CALCA基因多态性与偏头痛的关联研究

目的探讨α降钙素基因相关肽(CALCA)基因979G/A及4218T/C多态性与偏头痛遗传易感性关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态(PCR-RLFP)技术在124例偏头痛及115例健康对照中对2单核苷酸位点进行分析。结果病例组与对照组在2位点基因型均符合Hardy-Weinberg平衡定律:CALCA基因979G/A及4218T/C2位点等位基因和基因型频率在病例组与对照组间比较差异无显著性(P>0.05);偏头痛患者不同基因型间比较,在包括起病年龄、病程、头痛频率、头痛发作持续时间、头痛程度、有无先兆症状、家族史在内的几个临床指标上差异无显著性(P>0.05)。结论CALCA基因979G/A及4218T/C位点的多态性可能不是中国汉族偏头痛的主要遗传危险因素。

基于CALCA的汽车座椅骨架生命周期评价

本文基于生命周期评价方法,应用CALCA工具和CALCD数据库,结合企业实地调研数据,对汽车座椅骨架总成进行了生命周期评价。一个座椅骨架总成的全生命周期全球增温潜势(GWP 100a)为38.9kg CO_2e,酸化潜势(AP)为0.223kg SO_2e,光化学氧化剂形成潜势(POCP)为0.012 3kg C_2H_4e,富营养化潜势(EP)为0.052 5kg PO_4^(3-)e。

CALCA基因遗传变异及其与肉质性状关联分析

旨在分析早胜牛及其杂交牛CALCA基因第4外显子的多态性及其与肉质性状的相关性,发现与肉质性状相关的分子标记,为加快肉牛选育进程提供参考。利用PCR-SSCP技术对早胜牛、南杂牛、秦杂牛和西杂牛共362个个体的CALCA基因第4外显子进行了遗传变异检测,并运用SPSS 17.0软件对早胜牛(平凉类群)遗传变异与经济性状关联性进行了分析。结果表明,CALCA基因第4外显子存在2个突变位点T3237A和G3289A,并检测到AA和AB2种基因型。相关性分析表明,CALCA基因突变位点与剪切力、眼肌面积、热胴体重和熟肉率显著相关(P<0.05),AA基因型个体剪切力、热胴体重和熟肉率显著高于AB基因型个体(P<0.05),而AB基因型个体眼肌面积显著高于AA基因型个体(P<0.05),其他性状在各基因型间差异不显著。因此,初步推测CALCA基因的突变位点可以作为评定早胜牛肉质性状的遗传标记。

HPV16编码蛋白与宫颈癌细胞内CALCA和TFPI-2表达的关系

目的:研究人乳头瘤病毒16(HPV16)编码蛋白的表达与宫颈癌细胞内CALCA和TFPI-2基因表达水平的关系,探讨依赖于HPV感染的宫颈癌发病机制。方法:设计与合成HPV16编码基因E6和E7序列特异性短发夹RNA(sh RNA)寡聚核苷酸片段,构建表达sh RNA的p RNAi载体,其中携带绿色荧光蛋白(GFP)报告基因,以此感染HPV16阳性的Si Ha宫颈癌细胞,采用荧光成像和实时荧光定量PCR(q PCR)分析等方法,评价载体转染效率、抑制效率及候选基因转录表达水平的变化。结果:在激光共聚焦显微镜下,观察到释放绿色荧光的细胞群,转染成功;根据定量q PCR分析,HPV16编码基因E6和E7的m RNA表达水平明显下降,sh RNA表达载体转染产生抑制效率;CDK4和BCL-2 m RNA表达水平明显下降,推测抑制HPV基因转录后,可能抑制宫颈癌细胞生长,引起细胞周期停滞;抑制E7基因表达后,CALCA和TFPI-2 m RNA表达水平明显上升,而抑制E6基因表达后,对上述基因表达水平的影响不明显。结论:HPV16编码蛋白质E7可能引起宫颈癌细胞内CALCA和TFPI-2基因表达下调,此为揭示依赖于HPV感染的宫颈癌发病机制提供了依据。

维吾尔族妇女宫颈病变与CALCA基因启动子甲基化的关系

目的:研究维吾尔族妇女宫颈病变与降钙素相关肽α(calcitonin-related polypeptide alpha,CALCA)基因启动子区CpG位点甲基化的关系,进一步揭示宫颈癌组织中该基因表达调控的表观遗传学机制。方法:收集维吾尔族妇女宫颈病变患者手术切除或活检组织标本50例,其中宫颈鳞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)25例、宫颈内上皮内瘤样变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)9例及慢性宫颈炎16例,应用Sequenom MassARRAY甲基化DNA定量分析平台,对组织DNA的CALCA基因启动子区CpG位点进行甲基化水平的定量分析。结果:宫颈炎、CIN和CSCC组织中CALCA基因启动子区CpG片段甲基化率分别为0.22、0.26和0.33,经统计学分析,CSCC与CIN以及CSCC与宫颈炎之间均有显著差异(P<0.05)。从单一CpG位点角度分析,CSCC与宫颈炎组织CpG-2、CpG-3、CpG-9.10.11和CpG-12等6个CpG位点甲基化率均有显著差异(P<0.05)。结论:CALCA基因启动子甲基化与维吾尔族妇女宫颈癌发生密切相关,其中特定CpG位点甲基化水平变化可能成为宫颈癌早期诊断的分子标志物。

宫颈癌中CALCA基因甲基化与HPV16-E7致癌蛋白表达的依存关系

选择HPV16阳性宫颈癌细胞和RNAi技术,研究CALCA基因甲基化与HPV16-E7致癌蛋白表达的依存关系。构建慢病毒siRNA重组表达载体,建立稳定表达HPV16-E7-siRNA的RNAi细胞模型。以SiHa细胞和RNAi细胞模型的基因组DNA为对象,选择CALCA基因启动子区富含CpG岛屿的目标片段,使用亚硫酸氢盐测序法(bisulfite sequencing PCR,BSP)筛查分析,研究RNAi抑制HPV16-E7表达后,CALCA基因甲基化状态的可逆性程度。选出CALCA基因启动子区富含CpG位点的目标片段,其大小为365 bp,含有19个CpG岛屿,发现其中13个CpG位点的胞嘧啶在SiHa细胞基因组DNA中发生了甲基化(13/19),而在表达HPV16-E7-siRNA的RNAi细胞模型中,所有CpG位点的甲基化已发生逆转(0/19位点)。本研究从细胞水平证明了宫颈癌细胞内的CALCA基因启动子高甲基化对HPV16-E7致癌蛋白表达有依赖性,为进一步研究E7蛋白的作用及致癌机制奠定了重要的物质基础。

维吾尔族妇女宫颈病变病理进程与降钙素相关肽α表达的关系

目的:观察降钙素相关肽α(calcitonin-related polypeptide alpha,CALCA)的蛋白表达水平与宫颈病变病理进程的关系。方法:收集维吾尔族妇女宫颈炎、低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)、高度鳞状上皮内瘤变(HSIL)和宫颈鳞癌(CSCC)患者的石蜡包埋组织标本共104例,采用免疫组织化学方法检测CALCA蛋白的表达水平。结果:CALCA蛋白在大部分宫颈炎患者的宫颈上皮细胞中强表达,但是随着宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的发生,其表达水平呈现从强表达到弱表达或表达缺失的趋势改变,且与宫颈病变病理进程呈负相关(r=-0.361,P<0.01),其中宫颈炎、LSIL、HSIL和CSCC组患者的CALCA蛋白表达缺失率分别为45.5%(15/33)、75%(12/16)、80.8%(21/26)和82.8%(24/29),C ALCA蛋白表达缺失率在HSIL及CSCC与宫颈炎间的差异具有统计学意义(P<0.01),而在LSIL与宫颈炎间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CALCA蛋白表达缺失与维吾尔族妇女宫颈癌前病变及癌症的发生有一定的关系。

I/A’S50在冷凝液回收系统改造中的应用

主要介绍了利用Foxbro I/A’S50 DCS的CALCA模块在冷凝液回收系统中创建泵的逻辑控制系统,结合出口调节阀的控制,对凝液储罐的液面进行控制。通过对系统进行改进,可以实现对液面的稳态控制,弥补了单个调节阀由于出口流量压力和入口流量压力的不稳定,而导致的液面大幅频繁波动。