶实验检测大鼠海马神经元中miR-221-3p对CCR5的靶向调节。结果:与假手术组比较,模型组大鼠海马神经元发生明显病理损伤,新异臂进入次数、新异臂停留时间比、跳台实验潜伏期、脑组织IL-10水平及miR-221-3p mRNA表达降低(P<0.05),跳台实验犯错次数、神经功能缺损评分、脑梗死面积、脑组织IL-17、IL-18水平及CCR5 mRNA表达升高(P<0.05)。与模型组比较,针灸组大鼠海马神经元病理损伤明显减轻,新异臂进入次数、新异臂停留时间比、跳台实验潜伏期、脑组织IL-10水平及miR-221-3p mRNA表达升高(P<0.05),跳台实验犯错次数、神经功能缺损评分、脑梗死面积、脑组织IL-17、IL-18水平及CCR5 mRNA表达降低(P<0.05);与针灸组比较,miR-221-3p antagomir组大鼠海马神经元病理损伤加重,新异臂进入次数、新异臂停留时间比、跳台实验潜伏期、脑组织IL-10水平及miR-221-3p mRNA表达降低(P<0.05),跳台实验犯错次数、神经功能缺损评分、脑梗死面积、脑组织IL-17、IL-18水平及CCR5 mRNA表达升高(P<0.05)。与针灸组比较,针灸+miR-221-3p antagomir组大鼠海马神经元病理损伤加重,新异臂进入次数、新异臂停留时间比、跳台实验潜伏期、脑组织IL-10水平及miR-221-3p mRNA表达降低(P<0.05),跳台实验犯错次数、神经功能缺损评分、脑梗死面积、脑组织IL-17、IL-18水平及CCR5 mRNA表达升高(P<0.05)。与miR-221-3p antagomir组比较,针灸+miR-221-3p antagomir组大鼠海马神经元病理损伤减轻,新异臂进入次数、新异臂停留时间比、跳台实验潜伏期、脑组织IL-10水平及miR-221-3p mRNA表达升高(P<0.05),跳台实验犯错次数、神经功能缺损评分、脑梗死面积、脑组织IL-17、IL-18水平及CCR5 mRNA表达降低(P<0.05)。大鼠海马神经元中miR-221-3p靶向下调CCR5的表达。结论:针灸通过上调miR-221-3p表达进而抑制CCR5表达,可减轻缺血性脑卒中大鼠神经炎症,增强学习记忆能力,改善神经功能损伤。

可善挺通过抑制C5a/C5aR1通路对银屑病小鼠皮肤炎症和自噬的调控作用

目的本研究拟通过咪喹莫特(IMQ)小鼠银屑病模型,探究可善挺(Cosentyx)通过C5a/C5aR1通路对银屑病小鼠皮肤炎症和自噬的调控作用。方法 8周龄雄性BALB/c小鼠27只,随机分成3组(每组9只):空白对照组(Blank group)、银屑病模型组(Model group)、可善挺治疗组(Cosentyx-treat group),除空白对照组外,其余两组采用咪喹莫特(IMQ)制备银屑病模型,可善挺治疗组给与可善挺(第1、6、13天皮下注射,1 d两次,每次4.5mg/kg)干预。通过HE染色观察可善挺对银屑病模型小鼠皮肤组织的病理损伤的影响,通过ELISA检测小鼠皮损组织中促炎因子IL-4、IL-8、TNF-α、IL-1β的分泌情况,通过分光光度法检测小鼠皮损组织中髓过氧化物酶(MPO)活性,通过Western blot检测小鼠皮损组织中Beclin 1的表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值,通过免疫组化法检测小鼠皮损组织C5a、C3、C5aR1、C1qB的表达水平。结果可善挺抑制了皮损组织中IL-4、IL-8、TNF-α、IL-1β和MPO的表达,提高了Beclin 1的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,同时可善挺下调了C5a/C5aR1通路中C1qB、C3、C5a、C5aR1分子的表达。结论可善挺抑制了C5a/C5aR1通路,可以通过C5a/C5aR1通路调控银屑病皮损组织中炎症因子的表达,减缓银屑病炎症反应,同时可善挺增强了银屑病皮损组织中自噬作用,但无法确定可善挺是否通过C5a/C5aR1通路对银屑病皮损组织中自噬作用进行调控,因此机制还需进一步确定。

肾癌荷瘤小鼠组织中补体C5a/C5aR通路活化与肿瘤高凝状态的关系及其机制研究

目的研究肾癌荷瘤小鼠组织中补体C5a/C5aR通路活化与肿瘤高凝状态的关系及其机制。方法收集2016年7月至2019年10月于唐山市人民医院收治的32例经病理学活检确诊的肾癌患者的癌组织和癌旁组织。采用Western印迹法检测组织中C5a/C5aR通路活化相关蛋白表达情况。于BALB/c-nu/nu裸鼠前肢腋窝皮下接种人ACHN肾癌细胞株,接种成功后随机分为干预组、模型组,其中干预组尾静脉注射C5a联合C5aR阻断剂(C5aR antagonist,C5aRA),模型组等体积注射生理盐水,另取6只空白小鼠作为对照组。观察小鼠肿瘤生长情况,检测高凝状态相关指标水平。脱颈处死小鼠,收集癌组织,采用Western印迹法检测组织中C5a/C5aR通路活化相关蛋白表达情况。结果两组小鼠肿瘤体积于荷瘤6~21 d差异具有统计学意义,且干预组的肿瘤体积明显低于模型组(P<0.05)。3组小鼠于荷瘤第1天的血清D-D、vWF、TF水平差异无统计学意义,荷瘤第14天、第21天干预组、模型组血清凝血指标水平明显增加,其中干预组均明显低于模型组(P<0.05)。干预组癌组织中C5aR、C5b-9、FGL2、P38、p-P38的表达水平均明显低于模型组(P<0.05)。肾癌患者癌组织中C5aR、C5b-9、FGL2、P38、p-P38的表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05)。32例肾癌患者中高凝状态患者14例,非高凝状态患者18例,高凝状态组癌组织中C5aR、C5b-9、FGL2、P38、p-P38的表达水平均明显高于非高凝状态组(P<0.05)。结论补体C5a/C5aR通路可通过调控FGL2的表达而诱导肾癌的高凝状态,进而参与肾癌的发病过程。

C5a及C5aR拮抗剂在阿尔茨海默病中的研究进展

阿尔茨海默病（AD）是一类常见的神经变性疾病，随着年龄的增长其发病率也显著上升。AD典型的神经病理学标志包括神经元和突触的损伤，细胞外β-淀粉样蛋白沉淀（Ap）大量聚集形成的老年斑（SP），细胞内神经纤维缠结（NFTs），

短发夹状RNA基因沉默补体受体C5aR及抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡

目的:探讨短发夹状RNA基因沉默补体受体C5aR及抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡的作用效果。方法:构建针对大鼠补体受体C5aR基因编码区的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体质粒pRNAT-U6.1-C5aR shRNA,采用电穿孔的方法转染RK3E细胞,经G418筛选后,形成稳定的表达C5aR shRNA的细胞系。实验分为3组,①正常对照组:未转染的RK3E细胞;②阴性对照组:转染空载体pRNAT-U6.1的RK3E细胞系;③实验组:转染C5aR shRNA的RK3E细胞系。经脂多糖(LPS)孵育12小时后,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,RT-PCR检测mRNA的表达,γ计数仪测定125I标记的C5a与RK3E的结合情况。结果:与正常对照组和阴性对照组相比,实验组的细胞凋亡率显著降低(P<0.01),C5aR mRNA水平显著降低(P<0.01),125I标记的C5a与RK3E结合活性显著下降。结论:针对C5aR的特异性短发夹RNA可以明显引起靶基因的沉默,进而抑制LPS诱导的肾脏上皮细胞凋亡的发生。

C5a/C5aR通路在硕大利什曼原虫易感小鼠免疫病理发生中的作用及其机制

目的研究C5a/C5aR通路在对硕大利什曼原虫(Leishmania major,L.major)易感的BALB/c小鼠免疫病理发生中的作用及机制探讨。方法以C5aR KO小鼠(BALB/c背景)为模型,观察比较了WT和C5aR KO的BALB/c小鼠在L.major感染后的病变情况,有限稀释法检测了各组感染小鼠体内寄生虫的负荷,并进一步通过FACS检测了相关细胞因子如IL-17和IL-4的产生,来探讨C5a/C5aR通路在L.major易感型BALB/c小鼠免疫病理发生中的作用机制。结果相比WT小鼠,C5aRKO小鼠感染L.major后的病变程度明显减轻(P<0.05),体内寄生虫负荷也显著降低(6.952±0.398vs 4.340±0.434,P<0.01);同时,FACS胞内染色结果表明CD4+IL-4+T细胞亚群百分比显著降低(0.960 0±0.148 3 vs0.314 0±0.042 6,P<0.01),但CD3+IL-17+T细胞亚群的百分比在两组之间无显著差异(0.792 0±0.051 3 vs 0.858 0±0.084 5,P=0.522 3)。结论 C5a/C5aR通路通过调节Th2细胞关键细胞因子IL-4的产生,在L.major易感小鼠的免疫病理发生中发挥作用。

C5a/C5aR信号在约氏疟原虫肝期发育及遗传减毒子孢子诱导小鼠保护性免疫中的作用

目的探讨C5a/C5a R信号在约氏疟原虫肝期自然感染和遗传减毒子孢子诱导小鼠保护性免疫中的作用。方法遗传减毒子孢子免疫Balb/c小鼠2、4、6 d后,ELISA检测补体C5a的活化情况;然后利用C5a R-/-Balb/c小鼠,通过定量PCR检测和吉姆萨染色比较子孢子攻击免疫或未免疫2种小鼠的肝脏虫荷和原虫血症。结果子孢子攻击免疫或未免疫的野生与C5a R-/-小鼠的肝脏虫荷和原虫血症之间无统计学差异(P>0.05)。结论遗传减毒子孢子免疫能够成功诱导小鼠产生完全保护性免疫,但补体C5a R缺失对减毒子孢子的免疫保护效果和肝期自然感染均无明显影响,说明C5a/C5a R信号通路并不参与调节约氏疟原虫肝期发育和遗传减毒子孢子诱导小鼠产生的保护性免疫。

结肠癌组织中补体C5a/C5aR通路活化上调FGL2的表达

目的探讨补体C5a/C5aR通路在结肠癌发病中对纤维介素蛋白-2凝血酶原酶(fibrinogen-like protein 2,FGL2)的调节机制,明确补体系统在结肠癌发病中的功能和作用。方法收集2013年12月至2015年7月第三军医大学西南医院普外科、新桥医院消化科15例经病理活检确诊的住院临床结肠癌患者癌及癌旁组织。采用免疫组织化学方法检测结肠癌患者癌及癌旁组织中补体活化片段C5b-9、活化C3及C5aR的表达,佐证补体系统在结肠癌中的活化状态;进一步通过体内外实验(Western blot)验证结肠癌患者癌及癌旁组织MAPK信号通路中P38的磷酸化水平及FGL2的沉积,明确结肠癌发病中补体C5a/C5aR通路与二者的调节关系。结果免疫组织化学及Western blot实验证实结肠癌患者癌组织C5b-9、活化C3及C5aR的表达明显高于癌旁组织,FGL2的沉积亦显著高于癌旁组织;体外结果提示C5a能促进巨噬细胞系Raw264.7MAPK通路中P38的磷酸化水平(P=0.0013)及FGL2的产生能力(P=0.0071),加入C5aR阻断剂之后,二者表达随之减弱。结论 C5a/C5aR通路能通过MAPK信号途径中的P38信号完成对FGL2的调节作用进而参与结肠癌的发病进程。

LukS-PV通过C5aR诱导急性髓系白血病细胞THP-1凋亡的研究

目的探讨金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素亚组分(LukS-PV)是否通过C5aR发挥其诱导急性髓系白血病细胞THP-1凋亡的作用。方法将THP-1细胞株分为5组:未处理细胞为对照组,使用不同浓度的C5aR拮抗剂(0、50、100、150 nmol/L)预先作用于THP-1细胞后,再使用1μmol/L LukS-PV刺激细胞为处理组。24 h后通过Annexin V/PI染色法,线粒体膜电位法检测细胞凋亡,qRT-PCR法检测凋亡相关基因,Western blot法检测凋亡相关蛋白,酶标仪法检测Caspase-3活性。结果经过不同浓度C5aR拮抗剂干预后,LukS-PV诱导THP-1细胞凋亡的比率逐渐下降,促凋亡基因Bax、Bak、Bim和促凋亡蛋白cleaved-Caspase-3、Bak、Bax的表达量也逐渐减低,抑凋亡基因Bcl-2、Bcl-w、Bcl-x和抑凋亡蛋白Bcl-2的表达量逐渐升高,Caspase-3活性逐渐降低。结论LukS-PV可能通过结合C5aR从而激活下游线粒体通路,发挥其诱导人急性髓系白血病细胞THP-1凋亡的作用。