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抗新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10单克隆抗体的制备及鉴定
1
作者
于虹
王欣
+5 位作者
杨裔
陈万荣
郭彦
周育森
高基民
寇志华
《生物技术通讯》
CAS
2014年第2期203-206,共4页
目的:以新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10为靶抗原,制备并鉴定特异性抗CAP10的单克隆抗体。方法:用纯化的重组CAP10免疫BALB/c小鼠,血清抗体效价达到适当水平时进行细胞融合;经多次亚克隆筛选出分泌特异性抗体的细胞株,制备单抗腹水并进行...
目的:以新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10为靶抗原,制备并鉴定特异性抗CAP10的单克隆抗体。方法:用纯化的重组CAP10免疫BALB/c小鼠,血清抗体效价达到适当水平时进行细胞融合;经多次亚克隆筛选出分泌特异性抗体的细胞株,制备单抗腹水并进行抗体效价测定及亚类鉴定。结果:获得11株能稳定分泌抗新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10的单克隆抗体杂交瘤细胞株,抗体效价高且抗原特异性强。结论:获得了针对新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10的单克隆抗体,为深入研究CAP10蛋白的功能,以及临床新型隐球菌的检测和血清型分析奠定了基础。
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关键词
新型隐球菌
cap10蛋白
单克隆抗体
下载PDF
职称材料
新型隐球菌Cap10蛋白的重组表达及多克隆抗体制备
被引量:
2
2
作者
王欣
于虹
+4 位作者
佟双
杨裔
高基民
寇志华
周育森
《中国卫生检验杂志》
北大核心
2012年第6期1229-1231,1236,共4页
目的:重组表达新型隐球菌Cap10蛋白并制备特异抗体,为新型隐球菌的检测和诊断提供特异抗原和抗体。方法:选择CAP10基因开放阅读框架(ORF)抗原表位集中、保守性高的片段,经过大肠杆菌偏嗜的密码子优化后进行基因合成,将目的片段克隆至原...
目的:重组表达新型隐球菌Cap10蛋白并制备特异抗体,为新型隐球菌的检测和诊断提供特异抗原和抗体。方法:选择CAP10基因开放阅读框架(ORF)抗原表位集中、保守性高的片段,经过大肠杆菌偏嗜的密码子优化后进行基因合成,将目的片段克隆至原核表达载体pQE30中构建重组蛋白表达载体pQE30-CAP10并鉴定,IPTG诱导重组蛋白在M15中表达,并用SDS-PAGE和Western blot鉴定;镍柱纯化后,免疫家兔制备抗血清。结果:在大肠杆菌中成功表达Cap10,其纯度大于95%;二免后家兔血清抗体效价达到200万以上。结论:获得了高纯度的Cap10蛋白及高效价的多克隆抗体,为新型隐球菌的检测和致病机制研究奠定了基础。
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关键词
新型隐球菌
荚膜相关
蛋白
10
(
cap
10
)
B细胞表位
多克隆抗体
原文传递
题名
抗新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10单克隆抗体的制备及鉴定
1
作者
于虹
王欣
杨裔
陈万荣
郭彦
周育森
高基民
寇志华
机构
军事医学科学院微生物流行病研究所
温州医科大学检验医学与生命科学学院
出处
《生物技术通讯》
CAS
2014年第2期203-206,共4页
基金
传染病防治重大专项(2008ZX10001-007)
文摘
目的:以新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10为靶抗原,制备并鉴定特异性抗CAP10的单克隆抗体。方法:用纯化的重组CAP10免疫BALB/c小鼠,血清抗体效价达到适当水平时进行细胞融合;经多次亚克隆筛选出分泌特异性抗体的细胞株,制备单抗腹水并进行抗体效价测定及亚类鉴定。结果:获得11株能稳定分泌抗新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10的单克隆抗体杂交瘤细胞株,抗体效价高且抗原特异性强。结论:获得了针对新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10的单克隆抗体,为深入研究CAP10蛋白的功能,以及临床新型隐球菌的检测和血清型分析奠定了基础。
关键词
新型隐球菌
cap10蛋白
单克隆抗体
Keywords
Cryptococcus neoformans
protein
cap
IO
monoclonal antibodies
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
新型隐球菌Cap10蛋白的重组表达及多克隆抗体制备
被引量:
2
2
作者
王欣
于虹
佟双
杨裔
高基民
寇志华
周育森
机构
温州医学院检验与生命科学院
北京微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室
出处
《中国卫生检验杂志》
北大核心
2012年第6期1229-1231,1236,共4页
基金
传染病重大专项(2008ZX10001-007)
文摘
目的:重组表达新型隐球菌Cap10蛋白并制备特异抗体,为新型隐球菌的检测和诊断提供特异抗原和抗体。方法:选择CAP10基因开放阅读框架(ORF)抗原表位集中、保守性高的片段,经过大肠杆菌偏嗜的密码子优化后进行基因合成,将目的片段克隆至原核表达载体pQE30中构建重组蛋白表达载体pQE30-CAP10并鉴定,IPTG诱导重组蛋白在M15中表达,并用SDS-PAGE和Western blot鉴定;镍柱纯化后,免疫家兔制备抗血清。结果:在大肠杆菌中成功表达Cap10,其纯度大于95%;二免后家兔血清抗体效价达到200万以上。结论:获得了高纯度的Cap10蛋白及高效价的多克隆抗体,为新型隐球菌的检测和致病机制研究奠定了基础。
关键词
新型隐球菌
荚膜相关
蛋白
10
(
cap
10
)
B细胞表位
多克隆抗体
Keywords
Cryptococcus neoformans
cap
sule-associated protein
10
B-cell epitope
Polyclonal antibody
分类号
R446.5 [医药卫生—诊断学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗新型隐球菌荚膜相关蛋白CAP10单克隆抗体的制备及鉴定
于虹
王欣
杨裔
陈万荣
郭彦
周育森
高基民
寇志华
《生物技术通讯》
CAS
2014
0
下载PDF
职称材料
2
新型隐球菌Cap10蛋白的重组表达及多克隆抗体制备
王欣
于虹
佟双
杨裔
高基民
寇志华
周育森
《中国卫生检验杂志》
北大核心
2012
2
原文传递
已选择
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参考文献
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