大鼠腓肠肌CANPⅠ和CANPⅡ力竭运动后变化规律的研究

将大鼠随机分为对照组和力竭运动组,后者又分为运动后即刻、2、6、12、24、48和72小时组,测定钙蛋白酶蛋白及mRNA表达。结果:运动后,CANPⅡ活性显著升高,与运动性肌肉损伤关系密切。而CANPⅠ活性的变化在肌肉损伤之前,可能与肌肉损伤的预测有关。CANPⅠ和CANPⅡ的mRNA水平与对照组比均无明显改变。结论:CANPⅡ与CANPⅠ在运动后呈现不同的变化趋势,调节机制不尽相同,升高的CANPⅡ活性在运动性肌肉损伤过程中起到重要作用。

甲钴胺联合高压氧对急性敌敌畏中毒大鼠NTE、CANP蛋白及HIF-1αmRNA表达的影响

目的分析甲钴胺联合高压氧对急性敌敌畏中毒大鼠神经疾病靶标酯酶(NTE)、钙激活的中性蛋白酶(CANP)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA表达的影响。方法SD大鼠60只随机分为4组,分别为对照组(不处理)、模型组(急性敌敌畏中毒模型)、甲钴胺组(中毒模型+甲钴胺灌胃)、甲钴胺联合HBO组(中毒模型+甲钴胺灌胃+HBO),每组15只。采用实施Y型电迷宫实验评估大鼠记忆能力。对各组大鼠血NTE蛋白,CANP蛋白含量以及脑组织HIF-1α基因表达水平进行检测。结果模型组正确反应次数>8次的大鼠比率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。甲钴胺组和甲钴胺联合HBO组大鼠正确反应次数>8次的大鼠比率显著高于模型组(P<0.05)。治疗后2周和4周,模型组血浆NTE蛋白含量显著低于对照组(P<0.05),甲钴胺组和甲钴胺联合HBO组血浆NTE蛋白含量显著高于模型组(P<0.05);治疗后2周和4周,模型组血浆CANP蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),甲钴胺组和甲钴胺联合HBO组血浆CANP蛋白含量显著低于模型组(P<0.05),甲钴胺联合HBO组血浆CANP蛋白含量低于甲钴胺组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后2周和4周,模型组脑组织HIF-1αmRNA表达量显著高于对照组(P<0.05),甲钴胺组和甲钴胺联合HBO组脑组织HIF-1αmRNA表达量显著低于模型组(P<0.05),甲钴胺联合HBO组脑组织HIF-1αmRNA表达量低于甲钴胺组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲钴胺联合高压氧可较单独使用甲钴胺更有效缓解急性敌敌畏中毒大鼠智力损伤,上调NTE蛋白表达,降低大鼠CANP蛋白含量和HIF-1αmRNA表达水平。

钙活化中性蛋白酶和它的内源性抑制剂

本文从钙活化中性蛋白酶（ＣＡＮＰ）的性质、结构、酶原的激活及生物功能几方面的研究概括，证明随着对ＣＡＮＰ研究的深入，人们认识到ＣＡＮＰ不单单是一般的蛋白水解酶，它还参与了与Ｃａ２＋有关的基本的细胞活动，细胞内信号传递及触发细胞凋亡。对其内源性抑制剂Ｃａｌｐａｓｔａｔｉｎ的性质结构的研究。

钙激活中性蛋白酶抑制剂对E2诱导的乳腺癌细胞增殖效应的影响及其意义

目的观察钙激活中性蛋白酶(calcium-activated neutral protease,CANP)抑制剂对雌二醇(estradiol,E2)诱导的乳腺癌细胞增殖效应的影响,为探索乳腺癌治疗新药靶提供理论依据。方法以人乳腺肿瘤细胞系MCF-7为模型细胞,RPM1-1640培养,E2处理;MTT法分析细胞增殖,观察E2诱导乳腺癌细胞增殖;CANP特异性抑制剂calpeptin(CAL)或E2受体选择性调节剂他莫西芬(Tamoxifen,TAM)预处理模型细胞,观察CAL或TAM对E2诱导的肿瘤细胞增殖效应的影响及其差异。结果(1)E2诱导MCF-7细胞增殖呈时间和剂量依赖性。E2发挥最大作用的浓度为10-8mol/L,最佳作用时间为24h,增殖率达18.6%(P<0.01);(2)TAM能显著抑制E2诱导的细胞增殖,浓度为10-6mol/L时抑制效能最佳,抑制率达28.63%(P<0.01);(3)CAL也可明显抑制E2的细胞增殖效应,在CAL为10-5mol/L时抑制率最高,达26.34%(P<0.01)。比较CAL与TAM的细胞增抑制殖效能未见显著性差异。结论CANP抑制剂能有效抑制E2诱导的乳腺癌细胞增殖活动,因而以CANP作为乳腺癌治疗的候选药靶可能具有潜在的应用前景。

乳腺肿瘤钙离子激活中性蛋白酶活性的变化及其意义

目的观察乳腺肿瘤钙离子激活中性蛋白酶(CANP)活性的变化并探讨其临床意义。方法用蛋白印迹分析法显示乳腺肿瘤细胞和组织CANP小亚基的蛋白水解或周期蛋白E低分子(LMW)片断的形成,并通过LabWorks软件进行结果定量分析以判断CANP活性的变化。结果 乳腺癌细胞和组织CANP小亚基蛋白水解或LMW周期蛋白E的定量分析结果能反映CANP活性的变化。乳腺肿瘤组织和细胞CANP活性明显高于正常对照组;而且不同临床阶段乳腺癌之间CANP活性也存在明显差异,随着肿瘤的发展其CANP活性进一步显著升高。结论 周期蛋白E或CANP小亚基的蛋白水解程度可作为测定CANP活性的有效指标。乳腺肿瘤组织及细胞CANP活性均明显高于正常组织;CANP活性变化可作为判断乳腺肿瘤临床进展的重要标记。

胆囊胆汁癌胚抗原诊断大肠癌肝转移的临床意义

目的 探讨胆囊胆汁癌胚抗原 (CEA)值诊断大肠癌肝转移的临床价值。方法 应用竞争放射免疫分析法共测定胆囊胆汁及同期血清CEA值 75例。共分为三组 :A组 (大肠癌组 ) 34例、B组 (术后肝转移组 ) 11例、C组 (良性疾病组 )为对照组 30例。胆汁标本于术中细针穿刺胆囊抽取 5ml ,血清标本于术晨采集静脉血 2ml。结果 胆汁CEA测定结果 :A组均值 ( 173 2± 2 5)ng ml;B组均值 ( 752± 117)ng ml;C组均值 ( 4 1 3± 2 8)ng ml。经统计学处理 ,A、B与C组比较有显著性差异P <0 0 1,A与B组比较有显著性差异P <0 0 1。血清CEA测定结果 :A组均值 ( 17 3± 2 7)ng ml;B组均值 ( 19 5± 4 3)ng ml ;C组均值 ( 11 3± 1 4 )ng ml。经统计学处理 ,A、B与C组比较有明显差异P <0 0 5。A与B组比较无明显差异P >0 0 5。结论 胆囊胆汁CEA值 >640ng ml时对诊断大肠癌肝转移有一定临床意义。