CA-Ⅸ与Ki-67在膀胱癌中的表达及意义

目的探讨CA-Ⅸ与Ki-67在膀胱癌中的表达及意义。方法采用免疫组化EnVision法分别检测2018年5月-2019年12月浙江省湖州第一人民医院60例慢性膀胱炎和84例膀胱癌患者组织中CA-Ⅸ、Ki-67的表达水平及其与临床各参数的关系。结果CA-Ⅸ与Ki-67在膀胱癌中的阳性表达率高于慢性膀胱炎症组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。膀胱癌细胞分化为高级别者CA-Ⅸ阳性表达率较高(P<0.05),在年龄、性别、临床T分期、肿瘤大小、肿瘤数量、淋巴结有无转移方面,CA-Ⅸ阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);Ki-67在膀胱癌细胞分化为高级别者、T分期>T1者阳性表达率较高,差异均有统计学意义(P<0.05),在年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤数量、淋巴结有无转移方面,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论CA-Ⅸ与Ki-67可鉴别慢性膀胱炎与膀胱癌,对预后的判断和手术方法的选择有一定的指导作用。

宫颈脱落细胞CA-Ⅸ的表达与高危型人乳头瘤病毒感染状态的相关性研究

目的分析宫颈脱落细胞CA-Ⅸ的表达与高危型人乳头瘤病毒感染状态的相关性。方法选择2016年7月至2018年6月在本院妇科就诊的宫颈疾病患者677例作为研究对象,获取阴道拭子检测HPV及经宫颈细胞学涂片检查结果,根据宫颈病变不同严重程度分成宫颈癌前病变组(癌前组)、宫颈癌组(癌症组)、宫颈无癌性组(对照组),分析3组HPV感染情况以及高危型HPV分布。结果癌前组221例、癌症组40例,对照组416例;3组中HPV感染阳性率两两比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);癌症组CA-Ⅸ表达率42.50%显著高于癌前组的25.79%及对照组的0.24%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论高危型HPV感染与宫颈癌前病变、宫颈癌之间存在一定的关联,而高危型HPV感染以HPV16型、HPV 18型、HPV52型常见,而宫颈病变越严重,CA-Ⅸ表达越高。

肾癌特异性抗原G250/MN/CAⅨ的克隆及真核表达

目的:克隆人肾细胞癌特异性抗原G250基因,使其能够在真核细胞中表达并锚定修饰于细胞膜上。方法:提取人肾透明细胞癌细胞的总RNA,用RT-PCR扩增出G250基因,插入含有人Igκ链前导信号肽、IgG-Fc和GPI锚定信号肽基因序列的真核表达载体pCI-neo-GPI中;将构建的重组质粒pCI-neo-GPI-G250转染RenCa细胞,利用RT-PCR、Western印迹和免疫荧光检测G250在细胞中的表达。结果:构建的重组质粒pCI-neo-GPI-G250经测序正确;用各种方法对筛选得到的稳定转染细胞进行检测,均可以发现G250的表达,表达部位为细胞膜。结论:克隆出人肾细胞癌特异性抗原G250基因,且G250在RenCa细胞膜上可以正常表达,为进一步研究肾癌肿瘤疫苗的免疫原性提供了必要的前期准备。

Bmi-1和碳酸酐酶-Ⅸ在宫颈癌中的表达及意义

目的检测Bmi-1和碳酸酐酶-Ⅸ(CA-Ⅸ)在宫颈癌及癌旁正常组织中的表达,并研究其临床意义。方法随机抽取2011-01-01-2016-12-31间延安大学附属医院Ⅰ-Ⅳ期宫颈癌患者120例作为研究对象,60例癌旁正常组织作为对照,采用免疫组化方法检测宫颈癌组织及癌旁正常组织中Bmi-1及CA-Ⅸ的表达,并分析其与宫颈癌预后的相互关系。结果免疫组织化学检测显示宫颈癌组Bmi-1、CA-Ⅸ表达明显高于对照组(P<0. 05),Bmi-1和CA-Ⅸ蛋白表达水平随分期的增高,表达水平增高,差异有统计学意义(P <0. 05)。COX回归显示:Bmi-1、碳酸酐酶-Ⅸ不是预后的独立因素(P> 0. 05)。结论 Bmi-1和碳酸酐酶-Ⅸ的表达与宫颈癌发生、发展密切相关,但是尚不能作为宫颈癌评估预后的观测指标。

人凝血酶原复合物中凝血因子Ⅸ效价检测中影响因素的探讨

目的探讨人凝血酶原复合物(PCC)中凝血因子Ⅸ效价检测的影响因素,优化检测条件。方法研究不同的Ca2+浓度对一期法检测凝血因子Ⅸ效价的影响,并分别考察磷酸三丁酯、聚山梨酯-80(S/D)以及硫酸鱼精蛋白中和肝素对检测的影响。结果 Ca2+浓度为0.012 5 mol/L时,检测结果最稳定,标准曲线的相关性(r2)为0.999±0.001,回收率为(99.2±1.789)%,5次重复试验的变异系数为1.80%;S/D对PCC样品中凝血因子Ⅸ效价检测的影响无统计学意义(P>0.1);PCC样品的肝素未中和时,稀释倍数的影响较大,中和后凝血因子Ⅸ效价受稀释倍数影响较小。结论优化了凝血因子Ⅸ效价检测的影响因素,最优Ca2+离子浓度为0.012 5 mol/L;S/D试剂无影响;硫酸鱼精蛋白中和肝素后,凝血因子Ⅸ效价受稀释倍数影响较小。

批式吸附法制备人凝血因子Ⅸ复合物(英文)

目的 制备纯度较高 ,潜在血栓性小的凝血因子Ⅸ (FⅨ )复合物。方法 以人新鲜冰冻血浆为原料 ,采用SD病毒灭活工艺 ,经国产DEAE SepharoseFastFlow胶批式吸附和Ca3 (PO4) 2 吸附制备凝血因子Ⅸ复合物。结果 两步的活性收率分别为 ( 89.94± 1.31) % (n =7)、( 82 .2 7± 2 .18) % (n =6 ) ,制品的FⅨ∶C比活为 ( 16 .2 8± 2 .80 )IU/mg。FIX的量为 ( 12 6 .82±11.6 0 )IU/瓶 ( 2 0 0PE)。结论 本工艺实用性较高 ,可用于制备低成本 ,高质量的凝血因子Ⅸ复合物。

碳酸酐酶Ⅸ和血管内皮生长因子在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的探讨碳酸酐酶Ⅸ(CAⅨ)和血管内皮生长因子(VEGF)在膀胱移行上皮癌的表达和意义。方法应用免疫组化技术,检测膀胱移行上皮癌和正常膀胱粘膜中CAⅨ和VEGF的表达,结合临床病理资料进行分析。结果56例膀胱移行上皮癌标本中,CAⅨ阳性表达47例(83.9%),VEGF阳性表达49例(87.5%),主要位于膀胱腔面及坏死区周围癌细胞,10例正常膀胱粘膜中未见CAⅨ和VEGF表达。CAⅨ在G3级的阳性表达率高于G1、G2级(P<0.05),在T2-4组高于Tis-1组(P<0.05),VEGF在T2-4组高于Tis-1组(P<0.05)。CAⅨ和VEGF的表达存在正相关性(P<0.05,r=+0.543)。结论CAⅨ和VEGF参与膀胱癌的发展过程,进展期的膀胱癌具有较高的CAⅨ和VEGF表达,二者存在正相关性,缺氧和血管再生是恶性肿瘤的重要标志。

阳离子卟啉对宫颈癌细胞株Caski的光动力学杀伤效应

目的探讨阳离子卟啉(TMPyP4)对宫颈癌细胞株Caski的光动力学杀伤效果和可能作用机制,为光动力学治疗(PDT)在宫颈癌动物荷瘤模型以及临床应用中提供理论依据。方法以宫颈癌细胞株Caski为研究对象,以TMPyP4为光敏剂,按照不同处理因素分为正常对照组、单纯PDT组、单纯TMPyP4组和TMPyP4-PDT组。采用四甲基偶氮唑蓝法检测TMPyP4-PDT对宫颈癌细胞株Caski体外生长的抑制作用,光镜下观察细胞形态变化。采用Annexin V-PI双标记法检测细胞凋亡率。采用实时荧光定量PCR检测TMPyP4-PDT对Caski细胞Ki-67、MCM2、P16、CA-Ⅸ和NF-κB mRNA表达水平的影响。结果单纯TMPyP4组和TMPyP4-PDT组对细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.01),且呈剂量依赖性;单纯PDT组对细胞增殖的抑制作用不明显(P>0.05)。光镜下可观察到单纯PDT组贴壁细胞多,无核固缩及核碎裂样改变;单纯TMPyP4组及TMPyP4-PDT组细胞出现胞质空泡化、细胞体积缩小、细胞核碎裂及凋亡小体形成等。流式细胞术检测结果显示,TMPyP4-PDT可诱导Caski细胞凋亡,且随着药物浓度的增加,细胞凋亡百分比增加。实时荧光定量PCR检测发现,随着药物浓度的增加,Caski细胞Ki-67、MCM2、CA-Ⅸ和NF-κB mRNA表达水平明显降低,P16 mRNA表达水平升高,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 TMPyP4-PDT对宫颈癌细胞株Caski有明显的杀伤作用,其机制可能与正性调节P16以及负性调节Ki-67、MCM2、CA-Ⅸ和NF-κB mRNA表达量有关。

p-(18)FFSTC的合成和初步动物学评价

碳酸酐酶Ⅸ(CA Ⅸ)是一个非常有前景的肿瘤乏氧显像的靶点,而一些磺胺类化合物和CAⅨ有特异性结合。为研发一种用于CA Ⅸ检测的特异性正电子发射断层显像(PET)探针,应用点击化学(clickchem-istry)方法快速高效地合成了对CA Ⅸ有特异性结合的含氟磺胺类化合物1-(2-[18F]氟乙基)-N-(4-磺酰胺基苯基)-1H-1,2,3-三氮唑-4-酰胺(p-[18F]FSTC),合成时间约60min,标记率为90%,标记物经高效液相分离后放化纯度大于98%。p-[18F]FSTC在体内外稳定,正常小鼠体内分布结果显示,在血液中的清除较慢,脾、肺、肾和胃中的摄取较高。本工作为进一步研究18F标记的磺胺类化合物作为一种肿瘤乏氧显像PET探针提供了实验依据。

碳酸酐酶Ⅸ与血管内皮生长因子在直肠癌组织中表达及其临床意义

目的 探讨直肠癌组织中碳酸酐酶Ⅸ（CA-Ⅸ）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达及与临床病理的关系.方法 应用蛋白免疫印迹方法 （Western blot）检测104例直肠癌、30例正常直肠组织、30例直肠腺瘤中CA-Ⅸ和VEGF的表达.结果 直肠癌组织中CA-Ⅸ和VEGF阳性表达率分别为72.1%和65.4%,高于正常直肠组织和腺瘤组织（P〈0.05）.CA-Ⅸ的表达与Dukes＇分期及淋巴结转移相关,Dukes＇分期A至C期CA-Ⅸ阳性率下降（P〈0.05）,淋巴结转移组CA-Ⅸ阳性率低于无淋巴结转移组（P〈0.05）.直肠癌组织和系膜组织VEGF的表达与淋巴结转移关系密切,N2组VEGF阳性表达率分别为81.3%和75.0%,高于NO组的53.7%和25.9%（P〈0.05）.CA-Ⅸ和癌组织和系膜组织的VEGF的表达无明显相关（r=0.092和r=-0.292）.结论 CA-Ⅸ和VEGF表达与直肠癌发生、发展和浸润转移有关,但两者作用机制不同.

缺氧诱导因子-1α与碳酸酐酶Ⅸ在鼻息肉组织中的表达及相关性分析

目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、碳酸酐酶Ⅸ(CAⅨ)在鼻息肉组织中的表达及其相关性,探讨HIF-1α、CAⅨ在鼻息肉发病过程中的作用。方法:收集28例鼻息肉组织(鼻息肉组)和12例正常下鼻甲组织(对照组),用免疫组织化学法检测鼻息肉组与对照组中HIF-1α与CAⅨ的表达,观察比较2组之间表达的差异。结果:免疫组织化学染色显示鼻息肉组HIF-1α、CAⅨ免疫阳性细胞数及着色强度均明显高于对照组。图像分析显示,鼻息肉组HIF-1α、CAⅨ的积分吸收度值(103/HP)分别为21.76±3.52、26.87±4.60,与对照组3.37±1.65、3.25±1.20相比差异有统计学意义(P<0.05);Spearman等级相关分析显示,鼻息肉组中HIF-1α表达与CAⅨ表达密切相关(r=0.820,P<0.01)。结论:鼻息肉组中HIF-1α、CAⅨ表达均上调,且二者有协同表达关系,说明鼻息肉组织中存在缺氧现象,再加上感染、炎症等作用使氧耗增多,能量代谢失调,加重局部缺氧,HIF-1α表达升高,并且能够激活、上调CAⅨ的表达,从而在缺氧状况下维持细胞的正常pH值,使细胞适应缺氧微环境,从而保证缺氧区域细胞的持续生长和增殖,最终形成恶性循环,导致鼻息肉的形成。

血友病B基因治疗的研究进展

血友病B为临床上常见的出血性疾病,为X染色体连锁隐性遗传性疾病,以男性患者多见,女性患者极其罕见.我国血友病B患者数量众多,目前主要治疗方法为输注凝血因子FⅨ制剂以达到止血目的.但是由于反复输注凝血因子FⅨ制剂而产生凝血因子FⅨ抑制物、相关制剂价格高昂等问题,多数患者未能得到有效治疗,影响患者的生存质量.血友病B为单基因遗传性疾病,是基因治疗遗传性疾病的理想模型.因此,基因治疗为最有望治愈血友病B的方法.近年来,随着多种病毒载体的成功构建、定点切割的核酸酶的发现,将基因治疗血友病B的各方面研究进一步向前推进.笔者拟就血友病B基因治疗的研究进展进行综述.