低钾周期性麻痹家系CACNA1S基因突变的研究

目的低钾周期性麻痹(hypokalemic periodic paralysis,HoKPP)是一种由于离子通道功能异常引起的疾病,呈常染色体显性遗传。文中筛查HoKPP家系患者的基因突变位点,为产前基因诊断提供实验依据。方法报告1个具有4代18例患者的HoKPP中国家系。提取HoKPP患者、家系中健康人以及100例无血缘正常对照血样中白细胞基因组DNA,应用PCR和DNA测序进行候选基因突变分析,包括骨骼肌二氢嘧啶敏感性钙通道α1亚单位(CACNA1S)基因和骨骼肌钠通道α亚单位基因(SCN4A)。结果分子遗传学研究显示该HoKPP家系所有患者CACNA1S基因外显子30上均存在杂合突变(G3716A),推测导致氨基酸序列改变(R1239H),家系中健康人以及无血缘正常对照组中均未见患者所携带的杂合突变位点(G3716A)。结论 CACNA1S基因的R1239H突变是该HoKPP家系发病的分子遗传学基础,可行产前基因诊断预防患儿出生。

儿童CACNA1S基因突变型低钾型周期性麻痹2例报告

目的探讨儿童低钾型周期性麻痹（HOKPP）的临床及基因学特点。方法回顾性分析2014年8月至10收治的2例低钾型周期性麻痹患儿的临床资料。结果 2例患儿均以凌晨四肢乏力为首发症状,反复发作/逐渐加重,每次持续约2~24 h。发作时血钾明显降低,发作间期血钾正常。患儿及家族基因检测均提示存在CACNA1S基因突变。予口服补钾及对症治疗后病情缓解。结论对于反复发作性四肢乏力的患儿需高度警惕低钾型周期性麻痹的可能,基因检测有助于确诊并指导相关治疗。

CACNA1C基因突变儿童2例的临床及分子遗传学研究

本研究选取1例5岁5个月男性患儿,因“间断抽搐1年余”就诊,心电图检查提示QT间期延长,合并房室传导阻滞,可疑长QT综合征;另1例2岁3个月女性患儿,因“无明显诱因的发作性惊恐、抽搐伴发热”就诊,查体:小下颌、双眼内斜,脑电图异常,合并肌张力减低、运动、语言运动发育迟滞;2例患儿均完善了基因检测,例1结果提示CACNA1C基因存在c.1204G>A(p.G402S)新发杂合变异,诊断Timothy综合征,给予普萘洛尔治疗,后自行停药后猝死;例2结果提示CACNA1C基因存在c.1841T>C(p.L614P)新发杂合变异,给予抗癫痫治疗,随访仍有运动与语言发育迟滞。以上2例患儿的特征性表现同一基因引起的不同临床表型,均为罕见疾病,临床诊疗中需多加注意。

CACNA1S基因突变致低钾周期性麻痹的产前基因诊断

目的对CACNA1S基因R1239H突变导致的低钾周期性麻痹(HoKPP1型)家系中的1例中期妊娠者进行产前基因诊断,从而预防HoKPP患儿出生。方法患者于16孕周在B超下进行羊膜囊穿刺,抽取羊水10 mL,提取羊水细胞基因组DNA。选择3个多态性STR位点,D13S317、D8S1179和D16S539,排除母体细胞的污染。在此基础上对CAC-NA1S基因外显子30进行扩增,PCR产物进行正、反向测序。结果 STR多态性位点分析,证明无母体细胞污染,胎儿CACNA1S基因30外显子测序结果显示,胎儿带有和母亲同样的CACNA1S基因突变R1239H。结论对于有HoKPP风险的胎儿进行产前基因诊断非常重要,可以明确胎儿基因型,预防患儿出生。

中国人群低钾型周期性麻痹家系CACNA1S和SCN4A基因突变状态分析

目的检测中国人群中低钾型周期性麻痹(HPP)家系CACNA1S和SCN4A基因的突变情况,并与既往文献报道的西方白种人群HPP基因突变情况进行比较分析。方法应用PCR和DNA测序技术,对2个家族性HPP家系、1个甲亢性HPP家系和4例散发性HPP患者的CACNA1S基因和SCN4A基因进行测序,与基因库中的参考序列比对,以确定是否存在突变。在PubMed数据库中,搜集1999年1月-2012年12月公开发表的关于HPP家系CACNA1S、SCN4A基因突变的相关文献,最终纳入9篇文献。结果先证者均存在伴有血清钾降低的发作性肌无力、肌无力常累及四肢等典型的HPP临床表现,辅助检查证实血清钾降低,心电图提示低钾性改变,肌电图提示运动电位时限短、波幅低,诊断明确。3个家系的先证者和家族成员以及4例散发性HPP患者的CACNA1S和SCN4A基因中未发现突变位点。既往文献显示,西方白种人群中HPP患者CACNA1S及SCN4A基因的突变阳性率远高于中国人群。结论中国人群HPP患者CACNA1S和SCN4A基因突变率极低,与西方白人患者的检测结果存在差异。

CACNA1D基因突变大鼠血压变化及其与血浆Th1、Th2细胞因子的关系

目的观察CACNA1D基因突变大鼠血压变化,并分析其与血浆Th1、Th2细胞因子的关系。方法通过CRISPR/Cas9基因编辑技术创建CACNA1D基因c.920A>G突变SD大鼠并与野生型SD大鼠杂交,对繁殖至F2代的大鼠进行基因型鉴定,抽取野生型(AA型)、杂合突变型(AG型)、纯合突变型(GG型)SD大鼠14、22、12只,均雌雄各半。分别于实验鼠鼠龄第8、9、10、17、21、26、28、32周时采用尾袖法检测大鼠尾动脉收缩压,将32周时收缩压≥140 mmHg的大鼠判定为高血压大鼠,收缩压<140 mmHg的大鼠判定为正常血压大鼠。采用ELISA法检测各基因型大鼠32周龄时血浆Th1、Th2细胞因子白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10。结果AA型、AG型、GG型大鼠收缩压在10周龄前比较无统计学意义;10周龄后,AA型大鼠收缩压较前无明显改变,AG型、GG型大鼠收缩压随周龄增长逐渐升高,至28~32周龄时,AG型、GG型大鼠收缩压均高于AA型大鼠(P均<0.01)。32周龄时,AG型、GG型大鼠收缩压均高于同性别AA型大鼠,AG型、GG型雄性大鼠血浆IFN-γ高于AA型雄性大鼠,AG型雄性大鼠血浆IFN-γ/IL-4高于AA型雄性大鼠(P均<0.05);三种基因型雌性大鼠血浆IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IFN-γ和IFN-γ/IL-4比较均无统计学差异。32周龄时,共有高血压大鼠17例、正常血压大鼠31例;高血压大鼠血浆IL-4低于正常血压大鼠,IFN-γ/IL-4高于正常血压大鼠(P均<0.05);高血压与正常血压大鼠血浆IL-2、IL-5、IL-6、IL-10、IFN-γ比较差异无统计学意义。结论CACNA1D基因c.920A>G突变大鼠血压高于野生型大鼠,其高血压的发生可能与Th1/Th2细胞功能失衡有关。

AP1S3基因突变与泛发性脓疱型银屑病的相关性研究

目的:检测107例中国汉族泛发性脓疱型银屑病(GPP)患者衔接蛋白复合体1-σ1亚单位异构体基因(AP1S3)的突变。方法:提取全部107例GPP患者外周血DNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增AP1S3基因全部外显子,并进行测序。结果:107例GPP患者均未发现AP1S3基因突变以及单核苷酸多态性(SNP)位点。结论:本组GPP患者发病与AP1S3基因无关。

猪CACNA1S基因的多态性与胴体及肉质性状的相关分析

以金华猪(40头)、皮特兰猪(30头)及其杂交产生的金皮F2代资源猪群(126头)为材料,对钙离子通道主亚基α1的编码基因(CACNA1S)第44外显子A187G突变、第37内含子A37G突变、T179C突变作PCR-RFLP检测(内切酶依次为Cfr42Ⅰ、XbaⅠ、Eco72Ⅰ),分析其对胴体及肉质性状的遗传效应。结果表明:酶切位点Eco72Ⅰ的AA基因型对眼肌面积和肉色(L)存在极显著影响(P<0.01),BB基因型对后腿肌肉重存在极显著影响(P<0.01)和大腿pH存在显著影响(0.01<P<0.05);位点XbaⅠ对背膘厚(中)存在显著影响(0.01<P<0.05),但AA、AB、BB基因型间效应差异不显著(P>0.05);位点Cfr42Ⅰ仅在金华、皮特兰纯种猪群中存在多态性,而在屠宰猪群金皮F2代则表现为BB单态型。

应用辐射杂种细胞系对猪CACNA1S基因的定位研究

CACNA1S是钙离子通道α1亚单位的编码基因,该基因突变会导致人低钾性周期性麻痹和猪恶性高温综合征。根据人CACNA1S基因3′端非翻译区序列设计引物,对猪基因组DNA进行PCR扩增、测序,与人相应序列作同源性比较;然后采用IMpRHpanel将CACNA1S基因定位于猪10p11-12。

猪CACNA1S基因部分序列多态性检测及其与肉质性状的关联分析

采用PCR-SSCP技术,对30头苏钟猪和97头金华与皮特兰杂交F2代(JPF2)猪CACNA1S基因进行多态性检测,结合肉质性状作关联分析。结果表明:在猪CACNA1S基因1 234 bp核酸序列中,检测到25个单核苷酸突变点(SNP);关联分析结果显示,引物1S-65的AA、BB基因型对后腿肌肉重存在显著影响(P<0.05),AB基因型对后腿pH存在显著影响(P<0.05);引物1S-66的BB、BC基因型对蹄重存在极显著影响(P<0.01)。

人肺癌GSTM1基因多态性与p53突变的相关性

目的 探讨谷胱苷肽 S转移酶 μ1(GSTM1)基因的多态性与抑癌基因 p5 3突变在人肺癌发生中的关系。方法 收集 4 8例人肺癌标本 ,HE染色做病理诊断 ,抽提基因组 DNA,PCR扩增 GSTM1基因的第 4外显子 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析基因的多态性。对相应的肺癌标本用免疫组织化学的方法做突变型 P5 3蛋白表达的检测 ,分析二者的相关性。结果 在人的肺癌组织中 ,GSTM1基因的缺失率较高 ,达 5 4 .2 % ;突变型 P5 3蛋白总的表达率为 5 6 .3% ,其中GSTM1基因缺失者与非缺失者的 p5 3突变率分别为 73.1%和 36 .4 % ,二者之间有显著性差异 ,P<0 .0 5。结论 在人肺癌组织中 ,GSTM1基因的多态性与 p5 3基因突变明显相关 ,GSTM1基因的缺失可能会导致 p5

鸡CACNA1S基因单核苷酸多态性及其与肉质性状的关联性

利用PCR-SSCP技术,对萧山鸡、仙居鸡、灵昆鸡、萧山鸡×仙居鸡杂交F1代、AA鸡的L型钙离子通道α1亚单位(CACNA1S)基因(CACNA1S)5′-调控区(5′-UTR)和外显子1(exon1)进行多态性检测,结合肉质性状做关联分析。结果表明试验群体CACNA1S基因5′-UTR和exon1存在3个单核苷酸多态性(SNPs)位点与肉质性状关联,在SNPs551位点,NN和MN基因型的肌苷酸(IMP)含量极显著(P<0.01)大于MM基因型;NN和MN基因型的肌内脂肪(IMF)含量显著(P<0.05)大于MM基因型;NN基因型的谷氨酸(Glu)含量极显著(P<0.01)大于MN、MM基因型;在SNPs716位点,KK基因型的IMP和Glu含量极显著大于(P<0.01)JJ基因型;JJ基因型的IMF含量极显著大于(P<0.01)KK基因型;在SNPs1711位点,YY基因型的IMF含量显著(P<0.05)大于XY和XX基因型;YY基因型的Glu含量显著(P<0.05)大于XY和XX基因型。初步推断CACNA1S基因可能是影响鸡肉质性状(肌内脂肪含量、肌苷酸含量、谷氨酸含量)的主效基因或与主效基因连锁,并且这些突变位点可被用作分子遗传标记选择鸡的肉质性状。

猪CACNA1S基因的PCR-SSCP检测及其对肉质性状的遗传效应分析

应用PCR-SSCP技术检测126头金华和皮特兰猪杂交产生的金皮F2代试验猪群CACNA1 S基因的单核苷酸多态性,结合屠宰测定的肉质及屠体性状指标作遗传效应分析。结果表明:位点1S-46的BC、BD基因型对系水力存在极显著影响(P<0.01),BC基因型对肉色(L)存在显著影响(P<0.05),BB基因型对眼肌面积存在显著影响(P<0.05);位点1S-61的BC基因型、1S-70的AA基因型和1S-72的AA基因型对后腿重均存在极显著或显著影响(分别为P<0.01,P<0.05和P<0.01);位点1S-64的BB基因型对后腿温度存在极显著影响(P<0.01),对眼肌温度存在显著影响(P<0.05);位点1S-74的AB、AC、AE基因型分别对后腿重、背膘厚(中)以及系水力存在极显著影响(均为P<0.01)。

CACNA1S基因与低钾周期性麻痹

CACNA1S基因是L-型钙离子通道α1亚单位的编码基因,CACNA1S的基因突变会引起人低钾周期性麻痹及猪高温综合症,有关研究推测该基因是影响猪肉质性状的候选基因。笔者对CACNA1S基因的生物学特性、结构组成和CACNA1S基因突变引发的遗传病及CACNA1S基因的研究进展作了综合性阐述。

CACNA1S基因多态性引起甲状腺毒性低钾周期性麻痹的研究进展

目的低钾周期性麻痹作为一种常见的并发症,好发于甲状腺毒症的亚洲男子。造成低血钾症和肌麻痹的原因是钾离子突然的细胞内移,而非机体内钾的不足。伴有低钾周期性麻痹的甲状腺毒症患者的临床特点可能是不典型的,不易被临床医生识别。甲状腺毒性低钾周期性麻痹(TPP)的遗传易感性并不完全清楚,编码L型α1钙通道亚基(Cav1.1)的基因CACNA1S多态性与TPP相关已被注意到。本文旨在探讨TPP的临床表现,以及其发病与钙离子通道及CACNA1S基因多态性关系的研究进展。

猪CACNA1S基因内含子37的克隆及多态性研究

根据不同物种间保守性及相似性的特点,跨内含子设计引物,利用聚合酶链式反应(PCR)技术对猪CAC-NA1S内含子37进行克隆;采用PCR-SSCP技术,检测金华与皮特兰杂交F2代猪(JPF2)和苏钟猪CACNA1S基因内含子37的单核苷酸突变点(SNP),并结合JPF2猪生产性状进行相关分析。结果表明:(1)克隆得到猪CACNA1S基因内含子37完整DNA序列(235bp);(2)在猪CACNA1S基因内含子37中检测到6个SNP;(3)相关分析显示,位点1S-76对体长存在显著性影响(0.01<P<0.05)。

鸡Cacna1s基因部分序列的克隆及分析

利用PCR方法首次克隆了鸡Cacna1s基因5′-部分调控区和exon1共1863bp的序列,该序列已提交GenBank,登录号为GQ184725。同源性比对发现,鸡Cacna1s基因exon1与哺乳动物同源性较高,其核苷酸相似性在72.4%～77.0%,氨基酸相似性在66.0%～72.0%。鸡Cacna1s基因exon1较哺乳动物插入了9个碱基,分别编码1个高疏水性的缬氨酸和2个高亲水性的天冬氨酸和赖氨酸。Cacna1s基因部分序列的克隆,可为下一步在鸡上开展此基因与肉质和屠体性状的关联性研究奠定基础。

CACNA1S基因与低钾周期性麻痹的研究进展

CACNA1 S gene is the gene encoding L-type calcium channel αa-subunit. CACNA1 S gene mutations can cause hypokalemic periodic pa- ralysis （HOKPP）. The related research speculated that CACNA1 S gene was the candidate genes which affect meat quality traits. In the present ar- ticle, the biological characteristics of CACNA1 S gene, structure, genetic diseases and the research development were respectively reviewed so as to provide a reference for further research.

P/Q型钙通道α1亚基基因CACNA1A突变与偏头痛

偏头痛是一种常见的反复发作性疾病,有明显家族聚集性,发病机制未明。对家族性偏瘫型偏头痛(FHM)家系CACNA1A基因的鉴定,掀起了偏头痛分子遗传学研究的热潮。该基因定位于19p13,为脑特异性P/Q型钙通道α1A亚单位基因CACNA1A。业已鉴定出该基因的15种突变型。突变型与表现型之间存在一定的关系。但是,CACNA1A基因与普通型偏头痛是否相关的研究却得出了不同的结论。

广西1985年～2008年IBV分离株S1基因高变区Ⅰ和N基因的序列和系统进化分析

为了解广西传染性支气管炎病毒(IBV)的纤突蛋白S1基因高变区Ⅰ(HVRⅠ)和核(N)蛋白基因变异情况及S1和N基因变异的相关性,本研究应用RT-PCR方法扩增了广西1985年～2008年的21株IBV的S1基因HVRⅠ和N基因,并进行了克隆、序列测定及分析。结果发现:广西存在着多种基因型IBV流行;广西IBV分离株S1基因存在广泛的点突变和插入现象;N基因序列存在氨基酸替代现象。21株IBV中12株在S1基因HVRⅠ和N基因遗传进化树中均归属相同群,其余毒株却归属不同的群。2005年分离的GX-NN5存在基因重组现象。以上结果表明了广西IBV毒株存在基因突变和基因重组现象,S1和N基因的变异不完全平行,有些毒株间的S1和N基因差异很大。