CA50时间分辨荧光免疫分析法与免疫放射分析法的对比研究

目的:比较时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)和免疫放射分析法(IRMA)检测糖类抗原CA50的优势。方法:用TRFIA和IRMA分别测定肿瘤和正常对照血清标本中CA50含量并对其测定结果和相关性进行分析。结果:160例患者血清TRFIA结果为(20.55±30.82)U/ml,IRMA结果为(31.49±75.59)U/ml,相关系数r=0.928;88例正常对照组TRFIA测定值为(3.12±5.9)U/ml,IRMA测定值为(8.11±9.5)U/ml,r=0.976。结论:TRFIA与IRMA检测CA50两种方法具有较好的相关性。TRFIA试剂稳定性好,有效期长,无放射性污染,更有利于临床大批量检测的需要,值得进一步研究和推广。

CA50时间分辨荧光免疫分析法对肺癌的临床诊断价值

目的:探讨患者血清中糖链抗原50(CA50)含量对肺癌诊断的临床价值。方法:用时间分辨荧光免疫分析法检测36例肺癌患者和100例正常人血清中CA50的含量,并用IRMA对照检测。结果:肺癌患者CA50含量明显高于对照组,并有显著性差异(P<0.01),TRFIA和IRMA两种方法之间高度相关(R=0.9185)。结论:CA50 TRFIA是一种新型的非放射性的免疫检测方法,对血清中CA50的检测可作为肺癌的辅助诊断指标。

CA19-9时间分辨荧光免疫分析方法的建立及应用

以CA19- 9单抗 192 # 包被板条 ,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu3 + 及标记 2 41# 单抗 ,发光增强系统为以 β -二酮体为主的增强液 ,采用平衡饱和法建立了CA19- 9时间分辨荧光免疫分析。采用Log -Logit函数和四参数Logistic函数两种程序处理数据。结果表明方法的批内和批间CV分别为 3.2 6 %和5 .74% ,平均回收率为 99.6 1% ,灵敏度为 1.6 6U/mL ,可测范围为 18.6 9- 96 7U/mL ,ED2 0 、ED50 和ED80 分别为40 .5 5U/mL、114.2U/mL和 396 .9U/mL。本方法与CEA有 6 %交叉反应 ,与CA12 5、CA15 3和AFP均无交叉反应。Eu3 + 标记抗体于 - 30℃ ,保存六个月免疫反应性基本无损失 ,连续 5个月应用同批试剂 ,分析结果稳定。 78份血清样品的检测结果与化学发光法吻合。本文提示 ,采用CA19- 9时间分辨荧光免疫分析 ,可以高效灵敏地检测出血清中的CA19- 9含量 ,值得临床推广。

CA50时间分辨荧光分析法的方法学评估

目的评估所建立的CA50时间分辨荧光免疫分析法(CA50TRFIA)的技术指标及应用价值。方法建立CA50时间分辨荧光免疫分析法,分析其曲线的性质参数,研究该方法的特异性、精密度和回收率、灵敏度、稳定性、平行性,以及和免疫放射分析方法(IRMA)法间的相关性。结果10批标准曲线拟合相关系数均值R为-0.9978±0.0022,最大结合比Bm/Bo为127.26±9.85,批内和批间变异分别为2.6%和3.5%,平均回收率为108.61%,灵敏度为1.08U/mL,测定结果与进口CA50IRMA药盒测定值比较相关系数为0.94,其他肿瘤标志物无明显干扰,同批试剂连续6个月应用分析结果稳定。结论CA50TRFIA本底低干扰小,特异性强、稳定性好,灵敏度高,无放射性污染,是一种非放射性的标记免疫新方法,值得推广应用。

CA125时间分辨免疫荧光分析法及其临床应用

以 CA1 2 5单克隆抗体包被微孔板 ,用平衡饱和法与 CA1 2 5、Eu3+标记异硫氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸 -CA1 2 5单抗形成三层夹心 ,以β-二酮体为增强液 ,建立 CA1 2 5的时间分辩免疫荧光分析法 ( IFMA)。方法的批内和批间 CV分别为 2 .4 5%、2 .66% ,平均回收率 1 0 4 .2 9% ,灵敏度 3.2 7U/L,可测范围为 6.0 5-2 0 62 U/L。本法与 CEA无交叉 ,与 AFP有 6.77%的交叉 ,与β-HCG有 1 0 .89%的交叉。 84名健康女性血清 CA1 2 5浓度为 1 1 .4 2± 1 2 .2 0 U/L,34例卵巢癌患者血清 CA1 2 5浓度为 334 .33± 376.66U/L,与对照组比较有高度显著性差异 ( P<0 .0 1 )。血清样品测定结果与酶免疫分析 ( ELISA)和化学发光免疫分析 ( CLIA)测定结果呈相关 ,其相关系数 ( r)分别为 0 .888和 0 .899。诊断试验结果表明 ,CA1 2 5IFMA的敏感度、特异性。

CA19-9时间分辨荧光免疫分析方法建立及EDTA处理血浆对其测定结果的影响

建立双抗体夹心法CA19-9时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）,探讨抗凝剂EDTA对其检测结果的影响,并对本法的稳定性和与Abbort Axsym测定结果的相关性等指标进行评价.分别按一步法和二步法对CA19-9进行测定,并比较血清标本和用EDTA处理的血浆标本对CA19-9结果的影响.结果表明本试剂盒的线性范围为0.19～600U/mL,灵敏度为0.19U/mL,批内和批间CV（%）分别为1.1%～5.4%,1.2%～5.6%.对3230份标本用本试剂盒检测与Abbort Axsym试剂盒检测结果相关系数为0.931.一步法中EDTA处理血浆标本的检测结果明显低于血清标本,二步法中两者无显著性差异.本试剂盒各项指标达到规定的要求,可用于临床血清CA19-9检测.使用中采用血清或血浆标本时要用二步法进行测定,以减少EDTA对结果的影响.

丙肝病毒抗体检测运用时间分辨荧光分析法和酶联免疫法的应用价值观察

研究分析时间分辨荧光分析法和酶联免疫法于丙肝病毒抗体检测中应用效果。方法 丙型肝炎行丙肝病毒抗体检测患者2022年1月至同年12月选取521例,运用时间分辨荧光分析法和酶联免疫法做丙肝病毒抗体检测,检测作用做比对分析。结果 时间分辨荧光分析法对于丙肝病毒抗体检出率与酶联免疫法丙肝病毒抗体检出率比对无差异(P>0.05),丙肝病毒抗体检出情况与金标准比对,时间分辨荧光分析法较酶联免疫法准确率、灵敏度较高,优于酶联免疫法(P<0.05)。结论 丙肝病毒抗体检测,时间分辨荧光分析法行检测,对于丙肝病毒抗体有较高,且检测精准度、灵敏度良好。

血清糖类抗原153基于磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂的研制

目的在传统的时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术基础上,结合生物素-亲和素放大技术和磁性微粒技术优势,建立一项新方法进行血清中糖类抗原153(carbohydrate antigen153,CA153)含量的测定。方法利用磁性微粒表面的链霉亲和素分子与生物素-CA153包被抗体快速高效结合,从而在固相载体磁性微粒表面形成双抗体夹心复合物。并对新方法的各项性能指标进行评价。结果获得的CA153TRFIA线性方程为y=54638x+7052.2,R^(2)=0.9995;该方法的灵敏度为0.48U/mL,批内和批间的变异系数分别为2.09%~5.95%,1.54%~7.15%,平均回收率为94.48%,与其他肿瘤标志物无明显干扰,正常范围参考值为0~35U/mL。用该方法检测乳腺癌与健康体检者血清的CA153结果与化学发光法一致,相关系数为0.9782。结论该方法灵敏度优于传统技术,是TRFIA的一种新方法,反应时间短,操作简单,敏感度、特异性、准确度等均符合临床应用要求。

时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇

以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5～ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2

CA125时间分辨荧光免疫分析试剂盒的研制

目的研制CA125时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)试剂盒。方法采用双抗体夹心法建立CA125TRFIA试剂盒,对试剂盒各项指标进行评价。结果该试剂盒的工作范围为10～600U/m l,分析灵敏度为1.07U/m l,批内、批间的精密度分别为4.5%～8.1%,6.9%～11.5%。与CEA、AFP、CA50、CA15-3、CA19-9无交叉反应。稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年,37℃稳定7d。425份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0～37U/m l。123份血清标本用本试剂盒与国外其他方法的同类试剂盒同时检测,其相关系数为0.939。结论试剂盒各项指标均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒。

时间分辨荧光免疫分析法检测乙型肝炎血清标志物的分析方法性能验证

目的建立时间分辨荧光免疫检测法的方法学性能验证方案和试验方法。方法采用新波ANYTEST2000时间分辨荧光免疫分析仪和雅培AxSYM免疫发光分析仪测定乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)各项目,分析前者的检测精密度、准确度、交叉污染率、灵敏度、测量范围、临床可报告范围、生物参考区间及抗干扰性能,分析两者检测结果间的相关性。结果 ANYTEST2000时间分辨荧光免疫分析仪检测HBV-M各项目的精密度、准确度、交叉污染率、灵敏度、测量范围、临床可报告范围、生物参考区间均符合国际公认质量要求。血清中一定浓度的三酰甘油、总胆红素或血红蛋白对部分HBV-M项目产生不同程度的干扰。ANYTEST2000与AxSYM检测HBV-M各项目结果间差异无统计学意义(P>0.05),且具有良好的相关性。结论 ANYTEST2000分析仪测定HBV-M的主要分析性能验证结果与厂商规定的分析性能基本一致。本研究所建立的分析仪性能验证方案和方法有助于提高仪器的检测质量。

CA_(125)时间分辨荧光免疫分析

以CA12 5单克隆抗体固相包被 ,用平衡饱和法与CA12 5、Eu3+标异硫氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸 -CA12 5单抗形成三层夹心 ,以 β -二酮体为增强液 ,建立CA12 5的时间分辨荧光免疫分析法。数据采用Logit-Log函数和四参数Logistic函数数据处理程序处理。方法的批内和批间CV分别为 4 .5%和 4 .0 % ,平均回收率 96.7% ,灵敏度 3.3μg L ,可测范围为 16— 2 0 62 μg L。本法与CEA无交叉 ,与AFP有 4 .6%交叉 ,与 β -HCG有 12 .4 %交叉。测定结果与进口IRMA试剂盒相比较 ,相关系数为 0 .999,结果呈高度相关。

TgAb时间分辨荧光免疫分析间接测定法的建立及临床应用

目的建立甲状腺球蛋白抗体(TgAb)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)间接检测法。方法用Tg抗原包板,用铕(Eu3+)标记兔抗人IgG做标记物,间接法TRFIA检测人血清中的TgAb。结果 TgAb-TRFIA的灵敏度为1.0 IU/ml;批内变异系数(CV)为3.1%～3.6%,批间CV为3.3%～3.6%;平均回收率为101.6%;热稳定性好;与电化学发光分析技术(ECLIA)比对,相关系数达0.8945;与临床结果高度相关。结论本法建立的TgAb-TRFIA是一个高灵敏和可靠的检测,有助于甲状腺疾病的临床诊断。

血清透明质酸时间分辨荧光免疫分析法的反应条件优化及其临床应用

目的优化血清透明质酸（HA）时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）的反应条件,并探讨其临床应用价值。方法采用TRFIA检测血清中HA的含量,确定参与HA-TRFIA的各反应成分的浓度。结果最佳反应条件为包被浓度10 mg/L、HA结合蛋白（HABP）1∶500稀释、铕标记HA（Eu^3＋-BSA-HA）1∶200稀释。敏感性为5.17μg/L,批内变异系数（CV）为2.21%-3.78%,批间CV为3.73%-5.40%,平均回收率为100.4%。该法HA测定值与放射免疫测定值显著相关,且与临床结果一致。结论本研究建立的血清HA-TRFIA是一种灵敏准确的分析方法,适合临床应用。

溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响

目的探讨溶血对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素的影响。方法收集30例未发生溶血的血清标本,利用低渗溶血法分别制备轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本各10例;采用时间分辨免疫荧光分析法分别测定各组标本溶血前(0h)和溶血后0.5、2、18h的胰岛素浓度;通过配对t检验、重复测量数据的方差分析对溶血程度和时间对胰岛素浓度检测结果的影响进行分析。结果轻度溶血、中度溶血、重度溶血标本之间胰岛素浓度检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05);随着溶血时间的延长,胰岛素浓度呈明显下降趋势,0.5、2、18h检测结果与0h检测结果相比,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论溶血程度对时间分辨免疫荧光分析法测定胰岛素浓度的影响不明显,但溶血时间则对测定结果具有较为明显的影响;标本溶血和溶血时间均为影响胰岛素浓度检测结果的重要因素。

化学发光免疫分析法和时间分辨免疫荧光法定量检测不同浓度HBsAg的对比分析

目的以雅培全自动化学发光免疫分析法(CMIA法)为标准,探讨时间分辨免疫荧光法(TRIFA)检测血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的准确性和可行性,以便基层医院普遍开展此项目,为抗病毒个体化的策略及疗效的预测提供依据。方法分别用CMIA法和TRIFA法对157份乙型肝炎病毒(HBV)感染患者的血清进行检测,对于HBsAg滴度超过检测上限的样本,采用稀释液手动稀释后,再进行定量分析。将HBsAg水平分为4组:≤100 IU/mL、101~1 000 IU/mL、1 001~20 000 IU/mL、>20 000 IU/mL,分析两种方法阳性标本定量相关性。结果两种方法的直线回归方程为:Y=2.323X-896.3,相关系数r=0.943,P<0.001。以CMIA法检测值为参考,分为4组进行分析,结果显示在检测低浓度HBsAg样本时,TRIFA数值较CMIA法偏低,而高浓度样本以CMIA法检测值偏高。两种试剂在检测不同浓度的HBsAg均有较好的一致性(均P<0.05),其中以浓度在1 001~20 000 IU/mL时相关性最好。结论两种试剂在HBsAg定量检测上的准确性基本相当,定量相关性以检测值在1 001~20 000 IU/mL之间最佳。TRIFA成本低廉、易操作,更适于基层医院使用,具有广泛的应用前景。

甲状腺过氧化物酶抗体间接时间分辨荧光免疫分析法的建立及临床应用

目的建立甲状腺过氧化物酶（TPO）抗体间接时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）。方法用TPO抗原包板,用铕（Eu^3＋）标记兔抗人IgG做标记物,建立检测人血清TPO抗体的间接TRFIA。结果TPO抗体-TRFIA的敏感性为1.0 IU/mL;线性范围达1 000 IU/mL;批内变异系数（CV）为3.1%-3.6%,批间CV为3.3%-3.6%;平均回收率为98.89%;与电化学发光分析法（ECLIA）比对,相关系数达0.983 2;与临床诊断高度相关。结论本研究建立的TPO抗体-TRFIA是一个高灵敏和可靠的检测方法,有助于甲状腺疾病的临床诊断。

用国产时间分辨荧光免疫分析仪建立检测抗CCP抗体的TrFIA法

目的用国产时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)仪建立TrFIA法检测IgG类抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP-IgG抗体)。方法以人工合成的环瓜氨酸肽作为抗原包被微孔板,异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合铕(Eu3+-DTTA)标记鼠抗人IgG单克隆抗体,建立TrFIA法,分析CCP抗原包被浓度和Eu3+标记抗体最适用量,测定Eu3+标记抗体的标记率,用国产TrFIA仪进行检测,绘制标准曲线并分析本法的线性范围、精密度、特异性,计算回收率。对比分析建立的TrFIA法和欧蒙公司的ELISA法结果的一致率。结果本法CCP抗原的最适包被浓度为5μg/mL,最适Eu3+标记抗体稀释度为1∶1 000;平均每个鼠抗人IgG分子上连接10.27个Eu3+;标准曲线为Y=1.162X+2.819,相关系数(r2)=0.998;批内和批间CV分别为4.8%～5.6%和5.9%～7.6%;平均回收率为97.4%(96.5%～98.6%);用本法检测抗核抗体和抗CCP抗体无交叉反应;与ELISA比对试验结果,两法一致率为96.8%(90/93),Kappa值=0.95。结论建立的TrFIA法敏感性高、特异性好,可为抗CCP抗体的检测提供一种新的选择。

脂血标本对时间分辨荧光免疫分析法测定游离雌三醇水平的影响

目的探讨脂血标本对时间分辨荧光免疫分析法检测游离雌三醇水平的影响。方法收集男性呈正常和乳糜样外观的不同水平脂血标本,与不同水平的游离雌三醇定值血清混匀,制成混合血清,用时间分辨荧光分析法测定其游离雌三醇水平以评价不同乳糜样和正常外观脂血标本对游离雌三醇水平的影响。结果对于乳糜样外观标本,轻度脂血可使游离雌三醇水平增高,中度及高度脂血则使游离雌三醇水平降低,且对游离雌三醇水平的影响十分接近。外观正常的中度脂血对游离雌三醇水平无显著干扰。结论乳糜样外观脂血对时间分辨荧光分析法测定游离雌三醇存在不同的影响,进而影响唐氏筛查的准确度。